不具备血管舒张活性的促排水和利尿钠多肽的制作方法

专利名称：不具备血管舒张活性的促排水和利尿钠多肽的制作方法
不具备血管舒张活性的促排水和利尿钠多肽 相关申请的交叉引用
本申请要求享有2006年9月8日提交的美国临时申请第60/825,028
号的权益o
背景
本文本涉及促排水和利尿钠(natriuretic)多肽。例如，本文本涉及具有 促排水和利尿钠活性而不具备扩张血管组织的能力的多肽。
利尿钠多肽家族的成员是调节体液内稳态的激素。心房利尿钠肽(ANP) 由心房肌细胞响应于血管内容积的增加而分泌。ANP在循环中后，其主要 作用于肾脏、血管组织和肾上腺，其中它的作用导致肾脏排出钠和水并导 致血管内容积和血压降低。BNP也来自心肌细胞，并如ANP —样在人血 浆中循环。BNP是利尿钠的、抑制肾素(rennin)、血管舒张(vasodilating)和 松弛性的。BNP的主要循环和贮存形式是具有环结构的32氨基酸多肽。 BNP的生理作用由与鸟苷酸环化酶相连的受体利尿钠肽受体A (NPR-A)介 导。BNP的清除由NPR-C受体推动，将其移出循环。BNP也由中性内肽 酶通过酶促裂解而降解。C-型利尿钠肽(CNP)来源于内皮细胞，起血管舒 张和生长抑制多肽作用。树眼镜蛇属(Z)ew/raa^/力利尿钠肽(DNP)结构与 ANP、 BNP和CNP相似，从非洲绿树眼镜虫它(De"c/ow;^fl"gwWce;w)或绿 曼巴虫它(green mamba snake)的毒'液分离。概述
本文本涉及促排水和利尿钠多肽。例如，本文本提供了具有促排水和 利尿钠活性的多肽。在一些例子，本文提供的多肽可具有促排水和利尿钠 活性，而不具备扩张血管组织的能力。
大体上，本文本一方面特征为长度少于45氨基酸残基的多肽，其中 所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括或基本上由以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的 序列,(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张(vasodilatory)活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序歹'J。 所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种编码长度少于45氨基酸残基的 多肽的分离的核酸，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括或 基本上由以下组成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不多于3个^"配的 SEQ ID NO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8 个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或 有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠 活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包 括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序 列、SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽 可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残 基的多肽的核酸或基本上由编码长度少于45氨基酸残基的多肽的核酸组 成的载体，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括或基本上由 以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ IDNO: l所列的序列，(b)SEQIDNO: 2所列的序列或有不多于8个错配的 SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3 个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述 多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。 所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残 基的多肽的核酸的宿主细胞，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺 序包括或基本上由以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3 个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有 不多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列 的序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包 括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括SEQID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可为大致纯的多肽。所述宿主细胞可为真核宿主细胞。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括药学上可接受的运载体 (carrier)和长度少于45氨基酸残基的多肽的药物组合物，其中所述多肽以 从氨基末端至羧基末端的顺序包括或基本上由以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和 (c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。 所述多肽可包括SEQIDNO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可 包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。在另一实施方式，本文本特征为一种增加哺乳动物的促排水和利尿钠 活性而不降低血压的方法，其中所述方法包括向哺乳动物施用 一种长度少 于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序
包括或基本上由以下组成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不多于3个 错配的SEQIDNO: l所列的序列，(b)SEQIDNO: 2所列的序列或有不 多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的 序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括 利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种支架，其包括包含长度少于45 氨基酸残基的多肽的涂层(coating)，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末 端的顺序包括或基本上由以下组成(a)SEQIDNO: 1所列的序列或有不 多于3个错配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序 列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个《昔配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括 SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。 所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种透析袋(dialysis tubing),其包括 包含长度少于45氨基酸残基的多肽的涂层，其中所述多肽以从氨基末端 至羧基末端的顺序包括或基本上由以下组成(a) SEQ ID NO: l所列的序 列或有不多于3个错配的SEQ IDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2 所列的序列或有不多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ IDNO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽
