碱性乙酰胆碱受体亚型选择性的二氮杂二环烷的酰胺的制作方法

专利名称：：碱性乙酰胆碱受体亚型选择性的二氮杂二环烷的酰胺的制作方法
技术领域：
：本发明涉及与神经烟碱性乙酰胆碱受体结合并调节其活性的化合物，制备这些化合物的方法，包含这些化合物的药物组合物和使用这些化合物治疗种类广泛的疾病和障碍，包括与中枢神经系统(CNS)机能障碍有关的那些的方法。
背景技术：
：乾向神经烟碱性受体(NNRs)，也称烟碱性乙酰胆碱受体(nAChRs)的化合物的治疗可能性已经是近来某些综述的主题(参见Breining等人，爿/7/2.yep.40:3(2005)，Hogg和Bertrand，Cwrr./rwgra/^e":Wewo人"/sorcT.3:123(2004),Suto和Zacharias，fipe"一'/.r力er.Targe"8:61(2004),Dani等人，A/離g.颜.C力e迈."〃.14:1837(2004),Bencherif和Schmi11，C"/\r.Zr"《ra/^e".'^e"roA"/sor么1:349(2002))。已经提出丽R配体可以治疗的各种适应症是认知障碍，包括阿尔茨海默病、注意力缺陷障碍和精神分裂症(Newhouse等人，@//z.户力ar迈aco/.4:36(2004)，Levin和Rezvani，C"rr.Zrw《Targe^e"ro/."/sor^1:423(2002)，Graham等人，Cwrr."n/gr"ge".'6WJ^〃ro人"/son/.1:387(2002)，Ripoll等人，#ec/.(7;h./l20(7):1057(2004)，和McEvoy和Allen，C"rr.Zr"g7si^e",C;WiVe"/^/.Z2:ord.1:433(2002));疼痛和炎症(Decker等人，7b;.#e《C力e迈.4(3):369(2004)，Vincler，fA77e"^//2.//2reW.Zr"^y14(10):1191(2005)，Jain，Cwrr.^/zl//7k细W5:76(2004),Miao等人，肠旭c/e腳123:777(2004));抑郁和焦虑(Shytle等人，￥oA户syc力/"r/7:525(2002)，Damaj等人，尸力ar则co人66:675(2004),Shytle等人，Ze/re^.i/LT/eO^16:89(2002));神经变性(O，Neill等人，C"r二/7r"gra/^e";CA^#ei/ro/./"orcT.1:399(2002)，Takata等人，/.户力ar廳co/.Ajst.r力er.306:772(2003),Marrero等人，/.户力ar迈aco/.Azp.309:16(2004));帕金森病(Jonnala和Buccafusco，/.^ei/rc^c/,/fes.66:565(2001));成瘊(Dwoskin和Crooks,肠c力e瓜泡簡co/.63:89(2002)，Coe等人，A/瞎g.C力e迈.15(22):4889(2005));肥胖(Li等人，Cwrr.7b;7.#ecT.C力e迈.3:899(2003));和图雷特综合征(Sacco等人，/./^/c力op力ar肌co/.18(4):457(2004)，Young等人，67/".23(4):532(2001))。某些烟碱性化合物的局限在于它们会伴随有各种不希望的副作用，例如，通过刺激肌肉和神经节受体。期望的是有可以用于预防和/或治疗各种疾病或障碍(例如，CNS障碍)，包括緩解这些障碍的症状的化合物、组合物和方法，其中这些化合物显示了具有有利效果(例如，对于CNS的功能)的烟碱样药理学，但是没有显著的相关副作用。此外还需要提供影响CNS功能而不显著影响那些受体亚型的化合物、组合物和方法，其中那些受体亚型可能会诱导不希望的副作用(例如，对心血管和骨骼肌位点有可感知的活性)。本发明提供了这样的化合物、组合物和方法。发明简述本发明提供了一些酰胺化合物，其可以是由某些杂芳基羧酸和某些二氮杂二环烷，特别是3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷和3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷形成的。这些酰胺化合物对于CNS中发现的ot4P2亚型的NNRs以高亲和力相结合，与a7NNR亚型相比，其显示了a4P2亚型的选择性，其中a7NNR亚型也是在CNS中发现的。本发明也涉及由这些化合物制备的药学可接受的盐及其药物组合物，其可以用于治疗和/或预防范围广泛的疾病或障碍，特别是那些特征在于烟碱性胆碱能神经传递功能障碍或烟碱性胆碱能神经元的变性。也提供了在需要这样治疗的哺乳动物中治疗和/或预防障碍，例如CNS障碍的方法，并且也可以用于治疗某些疾病(例如，緩解疼痛和炎症)的方法。该方法涉及给受试者施用治疗有效量的化合物(包括盐)或包含这些化合物的药物组合物。此外，提供了治疗障碍的方法，其中这些障碍选自与年龄有关的记忆缺损、轻度认知缺损、早老性痴呆(早发性阿尔茨海默病)、老年痴呆(阿尔茨海默型痴呆)、Lewy体性痴呆、血管性痴呆、阿尔茨海默病、中风、AIDS痴呆综合征、注意力缺陷障碍、注意力缺陷伴多动障碍、诵读困难、精神分裂症、精神分裂症样精神障碍和情感分裂性精神障碍。此外提供了一种治疗障碍的方法，其中治疗障碍选自治疗轻度到中度阿尔茨海默型痴呆、注意力缺陷障碍、轻度认知缺损和与年龄有关的记忆缺损。该药物组合物掺入了本发明的化合物，当以有效量使用本发明的化合物时，其与受试者的相关烟碱性受体位点相互作用，因此可以发挥治疗剂的作用，用于治疗和预防种类广泛的疾病和障碍。该药物组合物为患这些障碍和显示这些障碍的临床现象的个体提供了治疗益处，在这些组合物中的化合物，当以有效量使用时，可以(i)显示了烟碱性药理学，影响相关的烟碱性受体位点(例如，发挥药理激动剂的作用以激活烟碱性受体)，和/或(ii)诱导神经递质分泌因此预防和抑制了与那些疾病有关的症状。此外，这些化合物有可能(i)增加患者脑中烟碱样胆碱受体的数量，(ii)显示神经保护效果，和/或(iii)当以有效量使用时，不会导致可感知的不良副作用(例如，显著升高血压和心率，对胃肠道的显著的负面效应，和对骨骼肌的显著效果)。包含本发明的化合物的药物组合物据信对于预防和治疗种类广泛的疾病和障碍是安全和有效的。在如下所述的详述和实施例中说明了本发明的上述和其他方面。附图简述附图1的图，显示了在口服N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷治疗的大鼠中，对目标识别进行研究的结果。该结果显示了识别指数(recognitionindex)(%)相对于剂量(mg/kg)的函数。附图2的图，显示了在口服N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷治疗的大鼠中，对目标识别进行研究的结果。该结果显示了识别指数(％)相对于剂量(mg/kg)的函数。发明详述如下详细描述了亚型选择性化合物，包括这些化合物的药物组合物，制备这些化合物的方法，和使用这些化合物治疗和/或预防的方法。参考下列优选实施方案将会更好地理解本文所述的化合物和方法。下列定义将会用于定义本发明的范围在本说明书中，除非另有说明，术语"烷基"包括直链和支链的烷基。这些可以但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基或异己基。因此术语"Ch坑基"包括具有1到4个碳原子的烷基，包括但不限于，甲基、乙基、正丙基、异丙基或叔丁基。在本说明书中，除非另有说明，术语"环烷基"涉及任选取代的，部分或完全饱和的单环、二环或桥接的烃环系统。术语"CH环烷基"可以但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。在本文中使用时，杂环基包含3到IO元，其包括一个或多个选自氧、硫和氮的杂原子。适当的杂环基部分的例子包括但不限于，哌啶基、吗啉基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、异噻唑烷基、噻唑烷基、异噁唑烷基、噁唑烷基、哌嗪基、噁烷基(四氢吡喃基)和草脲胺基(oxolanyl)(四氬吹喃基)。在本文中使用时，Cw烷氧基包含在直链或直链中的l到6个碳原子，也包括Cw环烷氧基和包含(V6环烷基部分的烷氧基。例子包括但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、异丁氧基、环丙基甲氧基、烯丙氧基或炔丙氧基。在本文中使用时，"芳香基"涉及3到10，优选5和6-元环芳香和杂芳香环。在本文中使用时，"包含芳香基的物质，，涉及是或包含芳香基的部分。因此，在该定义中包括苯基和千基部分，它们都是或包括芳香基，在该定义中包括吡啶基和嘧啶基，它们都是芳香基的一个亚类-杂芳基。在本文中使用时，芳基选自苯基、萘基和茚基。在本文中使用时，杂芳基包含3到10元，优选5或6元，其包括一个或多个选自氧、硫和氮的杂原子。适当的5-元环杂芳基部分的例子包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异镶哇基、噁二哇基、四唑基、三唑基和吡唑基。适当的6-元环杂芳基部分的例子包括吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。9-元环杂芳基部分的例子包括苯并咪唑基、吲嗪基、吲哚基、嘌呤基和二氢吲哚基。10-元环杂芳基部分的例子包括喹啉基和异喹啉基。应当注意的是，在整个说明书中，选择本发明的化合物的环上的取代基的数量和性质以避免立体上不希望的组合。本发明的某些化合物的名称是在计算机软件(ACDLabs8.0/Name(IUPAC))辅助下得到的。适当的药学可接受的盐的例子包括无机酸加成盐，例如盐酸盐、溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐和硝酸盐；有机酸加成盐例如乙酸盐、半乳糖二酸盐(galactarate)、丙酸盐、琥珀酸盐、乳酸盐、羟乙酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、曱磺酸盐、对甲苯磺酸盐和抗坏血酸盐；与酸性氨基酸的盐，例如天冬氨酸盐和谷氨酸盐；碱金属盐例如钠盐和钾盐；碱土金属盐例如镁盐和钙盐；铵盐；有机碱性盐例如三甲胺盐、三乙胺盐、吡啶盐、曱基吡啶盐、二环己胺盐和N，N'-二节基乙二胺盐；和与碱性氨基酸的盐，例如赖氨酸盐和精氨酸盐。在一些情况下，该盐可以是水合物或乙醇溶剂化物。代表性的盐如美国专利Dull等人的5,597,919，Dull等人的5，616，716和Ruecroft等人的5，663，356所提供。式I的化合物及其药学可接受的盐可以以溶剂化，例如水合，以及非溶剂化的形式存在，本发明包括所有这些形式。在本文中使用时，"激动剂"是兴奋它的结合伴侣，典型地是受体的物质。兴奋如在特定的测定的背景下所定义，或者由本文讨论的文献中可以是显而易见的，所述的讨论对于在基本类似情况下作为特定结合伴侣的"激动剂"或"拮抗剂"的因子或物质进行了比较，而这些是本领域技术人员可以理解的。兴奋可以定义为由激动剂或部分激动剂与结合伴侣的相互作用而诱导的特定效果或功能的增强，可以包:l舌别构效应。在本文中使用时，"拮抗剂"是抑制它的结合伴侣，典型地是受体的物质。