专利名称：N-(1-烷基-2-苯基乙基)-甲酰胺衍生物和其作为杀真菌剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及防治或预防致植物病微生物侵染有用植物的方法，其中式I化合物作为活性成分被施用至植物、至其部分或其所在地。本发明式I化合物的特征在于低施用率下有优异活性、被植物良好耐受和对环境安全。它们具有非常有用的治疗、预防和内吸性质，并被用于保护大量有用植物。式I化合物可以被用于抑制或消灭在有用植物的不同作物的植物或植物部分(果实、花卉、叶、茎、块茎、根)上发生的病害，同时还保护以后生长的那些植物部分例如对抗致植物病微生物。
还可以将式I化合物用作拌种试剂来处理植物繁殖材料，特别是种子(果实、块茎、小硬粒)和植物插条(例如稻)，以保护对抗真菌侵染以及对抗土壤中存在的致植物病真菌。
此外，本发明的式I化合物可以用于在相关领域防治真菌，例如在包括木材和木材相关工业产品的工业材料的保护中，在食物储存中或在卫生管理中。
式I化合物是，例如，对抗下述纲的致植物病真菌有效的半知菌类(Fungi imperfecti)(例如葡萄孢属(Botrytis)、梨孢属(Pyricularia)、长蠕孢属(Helminthosporium)、镰孢属(Fusarium)、壳针孢属(Septoria)、尾孢属(Cercospora)和链格孢属(Alternaria))和担子菌纲(Basidiomycetes)(例如丝核菌属(Rhizoctonia)、驼孢锈菌属(Hemileia)、柄锈菌属(Puccinia))。另外，它们还是对抗子囊菌纲(Ascomycetes classes)(例如黑星菌属(Venturia)和白粉菌属(Erysiphe)、叉丝单囊壳属(Podosphaera)、链核盘菌属(Monilinia)、钩丝壳属(Uncinula))和其它卵菌纲(Oomycetes classes)(例如疫霉属(Phytophthora)、腐霉属(Pythium)、单轴霉属(Plasmopara))有效的。已经观察到对葡萄钩丝壳(Uncinula necator)具有突出的活性。此外，所述新型式I化合物有效对抗致植物病细菌和病毒(例如对抗Xanthomonas spp、Pseudomonas spp、Erwinia amylovora以及烟草花叶病毒)。观察到对抗亚洲大豆锈病(Asian soybean rust)(豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi))的良好活性。
在本发明范围内，要保护的有用植物通常包含下述植物种谷物(小麦、大麦、黑麦、燕麦、稻、玉米、高梁和相关种)；甜菜(糖用甜菜和饲料甜菜)；梨果、核果和浆果(苹果、梨、李、桃、扁桃、樱桃、草莓、覆盆子和欧洲黑莓)；豆科植物(菜豆、小扁豆、豌豆、大豆)；油用植物(油菜、芥末、罂粟、橄榄、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可豆、落花生)；黄瓜植物(南瓜、黄瓜、甜瓜)；纤维植物(棉花、亚麻、大麻、黄麻)；柑橘类水果(橙、柠檬、葡萄柚、柑)；蔬菜(菠菜、莴苣、芦笋、卷心菜、胡萝卜、蒜、西红柿、马铃薯、辣椒)；樟科(鳄梨、肉桂、樟脑)或植物如烟草、坚果、咖啡、茄子、甘蔗、茶、胡椒、葡萄、啤酒花、香蕉和天然橡胶植物，以及观赏植物。
术语“有用植物”应理解为还包括由于常规育种方法或基因工程方法使其耐受除草剂如溴苯腈或多类除草剂(比如，例如，HPPD抑制剂，ALS抑制剂，例如氟嘧磺隆、氟磺隆和三氟啶磺隆，EPSPS(5-烯醇-丙酮酰-莽草酸-3-磷酸-合成酶)抑制剂，GS(谷氨酰胺合成酶)抑制剂或PPO(原卟啉原氧化酶)抑制剂)的有用植物。已通过常规育种方法(诱变)使其耐受咪唑啉酮类如甲氧咪草烟的作物的实例是
夏季油菜(芸苔(Canola))。通过基因工程方法使之耐除草剂或除草剂类的作物的实例包括抗草甘膦和抗草铵膦的玉米，该品种可根据商品名
和
购得。
术语“有用植物”应理解为还包括已通过使用重组DNA技术转化使其能合成一种或多种选择性作用毒素的有用植物，所述毒素如已知来自于毒素产生细菌，特别是芽孢杆菌属的那些细菌。
术语“有用植物”应理解为还包括已通过使用重组DNA技术转化使其能合成选择性作用抗病原物质，比如，例如所谓的“致病相关蛋白”(PRPs，见例如EP-A-0 392 225)的有用植物。所述抗病原物质和能合成所述抗病原物质的转基因植物的实例已知于例如EP-A-0 392225、WO 95/33818和EP-A-0 353 191。所述转基因植物的制造方法是本领域技术人员通常已知的，并且描述于例如上述出版物中。
文中使用的术语有用植物的“所在地”意在涵盖有用植物生长的地点、有用植物的植物繁殖材料播种的地点或有用植物的植物繁殖材料放入土壤中的地点。这种所在地的实施例是作物植物生长的大田。
术语植物“繁殖材料”应理解为表示植物的生殖部分，比如可以用于后者繁殖的种子，以及植物材料，比如插条或块茎，例如马铃薯。可以提及例如种子(严格意义的)、根、果实、块茎、鳞茎、根茎和植物部分。还可提及，发芽后或从土壤中出苗后要移植的发芽植物和幼苗。在移植前通过整体或部分浸渍处理可以保护这些幼苗。优选地“植物繁殖材料”应理解为表示种子。
式I化合物可以以未修饰的形式使用或优选与制剂领域惯用的载体和助剂一起使用。
所以本发明还涉及防治或保护对抗致植物病微生物的组合物，包含式I化合物和惰性载体，以及防治或预防有用植物被致植物病微生物侵染的方法，其中将包含式I化合物作为活性成分和惰性载体的组合物施用至植物、至其部分或其所在地。
为此，式I化合物和惰性载体以已知方式方便地制剂为乳油、可包衣糊剂、直接可喷雾或可稀释溶液剂、稀释乳剂、可湿性粉剂、可溶性粉剂、粉剂、颗粒剂以及例如在聚合物质中胶囊化。与组合物的类型类似，如喷雾、雾化、喷粉、撒播、被覆或浇注的施用方法是根据目标对象和主要环境选择的。该组合物还可以包含其它助剂比如稳定剂、消泡剂、粘度调节剂、粘合剂或增粘剂以及肥料、微量营养素供体或其它用来获得特殊效果的制剂。
适宜的载体和助剂可以是固体或液体并且是制剂技术中有用的物质，例如天然或再生矿物质、溶剂、分散剂、湿润剂、增粘剂、增稠剂、粘合剂或肥料。这些载体例如描述于WO 97/33890。
式I化合物或组合物，包含式I化合物作为活性成分和惰性载体，可与其它化合物同时或先后被施用至植物的所在地或要处理的植物。这些其它化合物可以是例如肥料或微量营养素供体或其它影响植物生长的制剂。它们还可以是选择性的除草剂和杀虫剂、杀真菌剂、杀细菌剂、杀线虫剂、杀软体动物剂或几种这些制剂的混合物，如果需要与制剂领域惯用的其它载体、表面活性剂或施用促进助剂一起。
施用式I化合物或组合物的优选方法是叶面施用，所述组合物包含作为活性成分的式I化合物和惰性载体。施用频率和施用率将取决于被相应病原菌侵染的风险。然而，通过用液体制剂浸透植物所在地或将该化合物以如颗粒形式的固体形式施用至土壤(土壤施用)，式I化合物可以经由土壤通过根穿透植物(内吸作用)。在水稻作物中，这种颗粒剂可以被施用至淹灌的稻田。也可以通过用杀真菌剂液体制剂浸渍种子或块茎或用固体制剂将它们包衣，将式I化合物施用至种子(包衣)。
制剂，即包含式I化合物和根据需要的固体或液体助剂的组合物，是以已知方式制备的，通常通过将该化合物与增容剂紧密混合和/或磨粉，所述增容剂如溶剂、固体载体和可选的表面活性化合物(表面活性剂)。
农业化学制剂通常包括0.1到99％重量、优选0.1到95％重量的式I化合物，99.9到1％重量、优选99.8到5％重量的固体或液体助剂，以及0到25％重量、优选0.1到25％重量的表面活性剂。
尽管优选将商业产品制剂为浓缩物，终端用户一般使用稀释制剂。
有利的施用率通常是5g到2kg的活性成分(a.i.)每公顷(ha)，优选10g到1kg a.i./ha，最优选20g到600g a.i./ha。当用作种子处理试剂时，适宜的施用率是10mg到1g活性成分每kg种子。希望作用的施用率可以通过实验确定。其取决于例如作用类型、有用植物的发育阶段和施用(地点、时间、施用方法)，并且因为这些参数施用率在宽范围内变化。
令人惊讶地，目前发现式I化合物还可以用于保护有用植物作物对抗致植物病生物以及处理被致植物病生物侵染的有用植物作物的方法，包含将草甘膦与至少一种式I化合物的组合施用至植物或其所在地，其中该植物是对草甘膦有抗性的或敏感的。
与在草甘膦不存在时使用式I化合物相比，所述方法可以提供不可预期的改善的病害防治。所述方法可以有效增强式I化合物对病害的防治。草甘膦与至少一种式I化合物的混合物可以增大由式I化合物至少部分地防治的病害谱，而式I化合物对已知被式I化合物某种程度地防治的病害种类的活性增加也可以是观察到的效果。
所述方法特别有效地对抗真菌界(Fungi)、担子菌门(Basidiomycot)、锈菌纲(Uredinomycetes)、锈菌亚纲(Urediniomycetidae)和锈菌目(Uredinales)(通常称为锈菌)的致植物病生物。农业上具有特别大范围影响的锈菌种包括层锈菌科(Phakopsoraceae)的那些，特别是层锈菌属(Phakopsora)的那些，例如豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)，其也称为亚洲大豆锈病，和柄锈科(Pucciniaceae)的那些，特别是柄锈菌属(Puccinia)的那些，如禾柄锈菌(Puccinia graminis)，也称为杆锈病或者黑锈病，其在谷物作物中是问题病害以及剪股颖隐匿柄锈菌(Puccinia recondita)，也称为褐锈病。
所述方法的一个实施方式是保护有用植物作物对抗致植物病生物和/或处理被致植物病生物侵染的有用植物作物的方法，所述方法包含将草甘膦，包括其盐或酯，和至少一种式I化合物同时施用，所述式I化合物具有对抗选自植物、植物部分和植物所在地的至少一个成员的致植物病生物的活性。
令人惊讶地，目前发现上述式I化合物或其药物盐还具有在动物中治疗和/或预防微生物感染的有利活性谱。
“动物”可以是任何动物，例如，昆虫、哺乳动物、爬行动物、鱼、两栖动物，优选哺乳动物，最优选人。“治疗”是指在被微生物感染的动物上的用途，目的是减少或减慢或停止感染的增加或散布，或减少感染或者治愈感染。“预防”是指在没有明显微生物感染迹象的动物上的用途，目的是预防任何可能的感染，或者减少或减慢任何可能感染的增加或散布。
按照本发明，提供式I化合物在制药中的用途，所述药物用于在动物中治疗和/或预防微生物感染。还提供式I化合物作为药物试剂的用途。还提供式I化合物在动物治疗中作为抗微生物剂的用途。按照本发明还提供包含式I化合物或其可药用的盐作为活性成分和可药用的稀释剂或载体的药物组合物。该组合物可以用于在动物中治疗和/或预防抗微生物感染。该药物组合物可以是适宜用于口服给药的形式，比如片剂、锭剂、硬胶囊剂、水悬浮剂、油悬浮剂、乳剂可分散粉剂、可分散颗粒剂、糖浆剂和酏剂。可选地，该药物组合物可以是适宜用于局部施用的形式，比如喷雾剂、霜剂或洗剂。可选地，该药物组合物可以是适宜用于肠胃外施用的形式，例如注射剂。可选地，该药物组合物可以是可吸入形式，例如气雾喷雾剂。
