具有最优的矿物和金属组成、低杂质和低且稳定的三甲胺水平的磷虾油制剂的制作方法

具有最优的矿物和金属组成、低杂质和低且稳定的三甲胺水平的磷虾油制剂的制作方法
【专利摘要】一种磷虾油制剂，其包含下降量的5mgN/100g或更低的三甲胺，或多于700ppm重量的内源钙和/或低于1200ppm重量的钠。制备这样的磷虾油制剂的方法，其包括用一种或多种极性溶剂和一种或多种非极性溶剂的溶剂混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤。治疗需要治疗的人体的方法，其包括向人体施用一定量的这样的磷虾油制剂。
【专利说明】具有最优的矿物和金属组成、低杂质和低且稳定的三甲胺水 平的磷虾油制剂
[0001 ]本发明要求在2014年2月11日提交的美国临时专利申请系列第61/938,599号的优 先权，其公开内容通过引用的方式整体并入本文。
技术领域
[0002] 本发明涉及具有低和稳定量的三甲胺(TMA)和/或最优的矿物和金属含量和/或低 量的杂质的磷奸油制剂。
【背景技术】
[0003] 流行病学和临床研究已显示食用鱼类和海鲜的各种健康益处。这些积极的健康结 果归因于在食物中长链n-3多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)的存在，包括二十碳五烯酸(EPA)和 二十二碳六烯酸(DHA) (Ruxton等人，2004)。研究已表明，连接至磷脂质的n-3LC-PUFA的生 物利用度优于连接至甘油的n-3LC-PUFA的生物利用度（ramprasath等人，2014 ; Schuchardt&Hahn 2013)〇
[0004] 矿物质是正常的生理过程所必需的，且是健康饮食的必要部分。磷虾累积金属和 矿物并因此可在递送这些营养素方面发挥重要作用(Tou等人，2007)。
[0005] 钙对于多种生理功能是一种必需的常量矿物质，且例如对于强壮骨骼的适当形成 与维持和血管的收缩与舒张是必要的。钙对于遍及人体的酶的正常运作也是必要的(Power 等人，1999)。
[0006] 具有外源(合成的或来自其他来源）必要金属和矿物例如钙的纯磷虾油的补充具 有数个潜在的劣势：（1)在外源成分和磷虾油之间的未知复合物的潜在形成，其可对磷虾油 的消化、吸收和生物活性产生影响；（2)外源矿物或金属和磷虾油之间下降的协同作用；（3) 活性成分的潜在分解和储存寿命稳定性的下降；（4)可能由外源化合物产生的过程产生的 不合需要的污染物的累积;和(5)增加的引起过敏的可能性。
[0007] 另外一种对人体重要的矿物为钠。人体需要少量的钠以维持体液的平衡和用于器 官的正常运作。然而，众所周知的是过量的钠摄入对人体健康有负面影响。饮食所引入的水 中的高水平的钠进入血流增加血压(也称为高血压），因此，心脏病，肾病和中风的风险增加 (Aburto等人，2013)。因此，世界卫生组织鼓励饮食(包括食物和膳食补充）的消费只包含最 少量的钠(世界卫生组织:成人和儿童钠摄入量指南，2012)。
[0008] 临床试验发现，磷虾油的食用通过显著降低甘油三酯、总胆固醇和LDL-胆固醇水 平积极地控制高血脂患者中的血脂。同时，磷虾油的食用可增加 HDL-胆固醇水平并降低血 液中葡萄糖的水平。因此，磷虾油消费者代表特别易受钠的血压升高效果的影响的人群。因 此，在磷虾油补充剂中钠含量应尽可能地最小化。
[0009] 决定磷虾油质量的另一个参数是存在的三甲胺(TMA)的量。TMA是包括在总挥发性 氮(TVN)中的一种分子并在死亡的生物体的分解过程中产生。因此，高水平的该化合物表明 所测试的海洋原料不新鲜。特别地，欧盟对鱼卫生的指令提供了一种指示，根据该指示，如 果鱼的感官检查显示任何对其新鲜度的怀疑，检查员必须实施基于TVN/TMA的化学测试 (1991年7月22日的理事会指令91/493/EEC;指定水产品的生产和放置于市场的卫生条件； 官方杂志L268,24/09/1991，ρρ· 0015-0034)。因此，用于食品生产的海洋原料(例如，磷虾） 的TMA水平经常作为材料的腐败/新鲜度和对于进一步处理材料的潜在需要的指示物 (Baixas-Nogueras S et al.；Trimethylamine and total volatile basic nitrogen determination by flow injection/gas diffusion in Mediterranean hake (Merluccius merluccius)；Journal of Agricultural and Food Chemistry Apr 49(4): 1681-1686；2001)〇
[0010]食物中较低的TMA水平是重要的且是有利的，具有多个原因：AIHA在2005年报道 TMA的吸附可导致人体的呼吸刺激。另一个来源(De i chmann和Gerarde 1969)报道了"甲胺" 吸入可导致鼻和喉的刺激、喉收缩、呼吸困难和肺水肿（ACUTE EXPO SURE GUIDE LI NE LEVELS(AEGLs)FOR TRIMETHYLAMINE(CAS Reg.No.75-50-3), INTERIM)〇
[0011]已知TMA作为当酶或细菌仍然为活性时未加工的死亡海洋生物的降解的一部分而 形成（D.Greed and P.D.Tom,Measuring,Maintaining Freshness in Aquaculture Products ,Global Aquaculture Advocate，Sept/Oct 2006，p 40-42)。因此假定一旦海洋 材料被加工(通常通过加热和干燥），则其不再包含酶和细菌活性，TMA水平将不增加。此外， 假定一旦使用溶剂提取、热处理或二者从这样的死亡海洋生物体中提取油，油中TMA的水平 将不增加。因此，一旦实现磷虾油中低的TMA，则预期TMA水平在存储过程中保持稳定（因为 无任何酶或细菌活性的存在），并因此对于磷虾油不实施TMA水平随时间的单独测试。现在 发现当使用常规提取方法提取时，TMA水平可随时间而增加。因此，需要提供实现在存储过 程中保持稳定的低TM水平的提取方法。
[0012]还需要磷虾油具有低的杂质水平(例如胆碱、甜菜碱和氨基酸）、高内部抗氧化能 力和最优的脂肪酶活性。富含Omega-3的油例如海洋油和特别地磷虾油是高度易于氧化为 脂质过氧化物和其他二次氧化产物。氧化的油可具有改变的生物活性，使它们无效或有害。 因此，海洋油具有充分的内部抗氧化能力以减少由在这些海洋油存储过程中产生的自由基 导致的氧化过程是非常重要的。需要最优的脂肪酶活性以使脂肪酸能够水解和吸收。
[0013] 尽管递送具有最优的内源矿物和金属含量(特别地高钙水平和低钠水平）、低水平 的杂质(例如胆碱、甜菜碱和氨基酸)和低且稳定的TM水平的磷虾油制剂非常重要，然而本 发明人惊讶地发现目前作为保健营养品(nutraceutical)市售的磷虾油产品不含最优水平 的矿物和金属且包含高量的TMA。

【发明内容】

[0014] 本发明涉及具有低和稳定量的三甲胺(TMA)和/或最优矿物和金属含量和/或低量 的杂质的磷虾油制剂和组合物。