抑制如在特定的测定的背景下所定义，或者由本文讨论的文献可以是显而易见的，所述的讨论对于在基本类似情况下作为特定结合伴侣的"激动剂"或"拮抗剂"的因子或物质进行了比较，而这些是本领域技术人员可以理解的。抑制可以定义为由拮抗剂与结合伴侣的相互作用而诱导的特定效果或功能的减小，可以包括别构效应。在本文中使用时，"部分激动剂"或"部分拮抗剂"是分别为其结合伴侣提供一定水平的兴奋或抑制的物质，其对于结合伴倡分别是不完全或不全然激动或拮抗的。应当理解的是，兴奋，以及因此，抑制实际上可以定义任何物质或物质的种类，并将它们定义为激动剂、拮抗剂或部分激动剂。在本文中使用时，"内在活性"或"效力"涉及结合伴侣复合物的生物学效应的一些测定值。至于受体的药理学，内在活性或效力所应当限定的范围将取决于结合伴侣(例如，受者/配体)复合物的范围，并考虑相对于特定生物学结果的活性。例如，在一些情况中，根据所涉及的特定的第二信使系统，内在活性可以不同。参见Hoyer，D.和Boddeke，H.，7>e/3^尸力sr/ffsco人Sc/.14(7):270-5(1993)。这些根据上下文的特定评价是否相关，以及它们在本发明的上下文中如何相关对于本领域普通技术人员是显而易见的。在本文中使用时，受体的调节包括受体的激动、部分激动、拮抗、部分拮抗或逆转激动。在本文中使用时，本文所述的化合物介导而释放的神经递质包括但不限于，乙酰胆碱、多巴胺、去甲肾上腺素、5-羟色胺和谷氨酸，本文所述的化合物是作为CNSNNRs的oc4p2亚型的调节剂而起作用。化合物本文所述的化合物是由某些杂芳基羧酸和某些二氮杂二环烷形成的酰胺化合物。这些化合物可以是如式I所代表的其中n的值是G或1，并且Cy是选自2-呋喃基、3-呋喃基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、1，3，4-噁二唑-2-基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、3-异噻唑基、4-异噻唑基、5-异噻唑基、1,3,4-噢二唑-2-基、1，2，4-噢二唑-3-基、1，2，4-瘗二唑-5-基和4-吡啶基的杂芳基，其中杂芳基任选被高达3个的独立地选自C卜6烷基、取代的CH烷基、Ch蜂基、取代的Ch烯基、Cw炔基、取代的C2-6炔基、C3-8杂环基、取代的CH杂环基、CH环烷基、取代的Cw环烷基、C5—1Q芳基、Cw。杂芳基、取代的C5—i。芳基、取代的Cw。杂芳基、d—6烷基-C5—10芳基、C卜6烷基-Cs—i。杂芳基、取代的d—6烷基-d!。芳基、取代的d-6烷基-Cw。杂芳基、Cw。芳基-Cw烷基、Cw。杂芳基-d-6烷基、取代的Cw。芳基-d-6烷基、取代的c杂芳基-CH烷基、卣素、-or、-NR'R〃、-CF3、-CN、-N02、-CW、-SIT、-N3、-C(=0)膨R''、-NR'C(=0)IT'、-C(=0)『、-C(=0)0R'、-0C(=0)IT、-0C(=0)NR'R''、-NR'C(=0)0R''、-S02R'、-S02NR'R〃和-NR'S0W的非氢取代基取代，其中R'和R"独立地选自氢、Cw烷基、C3—8环烷基、C3-8杂环基、Cw。芳基、Cw。杂芳基或Cw。芳基-Cw烷基，或IT和R〃和与它们相连的原子在一起可以形成Ch杂环，其中用于烷基、烯基、炔基、杂环基、环烷基、芳基、杂芳基、烷基芳基、烷基杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基时，术语"取代的"是指被一个或多个烷基、芳基、杂芳基、闺素、-OR'和-NR'R"基取代，或其药学可接受的盐。本发明的一个实施方案涉及式I的化合物，其中n的值是0或1，Cy是选自2-呋喃基或3-呋喃基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、1，3,4-噁二唑-2-基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、2-噻唑基、4-瘗唑基、5-瘗峻基、3-异噻唑基、4-异噻唑基、5-异噻唑基、1，3，4-噻二唑-2-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基和4-吡啶基的Cw。杂芳基，其中杂芳基任选被高达3个的独立地选自Cw烷基、取代的C卜6烷基、卣素和用笨基取代的Ch炔基的非氬取代基取代。在一个实施方案中，n是0。在另一个实施方案中n是1。在一个进一步的实施方案中，Cy是2-呋喃基。在另一个实施方案中Cy是卤素取代的2-呋喃基。在一个实施方案中Cy是氯取代的2-呋喃基。在一个进一步的实施方案中，n是0并且Cy是任选被卣素取代的2-呋喃基。在一个实施方案中n是1并且Cy是任选被卣素取代的2-呋喃基。在另一个实施方案中2-呋喃基是5位取代的。在另一个实施方案中R'和R"独立地选自曱基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。在一个进一步的实施方案中R'和R"独立地选自苯基或节基。在一些情况中，本发明的化合物是手性的。本发明包括这些化合物的所有对映体或非对映体形式。本发明的代表性化合物包括下列化合物N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(3-曱基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(5-甲基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(3-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(3-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(5-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(4-苯基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(5-(2-吡啶基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0〗辛烷，N-(5-(苯基乙炔基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(呋喃-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噁唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(异噁唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(异噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(3-溴异噁唑-5-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(3-甲氧基异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(1，2，4-噁二唑-3-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(l，2，4-噁二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(l，3，4-噁二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(噻唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(异噻唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(异噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0〗辛烷，N-(异噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(1，2,4-噻二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(1，2，4-噻二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(l，3，4-噻二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(吡啶-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，及其药学可接受的盐。本发明的代表性化合物也包括下列化合物N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(3-甲基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(5-曱基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(3-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(3-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(5-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(4-苯基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(5-(2-吡啶基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(5-(苯基乙炔基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(呋喃-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噁唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噁唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噁唑-4-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(3-溴异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(3-曱氧基异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l，2,4-噁二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l，2，4-噁二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(1，3，4-噁二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(噻唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噻唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷,N-(异噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(1，2，4-噻二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，16N-(l，2，4-噻二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(l，3，4-噻二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(吡啶-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，及其药学可接受的盐。