式I化合物有效对抗各种能在动物中导致微生物感染的微生物种。这些微生物种的实例是引起曲霉病(Aspergillosis)的那些，比如烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、黄曲霉(A.flavus)、土曲霉(A.terrus)、构巢曲霉(A.nidulans)和黑曲霉(A.niger)；引起芽生菌病(Blastomycosis)的那些，比如皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)；引起念珠菌病(Candidiasis)的那些，比如白假丝酵母(Candida albicans)、C.glabrata、热带假丝酵母(C.tropicalis)、近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)、克鲁斯假丝酵母(C.krusei)和葡萄牙假丝酵母(C.lusitaniae)；引起球孢子菌病(Coccidioidomycosis)的那些，比如粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)；引起隐球菌病(Cryptococcosis)的那些，比如新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)；引起组织胞浆菌病(Histoplasmosis)的那些，比如荚膜组织孢浆菌(Histoplasma capsulatum)以及引起接合菌病(Zygomycosis)的那些，比如伞枝犁头霉(Absidiacorymbifera)、微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)和少根根霉(Rhizopus arrhizus)。其它实例是镰孢属(Fusarium Spp)，比如尖镰孢(Fusarium oxysporum)和腐皮镰孢(Fusarium solani)和赛多孢属(Scedosporium Spp)，比如尖端赛多孢(Scedosporium apiospermum)和多育赛多孢(Scedosporium prolificans)。其它实施例是小孢霉属(Microsporum Spp)、发癣菌属(Trichophyton Spp)、表皮癣菌属(Epidermophyton Spp)、毛霉属(Mucor Spp)、孢子丝菌属(Sporothorix Spp)、瓶霉属(Phialophora Spp)、枝孢属(Cladosporium Spp)、Petriellidium spp、副球孢子菌属(Paracoccidioides Spp)和组织孢浆菌属(Histoplasma Spp)。
下述非限制性实施例以更多的细节举例说明上述发明，而不是对其限制。
制备实施例 实施例P1制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(4-氯苯基)-乙基]-酰胺(化合物编号1.001)
在0℃下，向2-(4-氯苯基)-乙胺(0.39g，2.5mmol)和三乙胺(0.50g，5.0mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(0.49g，2.5mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液，搅拌一小时。加入二氯甲烷(40ml)和水(20ml)，分层。用二氯甲烷(20ml)萃取水层。用1N NaOH(15ml)、1N HCl(15ml)、(10％氯化钠溶液(15ml)洗涤合并的有机层，在Na2SO4上干燥，在真空下浓缩，通过硅胶上的快速色谱法(用1:1的己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化提供的粗物质，提供0.71g(理论的90％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(4-氯苯基)-乙基]-酰胺(化合物编号1.001)，是无色油状物形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 2.86(t，2H，CH2)，3.64(q，2H，CH2)，3.84(s，3H，NCH3)，6.40(t，1H，NH)，6.79(t，1H，CHF2，J＝54Hz)，7.14(d，2H，Ar-H)，7.23(d，2H，Ar-H)，7.85(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+314/316。
实施例P2制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.197)
将3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(1.95g；10mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液滴加到搅拌的2.04g(10mmol)2-(2，4-二氯-苯基)-1-甲基-乙胺(化合物Z1.197)，其按照实施例P9中的描述制备，和三乙胺(0.152g；15mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中。在环境温度搅拌该反应混合物1小时，随后放置3h。用1M NaOH(20ml)和用1M HCl(20ml)洗涤反应混合物，接着在Na2SO4上干燥。除去溶剂后，通过硅胶上的快速色谱法(用1:1的己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化残余物。得到2.21g(理论的61％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.197)，是固体形式(m.p.157℃)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.24(d，3H，CH3)，2.95(m，2H，CH2)，3.90(s，3H，NCH3)，4.46(m，1H，CH)，6.21(t，1H，NH)，6.80(t，1H，CHF2)，7.14-7.19(m，2H，Ar-H)，7.37(d，1H，Ar-H)，7.84(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+362/364/366。
实施例P3制备3-二氟甲基-1-甲基-2H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-乙基]-酰胺(化合物编号1.206)
将3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(0.148g；0.758mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液滴加到搅拌的0.150g(0.721mmol)2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-丙胺盐酸盐(化合物Z1.206)，其按照实施例P10中的描述制备，和三乙胺(301μl；2.16mmol)的二氯甲烷(12ml)溶液中。在环境温度下搅拌反应混合物2小时，然后用1M NaOH(10ml)、1M HCl(10ml)、水(10ml)洗涤，在Na2SO4上干燥。得到190mg(理论的72％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-乙基]-酰胺(化合物编号1.206)，是树脂形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 3.62-3.75和3.92-4.15(m，2H，CH2)，3.87(s，3H，NCH3)，5.86-5.89和5.98-6.01(m，1H，CH)，6.67(t，1H，NH)，6.82(t，1H，CHF2)，7.29(d，1H，Ar-H)，7.37(d，1H，Ar-H)，7.41(d，1H，Ar-H)，7.91(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+366/368/370。
实施例P4制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.216)
将3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(0.098g；0.50mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液滴加到搅拌的0.129g(0.50mmol)2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物Z1.216)，其按照实施例P11中的描述制备，和三乙胺(0.202；2.0mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液中。在环境温度下搅拌反应混合物2小时。
除去溶剂后，通过硅胶上的快速色谱法(用1:1的环己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化残余物。得到0.15g(理论的78.9％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.216)，是树脂形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.43(d，3H，CH3)，3.87(s，3H，NCH3)，4.69-4.80(m，1H，CH)，5.73和5.84(d，1H，CH)，6.51(t，1H，NH)，6.79(t，1H，CHF2)，7.19(d，1H，Ar-H)，7.35-7.37(m，2H，Ar-H)，7.79(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+380/382/384。
实施例P5制备3-二氟甲基-1-甲基-2H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-丙基]-酰胺(化合物编号1.221)