[0015] 在本发明的某些实施方案中，磷虾油制剂包含磷虾油，其中所述磷虾油具有5mgN/ l〇〇g或更低浓度的三甲胺。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油在40°c或更低温度下 存储三个月，优选六个月后具有5mgN/100g或更低浓度的TMA。在本发明的某些实施方案中， 所述磷虾油具有多于700ppm重量的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。在本发明的其他实 施方案中，所述磷虾油具有多于500ppm重量的内源镁。在本发明的甚至其他实施方案中，所 述磷虾油具有少于450ppm重量的游离胆碱和/或少于1000 ppm重量的甜菜碱和/或少于 0.3g/100g的总氨基酸和/或少于0.15g/100g的以下各氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、 胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯 氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0016] 本发明也提供包含磷虾油的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有多于700ppm重量的 浓度的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油包括 多于500ppm重量的内源镁。在本发明的某些其他实施方案中，所述磷虾油具有450ppm重量 的游离胆碱和/或少于1000 ppm重量的甜菜碱和/或少于0.3g/100g的总氨基酸和/或少于 0.15g/100g的以下各氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、 异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、 色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0017] 本发明也提供了包含磷虾油制剂的磷虾油组合物，其中所述磷虾油制剂具有多于 700ppm重量的浓度的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。在本发明的某些实施方案中，所 述磷虾油制剂包括多于500ppm重量的内源镁。在本发明的某些其他实施方案中，所述磷虾 油制剂具有450ppm重量的游离胆碱和/或少于1000 ppm重量的甜菜碱和/或少于0.3g/100g 的总氨基酸和/或少于0.15g/100g的以下各氨基酸:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷 氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨 酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0018] 本发明提供一种组合物、胶囊、保健营养品或膳食补充剂，其包括本文描述的任一 磷虾油制剂，或包括本文描述的任一磷虾油制剂和一种或多种药用辅料的药物组合物。
[0019 ]本发明提供一种包含磷虾油制剂的组合物，其中所述磷虾油制剂具有5mgN/1 OOg 或更低浓度的三甲胺。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油制剂在40°C或更低温度下 存储三个月，优选六个月后具有5mgN/100g或更低浓度的三甲胺。
[0020] 本发明提供一种包含磷虾油制剂的组合物，其中所述磷虾油制剂具有多于700ppm 重量的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油制剂 包括多于500ppm重量的内源镁。在本发明的某些其他实施方案中，所述磷虾油制剂包括 450ppm重量的游离胆碱和/或少于1000 ppm重量的甜菜碱和/或少于0.3g/100g的总氨基酸 和/或少于0.15g/100g的以下各氨基酸：丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨 酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨 酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。在本发明的某些其他实施方案中，所述组合物不包括 来自非磷虾源的矿物或金属。在本发明的某些其他实施方案中，所述组合物为胶囊、保健营 养品、膳食补充剂或包括一种或多种药物辅料的药物组合物。
[0021] 本发明提供一种包括非磷虾油制剂和磷虾油制剂的组合物，并包含5mgN/100g或 更低的三甲胺。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油制剂在40°C或更低温度下存储三 个月，优选六个月后包括5mgN/100g或更低的TMA。在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油 包括多于700ppm重量的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。在本发明的其他实施方案中， 所述磷虾油制剂包括多于500ppm重量的内源镁。在本发明的再一些其他实施方案中，所述 磷虾油制剂包括450ppm重量的游离胆碱和/或少于1000 ppm重量的甜菜碱和/或少于0.3g/ 100g的总氨基酸和/或少于0.15g/100g的以下各氨基酸：丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨 酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、 丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。
[0022]本发明提供了一些制备磷虾油制剂的方法，包括使用一种或多种极性溶剂和一种 或多种非极性溶剂的溶剂混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤。在本发明的某些实施方案 中，所述方法对于使磷虾油制剂中的钠降低为低于磷虾油制剂中内源钙水平的水平是有效 的。在本发明的某些其他实施方案中，所述方法对于将磷虾油制剂中的钠降低至少于 1200ppm重量和维持磷虾油制剂中的内源钙多于700ppm重量是有效的。
[0023]在本发明的某些实施方案中，在所述方法中的溶剂混合物包含己烷和乙醇。在本 发明的某些其他实施方案中，所述溶剂混合物包含体积比为约9:1的己烷和乙醇。在本发明 的某些其他实施方案中，所述方法包括使用水洗涤提取的磷虾油的一个或多个步骤。和在 本发明的某些其他实施方案中，当实施所述至少一个洗涤步骤时，所提取的磷虾油溶解在 有机溶剂混合物中。
