发明所用组分均为绿色经济无污染，在土壤中均无任何残 留；5)本发明制得的菌肥适合工业化生产，在现有的化肥生产线即可进行生产，无需添加 新的设备，降低了生产投入；6)本发明处理的预煮液中所含的氨基酸与与生物菌剂联合作 用具备协同促进效果，可以进一步促进农作物对氮磷钾的吸收作用；7)本发明的复合生物 菌肥可以长期存放不易失活。8)本发明的复合生物菌肥还有防虫、抗虫的效果。9)本发明 的预煮液本身含有丰富的游离氨基酸、微量元素以及还原糖，与传统叶面肥生产相比较，无 须再另外添加，减少生产成本。
【附图说明】
[0036]图1是本发明预煮液浓度对褐球固氮菌活菌总数的影响结果图。
[0037] 图2是本发明预煮液pH值对褐球固氮菌活菌总数的影响结果图。
[0038]图3是本发明预煮液的体积对褐球固氮菌活菌总数的影响结果图。
[0039] 图4是本发明接种量对褐球固氮菌活菌总数的影响结果图。
[0040]图5是本发明培养温度对褐球固氮菌活菌总数的影响结果图。
【具体实施方式】
[0041] 下面结合实施例对本
【发明内容】
进行详细说明：
[0042] 实施例1 :一种复合生物菌肥的制作工艺，它包括以下步骤：
[0043] (1)预煮液的制备：
[0044]a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水；
[0045] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离心，取上清液；
[0046]c.将所得的上清液利用降膜蒸发器，降膜蒸发浓缩，浓缩至溶液折光率达到 35%，得浓缩液；
[0047] d.在浓缩液中添加变性剂，对浓缩液进行变性，其中所述的变性剂为80%的乙 醇，且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为6:1;
[0048]e.对变性后的浓缩液进行过滤除去经变性后所产生的沉淀，收集滤液；
[0049]f?将滤液进行旋转蒸发除去乙醇；
[0050]g.将旋转蒸发后所得的溶液利用5K的滤膜进行切向流过滤，收集滤出液，即可；
[0051] 所得的预煮液的成分如下：以重量比计：每百分预煮液中，氨基酸8份、微量元素2 份、还原糖2份，余量为水，其中，每百份氨基酸中，含5份谷氨酸、80份天门冬氨酸、5份丙 氨酸、10份精氨酸，每百份微量元素中，含68份铁、14. 3份锰、3. 4铜、14. 3份锌，每百份还 原糖中含有16. 67份果糖，66. 66份乳糖，16. 67份半乳糖；
[0052] (2)斜面种子培养：将褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌活化后，分别接种于含有A培 养基的斜面，同时将巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌经活化后，分别接种于含有B培养基 的斜面，各菌剂在40 °C，培养24h;其中所述的A培养基的制作方法为：将K2HP040 . 85g; KH2P040. 15g;MgS04 ? 7H20 0? 25g;CaC03 ? 2H20 0? 05g;Na2Mo? 2H20 0? 02g，酵母膏 0? 45g;甘 露醇25g;FeCl30.Olg，琼脂20g进行混合，其余为蒸馏水，配成1L培养液，调节培养液的pH 值为7. 0,之后在122°C下灭菌15min，即可；
[0053] 所述的B培养基的制作方法为：将蛋白胨8g、牛肉膏2. 5g、NaCl5. 5g、琼脂15g倒 入蒸馏水中进行混合，配成1L培养液，调节培养液的pH至7. 2,之后在115°C下灭菌20min， 即可。
[0054] (3)种子悬液制备：将培养好的斜面分别取出，然后每个斜面用5mL的无菌水洗 涤，制成菌悬液，接着各取lmL的褐球固氮菌悬液以及胶质芽孢杆菌悬液，分别接种于装 有350ml的C培养液的小摇瓶中，各取lmL的巨大芽孢杆菌悬液、苏云金芽孢杆菌悬液，分 别接种于装有350ml的D培养基的小摇瓶中，褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、 苏云金芽孢杆菌在小摇瓶中振荡培养24h，培养温度为40°C，即得种子悬液；所述的C培 养基的制作方法为：将K2HP040 . 85g;KH2P040. 15g;MgS04 ? 7H20 0? 25g;CaC03 ? 2H20 0? 05g; Na2Mo? 2H20 0. 02g，酵母膏0. 45g;甘露醇25g;FeCl30.Olg进行混合，其余为蒸馏水，配成 1L培养液，调节培养液的pH值为7. 0,之后在122°C下灭菌15min，即可；
[0055] 所述的D培养基的制作方法为：将蛋白胨8g、牛肉膏2. 5g、NaCl5. 5g倒入蒸馏水 中进行混合，配成1L培养液，调节培养液的pH至7. 2,之后在115°C下灭菌20min，即可。
[0056] (4)各菌剂的制备：将步骤（1)所得的预煮液进行浓缩，浓缩至可溶性固形物浓度 为2 %，然后将浓缩后的预煮液的pH调节至5. 0,经122°C，湿热灭菌lOmin，将步骤（3)中 得到的各种子悬液，分别接种于250ml三角瓶中，每个三角瓶中的预煮液为150ml，每个三 角瓶的接菌量为1 %，接种之后在40°C，持续培养24h，使活菌数为3~5亿个/mL;
[0057] (5)菌肥的制备：将经步骤⑴所得的预煮液经121°C，湿热灭菌20min，之后以重 量比计，将灭菌后的预煮液10份与步骤（4)所得的褐球固氮菌菌剂25份、胶质芽孢杆菌菌 剂10份、巨大芽孢杆菌菌剂25份、苏云金芽孢杆菌菌剂10份进行混合。
[0058] 实施例2 :-种复合生物菌肥的制作工艺，它包括以下步骤：
[0059] (1)预煮液的制备：