将3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(0.158g；0.813mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液滴加到搅拌的0.2g(0.774mmol)2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-丙胺盐酸盐(化合物Z1.221)，其按照实施例P12中的描述制备，和三乙胺(323μl；2.32mmol)的二氯甲烷(12ml)溶液中。在环境温度下搅拌反应混合物3小时，然后用1M NaOH(10ml)、1M HCl(10ml)、水(10ml)洗涤，在Na2SO4上干燥。得到190mg(理论的65％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-丙基]-酰胺(化合物编号1.221)，是树脂形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.77和1.87(s，3H，CH3)，3.95(s，3H，NCH3)，4.12-4.14和4.20-4.22(q，2H，CH2)，6.52(t，1H，NH)，6.73(t，1H，CHF2)，7.28(m，1H，Ar-H)，7.39(d，1H，Ar-H)，7.40(d，1H，Ar-H)，7.86(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+380/382/384。
实施例P6制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[1-(2，4-二氯苄基)-环丙基]-酰胺(化合物编号1.231)
将3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-碳酰氯(0.190g；0.98mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液滴加到搅拌的0.2g(0.93mmol)1-(2，4-二氯-苄基)-环丙胺(化合物Z1.231)，其按照实施例P13中的描述制备，和三乙胺(0.22ml；1.50mmol)的二氯甲烷(7ml)溶液中。在环境温度下搅拌反应混合物2小时，然后用1M NaOH(5ml)、1M HCl(5ml)、盐水(10ml)洗涤，在Na2SO4上干燥。然后通过硅胶上的快速色谱法(用1:1的己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化粗物质。得到145mg(理论的40％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[1-(2，4-二氯苄基)-环丙基]-酰胺(化合物编号1.231)，是树脂形式(m.p.165-168℃)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 0.88-0.99(m，4H，2xCH2)，3.18(s，3H，CH3)，3.86(s，3H，NCH3)，6.45(t，1H，NH)，6.76(t，1H，CHF2)，7.13(m，1H，Ar-H)，7.22(d，1H，Ar-H)，7.40(d，1H，Ar-H)，7.86(s，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+374/376/378。
实施例P7制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(4-溴-2-氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.451)
在氮气氛下将2-(4-溴-2-氯-苯基)-1-甲基-乙胺(化合物Z1.451)，其按照实施例P14中的描述制备(3.36g，13mmol)，3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(2.16g，12mmol)和10ml吡啶冷却至0℃。缓慢加入三氯氧化磷(2.08g，13mmol)。在80℃下搅拌混合物12h，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。用1.5N HCl、10％NaOH、水和盐水洗涤乙酸乙酯相，在硫酸钠上干燥。除去溶剂后，用己烷洗涤残余物。得到3.25g(理论的59％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(4-溴-2-氯-苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.451)，是浅褐色固体形式(纯度97％)。
1HNMR-(400MHz，CDC13)1.25δ(d，3H)，2.95δ(ddd，2H，CH2)，3.9δ(s，3H，NCH3)，4.45δ(m，1H，CHN)，6.2δ(s，1H，NH)，6.79δ(t，1H，CHF2)，7.2δ(d，1H)，7.3δ(d，1H)，7.5δ(s，1H)，7.84δ(S，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+406/408/4108 实施例P8制备3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(3，4′-二氯联苯基-4-基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.462)
在氮气氛下，将无水碳酸钾(0.25g，0.02mmol)和乙酸钯(0.007g，0.031mmol)加入按照实施例P7中的描述制备的(0.25g，0.62mmol)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(4-溴-2-氯-苯基)-1-甲基-乙基]酰胺(化合物Z1.451)的20ml乙醇/水(乙醇/水＝3:1)溶液。加入4-氯苯硼酸(0.105g，0.677mmol)。搅拌反应混合物16h。用HPLC监测反应。反应完成时，在C盐床上过滤反应混合物。浓缩滤液，然后使用二氧化硅柱(60-120μ目)通过色谱法用己烷乙酸乙酯(25％)洗脱纯化。得到163mg(理论的60％)3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(3，4′-二氯联苯基-4-基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.462)，是固体形式(m.p.96-98℃，纯度93％)。
1HNMR-(400MHz，CDCl3)1.25δ(d，3H)，2.96δ(ddd，2H，CH2)，3.83δ(s，3H，NCH3)，4.4δ(m，1H，CHN)，6.1δ(s，1H，NH)，6.75δ(t，1H，CHF2)，7.05-7.49δ(m，7H-Ar)，7.8δ(S，1H，吡唑-H)。
MS[M+H]+438/440 实施例P9制备2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.197) a)制备2，4-二氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯
在磺化烧瓶中将2，4-二氯-苯甲醛(77g，0.44mol)、硝基乙烷(216ml，3.04mol)和乙酸铵(81.4g，1.06mol)加入冰乙酸(600ml)。将所得溶液加热至90℃三小时。除去溶剂后，加入冰-水(400ml)。通过过滤收集固体产物，用水洗涤，从乙醇中重结晶。得到55.9g(理论的55％)2，4-二氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯，是黄色固体行形式(m.p.79-81℃)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 8.11(s，1H)，7.51(d，1H)，7.34(dd，1H)，7.27(d，1H)，2.33(s，3H，CH3)。
b)制备2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.197)
在氮气氛下、在冰浴冷却下，向搅拌中的氢化锂铝(3当量，30mmol，1.14g)的无水四氢呋喃(30ml)的悬浮液中滴加2，4-二氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯(10mmol，2.32g)的无水THF(20ml)溶液。搅拌10分钟后，将该悬浮液加热至回流1小时，然后将混合物冷却至0℃，随后在搅拌下按顺序滴加水(40ml)、叔丁基甲基醚(20ml)、20％NaOH(20ml)和水(40ml)分解过量的氢化锂铝。通过过滤收集反应产物，用MTBE洗涤。用盐水洗涤滤液，在MgSO4上干燥，过滤，减压干燥。得到2.0g(理论的98％)2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙胺(化合物Z1.197)，是褐色油状物形式。
MS[M+H]+204/206/208。
不再纯化，将2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙胺用于实施例P2。
实施例P10制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.206) a)制备(2，4-二氯-苯基)-氟-乙腈
在氮气氛下、在冷却至5℃下，向搅拌中的ZnI2(160mg，0.5mmol)、2，4-二氯-苯甲醛(40g，228mmol)和二氯甲烷(15ml)的溶液中滴加三甲基硅氰化物(29ml，228mmol)。在环境温度下搅拌反应混合物20分钟。用无水二氯甲烷(250ml)稀释反应混合物，冷却至5℃，滴加DAST(33ml，250mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液。在环境温度下搅拌反应混合物30分钟，然后加入冰水(700ml)。加入二氯甲烷(250ml)，萃取有机层。按顺序用水(250ml)、0.5N HCl(200ml)、饱和NaHCO3(200ml)和水(200ml)洗涤有机层。在NaSO4上干燥有机层，过滤，浓缩。然后通过硅胶上的快速色谱法(用9:1的己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化浓缩的液体。得到38.9g(理论的35.4％)(2，4-二氯-苯基)-氟-乙腈，是液体形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.64(d，1H)，7.49(d，1H)，7.41(dd，1H)，6.37(d，1H，J＝44Hz)。