可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列
的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为包括长度少于45氨基酸残基的多肽 的微粒或毫微粒，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括或基 本上由以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错 配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不 多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。 所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯 的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种长度少于45氨基酸残基的多肽， 其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a)SEQIDNO: l所 列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列,(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和 (c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所 列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括 SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、 SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可为 大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种编码长度少于45氨基酸残基的 多肽的分离的核酸，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括 (a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述 多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残 基的多肽的核酸或基本上由编码长度少于45氨基酸残基的多肽的核酸组 成的载体，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的 序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的序列。所述多肽可 包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的 序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残 基的多肽的核酸的宿主细胞，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺 序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列,(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3个错酉己 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可 包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括药学上可接受的运载体和长
10度少于45氨基酸残基的多肽的药物组合物，其中所述多肽以从氨基末端
至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错 配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多 于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序 列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括利 尿钠活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括 SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列、SEQIDNO: 7所列的序列 和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种支架，其包括包含长度少于45 氨基酸残基的多肽的涂层，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序 包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3个错配 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可 包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种透析袋，其包括包含长度少于45 氨基酸残基的多肽的涂层，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序 包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3个错配 的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可 包括SEQIDNO: l所列的序列。所迷多肽可包括SEQ ID NO: 7所列的 序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。在另一实施方式，本文本特征为包括长度少于45氨基酸残基的多肽
的微粒或毫微粒，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1所列的 序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可包括SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQ ID NO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。 所述多肽可为大致纯的多肽。
在另 一实施方式，本文本特征为一种长度少于45氨基酸残基的多肽， 其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 2所 列的序列或有不多于8个错配的SEQIDNO: 2所列的序列,和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所 述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可 不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列 的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯 的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种编码长度少于45氨基酸残基的 多肽的分离的核酸，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括 (a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列 的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管 舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包 括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序 列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的 序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残基的多肽的核酸或基本上由编码长度少于45氨基酸残基的多肽的核酸组
