专利名称：富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物油的提纯方法以及含有这种油的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物油的提纯方法以及含有这样的油的组合物。本发明还涉及一种从海豹和其它海洋哺乳动物中制备这种油的方法。特别是，本发明涉及一种来源于海豹和其它海洋哺乳动物的皮下和肌肉组织的转化方法。更特别的是，本发明涉及一种从海豹和其它海洋哺乳动物的尸体中获得脂质和蛋白提取物的方法以及这些提取物。另外，本发明还涉及通过本发明的方法获得的部分以及含有这些部分的食品补充剂。
整个海豹业希望找到海豹肉、海豹脂肪产品增长的市场，而且在亚洲市场的条件下，希望发现海豹生殖器催欲产品市场的增长。由于从鲸脂中提取的、富含ω-3脂肪酸的海豹油的特性，最近人们已经表现出对海豹油的新的兴趣。因为海豹油富含ω-3脂肪酸，所以它是一种典型的海洋动物油。更特别的是它含有二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)，它们有价值的特性是本领域的普通技术人员已熟知的。另外，这些油含有相当高水平的角鲨烯和维生素E。这些化合物对于健康的保持和发展是必需的。事实上在过去的二十年里，健康专家已经推荐含较少饱和脂肪和较高多不饱和脂肪的饮食。在这种建议已经被很多消费者遵循的同时，心脏病、癌症、糖尿病和许多其它衰弱性疾病的发病率却保持稳定的增长。科学家们认定多不饱和脂肪的类型和来源与脂肪的总量同样重要。最普通的多不饱和脂肪来源于蔬菜，并且这些脂肪缺乏长链脂肪酸(例如ω-3)。另外，创造合成脂肪的多不饱和脂肪的氢化作用已经引起某些疾病的增长，而且使某些必需脂肪酸的缺乏加重。的确，许多疾病已经被确定得益于ω-3的补充。这些疾病包括痤疮、过敏性疾病、阿尔茨海默病、关节炎、关节硬化、乳腺囊肿、癌症、膀胱纤维化、糖尿病、湿疹、高血压、机能亢进、肠功能紊乱、肾功不全、白血病和多发性硬化症。值得注意的是，世界卫生组织已经建议婴儿配方应当富含ω-3脂肪酸。
常规使用的多不饱和脂肪是来源于植物油的那些，它们含有明显数量的ω-6，但ω-3很少，或者不含ω-3。由于ω-6和ω-3均为良好健康所必需的，因此它们必须以约4∶1的比例进行消耗。今天西方饮食已经出现了严重的失衡，当前的消耗是ω-6平均比ω-3多20倍。关心的消费者已经开始寻找健康食品补充剂以恢复这种平衡。ω-3的三种主要来源是亚麻油、鱼油和海豹油。过去10年亚麻油和鱼油的生产有了快速增长。这两种油被认为是多不饱和脂肪良好的饮食来源，但是在补充ω-3脂肪酸方面，它们比海豹油的效果差。亚麻油不含EPA、DHA或DPA，而是含有亚麻酸，它是机体生成EPA的一种结构单元。但是，有证据表明其代谢转化率可能缓慢并且不稳定，特别是在那些健康受损的人中更明显。鱼油在脂肪酸组成的类型和水平方面变化较大，这取决于特殊的种类和它们的饮食。例如，水产养殖鱼倾向于所含ω-3脂肪酸的水平比野生鱼的水平低。研究已经表明，对处于心脏病和糖尿病危险中的人来说，海豹油比鱼油更有益。科学家推测这是由于从鱼油中相对地缺乏DPA以及机体提取并利用鱼油的EPA和DHA内含物的速率较慢。
ω-3油最富含、最直接和最完全的来源发现是在某些海洋哺乳动物的鲸脂中，而且尤其是在鞍纹海豹中。另外，机体从海豹鲸脂中吸收ω-3比从亚麻油和鱼油中吸收的速度更快，并且效率更高。这部分是因为海豹油中EPA和DHA的分子构型，它与鱼油中所发现的分子构型略有不同。