b)制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.206)
将无水四氢呋喃(10ml)中的(2，4-二氯苯基)-氟-乙腈(1.0g，4.9mmol)冷却至0℃。滴加1M硼烷-THF(19.6ml，19.6mmol)，在0℃下搅拌反应混合物1小时。滴加该乙醇(25ml)后，然后用乙醇HCl酸化反应混合物，在真空下浓缩。用醚研制残余物。得到2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-乙胺盐酸盐，是白色固体形式。
MS[M+H]+208/210/212。
实施例P11制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.216) a)制备1-(2，4-二氯苯基)-2-硝基-丙-1-醇
向搅拌中的硝基乙烷(8.3g，0.11mol)的乙腈(150ml)溶液中加入无水磷酸钾(1.0g，4.6mmol)，接着加入2，4-二氯-苯甲醛(17.5g，0.10mol)。搅拌反应混合物4小时。加水(300ml)，用二乙基醚(200ml)萃取反应混合物。用水洗涤有机萃取物，在无水Na2SO4上干燥，除去溶剂，通过硅胶上的快速色谱法(用9:1的环己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化所得残余物。得到20.7g(理论的82.5％)1-(2，4-二氯-苯基)-2-硝基-丙-1-醇的苏式/赤式-混合物。从环己烷中结晶，产生纯赤式1-(2，4-二氯苯基)-2-硝基-丙-1-醇。
(赤式-形式)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 1.43(d，3H，CH3)，2.92(d，1H，OH)，4.84(m，1H，CH)，5.79(t，1H，CH)，7.34(d，1H，Ar-H)，7.40(d，1H，Ar-H)，7.59(d，1H，Ar-H)。
b)制备2，4-二氯-1-(1-氟-2-硝基-丙基)-苯
在氮气氛下、冷却至5℃下，向搅拌中的赤式1-(2，4-二氯苯基)-2-硝基-丙-1-醇(2.5g，10.0mmol)的无水二氯甲烷(20ml)混合物中滴加二氯甲烷(5ml)中的DAST(1.3ml，10.0mmol)。在环境温度下搅拌该溶液1小时。加入二氯甲烷(80ml)，按顺序用饱和NaHCO3(50ml)、1M HCl(30ml)和盐水(so1e)(30ml)洗涤有机层。在NaSO4上干燥有机层，过滤，浓缩。得到2.5g2，4-二氯-1-(1-氟-2-硝基-丙基)-苯，是褐色油状物形式。
c)制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.216)
不再纯化，将按照上述描述制备的2，4-二氯-1-(1氟-2-硝基-丙基)-苯(0.67g，2.64mmol)溶于异丙醇(52ml)中。加入1M HCl(26.4ml，26.4mmol)。分小批加入锌(3.46g，52.8mmol)，在环境温度下搅拌该悬浮液2小时。加入饱和NaHCO3溶液(80ml)，搅拌混合物15分钟，然后通过C盐小塞子过滤，用乙酸乙酯洗涤。在NaSO4上干燥有机层，过滤，减压浓缩，滴加二乙基醚，然后滴加乙醇HCl(0.1ml)。然后减压浓缩混合物。用醚研制残余物，产生所需盐酸盐，是白色固体形式。得到0.175g(理论的25.6％)赤式2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-1-甲基-乙胺盐酸盐(化合物编号Z1.216)，是白色固体形式。
MS[M+H]+222/224/226。
实施例P12制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-丙胺盐酸盐(化合物编号Z1.221) a)制备2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-丙腈
在氮气氛下、在5℃下，向搅拌中的ZnI2(20mg，0.06mmol)和2，4-二氯-苯乙酮(4.3g，22.8mmol)的混合物中滴加三甲基硅氰化物(2.9ml，22.8mmol)。在环境温度下搅拌该溶液20分钟。加入无水二氯甲烷(20ml)，将溶液冷却至5℃。然后滴加二乙基氨基硫三氟化物DAST(3.3ml，25.0mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液。在环境温度下搅拌该溶液30分钟，然后加入冰-水(70ml)。加入二氯甲烷(25ml)，分离有机层和水层。按顺序用水(25ml)、0.5N HCl(25ml)、饱和NaHCO3(25ml)和水(20ml)洗涤有机层。在NaSO4上干燥有机层，过滤，减压浓缩，通过硅胶上的快速色谱法(用9:1的己烷/乙酸乙酯洗脱)纯化。得到3.14g(理论的63％)2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-丙腈，是液体形式。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ 7.52(d，1H)，7.48(d，1H)，7.37(dd，1H)，2.15(d，3H，J＝24Hz)。
b)制备2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-丙胺盐酸盐(化合物编号Z1.221)
在0℃下，向2-(2，4-二氯-苯基)-2-氟-丙腈(1.0g，4.9mmol)的无水THF(10ml)混合物，滴加1M硼烷-THF(19.6ml，19.6mmol)。在冰浴中搅拌反应混合物1小时。滴加乙醇(25ml)，用乙醇HCl酸化混合物，在真空下浓缩。用醚研制残余物，得到820mg(理论的64.5％)2-(2，4-二氯苯基)-2-氟-丙胺盐酸盐，是白色固体形式(m.p.152-155℃)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ 8.44(sbr，2H)，7.72(d，1H)，7.65(d，1H)，7.53(dd，1H)，3.55(m，2H)，1.85(d，3H，J＝28Hz)。
MS[M+H]+222/224/226。
实施例P13制备1-(2，4-二氯-苄基)-环丙胺(化合物编号Z1.231)
在环境温度下，向(2，4-二氯-苯基)-乙腈(6.3g，33mmol)和Ti(OiPr)4(36.3mmol)的乙醚(150ml)溶液中，滴加EtMgBr(乙醚中的1M，66ml，66mmol)。搅拌反应混合物1小时，加入BF3.Et2O(66mmol)，在环境温度下继续搅拌反应混合物30分钟。加入1N NaOH(120ml，120mmol)，分离有机层。用醚萃取水层，合并有机相。用盐水(100ml)洗涤后，在硫酸钠上干燥有机层，除去溶剂，通过硅胶上的快速色谱法(用9:1的二氯甲烷/甲醇洗脱)纯化得到的产物。得到3.1g(理论的43％)1-(2，4-二氯-苄基)-环丙胺，是液体形式。
MS[M+H]+216/218/220。
实施例P14制备2-(4-溴-2-氯苯基)-1-甲基-乙胺(化合物编号Z1.451) a)制备4-溴-2-氯-1-二溴甲基-苯
将4-溴-2-氯甲苯(10g，48.6mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(43.3g，243.3mmol)、苯甲酰过氧化物(0.5g)和CCl4(80ml)的混合物加热至回流6h。通过TLC确认反应完成。冷却后，通过过滤分离出黄色沉淀，用CCl4洗涤。浓缩有机层，使用二氧化硅柱(60-120μ目)通过色谱法用己烷洗脱来纯化浓缩的有机层和沉淀。得到17.5g(理论的98％)4-溴-2-氯-1-二溴甲基-苯。
1H NMR(400MHz，CDCl3)-7.02δ(s，1H)，7.5δ(dd，2H)，7.87δ(d，1H，CHBr2)， b)制备4-溴-2-氯苯甲醛
在回流温度下，将AgNO3(82g，482mmol)的55ml水溶液滴加到4-溴-2-氯-1-二溴甲基-苯(17.5g，48.2mmol)的25ml乙醇溶液中。立刻形成沉淀(AgBr)。继续加热1h。冷却反应混合物，加入200ml水。通过过滤除去沉淀，用氯仿萃取水相。用水和盐水洗涤有机相，在硫酸钠上干燥。除去溶剂后，得到9.6g(理论的85％)4-溴-2-氯苯甲醛(纯度97％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)7.24δ(td，1H)，7.6δ(d，1H)，7.8δ(d，1H)，10.4δ(s，1H，CHO)， MS[M+H]+217/219/220 c)制备4-溴-2-氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯
在0℃下，搅拌4-溴-2-氯苯甲醛(9.6g，43.8mmol)、乙酸铵(8.44g，109.6mmol)和乙酸(25ml)的混合物10分钟。缓慢加入硝基乙烷(21.6ml，302.4mmol)。在氮气氛下，将反应混合物加热至110℃30分钟。通过TLC确认反应完成。将反应混合物冷却至环境温度，加入冰-水。用乙酸乙酯萃取水溶液。用水和盐水洗涤有机相，在硫酸钠上干燥。除去溶剂，使用二氧化硅柱(60-120μ目)通过柱色谱法用2％的乙酸乙酯己烷洗脱来纯化残余物。得到6.14g(理论的50％)4-溴-2-氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯(纯度98％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)2.3δ(d，3H)，7.2δ(d，1H)，7.5δ(dd，1H)，7.65δ(d，1H)，8δ(s，1H)。
d)制备4-溴-2-氯-1-(2-硝基-丙基)-苯
在氮气氛下，将4-溴-2-氯-1-((E)-2-硝基-丙烯基)-苯(6.1g，22.1mmol)的40ml甲醇溶液冷却至0℃。缓慢加入硼氢化钠(2.52g，66.3mmol)。在环境温度下搅拌反应混合物6h，加入乙酸乙酯。除去溶剂后，将残余物溶于水中，用乙酸乙酯萃取。用水和盐水洗涤有机相，在硫酸钠上干燥。蒸发溶剂，得到5.5g(理论的89％)4-溴-2-氯-1-(2-硝基-丙基)-苯(纯度86％)。
