专利名称：一种连翘酯苷的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种连翘酯苷的制备方法，尤其是一种从植物中提取连翘酯苷的制 备方法。连翘酯苷(Forsythoside A, Forsythiaside)，分子式C29H36015，分子量 624.594，CAS登录号79916_77_1。主要存在于木犀科、玄参科多种植物中，其中木犀 科植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl的果实中含量较高，且原料来源丰富。其分
子式如下现代研究表明，连翘酯苷具有免疫调节、抑菌等多种活性，同时其也作为合成 其它活性衍生物的原料。木犀科植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.) Vahl的果实被作为中药连翘应用，
具有具有清热解毒、消肿散结的功效。现有技术中，尚没有适用于高纯度连翘酯苷工业化大生产的制备工艺报道，如 吴昭晖等人披露(吴昭晖，等.高效液相色谱法制备连翘酯苷对照品.第一军医大学学 报，2005，25(11) 1398) 了一种利用高效液相色谱仪制备连翘酯苷的方法，虽然成品 纯度高，但该方法对设备要求高且制备量少，并不适合工业化放大运用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的连翘酯 苷的制备方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案取连翘果实粗粉，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总
背景技术：
萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力30-50MPa，温度50_70°C，C02流量l_3ml/g 生药 min，萃取时间80-150min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为 5:2: 1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行4-7级逆流萃取，合并萃取液，减压回收 溶剂并浓缩，加到大孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱 液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏1836小时，析出淡黄色粉末，分离，即 得。C02超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比优选为5%。C02超临界萃取的压力优选为40MPa，温度优选为60°C，C02流量优选为2ml/ g生药 min。C02超临界萃取的时间优选为lOOmin。逆流萃取的级数优选为5级。大孔吸附树脂选自D101型、D102型、AB8型大孔吸附树脂中的一种。大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度优选为50%。大孔吸附树脂洗脱液的收集量优选为5倍量柱体积。冷藏时间优选为24小时。制备所得连翘酯苷可采用下列方法检测试验例1HPLC法测定连翘酯苷纯度色谱条件色谱柱十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相乙腈-水(25 75)；流 速l.OmL/min;检测波长277nm ；柱温30°C。测定方法精密称取连翘酯苷2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶 解，甲醇定容至刻度，吸取lOyL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。采用本发明制备连翘酯苷，利于大生产操作，能耗小，污染小。下面将结合具体实施方式
对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并 不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1取连翘果实粗粉lOKg，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹 带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力30MPa，温度50°C，C02流量lml/ g生药 min，萃取时间80min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为 5:2: 1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行4级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶 剂并浓缩，加到D101型大孔吸附树脂柱上吸附，40%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱 液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏18小时，析出淡黄色粉末，分离，即得 连翘酯苷 58.4g，经 HPLC 检测，纯度为 94.6%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR 等表 征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例2取连翘果实粗粉lOKg，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力50MPa，温度70°C，C02流量3ml/g 生药 min，萃取时间150min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为 5:2: 1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行7级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶 剂并浓缩，加到D102型大孔吸附树脂柱上吸附，60%乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱 液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏36小时，析出淡黄色粉末，分离，即得 连翘酯苷 61.3g，经 HPLC 检测，纯度为 94.9%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR 等表 征其物理性状的数据与现有技术相一致。实施例3取连翘果实粗粉10Kg，加入到C02超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带 剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力40MPa，温度60°C，C02流量2ml/g 生药 min，萃取时间lOOmin，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为 5:2: 1的乙酸乙酯-乙醇水混合溶剂进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂并 浓缩，加到AB8型大孔吸附树脂柱上吸附，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液， 减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏24小时，析出淡黄色粉末，分离，即得连翘 酯苷 68.4g，经 HPLC 检测，纯度为 98.7%，UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR 等表征其 物理性状的数据与现有技术相一致。
权利要求
1.一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成取连翘果实 粗粉，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分 比为4-6%，萃取压力30-50MPa，温度5070°C，CO2流量l_3ml/g生药· min，萃取时 间80-150min，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为5 2 1的乙酸乙 酯-乙醇-水混合溶剂进行4-7级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂并浓缩，加到大 孔吸附树脂柱上吸附，40-60%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收溶剂并 干燥，加入甲醇溶解，冷藏18-36小时，析出淡黄色粉末，分离，即得。
2.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取夹 带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。
3.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取的 压力40MPa，温度60°C，CO2流量2ml/g生药· min。
4.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述CO2超临界萃取的 时间为1 OOmin。
5.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述逆流萃取的级数为 5级。
6.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自 DlOl型、D102型、AB8型大孔吸附树脂中的一种。
7.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱 用乙醇的浓度为50%。
8.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱 液的收集量为5倍量柱体积。
9.根据权利要求1所述一种连翘酯苷的制备方法，其特征在于所述的冷藏时间为24 小时。
全文摘要
本发明涉及一种操作简便、污染小、能耗少的连翘酯苷的制备方法。工艺步骤为取连翘果实粗粉，加入到CO2超临界萃取器中，得萃取物，加入乙醇溶解，滤过，取滤液，用比例为5∶2∶1的乙酸乙酯-乙醇-水混合溶剂进行多级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂并浓缩，加到大孔吸附树脂柱上吸附，乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂并干燥，加入甲醇溶解，冷藏，析出淡黄色粉末，分离，即得。采用本发明制备连翘酯苷，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07H1/08GK102010450SQ20101053533
公开日2011年4月13日 申请日期2010年11月9日 优先权日2010年11月9日
发明者张发成, 王峰, 王琳 申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司