传统上，通过需要高温的方法提取海豹油，高温促使多不饱和脂肪的氧化。
诸如海豹等的海洋哺乳动物的油具有明显的优势。但不幸的是，仍然没有从这些海洋哺乳动物中提纯油的简单而又成本低廉的方法。另外，还必须提供一种方法，该方法使得从脂肪组织、活性蛋白部分以及来源于肌肉和内脏组织的脂质的含有明显数量的ω-3脂肪酸的油纯化。而且，由于海豹毛皮价格明显下降(去年大约为50％)，以及海洋哺乳动物尸体价格非常低(来自于1997年纽芬兰和拉布拉多海产食品工业，纽芬兰渔业和水产养殖部)，所以需要提高海洋哺乳动物(特别是海豹)躯体部分、特别是它们的尸体的价值。
另外还需要发现海洋哺乳动物(诸如海豹)的尸体的蛋白的利用和/或利益。
由于所报道的含有ω-3的脂肪酸对健康的益处，需要提供含有明显数量的它的提取物，即指通过一种简单而又成本低廉的方法制备这些脂肪酸，以及提供含有这种提取物的食品补充剂。
本发明致力于满足这些和其它需要。
本说明书中提到了很多文献，这些文献的内容在此全面地收编作为参考。
本发明的总结本发明涉及一种获得和纯化富含ω-3脂肪酸的海洋哺乳动物油的方法，此方法克服了现有技术中的缺陷。尤其特别地是，本发明涉及一种从海豹组织中提纯富含ω-3脂肪酸的油的方法、含有这样的油的部分以及含有这样的油的食品补充剂。在一个特别优选的实施方式中，海豹组织是鲸脂，它可以产生明显数量的油。
本发明还涉及从一种海洋哺乳动物中提取含有ω-3的脂肪酸的方法，此方法可以在保证鲸脂质量的条件下回收鲸脂油。更特别地是，此ω-3脂肪酸的提取方法减少了多不饱和脂肪的氧化。此方法还可以从其它组织以及一种来源于尸体的蛋白离析物中回收脂质。通过将尸体用作提取和提纯的基质，本方法除了可对海洋哺乳动物的尸体和不需要的组织进行对环境有利的妥善处理外，还可提供一种显著的附加值。的确，本发明可对通常被丢弃的海洋哺乳动物的组织进行回收利用。
尤其特别的是，在一个优选的实施方式中，本发明涉及一种海豹和相关种的通过在无溶剂条件下的“冷压”提取其皮下脂肪组织的转化方法。
在本发明的一个特别优选的实施方式中，此方法还包括第二个步骤，即通过溶剂提取从海豹肌肉和其它组织中回收蛋白。在一个特别优选的实施方式中，溶剂选自丙酮、醇、乙醇、乙酸乙酯，或者是至少两种这样的有机溶剂的组合。通过此溶剂或者多种溶剂的蒸发，回收在此第二步中通过溶剂或溶剂提取物提取的脂质。包括此第二步的方法，可以回收明显纯的蛋白部分，不含有显著水平的重金属或农药(它们不与蛋白一同沉淀)。
按照本发明，可以使用的非限制性的有机溶剂的实例是本领域中所熟知的，并且包括醇(例如异丙醇、丙醇等)。当然，优选使用的是对动物无毒的溶剂(例如甲醇等)。
术语“动物”是广泛地指动物界，并因此指哺乳动物、鱼、鸟等。
本发明的方法可从脂肪组织中生产富含ω-3的油，可以从肌肉和内脏组织(这些组织通常被抛弃)中获得(obtention)保持有酶活性的基本上纯的蛋白部分和脂质。
在许多优选实施方式中，本发明涉及海豹作为从中制备其提取物或部分的海洋哺乳动物。
在本发明的一个实施方式中，一旦杀死含有丰富ω-3的脂肪酸的海洋哺乳动物，立刻使此哺乳动物出血，并除去它的皮。切下皮下脂肪和其它脂肪组织，并在很低的温度下保存。优选的温度在大约0℃至大约10℃，而且更优选的温度在大约0℃至大约4℃。通过在脂肪上施加物理压力而提取出油。在一个特殊的实施方式中，通过研磨和在此组织上给予高压(冷提取)而提取出油。在这样一种方法中，脂肪溶化入此油中，然后通过过滤或离心而将其回收。