1HNMR(400MHz，CDCl3)，1.5δ(d，3H)，3.15δ(dd，1H，CHH)，3.35δ(dd，1H，CHH)，4.85δ(m，CHN)，7.05δ(d，1H)，7.3δ(dd，1H)，7.5δ(d，1H) MS[M+H]+(C9H9BrC1NO2)(248/249/250) e)制备2-(4-溴-2-氯苯基)-1-甲基-乙胺(化合物编号Z1.451)
将4-溴-2-氯-1-(2-硝基-丙基)-苯(6.8g，24mmol)溶于1:1的甲醇/水(40ml)。加入铁粉(4g，72mmol)和NH4Cl(7.8g，144mmol)。将反应混合物加热至65℃12h。在C盐床上过滤反应混合物，用甲醇洗涤。缩小滤液体系，加水。用2N HCl酸化得到的水溶液，用二乙基醚洗涤。通过加入10％NaOH，将水相pH增加至大于7。用乙酸乙酯萃取水相。在硫酸钠上干燥有机相，除去溶剂。得到3.6g(理论的59％)2-(4-溴-2-氯苯基)-1-甲基-乙胺(化合物Z1.451)，是褐色油状物形式。不再纯化，将化合物Z1.451用于实施例P7。
1HNMR-(400MHz，CDCl3)1.25δ(d，3H)，2.95δ(dd，2H，CH2)，3.2δ(m，1H，CHN)，4.42δ(m，NH2)，7.3δ(d，1II)，7.5δ(dd，1H)，7.7δ(d，1H)， MS[M+H]+248/249/250 表1到7式IA化合物 本发明还由下述表1到7中列出的优选的个体式(IA)化合物进一步举例说明。表14给出表征数据。
下述表Y后的表1到7中的每个，包含482个式(IA)化合物，其中R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c具有表Y中给出的含义，而A具有相关表1到7中给出的含义。由此，表1对应于当Y是1并且A具有表1表头下给出的含义的表Y，表2对应于当Y是2并且A具有表2表头下给出的含义的表Y，对表3到7同理。
表Y
表1提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。例如，化合物1.001具有如下结构
表2提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表3提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表4提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表5提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表6提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表7提供482个式(IA)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而R1、R2、R3、R4、R8a、R8b和R8c如表Y定义。
表8到12式IB化合物 本发明还由下述表8到12中列出的优选的个体式(IB)化合物进一步举例说明。表14给出表征数据。
下述表W后的表8到12中的每个，包含288个式(IB)化合物，其中B、R1、R2、R3和R4具有表W中给出的含义，而A具有相关表8到12中给出的含义。由此，表8对应于当W是8并且A具有表8表头下给出的含义的表W，表9对应于当W是9并且A具有表9表头下给出的含义的表W，对表10到12同理。
表W 在表W中，基团B代表B1、B2、B3或B4
表8提供288个式(IB)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而B、R1、R2、R3、R4、R9a和R9b如表W定义。例如，化合物7.001具有如下结构
表9提供288个式(IB)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而B、R1、R2、R3、R4、R9a和R9b如表W定义。
表10提供288个式(IB)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而B、R1、R2、R3、R4、R9a和R9b如表W定义。
表11提供288个式(IB)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而B、R1、R2、R3、R4、R9a和R9b如表W定义。
表12提供288个式(IB)化合物，其中A是
其中虚线表示基团A与酰胺基团的联结点，而B、R1、R2、R3、R4、R9a和R9b如表W定义。
表13式IIA化合物 式(IIA)的说明性化合物是下表12列出的化合物。表14给出这些化合物的表征数据。
表13
表14表征数据 表14表示表1到13化合物的选择的熔点和选择的NMR数据。在NMR测量中用CDCl3作溶剂，除非另有说明。如果存在溶剂的混合物，对此表示为，例如CDCl3/d6-DMSO)。并不试图列出所有情况的全部表征数据。
在表14和随后全部说明书中，用摄氏度表示温度；“NMR”表示核磁共振谱；MS表示质谱；“％”是重量百分比，除非相应浓度表示成其它单位。在整个本说明书中使用下列缩写 m.p.＝熔点 b.p.＝沸点 S＝单峰 br＝宽峰 d＝双峰 dd＝双二重峰 t＝三重峰 q＝四重峰 m＝多重峰 ppm＝百万分之一 式I化合物的制剂实施例 下列制剂实施例用来距离说明本发明，并涉及包含如表1到12的化合物的式I化合物的组合物的制造。同样的制剂实施例可以用来制造包含如表15中描述的化合物的式IA化合物的组合物。
实施例F-1.1到F-1.3乳油
可以通过用水稀释此浓缩物制备任何希望浓度的乳剂。
实施例F-2乳油
可以通过用水稀释此浓缩物制备任何希望浓度的乳剂。
实施例F-3.1到F-3.4溶液剂
该溶液适用于微滴剂形式。
实施例F-4.1到F-4.4颗粒剂
将所述新型化合物溶于二氯甲烷，将溶液喷雾到载体上然后通过真空蒸馏除去溶剂。
实施例F-5.1和F-5.2粉剂
通过将所有组分密切混合得到即用粉剂。
实施例F-6.1到F-6.3可湿性粉剂
混合所有组分并在适宜的磨中细磨混合物，得到可湿性粉剂，其可以用水稀释成任何希望浓度的悬浮剂。
实施例F7种子处理浓悬浮剂 表1到12化合物 40％ 丙二醇 5％ 丁醇PO/EO共聚物 2％ 具有10-20摩尔EO的三苯乙烯苯酚 2％ 1，2-苯并异噻唑啉-3-酮(20％的水溶液形式) 0.5％ 单偶氮色素钙盐 5％ 硅油(75％的水乳液形式) 0.2％ 水 45.3％ 用助剂与充分研磨的活性成分密切混合，得到浓悬浮剂，用水稀释后者可获得任意要求稀释度的悬浮剂。通过喷雾、灌注或浸泡，用该稀释剂可处理活的植物以及植物繁殖材料并保护其对抗微生物侵染。
生物实施例杀真菌作用 实施例B-1对抗白叉丝单囊壳菌(Podosphaera leucotricha)/苹果的作用(苹果白粉病) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理5周龄的苹果幼苗McIntosh品种。施用一天后，通过在测试植株上方抖动被苹果白粉病感染的植株来接种苹果植株。在22℃和60％r.h.以及14/10小时(光照/黑暗)的光照制度下温育12天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-2对抗苹果黑星菌(Venturia inaequalis)的作用/苹果(苹果黑星病) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理4周龄的苹果幼苗McIntosh品种。施用一天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮液(4 x 105分生孢子/ml)来接种苹果植株。21℃和95％r.h.下温育4天后，将该植株在温室中在21℃和60％r.h.放置4天。在21℃和95％r.h.再温育4天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-3对抗禾白粉菌(Erysiphe graminis)/大麦的作用(大麦白粉病) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理1周龄的大麦植株Express品种。施用一天后，通过在测试植株上方抖动被白粉病感染的植株来接种大麦植株。在温室中20℃/18℃(白天/夜晚)和60％r.h.下温育6天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-4对抗灰葡萄孢(Botrytis cinerea)/苹果的作用(苹果上的葡萄孢属(Botrytis)) 在苹果水果Golden Delicious品种上钻3个孔，并将每个用30μl每滴的经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)充满。施用两小时后，移取50μl灰葡萄孢的孢子悬浮液(4x105分生孢子/ml)至施用位点上。在生长室中22℃下温育7天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-5对抗灰葡萄孢(Botrytis cinerea)/葡萄的作用(葡萄上的葡萄孢属) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理5周龄的葡萄幼苗Gutedel品种。施用两天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮液(10x106分生孢子/ml)来接种葡萄植株。在温室中21℃和95％r.h.下温育4天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-6对抗灰葡萄孢(Botrytis cinerea)/番茄的作用(番茄上的葡萄孢属) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理4周龄的番茄植株Roter Gnom品种。施用两天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮剂(1x105分生孢子/ml)来接种番茄植株。在生长室中20℃和95％r.h.下温育4天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-7对抗圆核腔菌(Pyrenophora teres)/大麦的作用(大麦网斑病) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理1周龄的大麦植株Express品种。施用两天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮液(3x104分生孢子/ml)来接种大麦植株。在20℃和95％r.h.下温育2天后，将植株在温室中在20℃和60％r.h.放置2天。在接种4天后评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-8对抗小麦壳针孢(Septoria tritici)的作用/小麦(小麦斑枯病) 在喷雾室中用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理2周龄的小麦植株Riband品种。施用一天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮剂(10x105分生孢子/ml)来接种小麦植株。在23℃和95％r.h.下温育1天后，将该植株在温室中在23℃和60％r.h.放置16天。在接种18天后评价病害发生率。