[0024] 本发明提供由包含使用一种或多种极性溶剂和一种或多种非极性溶剂的溶剂混 合物从磷虾中提取磷虾油的步骤的方法制备的磷虾油制剂。在本发明的某些实施方案中， 所述溶剂混合物包含体积比为约9:1的己烷和乙醇。
[0025] 本发明提供方法和在方法中使用的组合物，所述方法降低心血管疾病或病况 (CVD)风险因子(例如降低总胆固醇、LDL-胆固醇或甘油三酯，或增加 HDL-胆固醇的量)和/ 或治疗或预防CVD，和/或改善患有CVD患者的状况，和/或改善患有认知疾病或病况的患者 的状况，和/或治疗或预防认知疾病或病况，和/或治疗或预防炎症或炎性疾病，和/或改善 患有炎症或炎性疾病或病况的患者的状况，和/或治疗或预防抑郁症，和/或改善患有抑郁 症患者的状况，和/或治疗或预防经前综合征，和/或改善患有经前综合征的患者的状况。所 述方法包括向有需要的人体施用有效量的一种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂具有 5mgN/100或更低浓度的三甲胺，和/或一种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含5mgN/100 或更低三甲胺。
[0026] 本发明提供方法和在方法中使用的组合物，所述方法降低CVD风险因子(例如降低 总胆固醇、LDL-胆固醇或甘油三酯，或增加 HDL-胆固醇的量)和/或治疗或预防CVD，和/或改 善患有CVD患者的状况，和/或改善患有认知疾病或病况的患者的状况，和/或治疗或预防认 知疾病或病况，和/或治疗或预防炎症或炎性疾病，和/或改善患有炎症或炎性疾病或病况 的患者的状况，和/或治疗或预防抑郁症，和/或改善患有抑郁症患者的状况，和/或治疗或 预防经前综合征，和/或改善患有经前综合征的患者的状况。所述方法包括向有需要的人体 施用有效量的一种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂具有多于700ppm重量的浓度的内源钙 和/或少于1200ppm重量的钠，和/或有效量的一种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂具有多 于700ppm重量的浓度的内源钙和/或少于1200ppm重量的钠。
[0027] 在本发明的某些实施方案中，所述磷虾油制剂是通过包含使用一种或多种极性溶 剂和一种或多种非极性溶剂的溶剂混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤的方法制备。
【附图说明】
[0028]图1是显示本发明的磷虾油制剂（根据实施例3B制备）和对照磷虾油（品牌C)在 517nm处的DPPH吸收的图。
【具体实施方式】
[0029] 本发明首次公开具有最优水平的矿物和金属、低水平的杂质和低且稳定水平的 TM的磷虾油及其制剂。
[0030] 术语"内源钙水平"或术语"内源镁水平"指从磷虾生物质中提取的钙或镁的水平， 不添加天然或合成的钙或镁。
[0031] 在本发明的一个实施方案中，所述磷虾油包含高的内源钙水平，优选多700ppm;低 的钠水平，优选< 1200ppm;和/或低的TM水平，优选<5mgN/100g，其中所述TMA水平在室温 下存储一个月的时间的过程中稳定保持在<5mgN/100g下。
[0032]根据本发明的另一个实施方案，在磷虾油制剂中内源钙水平为高于700ppm，优选 高于1000卩卩111，更优选高于1200卩卩111，甚至更优选高于2000且最优选高于3000或400(^卩1]1。 [0033]根据本发明的另一个实施方案，在磷虾油制剂中钠的水平为低于1200ppm，优选低 于1100卩卩111，更优选低于1000，甚至更优选低于900卩卩1]1且最优选低于700或50(^卩1]1。
[0034]根据本发明的另一个实施方案，在磷虾油制剂中钙的水平为高于钠的水平，优选 Ca/Na的比率为>1，更优选>2,甚至更优选>3且最优选>4。
[0035]在本发明的一个实施方案中，在存储至少4个月后，磷虾油制剂的TMA水平不增加 高于5mgN/100g，优选4mgN/100g，更优选3mgN/100g且最优选lmgN/100g。在本发明的另一个 实施方案中，在存储至少5个月后，至少6个月后，至少7个月后，至少8个月后，至少9个月后， 至少10个月后，至少11个月后，或至少一年后，磷4下油制剂的TMA水平增加不高于5mgN/ I OOg，优选 4mgN/1 OOg，更优选 3mgN/1 OOg 且最优选 ImgN/1 OOg。
[0036]在本发明一个优选的实施方案中，在室温下（20-30 °C )至少6个月的时间内，或在 40 °C或更低下至少3个月的时间内，磷虾油制剂的TMA水平增加不高于5mgN/100g，优选 4mgN/1 OOg，更优选 3mgN/1 OOg 且最优选 ImgN/1 OOg。
[0037]在本发明的一个实施方案中，磷虾油制剂包含高的内源镁水平，高于500ppm，优选 高于750ppm，更优选高于1000 ppm和最优选高于2000ppm。
[0038] 在本发明的一个实施方案中，磷虾油制剂包含低的胆碱水平，优选低于450ppm，更 优选低于300ppm，甚至更优选低于200ppm且最优选低于lOOppm。
[0039] 在本发明的一个实施方案中，磷虾油制剂包含低的甜菜碱水平，优选低于 1000 ppm，更优选低于750ppm或500ppm，甚至更优选低于250ppm且最优选低于50ppm或低于 IOppm0
[0040] 在本发明的一个实施方案中，磷虾油制剂包含低的总氨基酸水平，优选低于0.3g/ 100g，更优选低于〇 · lg/l〇〇g和最优选低于〇 · 〇5g/100g。
[0041] 根据本发明的另一个实施方案，磷虾油制剂包含低水平的下面的氨基酸:丙氨酸、 精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟 氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。优选地，所述 氨基酸中的每个的水平低于0.15g/100g或0 . lg/100g，优选低于0.05g/100g，更优选低于 0 · 04g/100g，甚至更优选低于0 · 02g/100g且最优选低于0 · 006g/100g。
[0042] 根据本发明的另一个实施方案，磷虾油制剂包含至少2g/100g的磷脂质，优选高于 10g/100g，更优选高于25g/100g，且最优选高于35g/100g或40g/100g的磷脂质。
[0043] 根据本发明的另一个实施方案，磷虾油制剂包含至少3%EPA，优选多于5%EPA，更 优选多于6%EPA且最优选多于8%或11 %EPA。根据本发明的另一个实施方案，磷虾油制剂 包含至少2%DHA，优选多于3%DHA且更优选多于5%或9%DHA。
[0044] 本发明的磷虾油制剂可为流体油、粉末、颗粒、蜡状物、糊状物、油或水性乳液形式 以及任何使其能够使用的形式。在本发明的另一个方面中，所述磷虾油制剂与营养、药物或 保健营养组合物或功能或医疗食物结合使用或为它们的一部分。
