专利名称：胍衍生物及其相关改进的制作方法
技术领域：
本发明提供化合物(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍、它的盐、制剂及开启哺乳动物体内的钾离子通道的方法。
过去的几年中，钾通道领域已有了突破性的进展。对这一领域的迅速发展产生重大影响的主要有两个事实。第一，建立了一些新的电生理方法，这些方法采用全细胞和接线夹(patchclamp)技术，在全细胞和单个通道水平上对钾通道的功能进行定性。第二，已经认识到，能够研制出各种新型的药理物质来特异性地阻断或开启这些通道。例如，可以得到能够特异性地阻断心肌中的延迟整流通道的化合物(如氯苯庚铵和苏特罗)，这些化合物现在作为一类新的重要的抗心律失常剂(即Ⅲ型抗心律失常剂)的原型。最近发现，某些曾被认为是“非特异性血管舒张剂”的药物(例如皮纳西多(pinacidil)和克罗梅卡林(cromakalim))在血管平滑肌中是具有选择性的钾通道开启剂(PCO)。
现在了解到，在各种生物组织中有大约30种不同的钾通道。虽然早就知道钾通道在神经元兴奋性中起重要作用，但最近有了新的钾通道探针，这帮助我们了解了这些通道在包括平滑肌和心肌及腺体在内的多种组织的基本电功能和机械功能中所起到的复杂而关键性的作用。
钾通道开启剂是从多种类型的结构衍生的。美国专利
4，057，636和Betensen(J.Med.Chem.，21(8)773.1982)描述了皮纳西多(N″-氰基-N-4-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍)。各种烷基提供了抗高血压活性，而最佳化合物在相对于氮为α位的碳上具有分枝结构。4-吡啶基和3-吡啶基异构体都是有效的血管舒张剂。2-吡啶基异构体基本无活性。在Peterson的文章(J.Med.Chem.，21(8)773，1982)中，皮纳西多是50号化合物，3-吡啶基异构体是17号化合物。在这篇报导中，皮纳西多在自发高血压的大鼠体内降低血压的最低有效剂量(MED)是0.5mg/kg，而3-吡啶基异构体的MED为1mg/kg。皮纳西多现正接受临床试验以确定其抗高血压效力。
我们现已发现，皮纳西多的3-吡啶基异构体的(-)异构体作为钾通道开启剂的效力大大高于外消旋体或皮纳西多。
因此，本发明提供化合物(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍及其药学上可接受的酸加成盐。
这里所用的术语化合物(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍或其药学上可接受的盐，也将称为“本发明的化合物”。虽然它是(-)异构体，但另一种命名法也把该化合物看作是1-异构体。该化合物基本上是对映异构纯的，至少含95%(-)异构体，相比之下，已知的外消旋体基本是(-)异构体和(+)异构体的1∶1混合物。
本发明包括(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的药学上可接受的酸加成盐。由于该化合物性质为碱性，所以它能与任意多种无机酸和有机酸反应而形成药学上可接受的酸加成盐。常用于形成这类盐的酸包括无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸和磷酸;以及有机酸如对溴苯磺酸、碳酸、琥珀酸、柠檬酸、苯甲酸和乙酸;以及有关的无机酸和有机酸。因此上述药学上可接受的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、癸酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯代苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、对苯二甲酸盐、磺酸盐、二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、β-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、扁桃酸盐等。优选的药学上可接受的酸加成盐包括与诸如盐酸和氢溴酸等无机酸形成的盐，尤其是与诸如草酸和马来酸等有机酸形成的盐。
本发明的另一方面包括制备(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的方法。本发明的化合物可以应用本领域熟知的一般方法来制备，这些方法中值得一提的是美国专利4，057，636和Petersen的方法(J.Med.Chem.，21(8)773，1978)，这两篇文献特别列入本说明书作为参考。(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍可以利用经典方法通过拆分外消旋体来制备。这些方法包括与具有光学活性的酸形成盐，以及将外消旋体在手性柱上进行高压液相层析。
(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍也可以采用具有光学活性的原料通过上述参考文献所述的方法来制备。例如，参见美国专利4，057，636，可以使氨基氰与适当的式Ⅱ光学活性前体反应，得到本发明的化合物。也可以使光学活性中间体Ⅲ或Ⅳ与3-氨基吡啶反应。也可以以类似的方式使光学活性亚胺Ⅴ或硫脲Ⅵ与氨基氰反应，得到(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍。我们推荐使用后一种方法，即用式Ⅵ的硫脲与氨基氰反应制备所要的产物。
所需的硫脲用异硫氰酸3-吡啶基酯与光学活性的2-氨基-3，3-二甲基丁烷或其盐反应来制备。这种光学活性原料的最好的制备方法是，通过对所需的光学活性酒石酸盐进行分级重结晶而拆分2-氨基-3，3-二甲基丁烷外消旋体。例如，为了制备供制备本发明化合物用的光学活性胺中间体，采用L(+)-酒石酸。异硫氰酸3-吡啶基酯与光学活性(-)-2-氨基-3，3-二甲基丁烷L(+)-酒石酸盐的反应最好是在无反应性的酸清除剂如三烷基胺或吡啶存在下，通过在无反应性的溶剂如四氢呋喃中混合约等摩尔量的两种试剂来进行。该反应在约25℃至反应混合物回流温度的温度下进行。加热回流时，向所需硫脲的转化通常在约18小时内完全。