化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-9对抗葡萄钩丝壳(Uncinula necator)的作用/葡萄(葡萄白粉病) 在喷雾室中，用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理5周龄的葡萄幼苗Gutedel品种。施用一天后，通过在测试植株上方抖动被葡萄白粉病感染的植株来接种葡萄植株。在26℃和60％r.h.以及14/10小时(光照/黑暗)的光照制度下温育7天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
实施例B-10对抗茄链格孢(Alternaria solani)的作用/番茄(番茄轮纹病) 在喷雾室中，用经制剂的测试化合物(0.02％活性成分)处理4周龄的番茄植株Roter Gnom品种。施用两天后，通过在测试植株上喷雾孢子悬浮液(2x105分生孢子/ml)来接种番茄植株。在生长室中20℃和95％r.h.下温育3天后，评价病害发生率。化合物1.001、1.002、1.036、1.196、1.197、1.198、1.199、1.202、1.204、1.205、1.206、1.207、1.216、1.221、1.231、1.235、1.275、1.392、1.416、1.441、1.442、1.443、1.446、1.448、1.451、1.461、1.462、1.463、1.464、1.465、1.482、2.001、2.157、2.196、2.197、2.198、2.199、2.206、2.235、3.197、3.198、3.199、3.200、3.212、5.197、5.198和5.199在此测试中显示良好活性(<20％侵染)。
本发明还涉及新型光学活性的乙基酰胺，具有杀微生物，特别是杀真菌活性；涉及包含这些化合物的组合物；还涉及它们在农业或园艺中防治或预防优选真菌的致植物病性微生物侵染植物的用途。
因此本发明提供式IA化合物
其中R51是C1-C3烷基、CF3或CF2H；X1是氢或氟；n是2或3；每个X2各自独立地代表氯、溴、氟、CH3或CF3； 当溶于非手性溶剂时，具有大于0°的旋光度[α]D。
取代基定义中出现的烷基基团可以是直链或支链的并且是，例如，甲基、乙基、正丙基后异丙基。
式IA化合物具有一个手性碳原子，其在上面画出的结构中用星号标出。
式IA化合物可以作为对映体纯的(+)-对映体(对映体过量(ee)>99％)或作为具有(+)-对映体对映体过量的(+)-和(-)-对映体的混合物存在。
当溶于非手性溶剂时，可以通过它们的旋光度[α]D清楚的区别这两种对映体一个具有大于0°的旋光度[α]D(本发明的(+)-化合物)，一个具有小于0°的旋光度[α]D(本发明的(-)-化合物)。
发现与(-)-化合物或它们两种化合物的外消旋混合物相比，(+)-化合物具有更高的杀微生物活性。
本发明优选提供式IA化合物，其中X1是氢。
本发明优选提供式IA化合物，其中至少一个取代基X2位于苯基环上的邻位。
本发明优选提供式IA化合物，其中每个X2是氯。在本发明的一个实施方式中，n是2。在本发明的另一个实施方式中，n是3。
在本发明的一个实施方式中，R51是甲基。在本发明的另一个实施方式中，R51是乙基。在本发明的另一个实施方式中，R51是CF3。
本发明优选提供具有至少50％的(+)-对映体对映体过量的式IA化合物。
本发明优选提供具有至少75％的(+)-对映体对映体过量的式IA化合物。
在本发明的一个实施方式中，式IA化合物是对映体纯的(+)-对映体。
通过将外消旋式IIk化合物(其属于前述式II化合物组)与式IIIk化合物(其属于前述式IIIA化合物组)反应来形成外消旋的式IA化合物；
其中R51、X2和n如式IA所定义，其中所述式IIk化合物在溶于非手性溶剂时具有0°的旋光度[α]D；
其中X1如式IA所定义并且R**是卤素、羟基或C1-6烷氧基，优选氯；接着用适宜手性固定相通过色谱法拆分该外消旋式IA化合物，可以制备式IA化合物。适宜手性固定相的实例在实施例P15b)中提供。
可以按照化合物II和IIIA的反应中的描述进行式IIk和IIIk的化合物间的反应。
可以按照上述反应流程1或与该反应流程类似地制备式IIk的外消旋中间体。此外，也可以按照下述反应流程12制备式III中间体。
流程12
在乙酸和乙酸铵存在下、在从环境温度到回流温度的温度下，通过用其中R1如式I所定义的式Vk硝基烷烃与其中B如式I所定义的式(VIk)羰基化合物反应，可以制备其中B和R1如式I所定义的式III硝基烯烃。
可选地，通过将式IIm化合物与如上描述的式IIIk化合物反应可以制备式IA化合物；所述式IIm化合物中
R51、X2和n如式IA所定义，其中所述式IIm化合物在溶于非手性溶剂时具有大于0°的旋光度[α]D，接着用适宜手性固定相通过色谱法拆分相应的外消旋式IIk中间体，可以制备所述式IIm中间体。式IIm中间体 是新颖的并且是为制备式IA化合物特别研发的。因此，这些中间体也形成本发明主题名称的一部分。
因为式IIIk化合物属于式IIIA化合物组，所以它们是已知的并且它们中的某些是可购得的。按照例如WO 93/11117中的描述，可以类似地制备它们。式Vk和VIk的化合物是已知的并且是可购得的或者可以按照本领域已知方法制备。
发现式IA化合物具有，出于实用性的，保护有用植物对抗如真菌、细菌或病毒的致植物病微生物的很有利的活性谱。
本发明涉及防治或预防致植物病微生物侵染有用植物的方法，其中式IA化合物作为活性成分被施用至植物、至其部分或其所在地。本发明式IA化合物的特征在于低施用率下有优异活性、被植物良好耐受和对环境安全。它们具有非常有用的治疗、预防和系统性质，并被用于保护大量有用植物。式IA化合物可以被用于抑制或消灭在有用植物的不同作物的植物或植物部分(果实、花卉、叶、茎、块茎、根)上发生的病害，同时还保护以后生长的那些植物部分例如对抗致植物病微生物。
还可以将式IA化合物用作拌种试剂来处理植物繁殖材料，特别是种子(果实、块茎、小硬粒)和植物插条(例如稻)，以保护对抗真菌侵染以及对抗土壤中存在的致植物病真菌。
此外，本发明的式IA化合物可以用于在相关领域防治真菌，例如在包括木材和木材相关工业产品的工业材料的保护中，在食物储存中或在卫生管理中。
式IA化合物是，例如，对抗下述纲的致植物病真菌有效的半知菌类(Fungi imperfecti)(例如葡萄孢属(Botrytis)、梨孢属(Pyricularia)、长蠕孢属(Helminthosporium)、镰孢属(Fusarium)、壳针孢属(Septoria)、尾孢属(Cercospora)和链格孢属(Alternaria))和担子菌纲(Basidiomycetes)(例如丝核菌属(Rhizoctonia)、驼孢锈菌属(Hemileia)、柄锈菌属(Puccinia))。另外，它们还是对抗子囊菌纲(Ascomycetes classes)(例如黑星菌属(Venturia)和白粉菌属(Erysiphe)、叉丝单囊壳属(Podosphaera)、链核盘菌属(Monilinia)、钩丝壳属(Uncinula))和其它卵菌纲(Oomycetes classes)(例如疫霉属(Phytophthora)、腐霉属(Pythium)、单轴霉属(Plasmopara))有效的。观察到对抗白粉病病害葡萄钩丝壳(Uncinula necator)的显著活性。此外，所述新型式IA化合物有效对抗致植物病细菌和病毒(例如对抗Xanthomonas spp、Pseudomonas spp、Erwinia amylovora以及烟草花叶病毒)。观察到对抗亚洲大豆锈病(Asian soybean rust)(豆薯层锈(Phakopso rapachyrhizi))的良好活性。
在本发明范围内，要保护的有用植物通常包含下述植物种谷物(小麦、大麦、黑麦、燕麦、稻、玉米、高梁和相关种)；甜菜(糖用甜菜和饲料甜菜)；梨果、核果和浆果(苹果、梨、李、桃、扁桃、樱桃、草莓、覆盆子和欧洲黑莓)；豆科植物(菜豆、小扁豆、豌豆、大豆)；油用植物(油菜、芥末、罂粟、橄榄、向日葵、椰子、蓖麻油植物、可可豆、落花生)；黄瓜植物(南瓜、黄瓜、甜瓜)；纤维植物(棉花、亚麻、大麻、黄麻)；柑橘类水果(橙、柠檬、葡萄柚、柑)；蔬菜(菠菜、莴苣、芦笋、卷心菜、胡萝卜、蒜、西红柿、马铃薯、辣椒)；樟科(鳄梨、肉桂、樟脑)或植物如烟草、坚果、咖啡、茄子、甘蔗、茶、胡椒、葡萄、啤酒花、香蕉和天然橡胶植物，以及观赏植物。
式IA化合物可以以未修饰的形式使用或优选与制剂领域惯用的载体和助剂一起使用。所以本发明还涉及防治或保护对抗致植物病微生物的组合物，包含式IA化合物和惰性载体，以及防治或预防有用植物被致植物病微生物侵染的方法，其中将包含式IA化合物作为活性成分和惰性载体的组合物施用至植物、至其部分或其所在地。
包含式IA化合物、其施用方法和其使用率的组合物的其它特征如对包含式I化合物的组合物描述。为在本发明方法中使用，可以将式IA化合物转化为上面描述的惯用制剂，例如，溶液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂(dusts)、粉剂(powders)、膏剂和颗粒剂。使用形式取决于具体的希望目的；在所有情况下，使用形式应保证式IA化合物的精确和均匀的分布。
式IA化合物可以与对式I化合物描述的草甘膦组合使用。式IA化合物与草甘膦组合使用的所述方法特别有效地对抗真菌界(Fungi)、担子菌门(Basidiomycot)、锈菌纲(Uredinomycetes)、锈菌亚纲(Urediniomycetidae)和锈菌目(Uredinales)(通常称为锈菌)的致植物病生物。农业上具有特别大范围影响的锈菌种包括层锈菌科(Phakopsoraceae)的那些，特别是层锈菌属(Phakopsora)的那些，例如豆薯层锈菌(Phakopsora pachyrhizi)，其也称为亚洲大豆锈病，和柄锈科(Pucciniaceae)的那些，特别是柄锈菌属(Puccinia)的那些，如禾柄锈菌(Puccinia graminis)，也称为杆锈病或者黑锈病，其在谷物作物中是问题病害以及剪股颖隐匿柄锈菌(Puccinia recondita)，也称为褐锈病。