在一个特殊实施方式中，通过常用的方法，例如过滤和/或离心，纯化此油。另外，通过惯用的加热方法，可以将此油中的水与任何挥发性化合物一起收集。
在本发明的另一个优选实施方式中，研磨尸体的其它组织，包括内脏，并用冷的丙酮和/或乙醇提取。在冲洗不溶物后，在低压下将溶剂从此提取物中去除，留下保持有某些活性酶活性、并且没有显著水平的细菌污染的蛋白浓缩物。在蒸发和从组织水中分离后，回收溶剂溶解物(脂质相)。
因此按照本发明的一个实施方式，提供了一种从海洋哺乳动物提取富含ω-3脂肪酸的油的方法，它包括一个脂质提取步骤，该步骤包括对一种来源于此海洋哺乳动物的组织进行冷压处理，通过此冷压处理可获得(obtention)一种富含ω3脂肪酸的油，并且它使多不饱和脂肪的氧化降至最小，并且其中的脂质提取步骤是在缺少有机溶剂的情况下进行。
按照本发明的另一个实施方式，也提供一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物油，它是按照本发明的方法获得的。
按照本发明的另一个实施方式，还提供了一种食品补充剂组合物，它包括本发明的海洋哺乳动物油，和一种适宜的载体。适宜的载体是本领域中众所周知的。
按照本发明的另一个实施方式，还提供一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物的油，它不含有微量的有机溶剂。
正如本领域的普通技术人员已知的那样，此处所用的命名“鲸脂油”或“鲸脂”是指皮下脂肪组织。
术语“冷压”是本领域技术人员所熟知的术语，它是指在低温下对脂肪施加一种物理压力(见上文)。
如此处所用，“特别纯的蛋白部分”或者类似术语的含义是指一种蛋白部分或蛋白制剂，它含有至少大约90％的蛋白，优选至少大约95％的蛋白。类似地，“基本上纯的蛋白部分”或者类似术语的含义是指一种蛋白部分，它至少90％是纯的，优选至少95％是纯的，并且特别优选至少99％是纯的。
术语“不含显著水平的重金属或农药”的含义是指农药或重金属的水平低于管理部门(例如加拿大卫生部[例如食品与药品工艺和规范]、食品与药品管理局[USA]等)通过的标准。
当用海豹组织举例说明本发明的方法和提取物时，含有丰富ω3的脂肪酸的一般海洋哺乳动物均可用于本发明的方法中。这些海洋哺乳动物是本领域技术人员所熟知的。其非限制性的实例包括鲸类(例如鲸)、象海豹、海豹、海象等。因此可以理解为本领域的普通技术人员可对本发明的教导进行改变，而从这些海洋哺乳动物中制备油、蛋白和脂质。
在本发明的一个优选实施方式中，含有丰富ω3的脂肪酸的海洋哺乳动物是海豹。此处所用的术语“海豹”，是广泛地指许多种类。在大西洋中所存在种类的非限制性的实例包括鞍纹海豹、头兜海豹(Cystophoracristata)、环纹海豹(Pusa hispida)、斑海豹(Phoca vitulina，还可以在太平洋中发现)、灰海豹(Halichoerus grpus)和髯海豹(ErignthusBarbatus)。