[0045] 如本文所用，营养组合物可为任何营养组合物，包括但不限于，人乳脂替代品、婴 儿配方产品、乳制品、奶粉、饮料、冰淇淋、饼干、大豆产品、烘焙食品（bakery)、面粉糕饼和 面包、酱汁、汤、预制食品、冷冻食品、调味品、糖食、油脂、人造黄油、丰盛的食物(spread)、 填料、谷类、即食产品、婴儿食品、幼童食品、酒吧食品(bar)、快餐、糖果和巧克力产品。
[0046] 如本文所用，功能食品可为任何功能食品，包括但不限于，乳制品、冰淇淋、饼干、 大豆产品、烘焙食品、面粉糕饼、蛋糕和面包、即食产品、酱汁、汤、预制食品、冷冻食品、调味 品、糖食、油脂、人造黄油、丰盛的食物、填料、谷类、即食产品、饮料和混合饮料(shake)、婴 儿食品、酒吧食品、快餐、糖果和巧克力广品。
[0047] 如本文所用，保健营养组合物可为任何保健营养品，其可为可被认为是食物或食 物的一部分并提供医疗或健康益处的任何物质，所述医疗或健康益处包括疾病或病况的预 防和治疗。这样的保健营养组合物包括但不限于，食品添加剂，食品补充剂，膳食补充剂，基 因工程食品例如蔬菜，草药食品，和加工食品例如谷类、汤类和饮料类和刺激性功能食品， 医疗食品和药物食品(Pharmafood)。膳食补充剂可以软凝胶胶囊、片剂、糖浆剂和其他已知 的膳食补充剂递送系统的形式被递送。
[0048] 药物或保健营养组合物可为本领域中通常使用的多种剂量递送形式中任一种。适 合于口服的药物组合物可呈现为离散剂量单元，例如丸剂、片剂、小球、糖衣药丸(dragges) 或胶囊，或为粉末或颗粒，或为溶液、悬浮液或酏剂。
[0049] 本发明组合物的合适的给药途径为口服、口腔含化给药、舌下给药、通过食管给 药、局部给药、经皮给药或肠胃外给药(包括皮下给药、肌肉给药、静脉内给药和皮内给药）。 在一个实施方案中，所述组合物是口服施用的。
[0050] 本发明还提供一种药物组合物，其中磷虾油制剂与(药学上)可接受的辅助物和任 选的其他治疗剂混合。所述辅助物从与组合物的其他成分相容的意义上说必须是"可接受 的"且对于其受者是无毒害的。
[0051] 在本发明的一个实施方案中，本发明的药物组合物还包含至少一种额外的药物活 性剂。
[0052]本发明提供一种方法，所述方法降低CVD风险因子(例如降低总胆固醇、LDL-胆固 醇或甘油三酯，或增加 HDL-胆固醇的量)和/或治疗或预防CVD，和/或改善患有CVD患者的状 况，和/或改善患有认知疾病或病况的患者的状况，和/或治疗或预防认知疾病或病况，和/ 或治疗或预防炎症或炎性疾病，和/或改善患有炎症或炎性疾病或病况的患者的状况，和/ 或治疗或预防抑郁症，和/或改善患有抑郁症患者的状况，和/或治疗或预防经前综合征， 和/或改善患有经前综合征的患者的状况。所述方法包括向有需要的人体施用有效量的一 种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含5mgN/1 OOg或更低的三甲胺。
[0053]本发明提供一种方法，所述方法降低CVD风险因子(例如降低总胆固醇、LDL-胆固 醇或甘油三酯，或增加 HDL-胆固醇的量)和/或治疗或预防CVD，和/或改善患有CVD患者的状 况，和/或改善患有认知疾病或病况的患者的状况，和/或治疗或预防认知疾病或病况，和/ 或治疗或预防炎症或炎性疾病，和/或改善患有炎症或炎性疾病或病况的患者的状况，和/ 或治疗或预防抑郁症，和/或改善患有抑郁症患者的状况，和/或治疗或预防经前综合征， 和/或改善患有经前综合征的患者的状况。所述方法包括向有需要的人体施用有效量的一 种磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含多于700ppm重量的内源钙和少于1200ppm重量的 钠。
[0054]如本文所用，术语"CVD风险因子"应被理解为除其他外包含高血液LDL或总胆固醇 和甘油三酯水平，低血清HDL胆固醇，升高的血清同型半胱氨酸，高血压，炎症，糖尿病和超 重和肥胖（NHLBI.(2011 )What Are Coronary Heart Disease Risk Factors?)。
[0055]如本文所用，术语"CVD"应被理解为包含任何心血管疾病或病况。这样的心血管疾 病或病况的非限制性实例包括风湿性心脏病、心脏瓣膜疾病、动脉瘤、动脉硬化、外周动脉 疾病、心绞痛、冠状动脉疾病、冠心病、心肌梗死、猝死、脑血管疾病、中风、短暂性脑缺血发 作、心肌症、心包疾病、先天性心脏病和心力衰竭。
[0056]如本文所用，术语"认知疾病或病况"应被理解为包含任何认知疾病或病况。这样 的认知疾病或病况的非限制实例为注意力缺失症(ADD)，注意缺失过动症(ADHD)、阅读障 碍、年龄相关的记忆缺陷和学习障碍、健忘症、轻度认知障碍、认知受损非痴呆、阿尔茨海默 病前疾病、阿尔茨海默病、帕金森氏病、痴呆前综合症、痴呆、与年龄有关的认知减退、认知 劣化、中度精神损害、由于变老的精神衰退、影响脑电波强度和/或脑葡糖糖利用的状况、压 力、焦虑、抑郁、行为障碍、集中和注意力障碍、情绪恶化、通常的认知和心理健康、神经退行 性疾病、激素失调或其任何组合。在一个具体的实施方案中，所述认知病况为记忆缺陷。
[0057]如本文所用，术语"炎性疾病"应被理解为包含任何炎性疾病或病况。这样的炎性 疾病或病况的非限制性实例包括类风湿性关节炎、骨关节炎、哮喘、前列腺炎、结肠炎、克罗 恩氏病、皮炎、憩室炎、血管球性肾炎、间质性膀胱炎、肠道易激综合症、肾炎、盆腔炎、牙周 炎、再灌注损伤、结节病、移植排斥和血管炎。
[0058]如本文所用，术语"改善状况"应被理解为包含:减轻与疾病、病况相关的不需要的 症状，或病理状况;在症状发生前预防症状的表现;减缓疾病或病况的发展;减缓疾病或病 况的恶化;减缓在疾病或病况的渐进性(或慢性)阶段造成的不可逆性损害;延迟(渐进性） 疾病或病况的发作；降低疾病或病况的严重性;治愈疾病或病况;阻止疾病或病况共同发生 (例如在通常有所述疾病倾向的个体中）或上述任何组合。
[0059] 本文所述的制剂的有效量是在所公开的状况或疾病的治疗和管理中提供治疗益 处的该制剂的剂量。本领域技术人员将认识到所述有效量可变化，例如，根据已知的因素， 例如本发明制剂的药效和药代动力学特征和其施用模式和途径，接收所述制剂的受体的年 龄、性别、健康和体重，治疗的频率和所需的效果，和并发治疗的类型。本领域技术人员还会 认识到可基于在该专利申请书的公开内容和本领域中的常识确定制剂的有效量或剂量。
[0060] 可通过标准临床技术来确定对本文公开的状况和疾病的治疗和/或管理有效的制 剂的量。体外或体内试验可任选地用于帮助确定最优剂量范围。本发明也提供一种制备磷 虾油制剂的方法。描述由海洋生物质制备海洋油的现有技术主要集中在优化油的产率和脂 质组分（PCT公开WO 00/23546(Beaudoin)、W0 00/23546(根据Folch et al.，J Biol Chem. 1957; 226:497-509的提取），Yamaguchi等人，1986)。令人惊奇地，本发明的发明人已 发现对油在营养、稳定性和安全方面具有关键效果的非脂质物质可通过制备油制剂的过程 控制。惊奇地发现从磷虾提取磷虾油的方法显著影响所形成磷虾油制剂中矿物、金属和杂 质(例如胆碱、甜菜碱和氨基酸)的量。
[0061] 还惊奇地发现可通过提取过程和任选地通过后续的洗涤过程控制具体矿物和金 属剖面。