一个实施方案涉及化合物N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷或其药学可接受的盐。另一个实施方案涉及化合物N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷或其药学可接受的盐。化合物的制备可以通过单-保护的二氮杂二环(即，两个胺官能团中的一个通过适当的衍生化而具有非反应性)与适当的官能化的杂芳基酰基氯或其他活性的羧酸衍生物的偶合来制备本发明的化合物。很多制备单-保护的二氮杂二环的方法都可以用于制备本发明的方法。在Colon-Cruz等人的PCTW002/070523和Zhenkun等人U.S.申请2006/0019985的中描述了合成适当保护的3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的方法，其中用多聚甲醛和和N-节基甘氨酸或或N-(甲氧基甲基)-N-(三曱基甲硅烷基曱基)苄胺来缩合N-苄基马来酰亚胺，以产生3，7-二节基-3,7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷-2，4-二酮(也称作2，5-二千基四氢吡咯并[3，4-c]吡咯-1，3-二酮)。该中间体的后续转化可以根据数种途径。在一种情况中，用氯甲酸a-氯乙酯(a-chloroethylchloroformate)处理来产生3-节基-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷-2，4-二酮(也称作2-节基四氢吡咯并[3，卜c]吡咯-1，3-二酮)，然后继续将其还原(使用硼烷-二曱基硫复合物)，转变成其N-(叔丁氧基羰基)衍生物，并氢化(以除去第二个千基)。这产生了N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3,3.O]辛烷，其可以用于与羧酸和它们的衍生物偶合，以产生本发明的化合物。可替代地，可以还原3，7-二节基-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷-2，4-二酮(用氢化铝锂)，部分氢化(以除去一个千基)，转变成其N-(叔丁氧基羰基)衍生物，并氢化(以除去第二个千基)，以产生N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷。加入和除去节基、叔丁氧基羰基和其他胺保护基的其他方法是本领域技术人员公知的，此外还在T.W.Greene和P.G.M.Wuts，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3rdEdition,JohnWiley&Sons,NewYork(1999)中进行了描迷。在Schrirapf等人的U.S.申请2004/0186107和Basha等人的2005/0101602中已经描述了N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的可替代制备方法，其包括将马来酰亚胺和N-(曱氧基甲基)-N-(三曱基曱硅烷基甲基)爷胺的缩合，得到7-千基-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷-2，4-二酮(也称作5-节基四氢吡咯并[3，4-c]吡咯-l，3-二酮)。随后用还原剂(例如，氢化铝锂)处理，得到3-苄基-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，它的游离胺可以由叔丁氧基羰基保护，然后通过氢解除去千基保护基。在这些缩合反应中可以用马来酸酯来替代马来酰亚胺。因此，根据Schaus等人的PCTW096/007656,用N-节基甘氨酸与多聚甲醛和马来酸二甲酯缩合得到N-节基-顺式-3，4-吡咯烷二羧酸二甲酯。然后可以用例如氢化铝锂还原该化合物，得到二醇，其可以在三乙胺存在下与曱磺酰氯进一步反应，得到相应的二甲磺酸酯。进一步用氨水和热处理，得到N-苄基保护的3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷。如上所述，这可以转变成N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷。3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷(双环哌啶(bispidine))的适当的衍生物可以用于制备本发明的化合物。一种这样的衍生物是N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，其可以以多种方法来制备。一种合成方法是如Stead等人在Org.力e〃.7:4459(2005)中所述，通过N-节基-N，-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷来进行。因此，N-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-酮，节胺和多聚甲醛之间的曼尼西反应得到了N-苄基-N，-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1〗壬烷-9-酮，连续用对曱苯磺酰肼和硼氢化钠对其进行处理(以除去羰基氧)，得到N-苄基-N，-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷。如上所述，可以除去节基，以提供N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷。适合转化成N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷或另一种单-保护的衍生物的二氮杂二环[3.3.l]壬烷的替代性合成方法已经在Jeyaraman和AvilainC/e/z7.We7.81(2):149-174(1981)和Berlin等人的美国专利5,468，858中进行了描述。制备本发明的酰胺的一种方法是将N-(叔丁氧基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷或N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷与适当官能化的羧酸偶合，然后除去叔丁氧基羰基保护基。很多这样的羧酸都是商业可购得的，其他则通过本领域技术人员已知的方法很容易地制得。制备酰胺时胺与羧酸的缩合典型地需要使用1-羟基苯并三唑(HOBt)和适当的活化剂，例如N，N，-二环己基碳二亚胺(DCC)、(苯并三唑-l-基氧基)三(二曱基氨基)磷六氟磷酸盐(B0P)、(苯并三唑-l-基氧基)三吡咯烷磷六氟磷酸盐(PyB0P)、0-(苯并三唑-l-基)-N，N，r，『-二(四亚甲基)脲六氟磷酸盐(HBPyU)、0-(苯并三唑-1-基)-N，N，N、fT-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)、0-(苯并三唑-l-基)-N,N，N、『-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)，或(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)(EDCI)。其他活化剂是本领域技术人员公知的(例如,参见Kiso和Yajima，Peptides,pp39-91，AcademicPress,SanDiego，CA(1995))。可替代地，可以通过单-保护的二氮二环与适当的官能化的酰基氯偶合来形成酰胺键，其中酰基氯可以是商业购买的或者可以使由适当的官能化的羧酸转化而制备的。酰基氯可以通过用例如亚硫酰氯或草酰氯以及其他试剂处理适当的羧酸而制得。在形成酰胺后，用含水或者无水酸除去保护基(例如，叔丁氧基羰基)可以得到本发明的化合物。有机合成领域的技术人员将会理解，存在很多制备本发明的化合物的方法，其中所述化合物用适合各种诊断用途的放射性同位素标记。因此，使用上述的方法，将"C-或，-标记的杂芳羧酸和N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3，3.O]辛烷或N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷缩合，并随后除去叔丁氧基羰基可以制备适合在正电子发射摄影术断层扫描中使用的化合物。治疗方法
技术领域：
