酶活力的葡萄糖标准 曲线图；图7为不同底物诱导下对JN2菌株的纤维素酶活检测结果图；图8为不同发酵温度对 JN2菌株的纤维素酶活检测结果图。
【具体实施方式】
[0014]以下结合实施例对本发明做进一步阐述，但并不用来限定本发明。
[0015]实施例1: 一种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法，将畜禽粪和食用菌栽培后 的菌渣混合，用解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens)JN2、沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudanonaspalustris)和黑曲霉（Aspergillusnige)发酵食用菌栽培后的菌 渣和畜禽粪的混合物，即为草莓专用抗重茬生物有机肥，具体制备方法如下： (1) 基质混合:将食用菌栽培后的菌渣与牛粪按重量比1:1混合均匀，调整C/N比值为 20，pH值调至中性，水分调节至55%; (2) 菌剂的制备： A.解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens) JN2菌液的制备:4°C保存的解淀粉 芽孢杆菌JN2接种于羧甲基纤维素钠液体培养基上37°C，lOOrprn摇床培养过夜，制备成种子 液； 将种子液按体积比1%的接种量接种于发酵罐中灭菌的羧甲基纤维素钠液体培养基中， 罐内压保持0. 〇2MPa，温度37°C，溶解氧2.Omg/L，转速150r/min，发酵培养两天，得到JN2发 酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; B. 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)菌液的制备:GH培养基装满整支 试管，将沼泽红假单胞菌菌种无菌条件接种于GH培养基中，温度30°C，光照强度5000LX静置 厌氧培养，至菌液变为深红色即得种子液； 将沼泽红假单胞菌扩大培养，培养基和培养条件与制备种子液的方法相同；当菌液颜 色变成深红色时，得到沼泽红假单胞菌发酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; C. 黑曲霉（Aspergillusnige)菌剂的制备：黑曲霉菌种接种于常规FOA固体培养基 平板上，28°C温度倒置黑暗培养，待长出新鲜菌丝后，挑菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养 基中，28°C，1OOrpm摇床培养，待培养基中长出大量菌丝团后，即获得黑曲霉种子液； 将小麦麸皮洒水拌匀，制成含水率55%的麸皮培养基，110-120°C高压灭菌后冷却，按每 千克麸皮培养基接入150mL菌液的比例接入黑曲霉种子液，搅拌均匀，28°C静置培养至大量 孢子产生时停止培养，将培养物置于30°C烘箱内烘干后即得黑曲霉菌粉； (3)接种微生物发酵:按每平方米混合肥料中接入10kg的比例向混合肥料中加入黑曲 霉菌粉，拌匀后堆置发酵，当温度低于50°C时翻堆后继续发酵，发酵时间为30天;发酵完成 后，按每平方混合肥料中接入10L的比例分别加入解淀粉芽孢杆菌菌液和沼泽红假单胞菌 菌液，调整pH值为6,水分含量为55%，搅拌均匀后，摊成15cm的薄层进行第二次发酵，控制温 度为25°C，发酵10天后，将其搅拌均匀风干至含水率<15%，即得到草莓专用抗重茬生物有 机肥。
[0016] 所述羧甲基纤维素钠培养基配方为:羧甲基纤维素钠15g/L，酵母粉lg/L，磷酸二 氢钾lg/L，硝酸铵lg/L，硫酸镁0.5g/L;所述GH培养基配方为:磷酸二氢钾lg/L，乙酸钠lg/ L，硫酸镁0.5g/L，硫酸铵lg/L，氯化钠lg/L，氯化妈0.lg/L，琥?自酸钠lg/L，酵母粉0.5g/L， 蛋白胨〇.58/1，？!1值6.2。
[0017] 所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)JN2在中国微生物菌种保藏 管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为:CGMCCNo:10677，保藏日期为:2015年4月1 日，保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码 为100101。所制备的草莓专用抗重茬生物有机肥总有效活菌数含量2 4X108CFU/mL。