值得注意的是，健康专家已经总结出80％的美国人具有必需脂肪酸不足。某些典型而非特异的必需脂肪酸缺乏的征兆和症状是疲劳、抑郁、皮肤和头发干燥、粘膜干燥、指趾甲断裂、消化不良、便秘和缺乏耐性。长期缺乏与慢性退行性疾病的高风险相关。多如60种的疾病与这种缺乏相关，或者是已经被确定为可得益于ω3的补充。这些疾病包括痤疮、过敏性疾病、阿尔茨海默病、关节炎、关节硬化、乳腺囊肿、癌症、膀胱纤维化、糖尿病、湿疹、高血压、机能亢进、肠功能紊乱、肾功不全、白血病、多发性硬化症、肌病、肥胖、银屑病和血管疾病。海豹油被证明可降低血清胆固醇，它没有处方药的副作用，并且它具有降低血液中血小板的能力可在预防中风中替代阿斯匹林。我们发现本发明的方法和由此获得的部分可应用于很多缺乏或疾病中。三种最重要的长链脂肪酸是EPA、DHA和DPA。这些脂肪酸已经出现在医学界中相对难解决的疾病中，它们将成为目前市场上最重要、增长最快的健康补充剂之一。
因此本发明还涉及包含一种或多种本发明部分的组合物，这些组合物可治疗和/或预防一种或多种适应于ω3补充剂的缺乏或疾病，特别是上述缺乏或疾病。
对于给予人或其它动物，专家(医学专家或健康食品补充剂专家)将最终决定所给对象的适宜的形式和剂量，并且可以预想到这将根据所选择治疗或预防、所给对象的反应和条件，以及疾病或情况的严重程度的不同而变化。
在本发明范围内的组合物应当含有有效量的活性成分(例如富含ω3脂肪酸的油)，以达到所需要的治疗和/或预防效果，同时避免不良的副作用。因为本发明的油具有中等至低水平的维生素A，因此可大剂量地给予(大于100ml)。值得注意的是，已知爱斯基摩人吃大量的鲸脂，相当于250-500ml本发明的油。因此，典型地，本发明的油可以以每日2-10ml范围的剂量给予哺乳动物(例如人)(根据人平均体重为150磅)。药物可接受的制剂在本发明的范围内，而且为本领域普通技术人员所熟知(《Remington药物学》，第16版，Mack主编)。本发明的蛋白部分可用作例如鱼、鸟或哺乳动物的蛋白来源。
参照附图，读完下列对优选实施方式的非限制性描述后，将会更清楚本发明的其他目的、优势和特点，此描述是示范性的，不应该被解释为是对本发明范围的限制。优选实施方式的说明获得海豹组织，并将所选择的组织在-20℃下保持冷冻隔离。在4℃下，进行所有组织样品的制备和脂质的提取。将适宜的组织样品切成片，并压入一个绞肉机中。或者通过机械压力，或者根据每种组织用丙酮溶解不同的时间，从称重的研磨过的样品中提取脂质。根据此组织，通过离心，或者通过过滤，将提取的脂质从非脂质物质中分离出来。在一个RotavaporTM仪中蒸发溶剂而回收这种溶剂提取的脂质。
将上述的常规提取方法用于特殊的海豹组织，例如鲸脂、肌肉、胰腺和肝脏。
表1显示了从肌肉、胰腺和肝脏组织中提取的脂质的产率。提取过夜并冲洗30分钟后，从胰腺和肝脏中获得的脂质的产率为2.6-3.0％。相反，从鲸脂中提取的步骤至少产生70％的透明油。此油为透明的，这是本发明方法的另一个优点。另外，来源于鲸脂的油是无色的。表1.不同提取时间用丙酮提取的脂质的量
表2显示了按照本发明的一个实施方式提取的肌肉组织的一般组成。此方法产生了两个连续的脂质部分和一个富含蛋白的干燥残余物。总结于表1和表2的结果表明脂质的回收率在2.6-3.0％之间。为了观察是否会有更多的脂质回收，用100ml的纯乙酸乙酯冲洗此肌肉残余物。可以回收另外的1.6-2.4％。表2.肌肉组织的一般组成
一种使用Folch方法(1957)的比较提取物显示使用Folch方法从肌肉中回收的总脂质，在产率方面，稍微好于本发明的方法。但是，Folch方法不能用于商业用途的脂质回收，原因是由于使用了甲醇而具有毒性。甲醇的毒性是众所周知的。
附