成的载体，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和 (b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。 所述多肽可不具有SEQ ID NO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多 肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述 多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括编码长度少于45氨基酸残 基的多肽的核酸的宿主细胞，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺 序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种包括药学上可接受的运载体和长 度少于45氨基酸残基的多肽的药物组合物，其中所述多肽以从氨基末端 至羧基末端的顺序包括(a)SEQIDNO: 2所列的序列或有不多于8个错 配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不 多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。 所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: 1所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另 一实施方式，本文本特征为一种增加哺乳动物的促排水和利尿钠 活性而不降低血压的方法，其中所述方法包括向哺乳动物施用一种长度少
13于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序
包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种增加哺乳动物的促排水和利尿钠 活性而不降低血压的方法，其中所述方法包括向哺乳动物施用 一种长度少 于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序 包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所歹'J 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种支架，其包括包含长度少于45 氨基酸残基的多肽的涂层，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序 包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为一种透析袋，其包括包含长度少于45 氨基酸残基的多肽的涂层，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备 血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽 可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3所列 的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所 列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在另一实施方式，本文本特征为包括长度少于45氨基酸残基的多肽 的微粒或毫微粒，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a) SEQIDNO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的 序列,和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张 活性。所述多肽可不具有SEQIDNO: 1所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所 述多肽可为大致纯的多肽。
在另 一 实施方式，本文本特征为治疗患有心血管或肾疾患(condition) 的哺乳动物的方法。所述方法可包括向哺乳动物施用一种多肽。所述哺乳 动物可患有心血管疾病。所述哺乳动物可患有充血性心力衰竭。所述哺乳 动物可患有心肌梗塞、冠心病、动脉疾病、肾才几能不全、癌症或钠和水滞 留状态(sodium and water retaining state)。
在一些例子，所述多肽的长度可少于45氨基酸残基，其中所述多肽 以从氨基末端至羧基末端的顺序包括或基本上由以下组成(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQIDNO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的 序列,和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张 活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 1所列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在一些例子，所述多肽的长度可少于45氨基酸残基，其中所述多肽 以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a)SEQIDNO: l所列的序列或有 不多于3个错配的SEQIDNO: l所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的 序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(c) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多 肽可包括利尿钠活性。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列。所述 多肽可包括SEQIDNO: 7所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 3 所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: l所列的序列、SEQIDNO: 7 所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
在一些例子，所述多肽的长度可少于45氨基酸残基，其中所述多肽 以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a)SEQIDNO: 2所列的序列或有 不多于8个错配的SEQ ID NO: 2所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列 的序列或有不多于3个错配的SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可包 括利尿钠活性。所述多肽可不具备血管舒张活性。所述多肽可不具有SEQ ID NO: l所列的序列。所述多肽可包括SEQIDNO: 2所列的序列。所述 多肽可包括SEQ ID NO: 3所列的序列。所述多肽可包括SEQ ID NO: 2 所列的序列和SEQIDNO: 3所列的序列。所述多肽可为大致纯的多肽。
除非另外限定，否则本文所用的所有技术和科学术语都具有如本发明 所属领域普通技术人员所通常理解的相同含义。尽管与本文描述的方法和 材料相似或等价的方法和材料可用于实践本发明，下文描述了适合的方法 和材料。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献以引用 的方式全文并入本文。如有冲突，以包括定义的本说明书为准。此外，这 些材料、方法和实施例仅为示例而不意为限制。
本发明的一个或多个实施方式的详述在下文的附图和描述中列出。根 据所述描述和附图以及权利要求书，本发明的其它特征、目标和优点将变 得明显。


图1是长度为33氨基酸残基的ABC-NP多肽(SEQ ID NO: 4)的示意 图。SEQ ID NO: 4的前5个氨基酸残基对应于人类成熟ANP的第11至 15氨基酸残基，命名为SEQIDNO: 1。 SEQIDNO: 4的第6至27氨基 酸残基对应于人类成熟CNP的第1至22氨基酸残基，除了在第15、 16 和17位氨基酸残基改变为精氨酸、谷氨酸和丙氨酸。SEQIDNO: 4的第 6至27氨基酸残基命名为SEQ ID NO: 2。 SEQ ID NO: 4的第28至33 氨基酸残基对应于人类成熟BNP的第27至32氨基酸残基，命名为SEQ ID NO: 3。
图2是长度为33氨基酸残基的ABC-NP1多肽(SEQ ID NO: 6)的示意 图。SEQ ID NO: 6的前5个氨基酸残基对应于人类成熟ANP的第11至 15氨基酸残基，命名为SEQIDNO: 1。 SEQIDNO: 6的第6至27氨基 酸残基对应于人类成熟CNP的第1至22氨基酸残基，命名为SEQ ID NO: 7。 SEQIDNO: 6的第28至33氨基酸残基对应于人类成熟BNP的第27 至32氨基酸残基，命名为SEQIDNO: 3。
