专利名称：一种制备萍蓬草素的方法
技术领域：
本发明属于中药化学技术领域，具体涉及一种制备萍蓬草素的方法。
背景技术：
萍蓬草素A(Nupharin A)和萍蓬草素B (Nupharin B)分子式均为C41H3tlO26,分子量为938. 67，CAS登录号分别81956-07-2、121916-42-5，是从睡莲科植物日本萍蓬草M/pAar japonicum DC.根茎、彩斑萍蓬草M/pAar variegatum Durand根中分离得到的鞣质类物质， 萍蓬草素A熔点为，为白色粉末(水);萍蓬草素B熔点为258°C，为无色针晶(水)。 药理研究表明，萍蓬草素A对金黄色葡萄球菌和酿酒酵母Sarcchomyces cerevisiae有抗菌作用，对拓扑异构酶II型呈抑制活性，IC50为0. 2 μ M。萍蓬草素B对金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌Proteus vulgaris有抗菌作用。日本萍蓬草是一种在北半球温带广泛分布的多年生根茎状的草科植物，在亚洲地区一直被作医药品使用，含有多种生物碱和鞣质。吴霞等发现日本萍蓬草根茎甲醇提取物对醋霉菌果蝇幼虫有杀虫活性，然而对鞣质的研究较少，因此研究出一种制备日本萍蓬草鞣质的方法是非常必要的，对扩大药源以及萍蓬草属植物的综合利用具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种提取制备萍蓬草素的方法，该方法所得萍蓬草素A、B 总量可达60-90%。为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案将日本萍蓬草根茎加丙酮溶液微波提取，过滤，得提取液；将提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱吸附，用不同浓度的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇，加入明胶溶液，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤， 滤液上葡聚糖凝胶柱，用50-90%丙酮溶液洗脱至无色，洗脱液浓缩干燥即得产品。所述丙酮溶液为60-100%的丙酮水溶液，加入量为药材量的4-10倍，所述微波提取，提取时间为lO-lOOmin。所述大孔吸附树脂选自HPD-400、ADS-7和S-8中的一种，洗脱剂为0-80%的乙醇水溶液，流速为l_2BV/h。所述明胶溶液浓度为2_5%。本发明工序简单，采用微波提取萍蓬草素提率高；大孔树脂和葡聚糖凝胶柱层析结合，分离效果好；且整个工艺条件温和，能耗低，适合工业化生产。
具体实施例方式下面将结合具体实施方式
对本发明做进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例1:
取原药材日本萍蓬草根茎Ikg粉碎成粗粉投入提取罐中，加5L70%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为400W，提取60min，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上HPD-400大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为lBV/h，收集富含萍蓬草素的洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为3%的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用70%丙酮溶液洗脱，控制流速为lBV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品 (萍蓬草素A和B总含量为86%)。实施例2:
取原药材日本萍蓬草根茎Ikg粉碎成粗粉投入提取罐中，加8L95%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为380W，提取30min，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上S-8大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集富含萍蓬草素洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为1的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用90%丙酮溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品(萍蓬草素A和B总含量为73%)。实施例3:
取原药材日本萍蓬草根茎Ikg粉碎成粗粉投入提取罐中，加10L80%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为350W，提取lOmin，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上ADS-7大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集富含萍蓬草素的洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为5%的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用80%丙酮溶液洗脱，控制流速为2BV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品(萍蓬草素A和B总含量为62%)。实施例4:
取原药材日本萍蓬草根茎Ikg粉碎成粗粉投入提取罐中，加4L60%的丙酮水溶液进行微波提取，微波功率为300W，提取lOOmin，过滤，得提取液，将提取液浓缩后上HPD-400大孔吸附树脂柱，待饱和吸附后，依次用0%、20%、50%、80%乙醇溶液洗脱，控制流速为1. 5BV/h, 收集富含萍蓬草素的洗脱液，将洗脱液浓缩至无醇，加入浓度为4%的明胶溶液，搅拌至不再有沉淀产生，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解，过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，先用去离子水洗脱除杂，再用50%丙酮溶液洗脱，控制流速为1. 5BV/h，收集洗脱液，浓缩、干燥即得产品(萍蓬草素A和B总含量为80%)。
权利要求
1.一种制备萍蓬草素的方法，其特征在于所得产品同时含有萍蓬草素A和萍蓬草素B， 萍蓬草素A和萍蓬草素B总含量为60-90%。
2.一种制备萍蓬草素的方法，其特征在于包括以下步骤将日本萍蓬草根茎加丙酮溶液微波提取，过滤，得提取液；将提取液浓缩后上大孔吸附树脂柱吸附，用不同浓度的乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇，加入明胶溶液，离心，将离心物用95%乙醇溶液溶解， 过滤，滤液上葡聚糖凝胶柱，用50-90%丙酮溶液洗脱至无色，洗脱液浓缩干燥即得产品。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述丙酮溶液为60-100%的丙酮水溶液，加入量为药材量的4-10倍，所述微波提取，提取时间为lO-lOOmin。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自HPD-400、ADS-7和 S-8中的一种，洗脱剂为0-80%的乙醇水溶液，流速为l_2BV/h。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述明胶溶液浓度为2-5%。
全文摘要
本发明涉及一种制备萍蓬草素的方法，包括以下步骤日本萍蓬草根茎加丙酮微波提取，过滤，得提取液，将提取液浓缩上大孔吸附树脂柱吸附，不同浓度乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇，加入明胶溶液，离心，将离心物用95%乙醇溶解，上葡聚糖凝胶柱，用50-90%丙酮溶液洗脱至无色，洗脱液浓缩干燥即得产品。采用本发明制备萍蓬草素，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07H13/08GK102391324SQ201110303458
公开日2012年3月28日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司