[0060]a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水；
[0061] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离心，取上清液；
[0062]c.将所得的上清液利用降膜蒸发器，降膜蒸发浓缩，浓缩至溶液折光率达到 40%，得浓缩液；
[0063] d.在浓缩液中添加变性剂，对浓缩液进行变性，其中所述的变性剂为85%的乙 醇，且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为4:1 ;
[0064]e.对变性后的浓缩液进行过滤除去经变性后所产生的沉淀，收集滤液；
[0065]f?将滤液进行旋转蒸发除去乙醇；
[0066]g.将旋转蒸发后所得的溶液利用8K的滤膜进行切向流过滤，收集滤出液，即可；
[0067] 所得的预煮液的成分如下：以重量比计：每百分预煮液中，氨基酸9份、微量元素3 份、还原糖4份，余量为水，其中，每百份氨基酸中，含20份谷氨酸、60份天门冬氨酸、12份 丙氨酸、8份精氨酸，每百份微量元素中，含76份铁、12份锰、4铜、8份锌，每百份还原糖中 含有40份果糖，20份乳糖，40份半乳糖；
[0068] (2)斜面种子培养：将褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌活化后，分别接种于含有A培 养基的斜面，同时将巨大芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌经活化后，分别接种于含有B培养基 的斜面，各菌剂在35 °C，培养36h;其中所述的A培养基的制作方法为：将K2HP040 . 80g; KH2P040. 18g;MgS04 ? 7H20 0? 20g;CaC03 ? 2H20 0? 08g;Na2Mo? 2H20 0? 015g，酵母膏 0? 48g; 甘露醇18g;FeCl30. 018g，琼脂18g进行混合，其余为蒸馏水，配成1L培养液，调节培养液的 pH值为7. 1，之后在118°C下灭菌18min，即可；
[0069] 所述的B培养基的制作方法为：将蛋白胨6g、牛肉膏3. 0g、NaCl5. 0g、琼脂17g倒 入蒸馏水中进行混合，配成1L培养液，调节培养液的pH至7. 1，之后在120°C下灭菌16min， 即可。
[0070] (3)种子悬液制备：将培养好的斜面分别取出，然后每个斜面用4mL的无菌水洗 涤，制成菌悬液，接着各取1. 5mL的褐球固氮菌悬液以及胶质芽孢杆菌悬液，分别接种于装 有300ml的C培养液的小摇瓶中，各取1. 5mL的巨大芽孢杆菌悬液、苏云金芽孢杆菌悬液， 分别接种于装有300ml的D培养基的小摇瓶中，褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、 苏云金芽孢杆菌在小摇瓶中振荡培养36h，培养温度为30°C，即得种子悬液；所述的C培 养基的制作方法为：将K2HP040 . 80g;KH2P040. 18g;MgS04 ? 7H20 0? 20g;CaC03 ? 2H20 0? 08g; Na2Mo? 2H20 0? 015g，酵母膏0? 48g;甘露醇18g;FeCl30. 018g进行混合，其余为蒸馏水，配 成1L培养液，调节培养液的pH值为7. 1，之后在118°C下灭菌18min，即可；
[0071] 所述的D培养基的制作方法为：将蛋白胨6g、牛肉膏3. 0g、NaCl5. 0g倒入蒸馏水 中进行混合，配成1L培养液，调节培养液的pH至7. 1，之后在120°C下灭菌16min，即可。
[0072] (4)各菌剂的制备：将步骤（1)所得的预煮液进行浓缩，浓缩至可溶性固形物浓度 为0. 5%，然后将浓缩后的预煮液的pH调节至6. 0,经121. 5°C，湿热灭菌15min，将步骤（3) 中得到的各种子悬液，分别接种于250ml三角瓶中，每个三角瓶中的预煮液为90ml，每个三 角瓶的接菌量为8%，接种之后在35. 7°C，持续培养72h，使活菌数为4. 5~5亿个/mL;
[0073] (5)菌肥的制备：将经步骤（1)所得的预煮液经121. 5°C，湿热灭菌15min，之后以 重量比计，将灭菌后的预煮液30份与步骤（4)所得的褐球固氮菌菌剂15份、胶质芽孢杆菌 菌剂15份、巨大芽孢杆菌菌剂15份、苏云金芽孢杆菌菌剂15份进行混合。
[0074] 实施例3 :-种复合生物菌肥的制作工艺，它包括以下步骤：
[0075] (1)预煮液的制备：
[0076]a.收集食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水；
[0077] b.将收集来的食用菌罐藏加工过程中所产生的工业废水进行离心，取上清液；
[0078]c.将所得的上清液利用降膜蒸发器，降膜蒸发浓缩，浓缩至溶液折光率达到 45%，得浓缩液；
[0079]d.在浓缩液中添加变性剂，对浓缩液进行变性，其中所述的变性剂为90 %的乙 醇，且所加入的乙醇与浓缩液的体积比为5:1 ;
[0080]e.对变性后的浓缩液进行过滤除去经变性后所产生的沉淀，收集滤液；
[0081]f.将滤液进行旋转蒸发除去乙醇；
[0082]g.将旋转蒸发后所得的溶液利用6K的滤膜进行切向流过滤，收集滤出液，即可；
[0083] 所得的预煮液的成分如下：以重量比计：每百分预煮液中，氨基酸9. 5份、微量元 素5份、还原糖5份，余量为水，其中，每百份氨基酸中，含18份谷氨酸、64份天门冬氨酸、10 份丙氨酸、8份精氨酸，每百份微量元素中，含75份铁、8份锰、5铜、12份锌，每百份还原糖 中含有20份果糖，60份乳糖，20份半乳糖。
[0084](2)斜面种子培养：将褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌活化后