[0062] 此外，本发明人惊奇地发现从磷虾中提取磷虾油的过程随时间影响油的TMA水平。 正如在实施例5中显示的，常规提取方法形成含随时间增加的TMA水平和不需要的矿物和金 属组分的磷虾油制剂。
[0063] 这些独特的发现使本发明人能够形成一种新型磷虾油组合物，其包含最优的矿物 和金属组分、低的杂质(例如胆碱、甜菜碱和氨基酸)和低水平的TMA，所述TM水平在长的时 间内保持为低。
[0064]根据本发明的一个实施方案，所述憐4下油制剂具有提尚的抗氧化能力、提尚的脂 肪酶活性和提高的经上皮钙运输，相比较于现有技术中已知的磷虾油制剂(其包含<700ppm 钙、>1200ppm钠和/或>5mgN/100g TMA)。
[0065] 本发明提供一种制备本发明的磷虾油制剂的方法，包含提取过程和任选的洗涤。
[0066] 任选地和优选地通过将一种或多种有机溶剂添加至磷虾生物质中以形成油提取 物来实施提取油的阶段。所述磷虾生物质可为膳食的形式或新鲜或冷冻的磷虾的形式，或 通过烹饪和倾析被处理以移除一些水含量的新鲜或冷冻的磷虾的形式，或为任何其他磷虾 形式。任选地且更优选地，通过离心、过滤、重力分离或其他方法将液相与脱脂的生物质分 离。任选地，通过重复上述过程从生物质中提取与脱脂生物质一起留下的残留的磷虾油：向 所述脱脂的磷虾生物质中添加一种或多种有机溶剂和通过相同的任选方法（即，离心、过 滤、重力分离等)分离液体。将由提取和再提取得到的液相结合起来以形成最终的液相。
[0067] 在选择过滤作为分离方法的情况下，重复提取可优选地通过简单地洗涤在从其移 除第一液相后作为"滤饼"留下的脱脂生物质来实施。此次通过洗涤完成的再提取将再次通 过使用一种或多种有机溶剂来实施。将由提取和再提取得到的滤液即液相合并以形成最终 的液相。
[0068] 任选地通过添加水，也任选地添加有机溶剂，将所述水和所述有机溶剂与最终的 液相混合来洗涤最终的液相。在混合后，任选地通过重力或通过离心实施分离，形成两个不 同的相:含磷虾油的有机相和含大部分水的第二相（即，水相）。可任选地使用水和任选的有 机溶剂在相同的程序中洗涤有机相。最终的液相，无论是洗涤的或未洗涤的，任选地和优选 地经受蒸发阶段以移除有机溶剂并得到油。优选在减压下实施蒸发。
[0069] 在提取和再提取阶段溶剂和磷虾生物质的比率(V溶剂:W生物质）为小于10:1，任 选地小于5:1，更优选地小于4:1。
[0070] 提取条件应被控制且可任选地被保持在10-60 °C，优选30-40 °C和1分钟至10小时， 优选l-3h，且更优选2-2.5h。提取可分批实施，例如在间歇反应器中，或任选地通过连续提 取工艺实施。连续提取可以并流或逆流模式在连续提取系统例如本领域中已知的那些中实 施。在连续提供中溶剂和磷虾生物质的比率被看作是在所述系统中两股流的流量间的比 率。
[0071] 也可任选地连续实施所述水洗涤阶段。任选地，可通过液体连续混合器（in-line mixer)或通过CSTR或通过混合器-沉降器系统混合水和有机相。混合的水-有机相可穿过连 续或间歇重力分离槽或任选地通过连续离心分离。在连续洗涤的情况下，水、乙醇和有机相 之间的比率将被认为是这些流的各流量间的比率。
[0072] 所述有机溶剂优选地，但不限于，包含含任选地极性和非极性溶剂混合物的有机 溶剂。极性溶剂可包括：乙醇、甲醇、2-丙醇、丁醇等。非极性溶剂可来自一种或多种下列物 质的组:己烷、庚烷、石油醚等。极性和非极性溶剂间的比率(体积:体积)为优选1:99-99:1， 更优选5:95-50:50，更优选10:90-20:80。优选的溶剂混合物为己烷乙醇混合物。
[0073] 在洗涤阶段用于洗涤有机相(含溶解在有机溶剂中的油）的水相的体积为优选地 小于100 %的最终液相体积，优选小于50 %的最终液相，更优选小于10 %的最终液相体积。
[0074] 在蒸发后得到的油任选地且优选地经受水洗涤阶段，在水洗涤阶段中所述油优选 再溶解在有机溶剂中以形成有机相。水任选地与有机溶剂一起或任选地在其之后被添加至 有机相中，与有机相混合并通过重力分离或离心与有机相分离。水洗涤阶段可任选地重复 一次或数次。通过从所洗涤的油中移除溶剂，任选地通过优选在减压条件下的有机溶剂蒸 发，得到最终的磷虾油制剂。
[0075] 油和在实施水洗涤时形成有机相的有机溶剂间的比率为优选(油:有机溶剂w/v) 1:1-1:40，优选 1:2-1:30，更优选 1:3-1:10且最优选1:5-1:8。
[0076] 所述有机溶剂优选地，但不限于，包含有机溶剂，所述有机溶剂任选地包含极性或 非极性溶剂的混合物。极性溶剂可包括：乙醇、甲醇、丁醇等。非极性溶剂可来自一种或多种 下列物质的组：己烷、庚烷等。极性和非极性溶剂间的比率(V:V)为优选1:99-99:1，更优选 5:95:50:50，更优选10:90-20:80。优选的溶剂混合物为己烷乙醇混合物。
[0077] 在洗涤阶段用于洗涤有机相(包含油+有机溶剂）的水相的体积优选小于100%的 有机相体积，优选小于50 %的有机相，更优选小于40 %的有机相，甚至更优选小于30 %的有 机相和最优选小于10%的有机相体积。
[0078] 通过外部实验室Norway的Nofima BioLab测试磷4下油样品中的TMA水平。在Conway 餐具中根据Conway和Byrne微量扩散法的改进版本（Conway&0'Mal ley ,Microdiffusion Methods · Biochem，36，656-661 (1942))实施测试。
[0079] 通过P-NMR通过第三方实验室(Spectral Services)分析或由HPTLC分析计算磷奸 油样品中的磷脂质(PU含量。通过如下过程实施HPTLC分析:使用氯仿：甲醇95:5 v/v溶液溶 解样品，和使用包括水、甲醇、乙酸、丙酮和氯仿的洗脱液使其在HPTLC二氧化硅凝胶板上运 行，和使用含水、硫酸和无水磷酸铜的着色溶液着色所述板。通过气相色谱-改进的AOCS官 方方法Ce lb-89分析EPA和DHA含量。
[0080] 通过ICP方法通过加拿大的POS生物技术实施元素分析以测定磷虾油样品中的矿 物和金属含量。
[0081 ] 通过德国Eurofins Analytik GmbH使用LC-MS-MS分析磷奸油样品中的胆碱和甜 菜碱。通过Eurofins Analytik GmbH根据ISO 13903:2005、EU 152/2009(F)和ISO 13904: 2005、EU 152/2009(F)的参考方法分析总氨基酸含量。
[0082]加速的稳定性测试是对于药物物质和产品的标准加速的储存条件模型 ("Stability Testing of New Drug Substances and Products Q1A(R2)''，ICH Harmonised Tripartite Guideline,Feb 2003)。
[0083] 与化合物的量和浓度相关联的如本文所用的术语百万分之几(ppm)和百分比（％) 分别指重量百万分之几和重量百分比。
[0084] 实施例
[0085] 实施例1:市售的磷虾油胶囊的矿物和金属组分和胆碱、甜菜碱和氨基酸的含量