图1和表3显示鲸脂脂质98％是甘油三酯。大约一半的肝脏脂质是中性脂质，其中中性脂肪酸(32％)是主要成分，另外一半主要由磷脂酰胆碱(23％)和磷脂酰乙醇胺(17％)组成。大约四分之三的肌肉脂质是中性的，甘油三酯占它们中的大多数(67％)。然而，另外四分之一含有鞘脂/溶血磷脂酰胆碱(13％)和磷脂酰胆碱(10％)。相反，44％的胰腺脂质是游离脂肪酸，大多数的磷脂是磷脂酰胆碱(21％)和磷脂酰乙醇胺(15％)。在胰腺提取物中没有检测到甘油三酯。表3.动物脂肪、肝脏、肌肉和胰腺油的脂质种类比例
表4显示了所选择的鲸脂和肌肉油的理化特性。皂化值和碘值表明两种组织的脂质含有短链脂肪酸和高水平的多不饱和脂肪酸。来源于鲸脂的不饱和脂肪酸与从肌肉组织中提取的不饱和脂肪酸相比，过氧化较少。肌肉油含有0.84％的挥发性物质和湿度。相反，在鲸脂油中没有检测到水分和挥发性物质。事实上，包露在125℃下，很容易使鲸脂油氧化。两种组织的脂肪酸组成显示于表5中。两种类型的油含有20∶5和22∶6这样高的比例的脂肪酸(海洋哺乳动物油的一个特征)。表4.鲸脂和肌肉油的理化特性
表5.鲸脂和肌肉油中的主要脂肪酸组成(mg/100mg)
在脂质提取后获得的蛋白残余物可以用作蛋白和酶的来源。为了证实这一点，测定肌肉蛋白的氨基酸组成和蛋白残余物的蛋白分解和淀粉分解活性。表6表明在肌肉蛋白中存在有所有的必需氨基酸。但是，仅仅有10％的肌肉蛋白是水溶性的。附图1至4说明胰腺蛋白提取物具有一些蛋白分解活性，但是肝脏蛋白提取物和肌肉蛋白提取物均不显示具有显著的活性。表6a.肌肉蛋白的氨基酸组成
表6b.蛋白离析物的平衡表
矿物质％
表7表明胰腺只具有微弱的淀粉分解活性，因此，它不是一个用于提纯淀粉酶的组织的选择。然而，它表明海洋哺乳动物组织可以用作保持有酶活性的蛋白的一个来源(除了富含ω3的油以外)。当然，本领域的普通技术人员可以将海豹的胰腺(或另一种器官)用作一种将要在此处表达的已知蛋白的来源。表7.胰腺蛋白提取物的淀粉分解活性
通过下列的非限制性实施例对本发明进行进一步详细描述。
实施例1从海豹的鲸脂中提取从污染的解剖组织中修剪下皮下脂肪组织(鲸脂)。立即将于-20℃下冷冻的鲸脂在4℃下在一个绞肉机中研磨，并使用机械压力将油从脂肪组织中挤出。以4000rpm离心15分钟后，回收此“鲸脂油”，并与残余物一同称重，以估计每部分回收的相对百分数。
实施例2从海豹的肌肉组织中提取从明显的非肌肉组织中修剪下肌肉组织。将肌肉组织样品在一个绞肉机中研磨，并以每克组织5个体积丙酮的比例，以高速在一个搅拌机中与冷的(-20℃)丙酮混合2分钟。充分混合后，在4℃下，搅拌不同的时间，用丙酮提取出脂质。在图示的时间，通过过滤从混合物中分离出溶剂。回收过滤的溶剂，并如上所述用冷的(-20℃)丙酮再次冲洗固相。混合这两种溶剂部分，并通过在一个RotavaporTM仪中蒸发，回收提取的脂质。在100ml的乙酸乙酯中增溶脂质部分，并在倾析过夜后回收(“组织脂质”)。将残余物在室温下空气干燥过夜，称重，磨成粉状(“蛋白离析”)并在-20℃下保持冷冻以作进一步的酶分析。
实施例3从海豹的胰腺和肝脏组织中提取除所获得的脂质部分不用乙酸乙酯增溶以外，如肌肉组织中所述，研磨并提取组织样品。残余的提取物空气干燥过夜，然后磨成粉状并在-20℃下保持冷冻以作进一步的酶分析。
实施例4Folch方法和本发明方法提取效率的比较为了比较提取方法的效率，将一种使用氯仿和甲醇的传统技术(Folch等.1957)用于肌肉组织。这种方法是用于测定提取方法效率的标准方法。通过将脂质部分悬浮于小容积的它们原来的溶剂中，并用重量测定法测定，在蒸发后分成小的等份试样，以此来评价脂质的回收。
