一种具有抗ev71病毒作用的复方浒苔多糖组合物的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及保健品技术领域，具体为一种具有抗EV71病毒作用的复方浒苔多糖组合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]肠道病毒71型，简称为EV71，是引起手足口病的最主要的病原体之一，多发生于5岁以下幼儿，其中，I岁以下婴儿发病率最高。手足口病具有极高的传染性，目前关于治疗以及预防传染的方法较少。
[0003]申请号为CN201510340906.2的中国专利公开了一种海带/海带多糖提取物在制备抗EV71药物中的应用；申请号为CN201410108714.4的中国专利公开了一种马尾藻多糖在制备用于治疗或预防肠病毒71型感染的组合物中的用途；申请号为CN201310028254.X的中国专利公开了一种鱼腥草水提液及其制备方法和应用。现有技术中公开的这些提取物、多糖物质对研制抗EV71病毒药物提供了一定的指导意义，具有重要的参考价值。
[0004]然而如何提供一种高效抗EV71病毒的药物，仍然是一个急需解决的难题。
[0005]浒苔多糖具有抗病毒、抗菌、降血糖、降血脂等生物活性，还能增强免疫力和调节人体代谢过程。研究发现，浒苔多糖能实现抗EV71病毒的作用，而且安全无毒。
[0006]黄芩为唇形科多年生草本植物，以根入药，具有清热燥湿，泻火解毒功效，其所含的活性因子主要是黄酮类。薄荷为食药两用的多年生草本植物，具有疏散风热、清利头目、利咽、透疹、疏肝解郁之功效，其功效主要来源于所含有的挥发油和黄酮类物质。金银花是药食两用的草本植物，具有清热解毒、凉血化淤之功效，含有留醇、芳香油等活性成分。
【发明内容】
[0007]本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种具有抗EV71病毒作用的复方浒苔多糖组合物及其制备方法。该药物组合物富含浒苔多糖，并且复配黄芩、金银花以及薄荷组合提取物，产生协同增效作用，能有效的抗EV71病毒，提高婴幼儿的自身免疫力。
[0008]为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案:
一种具有抗EV71病毒作用的复方浒苔多糖组合物，由以下重量份的组分组成:浒苔多糖45?65份，黄芩、金银花和薄荷的复合提取物20?25份;其中复合提取物中，原料黄芩、金银花以及薄荷的重量比为2:2:1。
[0009]所述的浒苔多糖的制备方法为:以浒苔为原料，经烘干、粉碎后，制得浒苔粉末;浒苔粉末经水提醇沉法制得提取物;提取物经纯净水复溶、除蛋白后，经旋转蒸发、冷冻干燥制得消1笞多糖。
[0010]所述的浒苔多糖的制备方法，具体步骤为:
(1)将浒苔清洗干净后，于55?65°C烘干，粉碎过20目筛，制得浒苔粉末，备用；
(2)取步骤(I)的浒苔粉末，加入纯净水，料液比为Ig:30?40 ml,80-90 °C浸提3?5 h，提取结束后，离心15?20 min，取上清液备用;将离心的残渣重复提取2~3次，合并上清液； (3)将步骤(2)的上清液在55?60°C进行旋转蒸发，将上清液浓缩为原体积的1/5?1/4;
(4)往步骤(3)浓缩的上清液中加入3?4倍体积的95%(v/v)乙醇，置于2~4°C条件下8?10 h后，离心15?20 min，所得沉淀物即为提取物；
(5)向步骤(4)所得提取物中加入纯净水，进行搅拌复溶，并除蛋白3~5次;所述的除蛋白的方法为:Sevag法、聚酰胺法、三氯乙酸法、酶解法中的一种或几种；
(6)将步骤(5)得到的浒苔多糖溶液在55?60°C进行旋转蒸发，将上清液浓缩为原体积的1/5?1/4，冷冻干燥，粉碎，过50?80目筛，得到浒苔多糖。
[0011]步骤(2)中、步骤(4)中所述的离心的转速均为3500?4500 r/min。
[0012]步骤(5)中沉淀物与纯净水的比例为:1 mg:2-5 ml。
[0013]所述的复合提取物的制备方法为:将黄芩、金银花以及薄荷按2:2:1重量比混合，先经醇提制得醇提物;醇提得到的滤渣再经80?90 °C水提制得水提物;最后将醇提物、水提物复合，即为复合提取物。
[0014]所述的复合提取物的制备方法，具体步骤为:
(1)将黄芩、金银花以及薄荷清洗干净后，分别于55?65°C烘干，粉碎过20目筛，制得粉末，备用；
(2)将黄芩、金银花和薄荷混匀，加入65%?80%(v/v)的乙醇溶液，料液比为I g: 4?6 ml，回流提取2?3h，过滤;滤渣重复提取2~3次，合并滤液，离心15-20 min，取上清液，在50?65。C条件下减压浓缩至浸膏状，冷冻干燥后粉碎过50?80目筛，得到黄芩、金银花和薄荷的复合醇提物；