：本发明的化合物是CNS的特征性物质a4P2NNR亚型的调节剂，可以在患有或对这些疾病或障碍敏感的受试者中，通过调节a4P2NNRs，用于预防和/或治疗各种疾病或障碍，包括那些CNS的疾病或障碍。这些化合物具有选择性地与ct4p2NNRs结合的能力，并表达烟碱的药理学(例如，作为激动剂、部分激动剂、拮抗剂等等发挥作用)。例如，当以有效量施用于需要的患者时，本发明的化合物在某种程度上可以预防CNS障碍的发展(即，提供保护效果)，改善CNS障碍的症状，和/或改善CNS障碍的复发。本发明的化合物可以用于治疗和/或预防那些已经被提出由其他类型的烟碱性化合物作为治疗剂的类型的疾病和障碍。参见，例如，在前述"发明背景，，部分中所列出的参考文献，以及Williams等人，细《iV函尸er，c.7(4):205(1994)，Arneric等人，6W"考b.1(1):1-26(1995)，Arneric等人，^rp.Op/",/"re".Aru^5(1):79-100(1996),Bencherif等人，/.尸力ar则co/.i5^p.r力e八279:1413(1996)，Lippiello等人，/.P力ar脂co7.f,/.7力er.279:1422(1996)，Damaj等人，/.尸力ar脂co厶fz;7.7Ter.291:390(1999);Chiari等人，he"細/。/柳91:1447(1999)，Lavand，homme和Eisenbach，爿i3e"Aes/'o/c^F91:1455(1999),Holladay等人，/.#ecT.C力e瓜40(28):4169-94(1997)，Bannon等人，iW露e279:77(1998)，PCTW094/08992，PCTW096/31475，PCTW096/40682和Bencherif等人的U.S.5，583，140,Dull等人的5，597，919,Smith等人的5,604，231和Cosford等人的5，852，041，将它们的公开内容以整体通过参考引入本文。该化合物和它们的药物组合物可以用于治疗和/或预防各种CNS障碍，包括神经变性障碍、神经精神性障碍、神经病学障碍和成瘾。该化合物和它们的药物组合物可以用于治疗和/或预防认知缺损(年龄相关性及其他)、注意力障碍和痴呆(包括由于传染原或代谢紊乱而导致的那些)；提供了神经保护作用；用于治疗惊厥和多发性大脑梗塞；治疗情绪障碍、强迫症和成瘾行为；提供了止痛作用；用于控制炎症(例如由细胞因子和核因子kappaB介导)和治疗炎性障碍；提供了緩解疼痛作用；并用于治疗感染(作为抗感染剂，用于治疗细菌、真菌和病毒感染)。本发明的化合物和药物组合物可以用于治疗和/或预防的障碍、疾病和病症是与年龄有关的记忆缺损、轻度认知缺损、早老性痴呆(早发性阿尔茨海默病)、老年痴呆(阿尔茨海默型痴呆)、Lewy体痴呆、HIV-痴呆、血管性痴呆、阿尔茨海默病、中风、AIDS痴呆综合征、注意力缺陷障碍、注意力缺陷伴多动障碍、诵读困难、精神分裂症、精神分裂症样精神障碍、情感分裂性精神障碍、帕金森综合症包括帕金森病、匹克病、亨廷顿舞蹈病、迟发性运动障碍、运动过度、进行性核上性麻痹、库杰二氏病、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、癫痫、躁狂症、焦虑、抑郁、惊恐障碍、双向性精神障碍、一般焦虑症、强制性障碍、暴怒发作、图雷特综合症、孤独症、药物和酒精成瘾、烟草成瘾、肥胖、恶病质、牛皮癣、狼疮、急性胆管炎、口腔炎、哞喘、溃疡性结肠炎、炎性肠病、隐窝炎、病毒性肺炎和关节炎(例如，类风湿性关节炎和骨关节炎)、内毒素血症、脓毒症、动脉粥样硬化、特发性肺纤维变性和肿瘤形成。有利的是，治疗或预防疾病、障碍和病症的同时，不会有可感知的不利副作用(例如，显著升高血压和心率，对胃肠道的显著负面效应，和对骨骼肌的显著效果)。当以有效量使用时，本发明的化合物可以调节a4P2NNRs的活性，同时不会与烟碱性亚型有可感知的相互作用，其中所述烟碱性亚型特征性地作用于人神经节(如它们缺乏引导肾上腺嗜铬组织中的烟碱性功能的能力所证明的)或骨骼肌(如它们缺乏引导在表达肌肉型烟碱性受体的细胞制备物中的烟碱性功能的能力所证明的)。因此，这些化合物能够治疗和/或预防疾病、障碍和病症，同时不引发与对神经节和神经肌肉部位的活性有关的显著的副作用。因此，施用这些化合物为治疗某些疾病、障碍和病症，同时避免某些副作用提供了治疗窗。也就是说，有效剂量的化合物足以为这些疾病、障碍或病症提供所需的效果，但是不足以(即，不以足够高的水平)提供不希望的副作用。因此，本发明提供了式I的化合物或其药学可接受的盐在治疗(例如，上述的治疗)中使用的应用。在另一个方面，本发明提供了式I的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗CNS障碍(例如上述的障碍、疾病或病症)的药物中的应用。在一个进一步的方面，本发明提供了式I的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗轻度到中度阿尔茨海默型痴呆、注意力缺陷障碍、轻度认知缺损和与年龄有关的记忆缺损的药物中的应用。诊断用途该化合物可以用于诊断组合物，例如探针，特别是当修饰它们以包含适当的标记物时。探针可以用于，例如，确定特异性受体，特别是cc4p2受体亚型的相对数量和/或功能。出于这种目的，本发明的化合物最优选是用放射性同位素部分例如UC、1SF、76Br、1231或1251标记的。可以用适合所使用的标记物的已知检测方法来检测所施用的化合物。检测方法的例子包括正电子断层扫描术(PET)和单光子发射计算机层摄影术(SPECT)。上述的放射标记物可以用于PET(辦如，"C、，或76Br)和SPECT(辦如，1231)成像，其中半衰期分别是，"C约20.4分钟，，约109分钟，1231约13小时和76Br约16小时。需要高度特异性的活性来使选择性受体亚型在非-饱和浓度下显影。所施用的剂量典型地在毒性范围之下，提供了高对比度的影像。期望该化合物能够以非毒性水平施用。以放射标记成像领域技术人员已知的方式来进行剂量的确定。参见，例如London等人的U.S.5,969,144。可以用已知4支术施用该化合物。参见，例如London等人的U.S.5，969，144。该化合物可以在配制的组合物中施用，所述组合物掺入了其他成分，例如在配制诊断组合物中有用的那些类型的成分。实施本发明有用的化合物最优选是以高纯度的形式使用的。参见，Elmalch等人的U.S.5，853,696。在该化合物施用于受试者(例如，人类受试者)后，在受试者体内存在的化合物可以显影，并通过适当的技术定量，以指示选择性NNR亚型的存在，量和功能。除了人，该化合物也可以施用于动物，例如小鼠、大鼠、狗和猴子。可以用任何适当的技术和装置来进行SPECT和PET显影。参见Villemagne等人，In:Arneric等人.(Eds.)肠r歸7^7/70i^"/7/〃es,^^"-Z^Gi^《,和Elmalch等人的U.S.5，853，696，以得到代表性的显影技术的内容。;改射性标记的化合物以高亲和力与选择性NNR亚型(询/如，a4P2)结合，优选以可忽略不计的非特异性结合力与其他烟碱样胆碱受体亚型(例如，与肌肉和神经节那些有关的受体亚型)结合。这样，该化合物可以用作受试者体内，烟碱样胆碱受体亚型非侵入性显影的试剂，特别是用于大脑内与各种CNS疾病和障碍有关的诊断。在一个方面，该i貪断组合物可以在诊断受试者，例如人类患者的方法中使用。该方法包4舌给该患者施用如本文所述的可检测的标记化合物，并检测该化合物与选择性NNR亚型(,/如，a4P2受体亚型)的结合。使用诊断工具例如PET和SPECT的本领域4支术人员可以一使用本文所述的放射标记化合物来诊断种类广泛的疾病和障碍，包括与中枢和自律性神经系统的机能障碍有关的疾病和障碍。这些障碍包括种类广泛的CNS疾病和障碍，包括阿尔茨海默病、帕金森病和精神分裂症。可以评价的这些和其他代表性疾病和障碍包括在Bencherif等人的U.S.5，952，339中所列的那些。在另一个方面，该诊断组合物可以在检测受试者，例如人类患者的选择性烟碱性受体亚型的方法中使用。该方法包括给该患者施用如本文所述的可检测的标记化合物，并检测化合物与选择性烟碱性受体亚型(辨如，ct4(32受体亚型)的结合。药物组合物根据本发明的一个实施方案，提供一种药物组合物，包含治疗有效量的本发明的化合物作为活性成分，与一种或多种药学可接受的稀释剂、赋形剂和/或惰性栽体相结合。施用化合物的方式可以是不同的。优选该组合物是口服的(例如，在溶剂例如水性或非水性液体的溶剂内的液体形式，或者在固体栽体内)。口服的优选组合物包括药丸、片剂、胶嚢、小胶嚢、糖浆和溶液，包括硬明胶胶嚢和定时释放胶嚢。可以将组合物配制成单位剂型，或是多或亚单位剂量。优选的组合物是液体或半固体形式。可以使用包含液体药学惰性载体例如水或其他药学相容的液体或半固体的组合物。使用这些液体和半固体是本领域技术人员公知的。也可以经注射，即静脉内、肌内、皮下、腹膜内、动脉内、鞘内和脑室内注射来施用该组合物。静脉内施用是优选的注射方法。注射用的适当载体是本领域技术人员公知的，包括5%葡萄糖溶液、盐水和磷酸盐緩冲盐水。这些化合物也可以作为输注液或注射液(例如，作为在药学可接受的液体或液体的混合物中的混悬液或乳剂)施用。也可以用其他方法，例如直肠施用来施用该制剂。用于直肠施用的制剂，例如栓剂是本领域技术人员公知的。也可以通过吸入(例如，以鼻内气雾剂的形式或者^f吏用如Brooks等人的U.S.4，922，901所列的某种形式递送工具，将其内容以整体引入本文)；局部(例如，以洗剂形式)；经皮(例如，4吏用透皮贴剂，4吏用Novartis和AlzaCorporation的商业技术，或通过粉末注射剂)；或通过含化、舌下或鼻内吸收来施用该化合物。尽管可以以完全的活性化学物质的形式施用该化合物，但优选各化合物配制成药物组合物或制剂的形式，以有效和有力地施用。施用这些化合物的示例性方法对于技术人员来说是显而易见的。这些制剂的有效性取决于所使用的具体组合物和接受治疗的具体患者。例如，该组合物可以以片剂、硬明胶胶嚢或定时释放胶囊的形式施用。这些制剂可以包含液体载体，其可以是油性的、水性的、乳化的，或者包含适合施用方式的某些溶剂。施用本文所述的药物组合物可以间隔性的，或者以逐渐、连续、恒定或可控的速率施用于温血动物(例如，哺乳动物，例如小鼠、大鼠、猫、兔、狗、猪、牛或猴子)；但是有利地，优选施用于人。此外，施用该药物组合物的时间和每天的次数可以不同。化合物的适宜剂量是指可以有效地预防该障碍的症状发生或治疗患者所患障碍的某些症状的量。"有效量"、"治疗量"或"有效剂量"是指该量足以引发所需的药理或治疗效果，因此可以有效地预防或治疗该障碍。因此，当治疗CNS障碍时，化合物的有效量是指该量足以通过受试者的血-脑屏障，以与受试者脑内的相关受体位点结合，并调节相关烟碱性受体亚型的活性(例如，调节神经递质分泌，因此可以有效地预防或预防该障碍)。通过延迟该障碍的症状的发生而显示出对障碍的预防。通过减少与障碍有关的症状或改善障碍的症状的复发而显示出对障碍的治疗。根据各种因素例如患者的情况、障碍的症状的严重度和药物组合物的施用方式，有效剂量可以不同。对于人类患者，典型化合物的有效剂量一般需要以这样的量施用化合物，该量足以调节与疾病有关的受体以影响神经递质(例如，多巴胺)释放，但是该量应当不足以诱导任何程度足够的对骨骼肌和神经节的作用。当然，化合物的有效剂量对于各患者是不同的，但是一般包括开始发生CNS效果或其他需要的治疗效果的量，但是低于观测到肌肉和神经节效果时的量。典型地，为了以有效剂量施用，化合物需要以小于5mg/kg患者体重的量施用。通常，施用的化合物的量是小于约1mg/kg患者体重至小于约100jag/kg患者体重，有时是约10ng/kg至小于100ng/kg患者体重。上述有效剂量典型地代表在24小时时间段内以单剂量或作为一个或多个剂量施用的量。对于人类患者，化合物的有效剂量可以要求以至少小于约1,但不超过约1000，通常不超过约500mg/24小时/患者的量施用化合物。可以如Elraalch等人的U.S.5，853，696和London等人的U.S.5，969，144所列，可以使用作为诊断剂的组合物，将它们的内容通过参考引入本文。也可以以制剂组合物施用该组合物，该制剂组合物掺入了其他成分，例如用于配制诊断组合物的其他类型的成分。提供下列实施例以说明本发明，并不应当解释为对其进行限制。在这些实施例冲，除非另有说明，所有份数和百分比都是重量。生物测定实施例1:在CNSnAChRs上的放射性配体结合a4p2nAChR亚型来源于大鼠皮质的膜的制备:将重150-250g的大鼠(雌性，Sprague-Dawley)保持在12小时的亮/暗循环中，并自由摄取水和由PMINutritionInternational,Inc提供的食物。用70%002麻醉动物，然后断头。移除脑，并置于水-冷平台上。