一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法
【专利摘要】本发明涉及一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，具体涉及一种应用闪提技术与酶解-超声波辅助提取相结合提取异牡荆苷的方法。其处理步骤包括：将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入70~80%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破碎提取5~10min；取出，调PH值至4.0~5.5，酶解，超声波辅助提取；过滤，滤液加碱中和，大孔吸附树脂纯化，重结晶得到高纯度的异牡荆苷。本发明工艺简单，采用两种技术联用，可以优势互补，大大缩短了提取时间，成本低、更利于环保，适合工业化生产。
【专利说明】一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，具体涉及一种应用闪提技术 与酶解-超声波辅助提取相结合提取异牡荆苷的方法，属于天然产物分离领域。
【背景技术】
[0002] 小叶榕叶，又名小榕叶、落地金钱，来源于桑科榕属植物榕树的叶。小叶榕叶为民 间常用中草药，其味淡、性凉，具有清热发表、解毒消肿、去湿止痛的功效。用于治疗哮喘和 慢性支气管炎，在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果。其中主要含黄酮、 三萜类和留体化合物等化学成分，黄酮类成分以异牡荆苷为主。异牡荆苷，黄色状干粉，熔 点228°C，不溶于水，溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，属于碳苷黄酮，结构稳定， 不易降解，并具有抗氧化、抗菌等活性。
[0003] 目前关于提取异牡荆苷的方法主要是传统的浸渍法、渗漉法、回流提取法等，这些 提取法均存在诸多不足，如杂质多，提取时间长，提取率低，溶剂消耗和残留大，成本高等。 专利CN1289470C "白花败酱草中几种高纯度药用物质的快速制备方法"，采用乙醇提取，有 机溶剂萃取、高效逆流色谱分离纯化等步骤，该方法提取时间长、有机溶剂用量大，并受到 仪器设备的制约，成本高，不适合大规模生产。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种快速、高效的提取高纯度异牡荆苷的方法，该方法具 有操作简单、反应条件温和、无毒性、对环境友好的优点，易于实现工业化生产。
[0005] 本发明包括以下步骤： a. 将新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入5~10倍的7(Γ80%的乙醇，置于中药提取 器上将小叶榕叶破碎提取5~10min ; b. 取出，醋酸/醋酸钠调PH值至4. (Γ5. 5,加入广2%的纤维素酶，置于超声波装置中， 于 25(T400W、4(T60°C下酶解 4(T60min ; c. 过滤，滤液加碱中和至PH7. 0,大孔吸附树脂纯化，8?10BV的4(Γ50%的乙醇洗脱，洗 脱液减压浓缩，得粗品； d. 乙醇重结晶2次，得到高纯度的异牡荆苷。
[0006] 步骤c中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠。
[0007] 步骤c中所述的大孔吸附树脂型号为AB-8、D-140、ADS-5等。
[0008] 本发明的优点在于：应用闪提技术对植物进行破碎，使物料高速粉碎至适当粒度， 同时伴有高速搅拌、振动等外力，充分提高了提取效率；再结合纤维素酶酶解植物的细胞 壁，使细胞破碎，在超声作用下，加速有效成分的溶出，从而提高了提取的速度和产率。本发 明具有操作简单、周期短、产品得率高、纯度高的优点，可实现大规模的产业化生产。
[0009] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1 : 将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入5倍的80%的乙醇，置于中药提取器 上将小叶榕叶破碎提取5min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至4. 0,加入1%的纤维素酶，置于 超声波装置中，于250W、40°C下酶解40min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7. 0, AB-8大孔 吸附树脂纯化，8BV的50%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到5. 3g异牡荆 苷，经HPLC检测，纯度为92. 3%。
[0011] 实施例2: 将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入8倍的75%的乙醇，置于中药提取器 上将小叶榕叶破碎提取8min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至5. 0,加入1. 5%的纤维素酶，置 于超声波装置中，于300W、50°C下酶解50min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7. 0, ADS-5 大孔吸附树脂纯化，10BV的40%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到6. 2g 异牡荆苷，经HPLC检测，纯度为95. 6%。
[0012] 实施例3: 将1000g新鲜或干燥的小叶榕叶放入容器中，加入10倍的70%的乙醇，置于中药提取 器上将小叶榕叶破碎提取10min，取出，醋酸/醋酸钠调PH值至5. 5,加入2%的纤维素酶， 置于超声波装置中，于400W、60°C下酶解60min，过滤，滤液加氢氧化钠中和至PH7. 0, AB-8 大孔吸附树脂纯化，9BV的45%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到5. 8g异 牡荆苷，经HPLC检测，纯度为93. 8%。
【权利要求】
1. 一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：将新鲜或干 燥的小叶榕叶放入容器中，加入5~10倍的7(Γ80%的乙醇，置于中药提取器上将小叶榕叶破 碎提取5?lOmin，取出，醋酸/醋酸钠调ΡΗ值至4. (Γ5. 5,加入广2%的纤维素酶，置于超声 波装置中，于25(T400W、4(T60°C下酶解4(T60min，过滤，滤液加碱中和至PH7. 0,大孔吸附 树脂纯化，8~10BV的4(Γ50%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩，甲醇重结晶2次，得到高纯度的 异牡荆苷。
2. 根据权利要求1所述的一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，其特征在于，所述 的碱为氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸钠。
3. 根据权利要求1所述的一种从小叶榕叶中提取异牡荆苷的方法，其特征在于，所述 的大孔吸附树脂型号为AB-8、D-140、ADS-5等。
【文档编号】C07D407/04GK104193734SQ201410445690
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司