(3)将步骤(2)醇提完成后得到的滤渣，加入蒸馏水，其中滤渣与蒸馏水的比例为Ig:20 ml，80?90 °C水浴2?3h，用4?6层的纱布过滤，挤压滤干，用80?90 °C蒸馏水洗脱滤渣2?3次，得到的上清液，离心15?20 min，抽滤，于55?60°C进行旋转蒸发，浓缩至浸膏，冷冻干燥，粉碎，过50?80目筛，得到黄芩、金银花和薄荷的复合水提物；
(4 )将步骤(2 )的复合醇提物和步骤(3 )的复合水提物混合，制得复合提取物。
[0015]步骤(2)、步骤(3)中所述的离心转速为:2500?4000 r/min条件下。
[0016]本发明的有益效果在于:
1)浒苔多糖与中药黄芩、薄荷和金银花提取物复配的复合物，产生协同增效作用，经药效学实验，具有很强的抗肠道病毒71型的效果，防治效果好，可提高婴幼儿的自身免疫力；
2)工艺操作简便，成本价格低，安全可靠，适合工业规模化生产。
【附图说明】
[0017]图1为复方浒苔多糖药物体外抗肠道病毒71型试验效果图。
【具体实施方式】
[0018]本发明用下列实施例来进一步说明本发明，但本发明的保护范围并不限于下列实施例。
[0019]实施例1
一种具有抗EV71病毒作用的复方浒苔多糖组合物，由以下重量份的组分组成:浒苔多糖45份，黄芩、金银花和薄荷的复合提取物25份;其中复合提取物中，原料黄芩、金银花以及薄荷的重量比为2:2:1。
[0020]所述的浒苔多糖的制备方法，具体步骤为:
(1)将浒苔清洗干净后，于60°C烘干，粉碎过20目筛，制得浒苔粉末，备用；
(2)取步骤(I)的浒苔粉末，加入纯净水，料液比为Ig:35 ml,85 °C浸提4 h，提取结束后，离心17 min，取上清液备用;将离心的残渣重复提取3次，合并上清液；
(3)将步骤(2)的上清液在270C进行旋转蒸发，将上清液浓缩为原体积的1/5;
(4)往步骤(3)浓缩的上清液中加入3倍体积的95%(v/v)乙醇，置于3°C条件下9 h后，离心17 min，所得沉淀物即为提取物；
(5)向步骤(4)所得提取物中加入纯净水，进行搅拌复溶，并除蛋白4次;所述的除蛋白的方法为:Sevag法；
(6 )将步骤(5 )得到的浒苔多糖溶液在57 °C进行旋转蒸发，将上清液浓缩为原体积的1/4，冷冻干燥，粉碎，过80目筛，得到浒苔多糖。
[0021 ] 步骤(2)中、步骤(4)中所述的离心的转速均为4000 r/min。
[0022]步骤(5)中沉淀物与纯净水的比例为:1 mg:4 ml。
[0023]所述的复合提取物的制备方法，具体步骤为:
(1)将黄芩、金银花以及薄荷清洗干净后，分别于60°C烘干，粉碎过20目筛，制得粉末，备用;
(2)将黄芩、金银花和薄荷混匀，加入70%(v/v)的乙醇溶液，料液比为Ig: 5 ml，回流提取2.5 h，过滤;滤渣重复提取2次，合并滤液，离心17 min，取上清液，在60 °C条件下减压浓缩至浸膏状，冷冻干燥后粉碎过80目筛，得到黄芩、金银花和薄荷的复合醇提物；
(3)将步骤(2)醇提完成后得到的滤渣，加入蒸馏水，其中滤渣与蒸馏水的比例为Ig:20 ml,85 °C水浴2 h，用5层的纱布过滤，挤压滤干，用80?90°C蒸馏水洗脱滤渣2次，得到的上清液，离心18 min，抽滤，于57 °C进行旋转蒸发，浓缩至浸膏，冷冻干燥，粉碎，过80目筛，得到黄芩、金银花和薄荷的复合水提物；
(4 )将步骤(2 )的复合醇提物和步骤(3 )的复合水提物混合，制得复合提取物。
[0024]步骤(2)、步骤(3)中所述的离心转速为:3000 r/min条件下。
[0025]实施例2
一种具有抗EV71病毒作用的复方浒苔多糖组合物，由以下重量份的组分组成:浒苔多糖65份，黄芩、金银花和薄荷的复合提取物20份;其中复合提取物中，原料黄芩、金银花以及薄荷的重量比为2:2:1。
[0026]所述的浒苔多糖的制备方法，具体步骤为:
(1)将浒苔清洗干净后，于55°C烘干，粉碎过20目筛，制得浒苔粉末，备用；
(2)取步骤(I)的浒苔粉末，加入纯净水，料液比为Ig:30 ml,80 °C浸提5 h，提取结束后，离心15 min，取上清液备用;将离心的残渣重复提取3次，合并上清液；
(3)将步骤(2)的上清液在550C进行旋转蒸发，将上清液浓缩为原体积的1/4;
(4)往步骤(3)浓缩的上清液中加入4倍体积的95%(v/v)乙醇，置于4°C条件下8 h后，离心20 min，所得沉淀物即为提取物；
(5)向步骤(4)所得