移除大脑皮层，并置于20体积(重量体积)的水-冷的制备緩冲液(137mMNaCl，10.7mMKCl，5.8mMKH2P04,8mMNa2HP04，20mMHEPES(游离酸)，5mM石舆乙酰胺，1.6mMEDTA，pH7.4);加入溶于甲醇，最终浓度为100的PMSF,并通过Polytron将该混悬液匀化。在4。C下，以18，000xg将该匀浆离心分离20分钟，将所得到的沉淀再悬浮于20体积的冰-冷的水中。在冰上培养60分钟后，通过在4。C下，以18,000xg离心20分钟来收集新的沉淀。将最终的沉淀再悬浮于10体积的緩沖液中，并在-20°C下贮存。来源于SH-EPl/人a4P2同源细胞的膜的制备:将来源于40个150mm培养皿中的细胞沉淀混合，并通过Polytron(KinematicaGmbH,Switzerland)在20ml的水冷的制备緩冲液中匀化。在4。C下，以48，000xg将该匀浆离心分离20分钟。将所得到的沉淀再悬浮于20mL的水-冷的制备緩沖液中并在-20。C下贮存。在分析的当天，融化水冻的膜，并以48,000xg旋转20分钟。倒出上清液并排出。将沉淀再悬浮于Dulbecco，s磷酸盐緩冲溶液(PBS，LifeTechnologies)pH7.4中，并用Polytron匀化6秒钟。用PierceBCA蛋白质分析试剂盒确定蛋白质浓度，用牛血清白蛋白作为标准品(PierceChemicalCompany,Rockford，IL)。在竟争化合物(O.OlnM到100mM)和5nMPH]烟碱存在下，将膜制品(人oc4P2的约50jLig，大鼠ct4P2的约200-300jjg蛋白质)在水上的PBS(分别为50uL和100laL)中培养2-3小时。用在0.33。/。聚乙烯亚胺(w/v)中预浸的GF/B过滤器，通过在多管组织收集器(Brandel，Gaithersburg，MD)上快速过滤来停止培养，以减少非特异性结合。将组织在PBS，pH7.4中漂洗3次。将闪烁液加入到包含洗涤后的组织的过滤器中，并使其平衡。然后通过液体闪烁计数器(2200CATri-CarbLSC，PackardInstruments,效率50°线WallacTrilux1450MicroBeta，效率40%,PerkinElmer)将过滤器计数，以确定与膜的放射性结合。数据表示为分解/分钟(DPMs)。在每次分析中，每个点有2-3个重复点。将每个点的重复点平均，并相对于药物浓度的log绘图。通过最小二乘法非线性回归来确定ICs。，其是对结合产生50%抑制作用时的化合物的浓度。用Cheng-Prussof等式(1973)计算Ki值Ki=IC5。/(1+N/Kd)其中N是fH]烟碱的浓度，Kd是烟碱的亲和力(3nM，在独立的实验中确定)。ot7nAChR亚型将重150-250g的大鼠(雌性，Sprague-Dawley)保持在12小时的亮/暗循环中，并自由摄取水和由PMINutritionInternational,Inc提供的食物。用70%C02麻醉动物，然后断头。移除脑，并置于水-冷平台上。移除海马，并置于10体积(重量体积)的水-冷的制备緩沖液(137mMNaCl，10.7mMKCI，5.8mMKH2P04，8mMNa2HP04，20mMHEPES(游离酸)，5mM多典乙酰胺，1.6mMEDTA，pH7.4);加入溶于曱醇，最终浓度为100pM的PMSF，并通过Polytron将该混悬液匀化。在4。C下，以18，000xg将该匀浆离心20分钟，将所得到的沉淀再悬浮于10体积的冰-冷的水中。在冰上培养60分钟后，通过在4。C下，以18,000xg离心分离20分钟来收集新的沉淀。将最终的沉淀再悬浮于IO体积的緩冲液中，并在-20。C下贮存。在分析的当天，融化组织，并以18,000xg离心20分钟，然后再悬浮于冰冷的PBS(Dulbecco，s磷酸盐緩冲溶液，138mMNaCl，2.67mMKCl，1.47mMKH2P04,8.1mMNa2HP04,0.9raMCaCl2，0.5mMMgCh，Invitrogen/Gibco，pH7.4)中，以使最终浓度为约2mg蛋白质/mL。通过Lowry等人，/》A/.193:265(1951)的方法来确定蛋白质，用牛血清白蛋白作为标准品。用Davies等人，^盯op力ar则co厶38:679(1999)的方法的改进来测定PH]MLA的结合。通过Tocris获得[3H]MLA(特异性活性=25-35Ci/mmo1)。在21。C下，用2小时的培养来确定[3H]MLA的结合。在48孔微滴定板中进行培养，并在300(xL的最终培养体积中每孔包含约200iag的蛋白质。培养緩沖液是PBS，[3H]MLA的最终浓度是5nM。在室温下，用Brandel组织收集器。通过在玻璃纤维过滤器(GF/B，Brandel)上过滤包含结合配体的蛋白质来停止结合反应。将过滤器浸在包含0.33%聚乙烯亚胺的去离子水中，以减少非特异性结合。在室温下，用PBS(3x1mL)洗涤各个过滤器。通过在所选择的孔中加入50pM非放射性MLA来确定非特异性结合。通过所选择的孔内受试化合物的7种不同的浓度来确定受试化合物对。H]MLA结合的抑制。各浓度都重复3次。用抑制50%特异性"H]MLA结合的化合物浓度来评价ICs。值。用Cheng等人，》/oc力e瓜衡擺co/.22:3099-3108(1973)的方法，由ICs。值来计算以nM报道的抑制常数(Ki值)。实施例2:多巴胺释放的确定根据Rapier等人，/.^ewroc力e迈.54:937(1990)所列的方法，用由大鼠脑获得的紋状体突触小体来测定多巴胺释放。将重150-250g的大鼠(雌性，Sprague-Dawley)保持在12小时的亮/暗循环中，并自由才聂取水和由PMINutritionInternational,Inc提供的食物。用70%(:02麻醉动物，然后断头。马上移除脑，切除紋状体。混合2只大鼠中每一只的紋状体组织，并用玻璃/玻璃匀化器在包含5mMHEPES，pH7.4的冰冷的0.32M蔗糖(5mL)中匀化。然后将组织以1,000xg离心10分钟。清除沉淀，以12，000xg离心上清液20分钟。将所得到的沉淀再悬浮于包含单胺氧化酶抑制剂的灌注緩冲液(128mMNaC1，1.2mMKH2P04，2.4mMKCl，3.2raMCaCh，1.2mMMgS04，25mMHEPES，lmM抗坏血酸，0.02mM帕吉林HC1和10mM葡萄糖，pH7.4)中，并以25，000xg离心15分钟。将最后的沉淀再悬浮于灌注緩沖液(1.4mL)中，以立即使用。在37。C下将突触小体混悬液培养10分钟以恢复代谢活性。以0.1mM的最终浓度加入。H]多巴胺(卩H]DA,特异性活性=28.0Ci/mmol，NENResearchProducts)，并将该混悬液在37°C下再培养10分钟。将组织(5GpL)和灌注緩冲液(100jaL)的等分液负载到BrandelSuprafusionSystem(2500系歹寸，Gaithersburg，MD)的suprafusion室内。以1.5mL/分钟的速率将灌注混悬液(室温)泵入该室中，洗涤时间是16分钟。然后将受试化合物(10juM)或烟碱(10uM)用于灌注流中48秒。在整个实验中从各室中连续收集各部分(每个24秒)以在使用激动剂后捕捉基础释放、激动剂诱导的峰释放并重建基线。直接将灌注液收集到装入了闪烁液的闪烁瓶中。通过闪烁计数定量所释放的。H]DA。对于各室，将峰的积分面积按基线正常化。释放表示成用等浓度的L-烟碱获得的释放的百分比。在每次分析中，用2-3个室重复各受试化合物；平均各重复的数据。当适当时，确定受试化合物的剂量-响应曲线。各化合物的最大活化(Emax)确定为L-烟碱诱导的最大活化的百分比。也确定导致特定离子流的半数最大激活(EC5。)时的化合物浓度。实施例3:选择性vs.外周nAChRs在人肌肉nAChR亚型中的相互作用在来源于胚胎横紋肌肉瘤的人无性系TE671/RD上建立肌肉-型nAChRs的活化(Stratton等人，Carcinogen10:899(1989))。这些细胞表达具有与肌肉-型nAChR类似的药理学(Lukas，/.户力ar迈aco/.7"力er.251:175(1989))、电生理学(Oswald等人，A^"rosc/.Ze".96:207(1989))和分子生物性质(Luther等人，/.肠而c/.9:1082(1989))的受体。根据常规方法(Bencherif等人，M/.Ce//.^e"ro"厶2:52(1991)和Bencherif等人，/.尸力ar则co/.257:946(1991))，将TE671/RD细胞保持在增殖生长期。细胞在Dulbecco，s改进Eagle，s培养基(Gibco/BRL)中培养，该培养基具有10%马血清(Gibco/BRL)、5%胎牛血清(HyClone，LoganUT)、lmM丙酮酸钠、4mML-谷氨酰胺和50,000单位的青霉素-链霉素(IrvineScientific)。当细胞80%融合时，将它们置于12孔聚苯乙烯板(Costar)上。当细胞达到100%融合时，进行实验。才艮据Lukas等人，J加/.万/oc力e迈.175:212(1988)所述的方法，用1b+流测定烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的功能。在实验的当天，从孔中小心地除去生长培养基，向各孔中加入包含氯化"铷(106jaCi/mL)的生长培养基。将细胞在37°C下培养至少3小时。在负载期后，除去过量的86Rb+，用不含标记物的Dulbecco，s磷酸盐緩沖盐水(138mMNaCl，2.67mMKCl，1.47mMKH2P04，8.1mMNa2HP04，0.9mMCaCl2，0.5mMMgCl"Invitrogen/Gibco，pH.7.4)洗涤细月包2次，小心不要扰乱细胞。接着，将细胞暴露于100mM的受試化合物，100juM的L-烟碱(AcrosOrganics)或单独的緩冲液4分钟。在暴露期后，除去包含释放的1b+的上清液，并转移到闪烁管中。加入闪烁液，通过液体闪烁计数测定释放的放射性。在每次分析中，每个点有2次重复，将其平均。将lb+释放量与阳性对照(100yML-烟碱)和阴性对照(单用緩沖液)进行比较以确定相对于L-烟碱释放的释放百分比。当适当时，确定受试化合物的剂量-响应曲线。各化合物的最大活化(Emax)确定为L-烟碱诱导的最大活化的百分比。也确定导致特定离子流的半数最大激活(EC5。)时的化合物浓度。在大鼠神经节nAChR亚型中的相互作用在来源于大鼠肾上腺髓质的肿瘤的嗜铬细胞瘤无性系PC12上建立大鼠神经节nAChRs的活化，PC12是神经峰来源的连续无性细胞抹。这些细胞表达神经节-样的nAChRs(参见Whiting等人，#""re327:515(1987);Lukas，/.尸力ar迈aco/.^rp.T/er.251:175(1989);Whiting等人,脱^ra//2組10:61(1990))。根据常规方案(Bencherif等人，#0人^ewo"/.2:52(1991)和Bencherif等人，/.漲r應o人脉77e八257:946(1991))，将大鼠PC12细胞保持在增殖生长期。细胞在Dulbecco，s改进Eagle，s培养基(Gibco/BRL)中培养，该培养基具有10%马血清(Gibco/BRL)、5%胎牛血清(HyClone，LoganUT)、lmM丙酮酸钠、4mML-谷氨酰胺和50,000单位的青霉素-链霉素(IrvineScientific)。