图3是长度为28氨基酸残基的BC-NP2多肽(SEQ ID NO: 8)的示意 图。SEQ ID NO: 8的第1至22氨基酸残基对应于人类成熟CNP的第1 至22氨基酸残基，除了在第15、 16和17位的氨基酸残基改变为精氨酸、 谷氨酸和丙氨酸。SEQ ID NO: 8的第1至22氨基酸残基命名为SEQ ID NO: 2。 SEQIDNO: 8的第23至28氨基酸残基对应于人类成熟BNP的 第27至32氨基酸残基，命名为SEQIDNO: 3。
图4包含四幅描绘以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25吗每 kg，以IV弹丸(bolus)施用)处理的犬的尿钠排泄率的条形图。基线是施用 前，而所指出的时间是在施用后。
图5包含四幅描绘以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25呢每
kg，以IV弹丸施用)处理的犬的尿流速的条形图。基线是施用前，而所指 出的时间是在施用后。
图6包含四幅描绘以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25吗每
17kg,以IV弹丸施用)处理的犬的平均动脉血压水平的条形图。基线是施用 前，而所指出的时间是在施用后。
图7包含四幅描绘以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25 每
kg，以IV弹丸施用)处理的犬的血浆加压素水平的条形图。基线是施用前， 而所指出的时间是在施用后。
图8包含四幅描绘以ABC-NP、 BNP、 ABC-NP或BC-NP2(25吗每
kg，以IV弹丸施用)处理的犬的肾血流量的条形图。基线是施用前，而所 指出的时间是在施用后。
图9是描绘未处理的人类心脏成纤维细胞(cardiac fibroblast)和以 ANP(10—6M)、 BNP(10-6M)、 CNP(10.6M)、 ABC隱NP(10-11 M、 10 或l(T6 M)、或ABC-NP+BNP(各l(T6 M)处理10分钟的人类心脏成纤维细胞中的 cGMP水平(pmol/mL)的条形图。
图10是描绘未处理的人类心脏成纤维细胞和以ANP(1(T6 M)、 BNP(IO.6 M)、 CNP(1(T6 M)、 ABC-NP1(1(T11 M、 l(T8 M或10.6 M)、 ABC-NP1+BNP(各l(T6 M)处理10分钟的人类心脏成纤维细胞中的cGMP 水平(pmol/mL)的条形图。
图11是描绘未处理的人类心脏成纤维细胞和以ANP(l(T6 M)、 BNP(10-6 M)、 CNP(10-6 M)或BC-NP2(10-11 M、 l(T8 M或l(T6 M)处理10分 钟的人类心脏成纤维细胞中的cGMP水平(pmol/mL)的条形图。
图12包含可编码具有SEQ ID NO: 4所列的氨基酸序列的ABC-NP 多肽的核酸序列(SEQIDNO: 5)。
详述
本文本涉及促排水和利尿钠多肽。例如，本文本提供具有促排水和/ 或利尿钠活性的多肽。在一些例子，本文提供的多肽可具有促排水和利尿 钠活性，而不具备降低血压的能力。本文本还提供诱导哺乳动物的促排水 和/或利尿钠活性的方法和材料。本文提供的多肽可具有任何序列并可具有任何长度。例如，本文^是供
的多肽可包括SEQIDNO: 1、 SEQ ID NO: 2和SEQ ID NO: 3所列的序 列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一种氨基酸序列，其与(a)SEQID NO: 1所列的序列比对具有4个或更少(例如，3个或更少、2个或更少、 1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其组合，与(b)SEQIDNO: 2 所列的序列比对具有10个或更少(例如，9个或更少、8个或更少、7个或 更少、6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或更少、2个或更少、1 个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其组合，和与(c)SEQIDNO: 3 所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个或更少、3个或更少、2个或 更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其组合。例如，本文提 供的多肽可包含SEQ ID NO: 1所列的序列，除了 SEQ ID NO: 1的第一 精氨酸残基或最后一个异亮氨酸残基被缺失或被不同氨基酸残基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一氨基酸序列，其为SEQ ID NO: 1所列的或与SEQ ID NO: 1所列的序列比对具有4个或更少(例如， 3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸缺失、取代，或其组合，(b) 第二氨基酸序列，其为SEQ ID NO: 2所列的或与SEQ ID NO: 2所列的 序列比对具有10个或更少(例如，9个或更少、8个或更少、7个或更少、 6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或更少、2个或更少、l个或0 个)的氨基酸添加、取代，或其组合，和(a)第三氨基酸序列，其为SEQ ID NO: 3所列的或与SEQ ID NO: 3所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个 或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸缺失、取代，或 其组合。例如，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 4所列的序列或由SEQ ID NO: 4所列的序列组成。
在一些例子，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 1、 SEQIDNO: 7 和SEQ ID NO: 3所列的序列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一种 氨基酸序列，其与(a)SEQIDNO: 1所列的序列比对具有4个或更少(例如， 3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其 组合，与(b) SEQ ID NO: 7所列的序列比对具有10个或更少(例如，9个 或更少、8个或更少、7个或更少、6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其
组合，和与(c) SEQ ID NO: 3所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个 或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取 代，或其组合。例如，本文提供的多肽可包含SEQIDNO: l所列的序列， 除了 SEQIDNO: 1的第一精氨酸残基或最后一个异亮氨酸残基被缺失或 被不同氨基酸残基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一氨基酸序列，其为SEQID NO: 1所列的或与SEQ ID NO: 1所列的序列比对具有4个或更少(例如， 3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸缺失、取代，或其组合，(b) 第二氨基酸序列，其为SEQ ID NO: 7所列的或与SEQ ID NO: 7所列的 序列比对具有10个或更少(例如，9个或更少、8个或更少、7个或更少、 6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0 个)的氨基酸添加、取代，或其组合，和(a)第三氨基酸序列，其为SEQ ID NO: 3所列的或与SEQ ID NO: 3所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个 或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸缺失、取代，或 其组合。例如，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 6所列的序列或由SEQ ID NO: 6所列的序列组成。