[0018] 实施例2: -种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法，将畜禽粪和食用菌栽培后 的菌渣混合，用解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens)JN2、沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudanonaspalustris)和黑曲霉（Aspergillusnige)发酵食用菌栽培后的菌 渣和畜禽粪的混合物，即为草莓专用抗重茬生物有机肥，具体制备方法如下： (1) 基质混合:将食用菌栽培后的菌渣与牛粪按重量比1:1混合均匀，调整C/N比值为 25，pH值调至中性，水分调节至60%; (2) 菌剂的制备： A.解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)JN2菌液的制备:4°C保存的解淀粉 芽孢杆菌JN2接种于羧甲基纤维素钠液体培养基上37°C，120rpm摇床培养过夜，制备成种子 液； 将种子液按体积比3%的接种量接种于发酵罐中灭菌的羧甲基纤维素钠液体培养基中， 罐内压保持ο. 〇3MPa，温度37°C，溶解氧1.6mg/L，转速150r/min，发酵培养两天，得到JN2发 酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; B. 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)菌液的制备:GH培养基装满整支 试管，将沼泽红假单胞菌菌种无菌条件接种于GH培养基中，温度30°C，光照强度5000LX静置 厌氧培养，至菌液变为深红色即得种子液； 将沼泽红假单胞菌扩大培养，培养基和培养条件与制备种子液的方法相同；当菌液颜 色变成深红色时，得到沼泽红假单胞菌发酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; C. 黑曲霉（Aspergillusnige)菌剂的制备：黑曲霉菌种接种于常规FOA固体培养基 平板上，28°C温度倒置黑暗培养，待长出新鲜菌丝后，挑菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养 基中，28°C，120rpm摇床培养，待培养基中长出大量菌丝团后，即获得黑曲霉种子液； 将小麦麸皮洒水拌匀，制成含水率60%的麸皮培养基，110_120°C高压灭菌后冷却，按每 千克麸皮培养基接入150mL菌液的比例接入黑曲霉种子液，搅拌均匀，28°C静置培养至大量 孢子产生时停止培养，将培养物置于30°C烘箱内烘干后即得黑曲霉菌粉； (3)接种微生物发酵:按每平方米混合肥料中接入10kg的比例向混合肥料中加入黑曲 霉菌粉，拌匀后堆置发酵，当温度低于50°C时翻堆后继续发酵，发酵时间为40天;发酵完成 后，按每平方混合肥料中接入10L的比例分别加入解淀粉芽孢杆菌菌液和沼泽红假单胞菌 菌液，调整pH值为7，水分含量为60%，搅拌均匀后，摊成20cm的薄层进行第二次发酵，控制温 度为28°C，发酵8天后，将其搅拌均匀风干至含水率<15%，即得到草莓专用抗重茬生物有机 肥。
[0019]其他方法同实施例1所述方法。
[0020] 实施例3: -种草莓专用抗重茬生物有机肥的制备方法，将畜禽粪和食用菌栽培后 的菌渣混合，用解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens)JN2、沼泽红假单胞菌 (Rhodopseudanonaspalustris)和黑曲霉（Aspergillusnige)发酵食用菌栽培后的菌 渣和畜禽粪的混合物，即为草莓专用抗重茬生物有机肥，具体制备方法如下： (1) 基质混合:将食用菌栽培后的菌渣与牛粪按1:1重量比混合均匀，调整C/N比值为 30，pH值调至中性，水分调节至65%; (2) 菌剂的制备： A. 解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)JN2菌液的制备:4°C保存的解淀粉 芽孢杆菌JN2接种于羧甲基纤维素钠液体培养基上37°C，150rpm摇床培养过夜，制备成种子 液； 将种子液按体积比5%的接种量接种于发酵罐中灭菌的羧甲基纤维素钠液体培养基中， 罐内压保持〇. 〇4MPa，温度37°C，溶解氧1.6mg/L，转速150r/min，发酵培养两天，得到JN2发 酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; B. 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonaspalustris)菌液的制备:GH培养基装满整支 试管，将沼泽红假单胞菌菌种无菌条件接种于GH培养基中，温度30°C，光照强度5000LX静置 厌氧培养，至菌液变为深红色即得种子液； 将沼泽红假单胞菌扩大培养，培养基和培养条件与制备种子液的方法相同；当菌液颜 色变成深红色时，得到沼泽红假单胞菌发酵液，检测发酵液中有效活菌数为4X108cfu/mL; C. 黑曲霉（Aspergillusnige)菌剂的制备：黑曲霉菌种接种于常规FOA固体培养基 平板上，28°C温度倒置黑暗培养，待长出新鲜菌丝后，挑菌丝接种于马铃薯葡萄糖液体培养 基中，28°C，150rpm摇床培养，待培养基中长出大量菌丝团后，即获得黑曲霉种子液； 将小麦麸皮洒水拌匀，制成含水率65%的麸皮培养基，110-120°C高压灭菌后冷却，按每 千克麸皮培养基接入150mL菌液的比例接入黑曲霉种子液，搅拌均匀，28°C静置培养至大量 孢子产生时停止培