当细胞80%融合时，将它们置于12孔Nunc板(Nunclon)上并用0.03%聚-L-赖氨酸(Sigma，溶于100mM硼酸)涂层。当细胞达到80°/。融合时，进行实验。根据Lukas等人，J/7a/.》/oc力e瓜175:212(1988)所述的方法，用"Rb+流测定烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的功能。在实验的当天，从孔中小心地除去生长培养基，向各孔中加入包含氯化86铷(106yCi/mL)的生长培养基。将细胞在37°C下培养至少3小时。在负载期后，除去过量的86Rb+,用不含标记物的Dulbecco，s磷酸盐緩冲盐水(138mMNaCl，2.67mMKCl，1.47mMKH2P04，8.1mMNa2HP04,0.9mMCaCl2,0.5mMMgCl2，Invitrogen/Gibco，pH.7.4)'冼涤细月包2次，小心不要扰乱细胞。接着，将细胞暴露于100MM的受试化合物，100nM的L-烟碱(AcrosOrganics)或单独的緩冲液4分钟。在暴露期后，除去包含释放的"Rb+的上清液，并转移到闪烁管中。加入闪烁液，通过液体闪烁计数测定释放的放射性。在每次分析中，每个点有2次重复，将其平均。将"Rb+释放量与阳性对照(IOOiiM烟碱)和阴性对照(单用緩冲液)进行比较以确定相对于L-烟碱释放的释放百分比。当适当时，确定受试化合物的剂量-响应曲线。各化合物的最大活化(Emax)确定为L-烟碱诱导的最大活化的百分比。也确定导致特定离子流的半数最大激活(EC5。)时的化合物浓度。在人神经节nAChR亚型中的相互作用细胞系SH-SY5Y是来源于亲代细胞系SK-N-SH的连续亚克隆的连续细胞系SK-N-SH，SK-N-SH最初是由人外周成神经细胞瘤获得的。SH-SY5Y细胞表达神经节-样nAChR(Lukas等人，Vo/.Ce//.iVe"ro"/.4:1(1993))。根据常规方案(Bencherif等人，Ce//.^eyrosc2'.2:52(1991)和Bencherif等人，/.尸力a價co人脉r力er.257:946(1991)),将人SH-SY5Y细胞保持在增殖生长期。细胞在Dulbecco，s改进Eagle，s培养基(Gibco/BRL)中培养，该培养基具有10%马血清(Gibco/BRL)、5%胎牛血清(HyClone，LoganUT)、lmM丙酮酸钠、4mML-谷氨酰胺和50,000单位的青霉素-链霉素(IrvineScientific)。当细胞80%融合时，将它们置于12孔聚苯乙烯板(Costar)上。当细胞达到100%融合时，进行实验。根据Lukas等人，ha/.5/oc力e迈.175:212(1988)所述的方法，用"Rb+流测定烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)的功能。在实验的当天，从孔中小心地除去生长培养基，向各孔中加入包含氯化86铷(106jaCi/mL)的生长培养基。将细胞在37。C下培养至少3小时。在负载期后，除去过量的86Rb+，用不含标记物的Dulbecco，s磷酸盐緩沖盐水(138mMNaCl，2.67mMKCl，1.47mMKH2P04，8.1mMNa2HP0"0.9mMCaCl2，0.5mMMgCl2，Invitrogen/Gibco，pH.7.4)洗涤细月包2次，小心不要扰乱细胞。接着，将细胞暴露于100MM的受试化合物，100^M的烟碱或单独的緩冲液4分钟。在暴露期后，除去包含释放的、b+的上清液，并转移到闪烁管中。加入闪烁液，通过液体闪烁计数测定释放的放射性。在每次分析中，每个点有2次重复，将其平均。将"Rb+释放量与阳性对照(IOO/aM烟碱)和阴性对照(单用緩沖液)进行比较以确定相对于L-烟碱释放的释放百分比。当适当时，确定受试化合物的剂量-响应曲线。各化合物的最大活化(Emax)确定为L-烟碱诱导的最大活化的百分比。也确定导致特定离子流的半数最大激活(EC5。)时的化合物浓度。实施例4:新目标识别(N0R)任务才艮才居Ennaceur和DelacourAe力ar.Ara/"Wes.100:85—92(1988)的描述来进行新目标识别(N0R)任务。合成实施例实施例5:N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的合成实施例5涉及N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的合成，如Schrimpf等人的美国申请U.S.2004/0186107和Basha等人的2005/0101602所述，根据下列技术进行合成5-千基四氢吡咯并[3，4-c]吡咯-1，3-二酮(或7-千基-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛-2，4-二酮)在氮气下，将三氟醋酸(TFA,0.50mL，6.5mmol)加入到马来酰亚胺(6.27g，0.0646mol)的二氯甲烷(150mL)冷(0°C)溶液中。在45分钟里滴加N-(甲氧基甲基)-N-(三曱基甲硅烷基曱基)节胺(20g，0.084mol)的二氯甲烷(100mL)溶液。在加入完成后，将混合物緩慢温热至环境温度并搅拌16小时。浓缩混合物，将所得到的残留物溶于二氯曱烷(200mL)，并用饱和碳酸氢钠水溶液(2x50mL)洗涤。分离水层，用二氯曱烷(2x75mL)萃取。用盐水(50mL)洗涤合并的二氯甲烷萃取液，用无水疏酸镁干燥，过滤并浓缩，得到12.5g(83.9%收率)的淡黄色、蜡状固体(MSm/z231(M+H))。2-千基八氢吡咯并[3，4-c]吡咯(或3-节基-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷)在氮气下，将5-苄基四氢吡咯并[3，4-c]吡咯-1，3-二酮(4，9g，0.021mol)溶于冷的(0。C)、干燥的四氢呋喃(THF)(50mL),在30分钟里向该连续冷却的溶液中滴加氢化铝锂(63mL的1M的THF溶液，0.063mol)。所得到的混合物在环境温度下搅拌30分钟，然后温热至回流4小时。然后将混合物冷却至0'C，通过緩慢加入过量的十水合疏酸钠固体使反应淬灭。将混合物温热至环境温度并搅拌16小时。过滤固体，用乙酸乙酯(3x100mL)洗涤残留物。浓缩合并的滤液，得到4.2g(99%收率)的蜡状固体(MSm/z203(M+H))。5-苄基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯(或N-节基-N，-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0辛烷)将粗2-节基八氢吡咯并[3，4-c]吡咯(4.2g，0.021mol)溶于THF(50mL)。加入碳酸氢二谏又丁酯(5.5g，0.025mol)和饱和NaHC03水溶液(10mL)，将混合物在环境温度下搅拌过夜。用水(10mL)使反应淬灭，并加入乙酸乙酯(30mL)。用乙酸乙酯(2x20mL)萃取水层，用无水疏酸钠干燥合并的有机萃取液并浓缩。通过珪胶柱色谱法(l:1己烷/乙酸乙酯)精制，得到5.07g(79.8%收率)的标题化合物(MSm/z303(M+H)).六氳吡咯并[3，4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯(或N-(叔丁氧基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷)在氮气大气下，将5-爷基六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-曱酸叔丁基酯(5.07g，0.0168mol)溶于甲醇(50mL)并加入20%Pd(0H)2/C(湿润)(2g)。温热所得到的混合物(45-50。C),并在40psi的氢气下振荡2小时。过滤该混合物并浓缩，得到3.49g(97.7%收率)的标题化合物(MSm/z213(M+H))。实施例6:N-(呋喃-2-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的合成实施例6涉及呋喃-2-基(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-基)甲酮(或N-(呋喃-2-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷)的合成，其是根据下列技术制备的，以说明用于制备3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的杂芳香酰胺的偶合反应呋喃-2-基(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-基)甲酮三氟乙酸酯(或N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷三氟乙酸酯)在干燥二氯甲烷(lmL)中合并呋喃-2-甲酸(0.037g，0.33mmol)和三乙胺(0.125mL，0.99mmol),并加入O-(苯并三哇-l-基)-l，1，3，3，-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU;0.125g,0.33鹏ol)。加入六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-曱酸叔丁基酯(0.064g，0.30mmo1)的二氯甲烷(O,5mL)溶液，将混合物在环境温度下搅拌过夜。在10%氲氧化钠水溶液下振荡该混合物，分离有机层。用氯仿(2x2mL)萃取水层。用水(2x1mL)洗涤合并的有机萃取液并浓缩。将所得到的残留物溶于二甲基甲酰胺(DMF)(0.3mL)，并通过HPLC(乙腈/水梯度)精制。合并包含所需物质的各部分并浓缩，剩下叔丁氧基羰基-保护的产物。将该物质溶于三氟醋酸(O.5mL)和二氯甲烷(O.5mL)的混合物，将该混合物在环境温度下搅拌1小时。通过旋转蒸发除去挥发物，然后高真空处理，得到77mg的油(800/。收率)CHNMR(d广甲醇，300MHz)3.20(m，2H),3.47-4.2(m，8H),6.60(t，1H)，7.18(d，1H),7.72(d,1H);MSm/z207(M+H)).实施例7:N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷三氟乙酸酯的合成实施例7涉及5-氯呋喃-2-基(六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-基)甲酮三氟乙酸酯(或N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷三氟乙酸酯)的合成，其是根据下列技术制备的，以说明用于制备3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷的杂芳香酰胺的偶合反应5-氯呋喃-2-甲酸将氢氧化钠水溶液(80mL的10%)加入到硝酸银(8.0g,47mmol)的水(20mL)溶液中。搅拌该混悬液，用30°/。