在一些例子，本文提供的多肽可包括SEQIDNO: 2和SEQ ID NO: 3所列的序列。在一些例子，本文提供的多肽可包含一种氨基酸序列，其 与(a)SEQIDNO: 2所列的序列比对具有10个或更少(例如，9个或更少、 8个或更少、7个或更少、6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或 更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其组合， 并与(b) SEQIDNO: 3所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个或更少、 3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、缺失、取代，或其 组合。例如，本文提供的多肽可包含SEQIDNO: 2所列的序列，除了 SEQ ID NO: 2的第 一甘氨酸残基被缺失或被不同氨基酸残基取代。
在一些例子，本文提供的多肽可包含(a)第一氨基酸序列，其为SEQID NO: 2所列的或与SEQIDNO: 2所列的序列比对具有10个或更少(例如， 9个或更少、8个或更少、7个或更少、6个或更少、5个或更少、4个或更少、3个或更少、2个或更少、1个或0个)的氨基酸添加、取代，或其
组合，和(b)第二氨基酸序列，其为SEQIDNO: 3所列的或与SEQIDNO: 3所列的序列比对具有5个或更少(例如，4个或更少、3个或更少、2个或 更少、1个或0个)的氨基酸缺失、取代，或其组合。例如，本文提供的多 肽可包括SEQ ID NO: 8所列的序列或由SEQ ID NO: 8所列的序列组成。
本文提供的多肽可具有任何长度。例如，本文提供的多肽的长度可为 25至45之间(例如，26至44之间、27至43之间、28至42之间、29至 41之间、30至40之间、31至39之间、或32至38之间)的氨基酸残基。 应理解，长度为25或45氨基酸残基的多肽是长度为25至45之间的氨基 酸残基的多肽。
在一些例子中，本文提供的多肽可为大致纯的多肽。此处所用于多肽 的术语"大致纯的"指该多肽大致没有天然伴随的其它多肽、脂质、糖类和 核酸。因此大致纯的多肽是从其天然环境移出的任何多肽并是至少60%纯 的或为任何化学合成的多肽。大致纯的多肽可为至少约60%、 65%、 70%、 75%、 80%、 85%、 90%、 95%或99%纯的。通常，大致纯的多肽可在非还 原性聚丙烯酰胺凝胶上产生单独的主条带。
在一些实施方式，本文提供的多肽可不具备血管活性。可通过确定血 管(如器官槽(organ chamber)中的颈动脉)对多肽的响应度而评估血管活性。
本文提供的多肽可通过表达编码该多肽的重组核酸或化学合成而获 得。例如可使用应用编码本文提供的多肽的表达载体的标准重组技术。然 后所得的多肽可使用例如亲合色谱技术和HPLC来纯化。纯化的程度可由 任何合适方法测量，包括但不限于柱色镨法、聚丙烯酰胺凝胶电泳或高 效液相色谱法。本文提供的多肽可被设计或工程化以包含允许纯化多肽(如 被捕获到亲合基质上)的标签序列。例如，诸如c-myc、血凝素、多组氨酸 或FlagTM标签(Kodak)等标签可用于帮助多肽纯化。这种标签可插入在多肽 内任何位置，包括羧基端或氨基端。可使用的其它融合物(fbsions)包括帮 助检测多肽的酶，诸如44性磷酸酶。
本文提供的多肽可制备为包含三个区，即包括N-末端(例如，来自ANP多肽的N-末端序歹'J)的第一区、包括成熟利尿钠多肽如CNP多肽的环结构
的第二区和包括C-末端(例如，来自BNP多肽的C-末端序列)的第三区。 BNP、 DNP、 ANP和CNP的N-末端、环结构和C-末端在别处阐述。见于 例如，美国专利申请第10/561,014号。
可使用本文提供的多肽来治疗心血管疾病、充血性心力衰竭、心肌梗 塞、冠状动脉疾病、肾病、抗缺血性肾病(anti-ischemic renal disease)、抗炎 性肾病(anti-inflammatory renal disease)、抗纤维变性性肾病(anti-fibrotic renal disease),肝病、癌症(例如，腺癌、鳞状细胞癌、小细胞肺癌、或乳 腺癌)、肺动脉高压、血管疾病、舒张期功能障碍、心功能不全、肾机能不 全(例如，造影剂引起的肾机能不全或缺血引起的肾机能不全)或其组合。 例如，在降低人类冠状动脉疾病症状的严重度的情况下，可向患有冠状动 脉疾病的人类施用ABC-NP多肽。
通过与药学上可接受的非毒性赋形剂或运载体混合，本文提供的多肽 可配制为药物组合物。这种组合物可以有效治疗例如心脏、肝脏、血管、 肾脏或其它的钠滞留(sodium retaining)疾患的量施用于需要其的受治疗者。 药物组合物可制备用于肠胃外施用，尤其是以水性生理緩沖溶液中液态溶 液或悬浮液的形式；用于口服施用，尤其是以片剂或胶嚢的形式；用于鼻 内施用，尤其是以粉末、鼻滴剂或气溶胶的形式。用于其它施用途径的组 合物可使用标准方法如所期望的制备。
用于肠胃外施用的制剂可包含作为普通赋形剂的无菌水或盐水、聚烷 撑二醇如聚乙二醇、植物来源的油、氢化萘及类似物。尤其是，生物相容 的、生物可降解的丙交酯聚合物、丙交酯/乙交酯共聚物、或聚氧乙烯 (polyoxethylene)-聚氧丙烯共聚物是用于控制多肽体内释放的赋形剂的例 子。其它适合的肠胃外递送系统包括乙烯-乙酸乙烯酯共聚物粒子、渗透泵、 可植入的输注系统和脂质体。如果期望，用于吸入施用的制剂可包含赋形 剂如乳糖。吸入制剂可为水性溶液，包含例如聚氧乙烯-9-月桂醚、甘胆酸 盐和脱氧胆酸盐，或该制剂可为用于以鼻滴剂形式施用的油性溶液。如果 期望，化合物可配制为鼻内施用的凝胶剂。用于肠胃外施用的制剂也可包 括用于含服施用的甘胆酸盐。
22对于口服施用，片剂或胶嚢可以常规方法与药学上可接受赋形剂 一起 配制，诸如粘合剂(如预胶凝化的玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羟丙甲基纤
维素)；填充剂(如乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)；润滑剂(如硬脂酸镁、滑 石或二氧化硅)；崩解剂(如土豆淀粉或淀粉乙醇酸钠)；或湿润剂(如十二烷 基^L酸钠)。可以本领域已知方法包衣片剂。用于口服施用的制品也可配制 为提供化合物的受控释放。
鼻制品可呈现液态形式或为干燥产品。雾化的水性悬浮液或溶液可包 括运载体或赋形剂以调节pH和/或张度。
在一些例子，本文提供的多肽可配制为持续释放剂型。例如，ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2多肽可配制为控释制剂。在一些例子，涂层、包封物 (envelope)或保护性基质(matrices)可配制为包含一种或多种本文提供的多 肽。可使用这类涂层、包封物和保护性基质以包被留置装置(indwelling devices),如支架、导管和腹膜透析袋。在一些例子，可将本文提供的多 肽并入聚合物物质、脂质体、微乳剂、微粒、毫微粒或蜡。
本文本还提供了编码本文提供的一种或多种多肽的分离的核酸。此处 所用的术语"分离的"对于核酸是指不与衍生它的生物体的天然存在的基因 组中紧邻的两序列(一个在5'端一个在3'端)紧邻的天然存在的核酸。例如， 分离的核酸可为但不限于任何长度的重组DNA分子，只要在天然存在的 基因组中正常直接连于该重组DNA分子侧翼的核酸序列之一被移除或不 存在。因此，分离的核酸包括但不限于作为独立于其它序列的单独分子(如 由PCR或限制性核酸内切酶处理产生的cDNA或基因组DNA片段)存在 的重组DNA,以及并入载体、自主复制质粒、病毒(如逆转录病毒、腺病 毒或疱渗病毒)或并入原核生物或真核生物基因组DNA的重组DNA。此 外，分离的核酸可包括作为杂合核酸序列或融合核酸序列 一部分的重组 DNA分子。
此处所用的术语"分离的"对于核酸还包括任何非天然存在核酸，因为 非天然存在核酸序列在自然界不存在，不具有在天然存在基因组中紧邻的 序列。例如，非天然存在核酸如工程化核酸被认为是分离的核酸。可使用常用分子克隆或化学核酸合成技术制备工程化核酸(如编码包括SEQ ID NO: 4、 6或8所列的氨基酸序列或由SEQIDNO: 4、 6或8所列的氨基 酸序列组成的多肽的核酸)。分离的非天然存在核酸可独立于其它序列，或 并入载体、自主复制质粒、病毒(如逆转录病毒、腺病毒或疱渗病毒)或并 入原核生物或真核生物的基因组DNA。此外，非天然存在核酸可包括作为 杂合核酸序列或融合核酸序列一部分的核酸分子。在例如cDNA文库或基 因组文库或包含基因组DNA限制酶切消化产物(restriction digest)的凝胶片 中存在于数百至数百万其它核酸中的核酸不被认为是分离的核酸。
此处所用的术语"核酸"是指RNA和DNA两者，包括mRNA、 cDNA、 基因组DNA、合成的(如化学合成的)DNA和核酸类似物。核酸可为双链 或单链的，为单链时可为有义链或反义链。此外核酸可为环状或线性的。 可在碱基部分、糖部分或磷酸酯主链修饰核酸类似物以改进例如核酸的稳 定性、杂交或溶解度。在碱基部分的修饰包括脱氧尿苷修饰脱氧胸苷，5-曱基-2'-脱氧胞苷和5-溴-2'-脱氧胞苷修饰脱氧胞苷。糖部分的修饰可包括 修饰核糖糖的2'羟基以形成2'-0-曱基糖或2'-0-烯丙基糖。脱氧核糖磷酸 酯主链可被修饰以产生吗啉代核酸，其中每个碱基部分连接至6-元吗啉代 环，或产生肽核酸，其中脱氧磷酸酯主链被假肽主链代替并保留四种碱基。 见于例^口 Summerton禾口 WellerJw/^em^iVwc/e/c Jc/(iZ>MgZ)ev., 7: 187-195 (1997);和Hyrup等.祝oorg朋.C/ e肌，4: 5- 23 (1996)。此外，脱氧磷 酸酯主链可被例如硫代磷酸酯或二硫代磷酸酯主链、亚磷酰胺 (phosphoroamidite)或烷基石粦酸三酯主链K替。