[0086] 测试购自商家的市售磷虾油产品的胶囊以得到金属和矿物组分(表1)。可以看出， 在测试的胶囊中的钠的值高于1200ppm且|丐的值低于700ppm。在测试的两种情况下，钠水平 高于钙水平。也可看出，胆碱水平高于450ppm，甜菜碱水平高于1000 ppm且氨基酸水平高于 在本发明的磷虾油中得到的那些。
[0087] 產市售磷虾油胶囊的金属、矿物和氨基酸组分
[0090] NT =未测试
[0091] 实施例2:市售磷虾油胶囊的TMA水平
[0092]测试购自商家的市售磷虾油产品的胶囊以得TMA水平。令人惊奇地，当抽样时，发 现TMA水平高于5mgN/100g(表2)。因此，所测试的磷虾油具有高的TM水平，尽管测试是在产 品的被推荐的保质期内（正如公开宣布的有效期限)实施的。
[0093] 市售的磷虾油胶囊的TMA组分
[0096] *稳定性测试后测试的TMA水平从13mgN/100g增加至28mgN/100g，所述稳定性测试 涉及在40°C下存储一个月。
[0097] 实施例3:根据本发明的磷虾油的生产
[0098] A.通过在间隙反应器中添加43331溶剂至1300kg磷虾膳食中并在约40°C下混合约 2h实施从磷虾膳食中提取油。所述溶剂混合物包含体积比为90:10的己烷和乙醇。在反应器 冷却至约25°C后使用篮式离心机系统对包含提取的油的溶剂进行过滤。将脱脂的膳食粉末 从篮式离心机中排出，并在相同的间歇反应器中使用额外的25201的相同的溶剂混合物再 提取，然后在篮式离心机中再次过滤所形成的溶剂/油混合物。将所有的滤液合并在一起。 [0099]在含己烷、乙醇和水的混合物中洗涤所述油。在得到清楚的相分离后，移除底部 (水)相。在减压下在约40-50°C下蒸发有机(上部)相的溶剂约12h以生产磷虾油。
[0100] 所述的方法产生约250kg磷虾油，所述磷虾油包含:PL(磷脂质）=42.12g/100g， EPA=ll·4g/100g，DHA = 9·2g/100g，TMA测试显示TMA〈lmgN/100g。在室温下8个月的稳定性 测试后，TMA水平保持〈lmgN/100g。表3中呈现了所产生油的元素分析结果。
[0101] B.通过添加1200ml溶剂至300gr磷虾膳食中并在约40°C下振动约2h实施从磷虾膳 食中提取油。溶剂混合物包含体积比为90:10的己烧和乙醇。使用Buchner真空系统将包括 提取的油的溶剂从所述膳食粉末中滤出。使用额外600ml的相同溶剂混合物洗涤作为"滤 饼"留下的脱脂的膳食粉末，以进一步提取留在脱脂的膳食中的油。在所有滤液被合并在一 起后，使用约50°C的浴在旋转蒸发仪中在减压下蒸发溶剂约Ih直至得到小于IOmbar真空且 在油相中无看得见的沸腾。得到约65g的油。
[0102] 将65g所得到的油中的约30g溶解在约206ml包括己烷、乙醇和水的溶剂混合物中。 搅拌所述溶液并在分离漏斗中使有机相和水相分离。使用约50 °C的浴在旋转蒸发仪中在减 压下蒸发有机(上部)相的溶剂约Ih直至得到小于IOmbar真空且在油相中无看得见的沸腾， 以产生磷虾油。
[0103] 所述的方法产生包含如下物质的磷虾油:PL>25g/100g，EPA>8g/100g，DHA>4.5g/ l〇〇g。表3中呈现了所产生油的元素分析结果。
[0104] ^:实施例3A和3B中产生的磷虾油的金属和矿物组分

[0107] C.根据本发明，以与上面描述的实施例的方法B相同的方法制备磷虾油。所述的方 法产生包含如下物质的磷虾油:PL = 40 · 95g/100g，EPA = 12· lg/100g，DHA = 6 · 7g/100g，游 离胆碱=323dot，甜菜碱<2OTm和下面的氨基酸组分：

L〇11〇」D.通过添加800ml溶剂至200gr磷虾膳食中并在约40 °C下振动约2h实施从磷虾膳 食中提取油。溶剂混合物包含体积比为90:10的分别地己烧和乙醇。使用Buchner真空系统 将包括提取的油的溶剂从所述膳食粉末中滤出。使用额外400ml的相同溶剂混合物洗涤作 为"滤饼"留下的脱脂的膳食粉末，以进一步提取留在脱脂的膳食中的油。在所有滤液被合 并在一起后，使用约50°C的浴在旋转蒸发仪中在减压下蒸发溶剂约Ih直至得到小于IOmbar 真空且在油相中无看得见的沸腾。得到约50g的油。
[0111] 将50g所得到的油中的约30g溶解在约930ml溶剂混合物中，所述溶剂混合物包括 己烷、乙醇和水，其比例为87.1 %己烷、9.7 %乙醇、3.2 %水。搅拌所述溶液并在分离漏斗中 使有机相和水相分离。使用约50 °C的浴在旋转蒸发仪中在减压下蒸发有机(上部)相的溶剂 约Ih直至得到小于IOmbar真空且在油相中无看得见的沸腾，以产生磷虾油。
[0112] 所述的方法产生包含如下物质的磷虾油:PL = 25.8g/100g，EPA = 8.2g/100g，DHA =4.88/10(^<^]\^测试显示了]\^〈111^/10(^。在40°(：下8个月的稳定性测试后了]\^水平保持〈 lmgN/100g〇
[0113] E.使用连续工业装置在逆流流中提取磷虾油。使用包含体积比为90:10的分别地 己烷和乙醇溶剂混合物在约40°C下实施提取。设定系统参数以确保300kg/h磷虾膳食和 1140L/h溶剂的流。通过重力连续地将含溶解的油的溶剂与脱脂的膳食分离。在约50°C下在 减压下蒸发所述溶剂。将400kg接收的油溶解在约27481的包括己烷、乙醇和水的溶剂混合 物中。搅拌所述溶液并使有机相和水相分离。在减压下蒸发有机(上部)相的溶剂以产生磷 虾油。
[0114]所得到的油经受使用由己烷、乙醇和水组成的相同的溶剂混合物的二次洗涤。
[0115] 所述方法产生包含下面物质的磷虾油制剂:PL = 36.4g/100g，EPA= 11.2g/100g， DHA = 6 · 5g/100g，TMA〈lmgN/100g，游离胆喊=87 · lppm，甜菜喊<2ppm，Ca= 1800ppm，Na = 400ppm和下面的氨基酸组分：

[0117] 实施例4:根据本发明的磷虾油胶囊的制备
[0118] 不仅作为散装油，而且在软胶囊封装后，磷虾油显示TMA低水平的稳定性。以与上 述实施例相同的方法根据本发明制备磷虾油，并将其封装在333mg软凝胶胶囊中。所使用的 主要的壳成分是明胶、丙三醇和水。在环境条件下在干空气室中干燥胶囊。
[0119] 胶囊中磷虾油的TMA测试显示TMA〈 ImgN/100g。在40 °C下5个月的稳定性测试后， TM水平保持低于5mgN/100g。
[0120] 实施例5:根据本领域中已知的方法制备磷虾油
[0121] 为了演示提取程序对最终油组成的影响，我们基于已知的商业提取过程(磷虾油 GRAS通知(GRN000371)(A)和PCT WO 00/23546(Beaudoin)(B))实施两种不同的常规提取程 序。如下面所显示的，所述常规提取方法产生不同于本发明的组成的磷虾油组成。
[0122] A.通过向磷虾膳食中加入乙醇并在400°C下振动2h实施从磷虾膳食中提取油。以 与上面给出的实施例中详细说明的方案相同的方式实施提取、过滤和蒸发程序。表4中呈现 了所产生的油的元素分析结果。
[0123] B.通过向磷虾膳食中加入乙醇并在400°C下振动2h实施从磷虾膳食中提取油。以 与上面给出的实施例中详细说明的方案相同的方式实施提取、过滤和蒸发程序。制备后TMA 测试显示 TMA = 21mgN/100g。