实施例5脂质组成的分析为了分析脂质组成，将已知数量的每种提取物装于硅胶盘中，通过薄层色谱法，TLC(Bowyer等，1962)分馏，所使用的溶剂如下中性脂质己烷、乙醚、乙酸(90∶10∶1，v/v)和磷脂氯仿、甲醇、水、乙酸(80∶25∶2∶2，v/v)。通过具有一些改变的气液色谱法，GLC(Bowyer等.1962)，分析鲸脂和肌肉油的脂肪酸组成。简言之，以在65℃下孵育2h代替在80℃下孵育1h，并以用己烷冲洗三次代替用水冲洗两次和不用水冲洗(Beaudoin等.，1970)。
为了去掉微量的有机溶剂和挥发性物质，将脂质部分在惰性气体下，加热至125℃大约15分钟。
鲸脂和肌肉脂质提取物具有下列特征(1)按照Nagendrappa等.(1998)的碘值；(2)按照美国油药剂师协会(AOCS)的过氧化物和皂化值、脂肪酸组成、水分和挥发性物质、以及折射指数；(3)按照He等.(1999)在用TLC分离脂肪酸后的游离脂肪酸。
实施例6蛋白组成的分析通过经典的Kjeldahl方法，估计肌肉组织中的蛋白数量。按照已知方法通过原子分光光度计估计矿物质的含量。
用邻-苯二甲醛(o-pthaldialdehyde)作试剂，通过用分光光度计测定氨基基团的释放，确定蛋白分解活性。在胰蛋白酶存在和缺少的情况下，在37℃下，孵育存在于50mM磷酸钾缓冲液(pH7.0)中的1％的组织提取物的匀浆。在所示的时间，加入三氯乙酸，并按照Church等，(1983，J Dairy Sci 661219-1227)的方法，除外试验在微量培养板中进行，在此上清液中测定氨基基团的数量。
按照Bernfeld(1951)的方法，确定淀粉分解活性。结论因此，本发明提供了一种获得一种海洋哺乳动物油的简单而又成本低廉的方法，该油富含ω3脂肪酸，可以用于多种类型的组合物例如食品补充剂中，以预防或治疗多种类型的情况或疾病。不同的海洋哺乳动物可以用作提纯该油的原材料。在一个优选实施方式中，海洋哺乳动物是海豹。海豹除了具有高浓度的ω3脂肪酸外，它还具有作为一种当前几乎只为其皮毛而被捕猎的动物的优势。结果，大量的海豹组织被浪费掉。因此，本发明提供了一种方法，该方法将这些通常被扔掉的组织回收利用为有益的、特别是对人类有益的价值增加的产品。按照本发明，优选的组织包括鲸脂、肌肉和具有蛋白质、尤其特别是具有一种所需酶活性的蛋白质的任何所需器官。这样器官的一种实例包括并不局限于肝脏和胰腺。在另外一个实施方式中，本发明提供了第二个步骤，它能够使一种基本上是纯的、并且可以充当鱼、鸟、哺乳动物等的动物饲料的蛋白质部分纯化。
虽然上文通过本发明的优选实施方式对本发明进行了描述，但是正如在待审的权利要求中所确定的那样，本发明可以作不背离本发明精神和实质的修改。
参考文献Beaudoin，A.B.1970，Métabolisme des lipides au cours dudéveloppement du Tripolium confusum Duval(coléoptére，Tenebrionidae)，Ph.D.Thesis，Laval大学.Berfeld P.，1951，Advances in Enzymol.12379Bowyer等，1962，BBA70423-431.Church等，1983，J.Dairy Sci.661219-1227.Folch等，1957，生物化学杂志，226497-509.Nagendrappa等，1998，JAOCS751219-1221.
