一种丁香酸的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种丁香酸的提取工艺，具体涉及一种超声辅助醇提的方法。其处理步骤：原材料的处理→酶解→超声提取→精制→超临界流体结晶，即得丁香酸成品。本发明工艺简单，提取效率高，节约能源，成本低，适于工业化生产。
【专利说明】一种丁香酸的提取工艺
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种丁香酸的提取技术，特别是涉及一种超声辅助醇提结合生物酶解 技术提取天然植物中的有效成分，以及应用超临界流体结晶技术来制备丁香酸晶体颗粒， 属于生物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 丁香酸(英文名称：Syringate)，化学名为3, 5-二甲氧基-4-轻基苯甲酸，CAS No :530-57-4,分子式为C9H1(l05，分子量为198. 18,物理性质：白色或类白色结晶性粉末，溶 于乙醇、乙醚，微溶于水和氯仿，熔点为204?207°C。
[0003] 经现代研究证明，丁香酸具有抗细菌和真菌以及镇静和局部麻醉作用。
[0004] 目前，在我国关于提取丁香酸的专利和文献很少见到，在现有提取技术中主要是 采用索氏提取法。索氏提取法，耗时过长，提取效率低，从而在一定程度上加大了工业生产 成本；在我国公开的发明专利"制备丁香酸的新方法"（专利号98113624.9 )中采用以三 甲氧基苯甲酸为原料，在一定的条件下，与碱作用，经过一步反应，即得丁香酸。该法是采用 化学合成的方法来制备丁香酸的，其操作过程复杂，反应合成条件要求高，生产过程中会产 生许多对环境有害的物质，不适合工业化生产。
【发明内容】
[0005] 本发明是针对现有制备丁香酸方法所存在的缺陷而进行的研究，主要是为了提供 一种操作简单、提取效率高、成本低、可工业化实现的提取方法。
[0006] 本发明采用的具体步骤如下： (1) 原材料的处理：将新鲜的原材料清洗干净，浙干，剪成长1~5_小碎段； (2) 酶解：称取一定量的材料碎段置于提取器中，加入碎段重量19Γ5%的生物酶解试 齐U，并同时加入料液比为1 :5?10的乙醇，在pH值Γ5,温度为45?50°C的条件下酶解f 3h ; (3) 超声提取：酶解完成后，将混合物在温度为5(T60°C的条件下超声提取3(T60min， 过滤，收集提取液备用； (4) 精制：将上述提取液采用酸性氧化铝柱层析，先用2飞倍柱体积蒸馏水洗脱，再用 3飞倍柱体积的乙醚洗脱，收集乙醚洗脱液，将洗脱液减压浓缩至原体积的1/5~1/2 ; (5) 超临界流体结晶：将上述浓缩液通过溶液泵经超临界流体结晶设备体系以高压状 态通过喷嘴急速喷入结晶釜内，流速为l(Tl50ml/min，在结晶釜底部收集析出的丁香酸晶 体细颗粒。
[0007] 步骤1)中所述的原材料为绒线草、杜鹃、茴香、乌蕨、药用蜀葵、染色栎的瘿等中 的一种或两种。
[0008] 步骤2)中所述的生物酶解试剂为果胶酶、纤维素酶、半纤维素酶中的一种或两种 以上的混合物。
[0009] 步骤3)中所述的超声提取的功率为2(Γ40ΚΗζ。
[0010] 步骤5)中所述结晶釜工作压力为l(T30MPa，喷嘴的温度为2(T70°C，结晶时间为 25~180min。 toon] 本发明采用超声辅助醇提结合生物酶解技术提取天然植物中的有效成分，以及应 用超临界流体结晶技术来制备丁香酸晶体颗粒。其中超声提取具有：1)提取效率高；2)提 取时间短；3)提取温度低；4)适应性广；5)提取药液杂质少，有效成分易于分离、纯化；6) 提取工艺运行成本低，综合经济效益显著；7)操作简单易行，设备维护、保养方便等优点。生 物酶解技术的使用，破坏了植物细胞壁，增大了植物细胞里面有效成分的流出，从而提高了 丁香酸的提取率。超临界流体结晶技术与传统结晶方法生产的产品相比，其结晶理想，表面 光滑，粒度均匀，几乎无溶剂残留。该工艺简单易行、无有害物质残留、环保无毒、成本低、操 作简单等优点，具有工业化意义。
[0012] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
[0013]