[0124] C.通过向冷冻的磷虾中添加丙酮从未加工的磷虾样品中提取油。将混合物放置在 保持在4°C的振动器中约2h。以与上面给出的实施例中详细说明的方案相同的方式实施提 取、过滤和蒸发程序。TMA测试显示TMA =〈lmgN/100g，然而，在室温下6个月的稳定性测试 后，TMA水平惊人地增加至9mgN/100g。在400 °C下6个月的稳定性测试后，TMA水平惊人地增 加至56mgN/l OOg。表4中呈现了所产生的油的元素分析结果。
[0125] 表4:实施例5A和5C中产生的磷虾油的金属和矿物组成

[0128] NT =未测试
[0129] 实施例6:通过DPPH试验评估磷虾油自由基清除能力
[0130] DPPH(2,2-二苯基-1-苦基肼)是一种已知的自由基和对于其他自由基的陷阱（"清 除剂"）。因此，在添加 DPPH时化学反应的速率下降用作该反应的自由基性能的指示剂。由于 在以约517nm为中心的强的吸收带，DPPH自由基在溶液中具有深紫色，且当被中和时其变为 无色或浅黄色。该性质使反应的可视化检测，且可从在517nm处光学吸收中计数初始自由基 的数目。
[0131] 在20ml瓶中将5毫升的0.1 OmM在异辛烷(异辛烷可溶解在DPPH和磷虾油样品中）中 的DPPH与50mg油样品混合，在黑暗中静置30min后，使用紫外分光光度计(JASCO V-630)测 试在517nm处样品混合物的吸光度。来自DPPH方法的自由基清除活性结果表达为DPPH溶液 的初始OD(517nm)的％。在异辛烷中（无磷虾油)DPPH的初始吸光度值代表对照组（100 % )。 来自图1的数据显示根据本发明的磷虾油制剂(根据实施例3B制备，且包含最优水平的矿物 和金属、低水平的杂质和低且稳定水平的TMA)显著降低了 DPPH的吸光度。这表明了根据本 发明的磷虾油制剂比对照的磷虾油包含更高的自由基清除能力(参见表1中的品牌C)。
[0132] 实施例7:通过脂肪酶活性试验水解磷虾油
[0133] 在25°C下在有机/水性两相体系中溶解磷虾油30min。通过添加不同量的脂肪酶衍 生物并在150rpm下搅拌来引发反应。通过HPLC-GC方法在不同的时间下测定游离脂肪酸 (FFA)的浓度。结果显示，相比较于常规磷虾油制剂，在整个试验时间点中，根据本发明的磷 虾油制剂表现较高的初始水解速率(较低的滞后时间），在水解试验过程中也具有较高的总 FFA水平。
[0134] 实施例8:使用Caco-2细胞模型评估经上皮运输
[0135] 在塑料培养瓶中生长Caco-2细胞（人结肠腺癌细胞系）。在达到90 %融合 (confluent)后，用本发明的磷虾油或富有外源钙盐的常规磷虾油（含<700ppm的钙和〉 1200ppm的钠)处理细胞，以评估经上皮的钙运输。结果显示，相比较于富含外源钙盐的对照 磷虾油，本发明的磷虾油显示出在更高的通过完全分化的Caco-2细胞的经上皮钙运输。
[0136] 实施例9:通过循环伏安法评估磷虾油的还原活性
[0137] 循环伏安法是一种类型的电位-动态电化学方法，其可用于有效地表征生物样品 或食物提取物的还原能力。通过循环工作电极的电势并测量作为结果的电流，例如氧化-还 原反应，来实施循环伏安法。因此，通过循环伏安的电化学方法分析磷虾油样品（与或不与 去离子水混合）的还原能力。数据显示，相比较于常规磷虾油制剂，本发明的磷虾油制剂具 有显著较高的还原能力。
【主权项】
1. 包含磷奸油的磷奸油制剂，其中所述磷奸油具有5mg氮/100g(mg N/100g)或更低的 三甲胺浓度。2. 根据权利要求1所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油在40°C或更低温度下存储三个 月后具有5mgN/100g或更低的三甲胺浓度。3. 根据权利要求1或2所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有大于700ppm重量的内源 钙浓度和/或低于1200ppm重量的钠浓度。4. 根据权利要求1-3任一项所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有大于500ppm重量 的内源镁浓度。5. 根据权利要求1-4任一项所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有小于450ppm重量 的游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.3g/100g的总氨基酸浓 度。6. 根据权利要求1-4任一项所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有小于450ppm重量 的游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.15g/100g的以下各氨基 酸的浓度:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、 赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬 氨酸。7. 包含磷虾油的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有大于700ppm重量的内源钙浓度和/ 或小于1200ppm重量的钠浓度。8. 根据权利要求7所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有大于500ppm重量的内源钙 浓度。9. 根据权利要求7或8所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有小于450ppm重量的游离 胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.3g/100g的总氨基酸浓度。10. 根据权利要求7或8所述的磷虾油制剂，其中所述磷虾油具有小于450ppm重量的游 离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.15g/100g的以下各氨基酸的 浓度:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨 酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨 酸。11. 包含权利要求1-10任一项所述的磷虾油制剂的组合物。12. 包含权利要求1-10任一项所述的磷虾油制剂的胶囊。13. 包含权利要求1-10任一项所述的磷虾油制剂的保健营养品。14. 包含权利要求1-10任一项所述的磷虾油制剂的膳食补充剂。15. 包含权利要求1-10任一项所述的磷虾油制剂和一种或多种药用辅料的膳食补充 剂。16. 包含磷虾油制剂的组合物，其中所述磷虾油制剂具有5mg N/ 100g或更低的三甲胺 浓度。17. 根据权利要求16所述的组合物，其中所述磷虾油制剂在40°C或更低温度下存储三 个月后具有5mgN/100g或更低的三甲胺浓度。