所述方法的一个实施方式是保护有用植物作物对抗致植物病生物和/或处理被致植物病生物侵染的有用植物作物的方法，所述方法包含将草甘膦，包括其盐或酯，和至少一种式IA化合物同时施用，所述式IA化合物具有对抗选自植物、植物部分和植物所在地的至少一个成员的致植物病生物的活性。
令人惊讶地，目前发现上述式IA化合物或其药物盐还具有在动物中治疗和/或预防微生物感染的有利活性谱。
按照本发明，提供式IA化合物在制药中的用途，所述药物用于在动物中治疗和/或预防微生物感染。还提供式IA化合物作为药物试剂的用途。还提供式IA化合物在动物治疗中作为抗微生物剂的用途。按照本发明还提供包含式IA化合物或其可药用的盐作为活性成分和可药用的稀释剂或载体的药物组合物。该组合物可以用于在动物中治疗和/或预防抗微生物感染。该药物组合物可以是适宜用于口服给药的形式，比如片剂、锭剂、硬胶囊剂、水悬浮剂、油悬浮剂、乳剂可分散粉剂、可分散颗粒剂、糖浆剂和酏剂。可选地，该药物组合物可以是适宜用于局部施用的形式，比如喷雾剂、霜剂或洗剂。可选地，该药物组合物可以是适宜用于肠胃外施用的形式，例如注射剂。可选地，该药物组合物可以是可吸入形式，例如气雾喷雾剂。
式IA化合物有效对抗各种能在动物中导致微生物感染的微生物种。这些微生物种的实例是引起曲霉病(Aspergillosis)的那些，比如烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、黄曲霉(A.flavus)、土曲霉(A.terrus)、构巢曲霉(A.nidulans)和黑曲霉(A.niger)；引起芽生菌病(Blastomycosis)的那些，比如皮炎芽生菌(Blastomycesdermatitidis)；引起念珠菌病(Candidiasis)的那些，比如白假丝酵母(Candidaalbicans)、C.glabrata、热带假丝酵母(C.tropicalis)、近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)、克鲁斯假丝酵母(C.krusei)和葡萄牙假丝酵母(C.lusitaniae)；引起球孢子菌病(Coccidioidomycosis)的那些，比如粗球孢子菌(Coccidioidesimmitis)；引起隐球菌病(Cryptococcosis)的那些，比如新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)；引起组织胞浆菌病(Histoplasmosis)的那些，比如荚膜组织孢浆菌(Histoplasma capsulatum)以及引起接合菌病(Zygomycosis)的那些，比如伞枝犁头霉(Absidiacorymbifera)、微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)和少根根霉(Rhizopus arrhizus)。其它实例是镰孢属(Fusarium Spp)，比如尖镰孢(Fusarium oxysporum)和腐皮镰孢(Fusarium solani)和赛多孢属(Scedosporium Spp)，比如尖端赛多孢(Scedosporium apiospermum)和多育赛多孢(Scedosporium prolificans)。其它实施例是小孢霉属(Microsporum Spp)、发癣菌属(Trichophyton Spp)、表皮癣菌属(Epidermophyton Spp)、毛霉属(Mucor Spp)、孢子丝菌属(Sporothorix Spp)、瓶霉属(Phialophora Spp)、枝孢属(Cladosporium Spp)、Petriellidium spp、副球孢子菌属(Paracoccidioides Spp)和组织孢浆菌属(Histoplasma Spp)。
下述非限制性实施例以更多的细节举例说明上述发明，而不是对其限制。
制备实施例 实施例P15制备(+)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物编号1.01)
a)制备(+)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(化合物1.01) 将外消旋3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺(480mg，按照实施例P2中的描述制备)溶于3∶1(v/v)的72ml正己烷/异丙醇。在Chiralpak AD
(批号AD00CM-BF001 Daicel Japan，尺寸500mm x 50mm，颗粒尺寸20μm，流速30ml/分)上，用7:3(v/v)的正己烷/异丙醇洗脱在高效液相色谱(HPLC)上纯化上述溶液。在柱上每次分离8ml(53mg外消旋体)地进行多次以分离所有物质。用UV检测器在210nm进行化合物检测。合并用分析HPLC(Chiralpak AD00CE-CH017，Daicel)检查的纯对映体样品(ee>99％)，蒸发溶剂。
在Perkin Elmer 241旋光仪(在CHCl3中溶解化合物，以摄氏度表示温度；“c”代表g/ml浓度，光程长度为10cm)上收集旋光数据。
化合物A1.01，(+)-化合物 得到116mg(+)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺，是固体形式(ChiralpakAD00CE-CH017，Daicel，8515的正己烷/异丙醇；保留时间10.34分钟)；[α]23D＝+50(c4.9，CHCl3)。
比较实施例化合物A1.01的(-)-类似物 得到174mg(-)-3-二氟甲基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸[2-(2，4-二氯苯基)-1-甲基-乙基]-酰胺，是固体形式(ChiralpakAD00CE-CH017，Daicel，85:15的正己烷/异丙醇；保留时间7.80分钟)；[α]23D＝-52(c4.4，CHCl3)。
表15式IA化合物 通过在下表15中列出的优选的个体式(IA)化合物进一步举例说明本发明。
通过将式IA化合物溶于氯仿并在λ＝589nm、23℃和10cm的光程长度下测量其旋光度来测量[α]23D值。“c”代表浓度，以g/ml度量。
表15 表16式IIn化合物 通过在下表16中列出的优选的个体式(IIn)化合物进一步举例说明本发明。
表16 生物实施例杀真菌作用 实施例B-11抗灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的作用-真菌生长测定 将来自低温存储器的该真菌分生孢子直接混入营养肉汤中(PDB马铃薯葡萄糖肉汤)。将测试化合物的(DMSO)溶液放入微滴定板(96-孔规格)中后，加入包括真菌孢子的营养肉汤。在24℃温育测试板，48-72小时后用光度法测定生长抑制。化合物的活性表达为真菌生长抑制率(0＝没有生长抑制，80％到99％的等级表示好到很好的已知，100％＝完全抑制)。
实施例B-12抗落花生球腔菌(Mycosphaerella arachidis)的作用(落花生早期叶斑病；落花生尾孢(Cercospora arachidicola)[无性型])-真菌生长测定 将来自低温存储器的该真菌分生孢子直接混入营养肉汤中(PDB马铃薯葡萄糖肉汤)。将测试化合物的(DMSO)溶液放入微滴定板(96-孔规格)中后，加入包括真菌孢子的营养肉汤。在24℃温育测试板，6-7天后用光度法测定生长抑制。化合物的活性表达为真菌生长抑制率(0＝没有生长抑制，80％到99％的等级表示好到很好的已知，100％＝完全抑制)。
实施例B-13抗小麦壳针孢(Septoria tritici)的作用-真菌生长测定 将来自低温存储器的该真菌分生孢子直接混入营养肉汤中(PDB马铃薯葡萄糖肉汤)。将测试化合物的(DMSO)溶液放入微滴定板(96-孔规格)中后，加入包括真菌孢子的营养肉汤。在24℃温育测试板，72小时后用光度法测定生长抑制。化合物的活性表达为真菌生长抑制率(0＝没有生长抑制，80％到99％的等级表示好到很好的已知，100％＝完全抑制)。
实施例B-14抗雪腐明梭孢属(Monographella nivalis)的作用(无性型雪腐镰孢(Fusarium nivale)、雪腐微托菌(Microdochiunivale)；雪腐病)-真菌生长测定 将测试化合物的(DMSO)溶液(2％二甲亚枫，0，025％吐温20)放入微滴定板(96-孔规格)中后，加入包括真菌孢子的营养肉汤。将来自低温存储器的该真菌的40.000/ml分生孢子直接混入营养肉汤中(PDB马铃薯葡萄糖肉汤)。在各种施用率下测试化合物；在表中以百万分之一(ppm)表示这些施用率。在24℃温育测试板，72小时后用光度法测量生长抑制(0＝没有生长抑制，80％到99％的等级表示好到很好的已知，100％＝完全抑制)。
实施例B-15抗大麦上的圆核腔菌(Pyrenophora teres)的作用 将大麦叶片节片放入多孔板中的琼脂上(24-孔规格)并用测试溶液(200ppm、60ppm和20ppm的活性成分)喷雾。干燥后，用所述真菌的孢子悬浮液温育叶片圆片。经过适当温育，在接种4天后按照预防性的杀真菌活性(以％)评价化合物的活性。
权利要求
1.式I化合物
其中
R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢，卤素，硝基，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C3-C6环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代或者C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代；
或者R1与R2一起是C2-C5亚烷基基团，其是未取代的或被一个或多个C1-C6烷基基团取代；
或者R3与R4一起是C2-C5亚烷基基团，其是未取代的或被一个或多个C1-C6烷基基团取代；
每个R5各自独立地代表卤素、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷硫基或-C(Ra)＝N(0Rb)；
Ra是氢或C1-C6烷基；
Rb是C1-C6烷基；
A是A1
其中
R16是卤代甲基；
R17是C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；和