本文提供的核酸可包括SEQIDNO: 5所列的序列或由SEQ ID NO: 5 所列的序列组成。
通常，本文提供的分离的核酸长度为至少10核苷酸(如长度为10、 15、 20、 25、 30、 35、 40、 50、 75、 100、 200、 300、 350、 400、或更多核苷 酸)。小于全长的核酸分子可为有用的，例如为诊断目的作为引物或探针。 可通过标准技术制备分离的核酸分子，包括但不限于常用分子克隆和化学 核酸合成技术。例如可使用聚合酶链式反应(PCR)技术。PCR是指其中酶 促扩增靶核酸的方案或技术。从目标区域各端的序列信息或超出的序列信息通常用于设计寡核苷酸引物，该引物序列与待扩增的模板相反链相同。
PCR可用于从DNA和RNA扩增特定序列，包括总基因组DNA或总细胞 RNA的序列。引物长度通常为15至50核苷酸，但长度可从10核苷酸至 数百核苦酸变化。例如，引物长度可为12、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、 25、 26、 27、 28、 29、 30、 35、 40或45核苷酸。可以常规 方法从限制酶切消化产物纯化引物或可化学合成引物。为了扩增的最大效 率，引物通常为单链，但引物可为双链的。双链引物在用于扩增前首先变 性(如用热处理)以分离各链。普通PCR技术描述于例如PCR Primer: A Laboratory Ma歸l(PCR引物实验室手册)，Dieffenbach和Dveksler编辑， Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1995 。当使用RNA为模板来源时，可 使用逆转录酶来合成互补DNA(cDNA)链。如别处描述的，连接酶链式反 应、链置换扩增、自动维持序列扩增(self-sustained sequence replication)或 基于核酸序列的扩增也可用于获得分离的核酸(Lewis， Gewe"c ￡>igf>zeen'ng We體，12(9): 1 (1992); Guatelli等，尸rac. AW/.爿caof. OS^， 87: 1874-1878 (1990);和Weiss, S"'e"ce， 254: 1292(1991))。
也可化学合成分离的核酸，作为单独核酸分子(如应用亚磷酰胺技术以 3'至5'方向使用自动DNA合成)或作为一系列寡核苷酸。例如， 一对或多 对长寡核苷酸(如>100核苷酸)可合成为包含期望序列，每一对包含短的互 补性区段(如约15核苷酸)，如此当寡核苷酸对退火时形成双链体。DNA 聚合酶用于延伸寡核苷酸，形成每寡核苷酸对的单、双链核酸分子，随后 其可被连接入载体。
也可由诱变获得分离的核酸。例如，编码具有SEQIDNO: 1、 2、 3、 4、 6、 7或8所列序列的多肽的核酸序列可使用标准技术突变，例如，由 PCR的寡核苦酸定向诱变和/或位点定向诱变。见于Short Protocols in Molecular Biology (分子生物学简要方案)，第8章，Green Publishing Associates和John Wiley & Sons, Ausubel等编辑，1992。这种突变包括添 加、缺失、取代和其组合。
本文本还提供了包含本文提供的核酸的载体。此处所用的"载体"是复制子，如质粒、噬菌体或粘粒，另一DNA区段可插入其中以促使所插入 区段的复制。载体可为表达载体。"表达载体"为包括一个或多个表达控制
序列的载体，"表达控制序列"是控制和调节另一 DNA序列转录和/或翻译 的DNA序列。
在本文提供的表达载体中，核酸可可操作地连接于一个或多个表达控 制序列。此处所用的"可操作地连接"表示并入遗传构建体从而表达控制序 列有效地控制目标编码序列的表达。表达控制序列的例子包括启动子、增 强子和转录终止区。启动子是由DNA分子区域组成的表达控制序列，通 常在转录起始点上游的100核苷酸内(通常靠近RNA聚合酶II的起始位 点)。为了使编码序列处于启动子控制下，将多肽的翻译阅读框的翻译起始 位点置于启动子下游1至约50核苷酸之间可是必需的。增强子提供时间、 位置和水平方面的表达特异性。不同于启动子，增强子当位于与转录位点 不同距离时也起作用。增强子也可位于转录起始位点下游。当RNA聚合 酶能转录编码序列为mRNA时，编码序列"可操作地连接"细胞中的表达控 制序列并"处于其控制下"，随后可翻译mRNA为编码序列编码的多肽。
合适的表达载体包括但不限于质粒和病毒载体，其衍生自例如细菌噬 菌体(bacteriophage)、杆状病毒、烟草花叶病毒、疱渗病毒、细胞巨化病毒、 逆转录病毒、痘病毒、腺病毒和腺相关病毒。多种载体和表达系统可从如 下公司商业获得Novagen (Madison， WI)、 Clonetech (Palo Alto, CA)、 Stratagene (La Jolla, CA)和Invitrogen/Life Technologies (Carlsbad, CA)。
表达载体可包括设计为促进随后操作(如纯化或定位)所表达的核酸序 列的标签序列。如绿色荧光蛋白(GFP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、多组氨 酸、c-myc、血凝素或FlagTM标签(Kodak, NewHaven，CT)序列等标签序列 通常表达为与编码多肽的融合体。这种标签可插入在多肽的任何地方，包 括羧基端或氨基端。
本文本还提供了包含本文提供的核酸分子和/或核酸载体的宿主细胞。 术语"宿主细胞"意为包括可引入核酸分子或载体的原核细胞和真核细胞。 任何方法可用于引入核酸到细胞。例如，磷酸钙沉淀、电穿孔、热激、脂 质转染法、微注射和病毒介导的核酸转移可用于引入核酸到细胞。此外，棵DNA可如别处描述的直接体内递送到细胞(美国专利第5,580,859和 5,589,466号)。
參彭i
本文本提供了检测本文提供的多肽的方法和材料。这种方法和材料可 用于监控接受多肽作为治疗剂的哺乳动物的多肽水平。例如，可使用一个 或多个抗体免疫地检测本文提供的多肽(如ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2 多肽)。此处所用的术语"抗体"包括能结合于本文提供的多肽的表位决定子 的完整分子和其片段。术语"表位"是指抗原上结合抗体互补位的抗原决定 子。表位决定子通常由化学活性的表面分子组合(grouping)组成，如氨基酸 或糖侧链，且通常具有特定三维结构特征以及特定电荷特征。表位通常具 有至少5个连续氨基酸(连续表位)，或可选地为限定特定结构的一组非连 续氨基酸(如构象表位)。术语"抗体"包括多克隆抗体、单克隆抗体、人源化 抗体或嵌合抗体、单链Fv抗体片段、Fab片段和F(ab》片段。多克隆抗体 是包含在免疫动物血清中抗体分子的异源群体。单克隆抗体是针对抗原的 特定表位的抗体的同类群体。
对本文提供的多肽(如ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2)具有特异结合 亲合性的抗体片段可由已知技术产生。例如，F(ab')2片段可由胃蛋白酶消 化抗体分子而产生；Fab片段可由还原F(ab')2片段的二硫键而产生。或者 可构建Fab表达文库。见于例如，Huse等，>SWe"ce, 246: 1275 (1989)。产 生抗体或其片段后，由标准免疫检测方法测试其对本文提供的多肽的识 别，包括ELISA技术、放射免疫测定和蛋白质印迹法。见于Short Protocols in Molecular Biology(分子生物学简要方案)，第11章，Green Publishing Associates和John Wiley & Sons, Ausubel, F.M.等编辑，1992。
在免疫测定中，对本文提供的多肽具有特异结合亲合性的抗体或结合 这种抗体的第二抗体可直接或间接地被标记。合适的标记包括但不限于放 射性核素(如125I、 131I、 35S、 3H、 32P、 "P或I4C)、荧光部分(如荧光素、FITC、 PerCP、若丹明或PE)、发光部分(如Quantum Dot Corporation, Palo Alto, CA 供应的QdotTM毫微粒)、吸收限定波长的光的化合物、或酶(如碱性磷酸酶
或辣根过氧化物酶)。通过与生物素轭合可间接标记抗体，随后用标记有上
27述分子的抗生物素蛋白或链霉亲和素检测。检测或定量标记的方法取决于 标记的性质并是本领域已知的。检测器的例子包括但不限于X射线胶片、 放射性计数器、闪烁计数器、分光光度计、比色计、荧光计、发光计和光 密度计。本领域技术人员熟悉的这些方法的组合(包括"多层"测定)可用于增 强测定的灵敏度。