【具体实施方式】： 实施例1 : 将新鲜的绒线草和杜鹃清洗干净，浙干，剪成小碎段，称取lkg两者的混合材料碎段置 于提取器中，加入碎片重量1%的纤维素酶和果胶酶混合物试剂，并同时加入料液比为5L的 乙醇，在pH值为4,温度为45°C的条件下酶解lh ;酶解完成后，将混合物在温度为50°C的条 件下，采用20KHz超声提取30min，过滤，收集提取液；将提取液采用酸性氧化铝柱层析，先 用2倍柱体积蒸馏水洗脱，再用3倍柱体积的乙醚洗脱，收集乙醚洗脱液；将洗脱液减压浓 缩至原体积的1/5,将上述浓缩液通过溶液泵经超临界流体结晶设备体系以高压状态通过 喷嘴急速喷入结晶釜内，流速为l〇ml/min，在结晶釜底部收集析出的丁香酸晶体细颗粒，结 晶釜工作压力为lOMPa、喷嘴的温度为20°C、结晶时间为25min。经检测，所得丁香酸样品的 纯度为86. 19%，丁香酸的提取率为50. 52%。
[0014] 实施例2 : 将新鲜的杜鹃清洗干净，浙干，剪成小碎段，称取lkg两者的混合材料碎段置于提取器 中，加入碎片重量3%的纤维素酶和果胶酶混合物试剂，并同时加入料液比为6L的乙醇，在 pH值为5,温度为47°C的条件下酶解2h ;酶解完成后，将混合物在温度为55°C的条件下，采 用30KHz超声提取40min，过滤，收集提取液；将提取液采用酸性氧化铝柱层析，先用3倍柱 体积蒸馏水洗脱，再用5倍柱体积的乙醚洗脱，收集乙醚洗脱液；将洗脱液减压浓缩至原体 积的1/3,将上述浓缩液通过溶液泵经超临界流体结晶设备体系以高压状态通过喷嘴急速 喷入结晶釜内，流速为50ml/min，在结晶釜底部收集析出的丁香酸晶体细颗粒，结晶釜工作 压力为20MPa、喷嘴的温度为50°C、结晶时间为60min。经检测，所得丁香酸样品的纯度为 87. 10%，丁香酸的提取率为50. 82%。
[0015] 实施例3: 将新鲜的绒线草和杜鹃清洗干净，浙干，剪成小碎段，称取lkg两者的混合材料碎段置 于提取器中，加入碎片重量5%的纤维素酶和果胶酶混合物试剂，并同时加入料液比为10L 的乙醇，在pH值为5,温度为50°C的条件下酶解3h ;酶解完成后，将混合物在温度为60°C 的条件下，采用40KHz超声提取60min，过滤，收集提取液；将提取液采用酸性氧化铝柱层 析，先用5倍柱体积蒸馏水洗脱，再用6倍柱体积的乙醚洗脱，收集乙醚洗脱液；将洗脱液减 压浓缩至原体积的1/2,将上述浓缩液通过溶液泵经超临界流体结晶设备体系以高压状态 通过喷嘴急速喷入结晶釜内，流速为150ml/min，在结晶釜底部收集析出的丁香酸晶体细颗 粒，结晶釜工作压力为30MPa、喷嘴的温度为70°C、结晶时间为180min。经检测，所得丁香酸 样品的纯度为87. 79%，丁香酸的提取率为51. 54%。
【权利要求】
1. 一种丁香酸的提取工艺，其特征在于采用以下步骤： (1) 原材料的处理：将新鲜的原材料清洗干净，浙干，剪成长1~5_小碎段； (2) 酶解：称取一定量的材料碎段置于提取器中，加入碎段重量19Γ5%的生物酶解试 齐U，并同时加入料液比为1 :5?10的乙醇，在pH值Γ5,温度为45?50°C的条件下酶解f 3h ; (3) 超声提取：酶解完成后，将混合物在温度为5(T60°C的条件下超声提取3(T60min， 过滤，收集提取液备用； (4) 精制：将上述提取液采用酸性氧化铝柱层析，先用2飞倍柱体积蒸馏水洗脱，再用 3飞倍柱体积的乙醚洗脱，收集乙醚洗脱液，将洗脱液减压浓缩至原体积的1/5~1/2 ; (5) 超临界流体结晶：将上述浓缩液通过溶液泵经超临界流体结晶设备体系以高压状 态通过喷嘴急速喷入结晶釜内，流速为1 (Γ150ml/min，在结晶釜底部收集析出的丁香酸晶 体细颗粒。
2. 根据权利要求1所述的提取工艺，其特征在于：步骤1)中所述的原材料为绒线草、 杜鹃、茴香、乌蕨、药用蜀葵、染色栎的瘿等中的一种或两种。
3. 根据权利要求1所述的提取工艺，其特征在于：步骤2)中所述的生物酶解试剂为果 胶酶、纤维素酶、半纤维素酶中的一种或两种以上的混合物。
4. 根据权利要求1所述的提取工艺，其特征在于：步骤3)中所述的超声提取的功率为 2(Γ40ΚΗζ。
5. 根据权利要求1所述的提取工艺，其特征在于：步骤5)中所述结晶釜工作压力为 l(T30MPa，喷嘴的温度为2(T70°C，结晶时间25?180min。
【文档编号】C07C51/42GK104193618SQ201410445550
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司