R18是氢、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；
或A是A2
其中
R26是卤代甲基；和
R27是C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；
或A是A3
其中
R36是卤代甲基；
R37是C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；和
R38是氢、卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4卤代烷氧基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；
或A是A4
其中
R46是卤代甲基；和
R47是C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基、C1-C4烷氧基-C1-C4烷基或C1-C4卤代烷氧基-C1-C4烷基；
B是苯基、萘基或喹啉基基团，其被一个或多个取代基R8取代；
每个取代基R8各自独立地代表卤素，C1-C6卤代烷氧基，C1-C6卤代烷硫基，氰基，硝基，-C(Rc)＝N(ORd)，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C3-C6环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C6-C14二环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，苯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代或者苯氧基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，吡啶基氧基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代；
每个Rc各自独立地是氢或C1-C6烷基；
每个Rd各自独立地是C1-C6烷基；
每个R9各自独立地是卤素、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷硫基、C3-C6烯氧基、C3-C6炔氧基或-C(Re)＝N(ORf)；
每个Re各自独立地是氢或C1-C6烷基；
每个Rf各自独立地是C1-C6烷基；
以及这些化合物的互变异构体/异构体/对映体。
2.权利要求1的式I化合物，其中
R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢，卤素，硝基，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C3-C6环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代或者C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代；
或者R1与R2一起是C2-C5亚烷基基团，其是未取代的或被一个或多个C1-C6烷基基团取代；
或者R3与R4一起是C2-C5亚烷基基团，其是未取代的或被一个或多个C1-C6烷基基团取代；
每个R5各自独立地代表卤素、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C3-C6环烷基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷硫基或-C(Ra)＝N(ORb)；
Ra是氢或C1-C6烷基；
Rb是C1-C6烷基；
B是苯基、萘基或喹啉基基团，其被一个或多个取代基R8取代；
每个取代基R8各自独立地代表卤素，C1-C6卤代烷氧基，C1-C6卤代烷硫基，氰基，硝基，-C(Rc)＝N(ORd)，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C3-C6环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C6-C14二环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，苯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代；
每个Rc各自独立地是氢或C1-C6烷基；
每个Rd各自独立地是C1-C6烷基；
每个R9各自独立地是卤素、硝基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷硫基、C3-C6烯氧基、C3-C6炔氧基或-C(Re)＝N(ORf)；
每个Re各自独立地是氢或C1-C6烷基；和
每个Rf各自独立地是C1-C6烷基。
3.权利要求2的式I化合物，其中A是A1。
4.权利要求2的式I化合物，其中B是苯基基团，其被一个或多个取代基R8取代。
5.权利要求4的式I化合物，其中每个取代基R8各自独立地代表卤素，C1-C6卤代烷氧基，C1-C6卤代烷硫基，硝基，-C(Rc)＝N(ORd)，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代或者C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代。
6.权利要求2的化合物，其中A是A1并且B是苯基基团，其被一个或多个取代基R8取代，其中每个取代基R8各自独立地代表卤素卤素，C1-C6卤代烷氧基，C1-C6卤代烷硫基，硝基，-C(Rc)＝N(ORd)，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代或者C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R9取代。
7.权利要求4的式I化合物，其中B是B1
其中R18a是氢、卤素、氰基、C1-C6烷基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基或苯基，其是未取代的或被一个或多个卤素取代；R18b是氢、卤素、氰基、C1-C6烷基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基或苯基，其是未取代的或被一个或多个卤素取代；R18c是氢、卤素、氰基、C1-C6烷基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基或苯基，其是未取代的或被一个或多个卤素取代；R18d是氢、卤素、氰基、C1-C6烷基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基或苯基，其是未取代的或被一个或多个卤素取代；R18e是氢、卤素、氰基、C1-C6烷基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基、C1-C6卤代烷氧基或苯基，其是未取代的或被一个或多个卤素取代；条件是R18a、R18b、R18c、R18d和R18e中至少一个不是氢。
8.权利要求7的式I化合物，其中R18b和R18d是氢；并且R18a、R18c和R18e各自独立地选自氢、卤素、C2-C6炔基或C1-C6卤代烷基；条件是R18a、R18c和R18e中至少一个不是氢。
9.权利要求2的式I化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢，卤素，硝基，C1-C6烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C3-C6环烷基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代，C2-C6链烯基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代或者C2-C6炔基，其是未取代的或被一个或多个取代基R5取代。
10.权利要求2的式I化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢、卤素或C1-C6烷基，其是未取代的或被选自卤素、C1-C6烷氧基和C1-C6卤代烷氧基的一个或多个取代基取代。
11.权利要求2的式I化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢、卤素或C1-C6烷基，其是未取代的或被选自卤素和C1-C6烷氧基的一个或多个取代基取代。
12.权利要求2的式I化合物，其中R1、R2、R3和R4各自独立地代表氢、卤素或C1-C6烷基。
13.权利要求2的式I化合物，其中R1是C1-C6烷基或C1-C6卤代烷基。
14.权利要求2的式I化合物，其中R1是卤素或C1-C6烷基。
15.权利要求2的式I化合物，其中R1是C1-C6烷基。
16.权利要求2的式I化合物，其中R3是卤素。
17.权利要求2的式I化合物，其中R1是CF3、CF2H或CFH2。
18.权利要求2的式I化合物，其中R1是CF3。
19.权利要求2的式I化合物，其中R1是CF2H。
20.权利要求2的式I化合物，其中R1是CFH2。
21.防治或预防致植物病微生物侵染有用植物的方法，其中将权利要求1的式I化合物或包含该化合物作为活性成分的组合物施用至植物、至其部分或其所在地。
22.防治或保护对抗致植物病微生物的组合物，包含权利要求1的式I化合物和惰性载体。
23.式IA化合物
其中R51是C1-C3烷基、CF3或CF2H；X1是氢或氟；n是2或3；每个X2各自独立地代表氯、溴、氟、CH3或CF3；
当溶于非手性溶剂时，具有大于0°的旋光度[α]D。
24.权利要求23的式IA化合物，其中X1是氢。
25.权利要求23的式IA化合物，其中R51是甲基。
26.权利要求23的式IA化合物，其中X2是氯。
27.权利要求23的式IA化合物，其中n是2。
28.权利要求23的式IA化合物，其中n是3。
29.防治或预防致植物病微生物侵染有用植物的方法，其中将权利要求23的式IA化合物或包含该化合物作为活性成分的组合物施用至植物、至其部分或其所在地。
30.防治或保护对抗致植物病微生物的组合物，包含权利要求23的式IA化合物和惰性载体。
全文摘要
其中取代基如权利要求1所定义的式(I)化合物适宜用作杀微生物剂。
文档编号C07D207/34GK101489999SQ200780027008
公开日2009年7月22日 申请日期2007年6月6日 优先权日2006年6月8日
发明者D·斯蒂尔利, J·J·泰勒, H·沃尔特, P·A·沃辛格顿, R·拉加恩 申请人:先正达参股股份有限公司, 辛根塔有限公司