用于检测本文提供的多肽的免疫测定可以多种已知形式(format)进行， 包括三明治测定、竟争测定(竟争性RIA)或桥免疫测定(bridge immunoassay^见于例如，美国专利第5,296,347; 4,233,402; 4,098,876和 4,034,074号。检测本文提供的多肽的方法通常包括将生物样品与结合本文 提供的多肽的抗体接触，并检测多肽与抗体的结合。例如，对本文提供的 多肽具有特异结合亲合性的抗体可由本领域已知多种方法的任一种固定 于固相基质上，随后接触生物样品。多肽对固相基质上抗体的结合可通过 利用表面等离子体共振现象而检测，该现象导致结合后表面等离子体共振 强度变化，这可被合适仪器如Biacore装置(Biacore International AB， Rapsgatan， Sweden)定性或定量地^险测。或者，抗体一皮如上所述i也标i己和斗企 测。使用已知量的本文提供的多肽可产生标准曲线以帮助定量多肽水平。
在其它实施方式，其中捕获抗体固定在固相基质上的"三明治"测定用 于检测本文提供的多肽的存在、不存在或水平。固相基质可与生物样品接 触以使样品中任何目标多肽可结合固定抗体。结合于抗体的多肽的存在、 不存在或水平可使用对该多肽具有特异结合亲合性的"检测"抗体确定。在 一些实施方式，可使用对BNP和本文提供的多肽具有结合亲合性的捕获抗
检测抗体。应理解，在三明治测定中，捕获抗体不应与检测抗体结合相同 表位(或在多克隆抗体的情形是一定范围的表位)。因此，如果单克隆抗体 用作捕获抗体，则检测抗体可为另一单克隆抗体，其结合的表位与捕获单 克隆抗体结合的表位在物理上完全分离或仅与它部分重叠，或4企测抗体可 为多克隆抗体，其结合的表位不同于捕获单克隆抗体结合的表位或是捕获 单克隆抗体结合的表位之外的表位。如果多克隆抗体用作捕获抗体，则检 测抗体可为单克隆抗体，其结合的表位与捕获多克隆抗体结合的任一表位在物理上完全分离或与它部分重叠，或检测抗体可为多克隆抗体，其结合 的表位不同于捕获多克隆抗体结合的表位或是捕获多克隆抗体结合的表
位之外的表位。可以三明治ELISA测定、三明治蛋白质印迹测定或三明治 免疫^t性;险测测定进行三明治测定。
抗体(如捕获抗体)可结合的合适的固相基质包括但不限于，微量滴定 板、管、膜如尼龙或硝酸纤维素膜、和珠或粒子(如琼脂糖、纤维素、玻璃、 聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、磁性或能磁化的珠或粒子)。当使用自动免疫测定 系统时，^磁性或能^t化的粒子尤其有用。
对本文提供的多肽具有特异结合亲合性的抗体可由标准方法产生。通 常，多肽可如上所述地重组产生，或可由生物样品(如异源表达系统)纯化， 并用于免疫宿主动物，包括兔、鸡、小鼠、豚鼠或大鼠。例如，具有SEQ ID NO: 4、 6或8所列的氨基酸序列的多肽(或其长度为至少6氨基酸的片 段)可用于免疫动物。可用于增加免疫响应的各种佐剂取决于宿主物种，并 包括弗氏佐剂(完全和不完全)、矿物胶体(mineral gel)如氢氧化铝、表面活 性物质如溶血卵磷脂、复合多元醇(pluronic polyol)、聚阴离子、肽类、油 乳胶、钥孔戚血蓝素和二硝基苯酚。可使用本文提供的多肽和标准杂交瘤 技术制备单克隆抗体。尤其是，可由任何提供制备抗体分子的技术获得单 克隆抗体，诸如描述于Kohler等，A^/w ，256: 495 (1975)的持续培养的细 胞系、人类B-细胞杂交瘤技术(Kosbor等，/;wmmo/ogyr(^^y,4: 72(1983); Cole等，尸n c. iVa". Jcflc/. OS^， 80: 2026 (1983))和EBV-杂交瘤技术 (Cole等，"Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy(单克隆抗体和癌症治 疗)，"Alan R. Liss, Inc., pp. 77-96 (1983))。这种抗体可为任何免疫球蛋白类， 包括IgG、 IgM、 IgE、 IgA、 IgD及其任何亚类。可在体外和体内培养产生 单克隆抗体的杂交瘤。
用于检测本文提供的多肽的可选技术包括质i普-分光光度技术 (mass-spectrophotometric technique)，如电喷射电离(ESI)和基质辅助激光解 吸电离(MALDI)。见于例如，Gevaert等，￡7e"rap/^m^， 22(9): 1645-51 (2001); Chaurand等，JJw. &c.Mfl^5^"ram.， 10(2): 91-103 (1999)。用 于这种应用的质"i普4义可乂人Applied Biosystems (Foster City, CA); BrukerDaltronics (Billerica, MA)和Amersham Pharmacia (Sunnyvale, CA)获得。
本发明将由以下实施例进一步阐述，这不限制由权利要求书所描述的 本发明范围。
实施例
实施例1 -ABC-NP、 ABC-NP1和BC-NP2多肽的生物学效应
设计并合成具有图1-3所列的序列的多肽。图1所列的多肽称为 ABC-NP多肽；图2所列的多肽称为ABC-NP1多肽；图3所列的多肽称 为BC-NP2多肽。对正常犬检测静脉内输注ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2 的生物学效应。简要地说，对5只正常犬输入以IV弹丸施用的25吗每 kg的ABC-NP、 ABC-NP 1或BC-NP2。尿钠排泄、尿流量、平均动脉血压、 血浆加压素水平和肾血流量如别处所述的测量(Chen等，/ i^，Zo/. Aeg"/. /"tegr. Com尸.尸/^wW., 288: R1093-R1097 (2005)和Haber等，,C//w. ^W,."o/.脸威,29: 1349-1355 (2005))。将结果与IV弹丸施用25吗每 kg BNP治疗的犬获得的结果进行比较。
系统施用ABC-NP多肽导致了促排水和利尿钠效应(图4和5)。系统 施用ABC-NP多肽对平均动脉血压无影响(图6)。系统施用ABC-NP多肽 不提高血浆加压素水平(图7)。施用BNP后血浆加压素水平提高(图7)。 ABC-NP和BNP两者导致心充盈压相似的降低。
这些结果证实与BNP相比，ABC-NP多肽具有不同的肾效应，不具备 影响系统血压的能力。
ABC-NPl处理导致平均动脉血压降低和肾血流量增加(图6和8)。以 ABC-NPl处理的犬未观察到延长的促排水(aquretic)和利尿肾作用，以 ABC-NP处理的犬则观察到延长的促排水和利尿肾作用(图4和5)。以 ABC-NPl处理还指出了血浆加压素水平增加的强趋势(图7)。这些结果证 实CNP环中的REA氨基酸序列(图l)导致以ABC-NP观察到血管舒张作 用的缺乏。
以BC-NP2处理不导致平均动脉血压降低或肾血流量增加(图6和8)。因此，如同ABC-NP, BC-NP2不具备血管舒张效应。与ABC-NP相比， BC-NP2仅具有约50%的肾效应(图4和5)。这些结果证实ABC-NP的N-末端存在的ANP的5个氨基酸残基牵涉在ABC-NP的延长的促排水和利 尿作用中。
在体外检测ABC-NP、 ABC-NP1或BC-NP2对心脏成纤维细胞的生物 学效应。简要地说，将80-90%汇合的心脏成纤维细胞孵育于含有20 mmol/L N-[2-羟乙基]哌唤-N'[2-乙磺酸]、0.1%牛血清白蛋白和0.5 mmol/L 3-异丁基 -l-曱基黄嘌呤(Sigma)的hanks平衡盐溶液(InVitrogen)中。处理的细胞接受 ANP (10-6 M)、 BNP(1(T6M)、 CNP(10-6M)、 ABC-NP (1011 M、 10、或 l(T6 M)、 ABC-NP1 (l(T11 M、 l(T8 M或l(T6 M)或BC-NP2 (10-11 M、 l(r8M 或10-6 M)达10分钟。在6% TCA中裂解细胞并超声处理10分钟。在4倍 体积的醚中醚萃取样品四次，干燥，并在300 )iLcGMP测定緩沖液中重构。 使用竟争性RIA cGMP试剂盒(Perkin-Elmer, Boston, MA)测定样品。简要地 说，将样品与标准品用100 (iL抗-人类cGMP多克隆抗体和I'"-抗原孵育 18小时。将cGMP测定緩冲液加入样品，并以2500 rpm离心20分钟。吸 出游离的部分；对结合的部分计数；并确定浓度。根据稀释因子校正样品， 将值表示为pmole/mL。与ANP、 BNP或CNP没有交叉反应性，与cAMP、 GMP、 GDP、 ATP和GTP有0.001o/o的反应性。
以ABC-NP 1处理活化人类心脏成纤维细胞中的cGMP,而以ABC-NP 和BC-NP2处理未活化(图9-11)。这些结果证实ABC-NP1对人类心脏成纤 维细胞有生物学效应，而ABC-NP和BC-NP2两者对人类心脏成纤维细胞 均不表现为具有任何生物学效应。因此，ABC-NP1可具有诱导抗纤维变性 作用的能力，ABC-NP或ABC-NP2则可能不存在这样的能力。
实施例2-使用动物模型，ABC-NP、 ABC-NPl和
BC-NP2多肽的生物学效应
进一步在两个大型动物钠滞留模型中评价ABC-NP、 ABC-NP1或 BC-NP2输注的效应CHF的起搏的(paced)犬模型和模拟肝硬化和肾变病的钠滞留的犬模型。第一个模型是CHF的快速起搏模型，如别处所述的