18. 根据权利要求16或17所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有大于700ppm重量的 内源钙浓度和/或低于1200ppm重量的钠浓度。19. 根据权利要求16-18任一项所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有大于500ppm重 量的内源镁浓度。20. 根据权利要求16-19任一项所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有小于450ppm重 量的游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.3g/100g的总氨基酸 浓度。21. 根据权利要求16-19任一项所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有小于450ppm重 量的游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.15g/100g的以下各氨 基酸的浓度:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨 酸、赖氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸 和缬氨酸。22. 包含磷虾油制剂的组合物，其中所述磷虾油制剂具有大于700ppm重量的内源钙浓 度和/或低于1200ppm重量的钠浓度。23. 根据权利要求22所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有大于500ppm重量的内源 镁浓度。24. 根据权利要求22或23所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有小于450ppm重量的 游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.3g/100g的总氨基酸浓度。25. 根据权利要求22或23所述的组合物，其中所述磷虾油制剂具有小于450ppm重量的 游离胆碱浓度和/或小于lOOOppm重量的甜菜碱浓度和/或小于0.15g/100g的以下各氨基酸 的浓度:丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖 氨酸、蛋氨酸、鸟氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、羟脯氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨 酸。26. 根据权利要求16-25任一项所述的组合物，其中所述组合物不包含来自非磷虾源的 矿物或金属。27. 根据权利要求16-25任一项所述的组合物，其中所述组合物为胶囊。28. 根据权利要求16-25任一项所述的组合物，其中所述组合物为保健营养品。29. 根据权利要求16-25任一项所述的组合物，其中所述组合物为膳食补充剂。30. 根据权利要求16-25任一项所述的组合物，其中所述组合物为药物组合物并包含一 种或多种药用辅料。31. 制备磷虾油制剂的方法，其包含使用含一种或多种极性溶剂和一种或多种非极性 溶剂的溶剂混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤。32. 根据权利要求31所述的方法，其中所述方法对于使磷虾油制剂中的内源钠水平降 低至低于磷虾油制剂中内源钙水平是有效的。33. 根据权利要求31所述的方法，其中所述方法对于将磷虾油制剂中的内源钠降低至 少于1200ppm重量和/或维持磷虾油制剂中的内源钙多于700ppm重量是有效的。34. 根据权利要求31所述的方法，其中所述溶剂混合物包含己烷和乙醇。35. 根据权利要求34所述的方法，其中所述溶剂混合物中己烷比乙醇的体积比为约9: 1〇36. 根据权利要求31所述的方法，还包含至少一个用水洗涤所提取的磷虾油的步骤。37. 根据权利要求36所述的方法，其中当实施所述至少一个用水洗涤所提取的磷虾油 的步骤时，所提取的磷虾油溶解在有机溶剂混合物中。38. 磷虾油制剂，其由包含使用一种或多种极性溶剂和一种或多种非极性溶剂的溶剂 混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤的方法制备。39. 根据权利要求38所述的磷虾油制剂，其中所述溶剂混合物中己烷比乙醇的体积比 为约9:1。40. 降低总胆固醇量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对降低人体内总胆固 醇量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含5mgN/100g或更低的三甲胺。41. 降低甘油三酯量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对降低人体内甘油三 酯量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含5mgN/100g或更低的三甲胺。42. 增加 HDL-胆固醇量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对增加人体内HDL-胆固醇量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含5mgN/100g或更低的三甲胺。43. 降低总胆固醇量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对降低人体内总胆固 醇量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含多于700ppm重量的内源钙和少于 1200ppm重量的钠。44. 降低甘油三酯量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对降低人体内甘油三 酯量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含多于700ppm重量的内源钙和少于 1200ppm重量的钠。45. 增加 HDL-胆固醇量的方法，所述方法包含向有需要的人体施用对增加人体内HDL-胆固醇量有效的量的磷虾油制剂，其中所述磷虾油制剂包含多于700ppm重量的内源钙和少 于1200ppm重量的钠。46. 根据权利要求40-45任一项所述的方法，其中所述磷虾油制剂由包含使用一种或多 种极性溶剂和一种或多种非极性溶剂的溶剂混合物从磷虾中提取磷虾油的步骤的方法制 备。
【文档编号】A23D9/007GK105992588SQ201580008278
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2015年2月10日
【发明人】利亚蒂·罗内恩, 拉恩·努马, 盖·本-德罗尔
【申请人】恩兹莫特克有限公司