权利要求
1.一种从海洋哺乳动物中提取富含ω3脂肪酸的油的方法，它包括一个脂质提取步骤，该步骤包括对来源于上述海洋哺乳动物的组织进行冷压处理，通过所述冷压处理可获得(obtention)富含ω3脂肪酸的油，并且它使多不饱和脂肪的氧化降至最小，并且其中所述脂质提取步骤是在缺少有机溶剂的情况下进行。
2.权利要求1的方法，其中所述海洋哺乳动物是海豹。
3.权利要求1或2的方法，其中所述组织至少是鲸脂和肌肉组织中的一种。
4.权利要求1至3中任一的方法，其中所述组织从上述海洋哺乳动物的尸体中得到。
5.权利要求1至4中任意一项方法，它还包括一个蛋白提取步骤，该步骤包括a)使用至少一种有机溶剂将所述蛋白析出；b)通过蒸发所述至少一种有机溶剂，回收a)的液相中的另外的脂质；以及c)从上述的沉淀中回收所述蛋白，其中所述回收蛋白基本上是纯的并且不含有显著水平的重金属或杀虫剂。
6.权利要求5的方法，其中所述至少一种溶剂选自丙酮、醇、乙醇和乙酸乙酯。
7.权利要求5或6的方法，其中所述回收蛋白保持有一些酶活性。
8.一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物的油，它是按照权利要求1至7中任意一项方法获得的。
9.一种食品补充剂组合物，含有权利要求8所述海洋哺乳动物的油，和一种适宜的载体。
10.一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物的油，它不含有微量的有机溶剂。
11.权利要求5、6或7的方法，其中所述有机溶剂是一种无毒的有机溶剂。
12.权利要求1至7中任意一项方法，其中所述组织经过一个研磨步骤。
13.权利要求12的方法，其中所述研磨步骤和冷压处理同时进行。
14.权利要求1至7或11至13中任意一项方法，其中所述海洋哺乳动物选自鲸类、海豹和海象。
15.权利要求14的方法，其中所述海洋哺乳动物是海豹。
16.权利要求8的油，其中所述海洋哺乳动物选自鲸类、海豹和海象。
17.权利要求16的油，其中所述海洋哺乳动物是海豹。
18.权利要求9的食品补充剂，其中所述海洋哺乳动物选自鲸类、海豹和海象。
19.权利要求18的食品补充剂，其中所述海洋哺乳动物是海豹。
20.权利要求1至7或11至15中任意一项方法，其中所述油通过离心和/或过滤进一步纯化。
全文摘要
本发明涉及一种富含ω3脂肪酸的海洋哺乳动物油的提纯方法以及含有这样的油的组合物。本发明还涉及一种从海豹和其它海洋哺乳动物中制备这种油的方法。尤为特别是，本发明涉及一种来源于海豹和其它海洋哺乳动物的皮下和肌肉组织的转化方法。更为特别的是，本发明涉及一种从海豹和其它海洋哺乳动物的尸体中获得脂质和蛋白提取物的方法以及这些提取物。另外，本发明还涉及通过本发明的方法获得的部分以及含有它们的食品补充剂。
文档编号C11B1/06GK1411500SQ00817298
公开日2003年4月16日 申请日期2000年12月4日 优先权日1999年12月2日
发明者A·鲍顿, G·马丁 申请人:舍布鲁克大学