(Chen等，Gycw/Wo", 100: 2443-2448(1999))。简要地说，将犬以240bpm 起搏10天以产生严重CHF的模型。将24只犬起搏，6只接受ABC-NP多 肽，6只接受ABC-NP1多肽，6只接受BC-NP2多肽，6只接受呋塞米(lasix) (作为利尿剂对照)。在输注时进行急性血液动力学研究，比较各组之间和 各犬之间在基线和输注时的值。第二个模型是具有钠滞留和腹水而不同时 发生心充盈压增加的TIVCC模型，如别处所述(Wei等，/尸/^w'o/., 273: R838-844 (1997))。在每只钠滞留犬模型，使用静脉内施用增加剂量直到 100 pmol.kg/分钟测试ABC-NP、 ABC-NP1和BC-NP2多肽。
实施例3 -治疗处于左心室重塑(remodeling)风险的患者
IV输注ABC-NP1多肽来治疗处于左心室重塑风险的患者(例如，心肌 梗塞患者)。在输注之前获取生命体征并进行实验室一企测以测量神经激素和 肾功能。进行MRI以测量左心室大小和功能。以0.001 pg/kg/分钟和1 (ig/kg/ 分钟之间的剂量开始静脉内输注ABC-NP1多肽。输注期间每两小时评价 生命体征。输注可持续72小时。在72小时内，在输注结束前取血以测量 神经激素和肾功能。1个月和6个月后患者返回，重复MRI以评价左心室 大小和功能。
实施例4-治疗心肾疾患
预期地以IV输注ABC-NP或BC-NP多肽治疗肾功能恶化发展、在急 性失代偿的心力衰竭背景中具有利尿剂抗性的患者。在输注之前获取生命 体征并进行实验室检测以测量电解质、血清肌肝、胱抑素(cystatin)和BNP 多肽水平。测量基线排尿量并评价尿电解质。开始静脉内输注ABC-NP或 BC-NP多肽。输注持续12至72小时，输注期间每2小时评价生命体征和 排尿量。输注期间每天评价药物水平(例如，ABC-NP或BC-NP多肽水平)、 BNP多肽水平、血清肌酐、胱抑素、血浆电解质和尿电解质。其它实施方式
应理解，尽管本发明已结合其详述进行了阐述，但前述的描述意为阐 释而非限制本发明范围，本发明范围由所附权利要求书的范围限定。其它 方面、优点和修饰都在以下权利要求书的范围内。
权利要求
1.一种长度少于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端至羧基末端的顺序包括(a)SEQ ID NO1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO1所列的序列，(b)SEQ ID NO2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO2所列的序列，和(c)SEQ ID NO3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO3所列的序列。
2. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括利尿钠活性。
3. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽不具备血管舒张活性。
4. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: l所列的序列。
5. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2所列的序列。
6. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 3所列的序列。
7. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: l所 列的序列、SEQ ID NO: 2所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
8. 根据权利要求1所述的多肽，其中所述多肽是大致纯的多肽。
9. 一种长度少于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端 至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 1所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 1 所列的序列，(b) SEQ ID NO: 7所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2 所列的序列，和(c)SEQIDNO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3 所列的序列。
10. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括利尿钠活性。
11. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 1 所列的序列。
12. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 7所列的序列。
13. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 3所列的序列。
14. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽包括SEQ ID NO: 1 所列的序列、SEQIDNO: 7所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
15. 根据权利要求9所述的多肽，其中所述多肽是大致纯的多肽。
16. —种长度少于45氨基酸残基的多肽，其中所述多肽以从氨基末端 至羧基末端的顺序包括(a) SEQ ID NO: 2所列的序列或有不多于8个错配的SEQ ID NO: 2 所列的序列，和(b) SEQ ID NO: 3所列的序列或有不多于3个错配的SEQ ID NO: 3 所列的序列。
17. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括利尿钠活性。
18.根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽不具备血管舒张活性。
19. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽不具有SEQIDNO: 1所列的序列。
20. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2所列的序列。
21. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 3所列的序列。
22. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽包括SEQIDNO: 2 所列的序列和SEQ ID NO: 3所列的序列。
23. 根据权利要求16所述的多肽，其中所述多肽是大致纯的多肽。
24. —种分离的核酸，其编码根据权利要求l、 9或16所述的多肽。
25. —种载体，其包括编码根据权利要求1、 9或16所述的多肽的核酸。
26. —种宿主细胞，其包括编码根据权利要求1、 9或16所述的多肽的核酸。
27. 根据权利要求26所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞是真核宿主细胞。
28. —种药物组合物，其包括药学上可接受的运载体和根据权利要求 1、 9或16所述的多肽。
29. —种增加哺乳动物的促排水和利尿钠活性而不降低血压的方法，
30. —种治疗患有心血管疾患或肾疾患的哺乳动物的方法，其中所述 方法包括向所述哺乳动物施用根据权利要求1、 9或16所述的多肽。
31. 根据权利要求30所述的方法，其中所述哺乳动物患有心血管疾病。
32. 根据权利要求30所述的方法，其中所述哺乳动物患有充血性心力衰竭。
33. 根据权利要求30所述的方法，其中所述哺乳动物患有心肌梗塞、 冠心病、动脉疾病、肾机能不全、癌症或钠和水滞留状态。
34. —种支架，其包括包含根据权利要求1、 9或16所述的多肽的涂层。
35. —种透析袋，其包括包含根据权利要求1、 9或16所述的多肽的涂层。
36. —种微粒或毫微粒，其包括根据权利要求l、 9或16所述的多肽。
全文摘要
本发明提供了促排水和利尿钠多肽。例如，本发明提供了具有促排水和/或利尿钠活性的多肽。在一些例子，本发明提供的多肽可具有促排水和利尿钠活性而不具备降低血压的能力。本发明还提供了在哺乳动物中诱导促排水和/或利尿钠活性的方法和材料。
文档编号C07K14/00GK101600731SQ200780040226
公开日2009年12月9日 申请日期2007年9月7日 优先权日2006年9月8日
发明者J·C·小伯内特, 陈鸿豪 申请人:梅约医学教育与研究基金会