氨水溶液緩慢处理，直至变澄清。加入5-氯呋喃-2-甲醛(3.0g，23mmol)(AldrichChemical)的曱醇(5mL)溶液，在环境温度下将所得到的混合物搅拌30分钟。过滤反应混合物，用醚(100mL)洗涤滤液。然后通过加入冷20%疏酸将滤液水溶液制成酸性(pH3)。用乙酸乙酯(3x100mL)萃取所得到的混合物。用饱和氯化钠水溶液(100mL)洗涤萃取液，干燥(无水疏酸钠)并真空浓缩，得到3.2g(95%收率)的白色固体(mp178-179°C)。该反应是易于改变大小的，并可以>10g的规模多次进行。N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷三氟乙酸酯将包含1滴DMF的草酰氯(12.2g，95.8mmol)滴加到5-氯呋喃-2-甲酸(6.25g，47.9mmol)的200mL二氯甲烷溶液中。在完成加入后，移除冰浴，温热反应至环境温度1小时。然后真空除去挥发物，将残留物溶于THF(5GmL)。然后将酰基氯的溶液加入到搅拌着的，冰-冷却的六氢吡咯并[3，4-c]吡咯-2-甲酸叔丁基酯(10.2g，47.9mmol)和二异丙基乙胺(25g,~4当量)的THF(200mL)溶液中。将该混合物在环境温度下搅拌16小时。然后真空除去挥发物，残留物分配于水(100mL)和醚(300mL)。在旋转蒸发器上浓缩醚层和水层的两种醚萃取液(100mL)。残留物在硅胶上进4亍柱色镨法，用0-60%乙酸乙酯的己烷梯度洗脱。浓缩所选择的部分，得到13.9g(85.3%收率)的淡黄色糖浆。将一部分的该物质(12.9g，37.9mmol)溶于二氯甲烷和三氟醋酸(分别为100mL)的混合物。将该混合物在环境温度下搅拌2小时，然后真空浓缩。残留物分配于氯仿(200mL)和50%碳酸钾水溶液(200mL),用氯仿(3x200mL)萃取水层。用无水硫酸钠干燥合并的氯仿层，并真空浓缩，剩下8.66g(95%收率)的淡黄色固体CHNMR(d广曱醇，300MHz)3.15—3.35(m，4H)，3.50—4.20(m，6H)，6.51(d，1H)，7.17(d，1H);MSra/z241(M+H))。实施例8:3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷-3-甲酸叔丁基酯的合成实施例8涉及3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷-3-甲酸叔丁基酯(或N-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷)的合成，其是根据下列技术制备的7-苄基-3，卜二氮杂二环[3.3.1]壬烷-3-甲酸叔丁基酯(或N-节基-N，-(叔丁氧基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷)根据Stead等人.in丄e〃.7(20):4459(2005)所列的方法来制备7-千基-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷-3-曱酸叔丁基酯。3，7-二氮杂二环[3.3.1]-3-甲酸叔丁基酯在氮气大气下，将7-苄基-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷-3-曱酸叔丁基酯(0.49g,1.6mmol)溶于甲醇(20mL),并加入20%Pd(OH)2/C(湿润)(~2g)。将该混合物温热至约5(TC，在55psi的氢气下振荡2小时。过滤所得到的混合物并浓缩，得到O.32g(94%收率)的标题化合物(MSm/z227(M+H))。实施例9:N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷三氟乙酸酯的合成实施例9涉及(3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬-3-基)-呋喃-2-基曱酮三氟乙酸酯(或N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷三氟乙酸酯)的合成，其是根据下列技术制备的，以说明用于制备3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷的杂芳香酰胺的偶合反应3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬-3-基)-呋喃-2-基甲酮三氟乙酸酯(或N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷三氟乙酸酯)在干燥二氯曱烷(lmL)中将呋喃-2-曱酸(0.032g，0.29mmol)和三乙胺(0.870mmol，0.121mL)合并，并加入HBTU(O.llg，0.29mmol)。加入3，7-二氮杂二环[3.3.1]-3-曱酸叔丁基酯(0.059g，0,26mmol)的二氯曱烷(O.5mL)溶液，将该混合物在环境温度下搅拌过夜。用10%氢氧化钠水溶液处理该混合物，并用氯仿(2x2raL)萃取。用水(2x1mL)洗涤合并的有机萃取液并浓缩。将所得到的残留物溶于DMF(O.3mL)并通过HPLC(乙腈/水梯度)精制。合并包含所需物质的各部分并浓缩，剩下叔丁氧基羰基-保护的产物。将该物质溶于三氟醋酸(0.5mL)和二氯曱烷(0.5mL)的混合物，将该混合物在环境温度下搅拌1小时。通过旋转蒸发除去挥发物，然后高真空处理，得到36rng的油(41%收率)CHNMR(d广曱醇，300MHz)2.10(bs，2H)，2.35(bs，2H),3.30-3.45(m，4H)，3.55(m,2H),6.65(m，1H)，7.15(d，1H)和7.75(d，1H).MSm/z221(M+H))。实施例10:N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷三氟乙酸酯的合成实施例10涉及(3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬-3-基)-5-氯呋喃-2-基曱酮三氟乙酸酯(或N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷三氟乙酸酯)的合成，其是根据下列技术，通过如实施例9类似的方法制备的在干燥二氯甲烷(IOmL)中将5-氯呋喃-2-甲酸(0.96g，6.5mmol)和三乙胺(21mmol，2.9mL)合并,并加入HBTU(2.47g,65.1mmo1)。加入3，7-二氮杂二环[3.3.1]-3-曱酸叔丁基酯(1.5g，66mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，将该混合物在环境温度下搅拌过夜。用10%氢氧化钠水溶液处理该混合物，并用氯仿(2x20mL)萃取。用水(2x10mL)洗涤合并的有机萃取液并浓缩。在硅胶上通过柱色谱法精制所得到的残留物，用乙酸乙酯的己烷梯度洗涤，得到呈粘稠油状的叔丁氧基羰基-保护的产物。将该物质溶于三氟醋酸(20mL)和二氯曱烷(20mL)的混合物，将混合物在环境温度下搅拌1小时。通过旋转蒸发除去挥发物，然后真空处理，得到1.38g(57.5%收率)的粘稠状的黄色油CHNMR(d「曱醇，300MHz)2.OO(bs,2H),2.15(bs，2H)，3.15-3.35(m，6H)，4.25(m，2H),6.53(d，1H)和7.10(d，1H).MSm/z255(M+H))。实施例11:光谱和受体结合数据的列表上述说明性的酰胺偶合方法用于制备如表1和2所示的化合物。在一些情况下，以足以获得核磁共振(NMR)数据的规模来合成化合物。在其他情况中，在各种平行合成装置中以类似规模制备化合物，并仅通过LCMS进行(结构)表征。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage46</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage47</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table>生物学数据的综述本发明代表性的表1和2的化合物分别在1nM到1000nM和1nM到220nM的范围内显示了对大鼠和人a4p2亚型的抑制常数(Ki值)。在1700nM到210，000nM的范围内，对a7亚型的Ki值是不同的(在很多情况中，化合物不会以高流量筛选与a7亚型充分结合以保证Ki的确定)。这些相同的化合物对人肌肉(对烟碱最大响应的1-25%)或人神经节(对烟碱最大响应的1-20%)亚型显示了相对很小的功能活性。在NOR任务中评价了某些示例性化合物。因此，浓度分别为0.1mg/kg和0.3mg/kg的N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷(附图l)和N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷(附图2)在大鼠中是有活性的。这为本发明的化合物治疗认知缺陷、注意力障碍和痴呆的效力(和效能)，以及这些化合物用于人类治疗的可能性提供了证据。上面对于本发明是说明性的，但是并不能解释为对其进行限制。本发明被下文的权利要求，所包括权利要求的等价表达所限定。出于所有目的，将本文所涉及的所有专利和出版物以整体通过参考引入本文。权利要求1.如式I代表的化合物式I其中n的值是0或1，并且Cy是选自2-呋喃基、3-呋喃基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、1，3，4-噁二唑-2-基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、3-异噻唑基、4-异噻唑基、5-异噻唑基、1，3，4-噻二唑-2-基、1，2，4-噻二唑-3-基、1，2，4-噻二唑-5-基和4-吡啶基的杂芳基，其中杂芳基任选被高达3个的独立地选自C1-6烷基、取代的C1-6烷基、C2-6烯基、取代的C2-6烯基、C2-6炔基、取代的C2-6炔基、C3-8杂环基、取代的C3-8杂环基、C3-8环烷基、取代的C3-8环烷基、C5-10芳基、C5-10杂芳基、取代的C5-10芳基、取代的C5-10杂芳基、C1-6烷基-C5-10芳基、C1-6烷基-C5-10杂芳基、取代的C1-6烷基-C5-10芳基、取代的C1-6烷基-C5-10杂芳基、C5-10芳基-C1-6烷基、C5-10杂芳基-C1-6烷基、取代的C5-10芳基-C1-6烷基、取代的C5-10杂芳基-C1-6烷基、卤素、-OR′、-NR′R″、-CF3、-CN、-NO2、-C2R′、-SR′、-N3、-C(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)R″、-C(＝O)R′、-C(＝O)OR′、-OC(＝O)R′、-OC(＝O)NR′R″、-NR′C(＝O)OR″、-SO2R′、-SO2NR′R″和-NR′SO2R″的非氢取代基取代，其中R′和R″独立地选自氢、C1-6烷基、C3-8环烷基、C3-8杂环基、C5-10芳基、C5-10杂芳基或C5-10芳基-C1-6烷基，或R′和R″和与它们相连的原子在一起可以形成C3-8杂环，其中用于烷基、烯基、炔基、杂环基、环烷基、芳基、杂芳基、烷基芳基、烷基杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基时，术语“取代的”是指被一个或多个烷基、芳基、杂芳基、卤素、-OR′和-NR′R″基取代，或其药学可接受的盐。2.根据权利要求l的化合物，其中n的值是Q或l,Cy是选自2-呋喃基或3-呋喃基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、1，3，4-噁二唑_2-基、1，2，4-噁二唑-3-基、1，2，4-噁二唑-5-基、2-瘗哇基、4-噻唑基、5-噻唑基、3-异噻唑基、4-异噻唑基、5-异噻唑基、1，3，4-瘗二哇-2-基、1，2，4-瘗二唑-3-基、1，2，4-瘗二唑-5-基和4-吡咬基的C5—i。杂芳基，其中杂芳基任选被高达3个的独立地选自CH烷基、取代的Cw烷基、fi素和用苯基取代的CH炔基的非氢取代基取代。3.根据权利要求1或2的化合物，其中n是0。4.根据权利要求1到3任一的化合物，其中n是()并且Cy是2-呋喃基。5.根据权利要求1到3任一的化合物，其中Cy是卣素取代的2-呋喃基。6.选自下列的化合物N-(呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(3-甲基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(5-甲基呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，'N-(3-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(3-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(5-溴呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(4-苯基呋喃-2-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(5-(2-吡啶基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-(5-(苯基乙炔基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛坑，N-(呋喃-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噁唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，N-(噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,N-(噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-N-受的盐。7.N-N-N-N-N-N-N-N-N_异噁唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0〗辛烷，异噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，3-溴异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，3-甲氧基异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，1，2，4-噁二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，1，2，4-噁二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,1，3，4-噁二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，噻唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，异噻唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，异噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，异噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷,1，2，4-噻二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，1，2,4-噻二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，1，3，4-噻二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.0]辛烷，吡啶-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷，及其药学可接选自下列的化合物呋喃-2-基羰基)-3，7-二3-甲基呋喃-2-基羰基)-5-甲基呋喃-2-基羰基)-3-氯呋喃-2-基羰基)-3，5-氯呋喃-2-基羰基)-3，3-溴呋喃-2-基羰基)-3，5-溴呋喃-2-基羰基)-3，4-苯基呋喃-2-基羰基)-氮杂二环[3.3.l]壬烷，3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷,3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，5-(2-吡啶基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷:N-(5-(苯基乙炔基)呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬坑，N-(呋喃-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噁唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N一(噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(异噁唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噁唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(3-溴异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(3-甲氧基异噁唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.1]壬烷，N-(l，2，4-噁二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l，2，4-噁二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l，3，4-噁二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噻唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3,l]壬烷，N-(噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(噻唑-5-基羰基)-3,7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噻唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噻唑-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(异噻唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l,2，4-噻二唑-3-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l，2，4-噻二唑-5-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(l,3，4-噻二唑-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，N-(吡啶-4-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷，及其药学可接受的盐。8.化合物N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.O]辛烷或其药学可接受的盐。9.化合物N-(5-氯呋喃-2-基羰基)-3，7-二氮杂二环[3.3.l]壬烷或其药学可接受的盐。10.根据权利要求1到9任一的化合物在制备药物中的应用。11.一种治疗中枢神经系统障碍的方法，包括给需要这样治疗的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1到9任一的化合物。12.权利要求11的方法，其中所述障碍选自与年龄有关的记忆缺损、轻度认知缺损、早老性痴呆(早发性阿尔茨海默病)、老年痴呆(阿尔茨海默型痴呆)、Lewy体性痴呆、血管性痴呆、阿尔茨海默病、中风、AIDS痴呆综合征、注意力缺陷障碍、注意力缺陷伴多动障碍、诵读困难、精神分裂症、精神分裂症样精神障碍和情感分裂性精神障碍。13.权利要求ll的方法，其中所述障碍选自轻度到中度阿尔茨海默型痴呆、注意力缺陷障碍、轻度认知缺损和与年龄有关的记忆缺损。14.一种药物组合物，包含治疗有效量的根据权利要求1到9任一的化合物作为有效成分，与一种或多种药学可接受的稀释剂、赋形剂和/或惰性载体相结合。15.根据权利要求14的药物组合物在制备治疗中枢神经系统障碍的药物中的应用。全文摘要公开了化合物，包含该化合物的药物组合物，制备方法及其用途。该化合物是可以由某些杂芳基羧酸和某些二氮杂二环烷制备的酰胺化合物。这些化合物对中枢神经系统(CNS)中的α4β2亚型神经烟碱性受体显示出选择性并高亲和性地结合。这些化合物和组合物可以用于治疗和/或预防种类广泛的疾病或障碍，特别是CNS障碍。这些化合物可以(i)改变患者脑中烟碱样胆碱受体的数量，(ii)显示神经保护效果，以及(iii)当以有效量使用时，不会导致可感知的不利副作用(例如，副作用例如血压和心率显著升高，对胃肠道的显著不利效果，和对骨骼肌的显著效果)。文档编号C07D471/08GK101528745SQ200780040228公开日2009年9月9日申请日期2007年11月1日优先权日2006年11月2日发明者A·马祖罗夫,C·H·米勒,M·S·梅尔文,P·S·哈蒙德,R·C·维塔克,S·R·布赖宁,S·R·阿奇雷迪,V·S·默西,肖云德,蓝苗申请人:塔加西普特公司