接着，在无反应性的溶剂如乙腈中，用碳化二亚胺试剂(如1，3-二环己基碳化二亚胺)和氨基氰处理所产生的(-)-N-3-吡啶基-N′-(1，2，2-三甲基丙基)硫脲，将其转化为(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍。此外，最好还应用一种无反应性的酸清除剂，如三烷基胺。一般采用摩尔数相对于硫脲原料略过量的碳化二亚胺和氨基氰试剂。反应一般在约0-50℃的温度下进行，在约25℃下搅拌约18小时后，反应即基本完全。
下列实例说明本发明化合物的制备方法。该方法只是说明性的，决不是要限制本发明的范围，请不要误解。
实例1(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍A.(-)-N-3-吡啶基-N′-(1，2，2-三甲基丙基)硫脲的制备。
在氮气氛下，于9.2g(-)-2-氨基-3，3-二甲基丁烷L(+)-酒石酸盐在约100ml四氢呋喃中的浆状物中加入21ml三乙基胺。搅拌15分钟后，在搅拌下加入5g异硫氰酸3-吡啶基酯。将该溶液加热回流过夜，然后冷却并真空浓缩。在硅胶上进行高压层析纯化所得的油状物。合并适当的级分并真空浓缩，得到9g所要的标题中间体，为粘稠油状物。
元素分析C12H19N3S计算值C，60.72;H，8.07;N，17.70实测值C，59.93;H，7.99;N，16.34。
B.(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的制备。
将3g得自上述实例1A的硫脲、3.9g1，3-二环己基碳化二亚胺和1.06g氨基氰在氮气氛下加至约50ml乙腈中。加入5滴N，N-二异丙基乙胺，将该混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物真空浓缩，所得糊状物加100ml 4∶1己烷/乙醚研制。倾出液体，将残余固体在100ml 0.8N盐酸中搅拌1小时。过滤该溶液，将滤液调至pH8。过滤回收所得固体并用甲醇/水结晶，得1.3g所要的标题产物，m.p.144-145℃。在甲醇中的旋光度为〔α〕D＝-165.365°。
元素分析C12H19N5计算值C，63.65;H，7.81;N，28.55;
实测值C，63.88;H，7.84;N，28.69。
用同样的方式制得(+)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍，m.p.141-142℃。〔α〕D＝+161.034°(甲醇)。
元素分析C13H19N5计算值C，63.65;H，7.81;N，28.55;
实测值C，63.39;H，7.99;N，28.35。
本发明还提供一种开启哺乳动物钾通道的方法，该方法包括施用开启钾通道有效量的(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍或其药学上可接受的盐。
本发明的化合物是一种钾通道激动剂或“开启剂”。因此，该化合物引起血管舒张，这使它成为一种有效的抗高血压剂，因而可用于治疗其它有关病症，如哮喘、间质性膀胱炎、尿失禁和其它泌尿生殖系失调、局部缺血性腹疾、胃肠运动失调、心律失常、外周血管疾病、充血性心力衰竭、肺高血压、哮喘、斑形脱发、痛经、青光眼、绞痛和脱发。根据需治疗的具体病症，本发明化合物可以单独施用，也可以与一种或多种其它药理活性药剂结合施用，但以基本不含(+)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的形式施用。
(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍影响心脏电生理和血管舒张参数的能力通过用犬组织进行体外实验来证实，并与其(+)异构体、外消旋N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍和皮纳西多作比较。这四种化合物都用Steinberg等人(Journal of Cardiovascular Pharmacology，12(Suppl.2)，S30-S40，1988)所述的犬头静脉试验来进行测试。测定每种化合物舒张用苯福林收缩的头静脉的有效浓度(或称EC50)，结果示于表Ⅰ。
表ⅠEC50(μM)＊化合物犬头静脉(±)-皮纳西多0.76±0.12(±)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍0.56±0.14(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍0.09±0.03(+)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍6.41±1.8＊±标准误差本发明的化合物及其药学上可接受的盐最好在施用前配成制剂。因此，本发明的另一方面是一种药物制剂，其中含有(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。该制剂所含的本发明化合物可以是唯一的生物活性药剂，也可以以基本不含(+)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的形式与一种或多种其它有药理活性的药物混合。
本发明的药物制剂用熟知且易得的成分按已知方法来制备。制备本发明的组合物时，通常将活性成分与载体混合或用载体稀释，或包在载体内，这种载体的形式可以是胶囊、香囊、纸或其它容器。当载体作为稀释剂时，可以是对活性成分起载体、赋形剂或介质作用的固体、半固体或液体物质。因此，这些组合物的形式可以是片剂、丸剂、粉剂、锭剂、香囊剂、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液、糖浆剂、气雾剂(固体或在液体介质中)、最多含(例如)10%(重量)活性化合物的软膏剂、软硬明胶胶囊剂、栓剂、无菌注射液和无菌包装粉末。活性成分一般占制剂重量的约1-95%。
合适的载体、赋形剂和稀释剂的一些例子有乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水糖浆、甲基纤维素、甲基羟基苯甲酸盐和丙基羟基苯甲酸盐、滑石、硬脂酸镁和矿物油。此外，这些制剂还可含有润滑剂、润湿剂、乳化和悬浮剂、防腐剂、甜味剂或调味剂。可以采用本领域熟知的方法配制本发明组合物，以使活性成分在施用于患者之后能快速释放、持续释放或延迟释放。
最好把组合物配成单位剂型，每个剂型含约5-500mg活性成分，更常见的是约25-300mg。术语“单位剂型”指的是适于作为人体或其它哺乳动物的单元剂量的物理上独立的单位，每个单位含有与合适的药物载体结合的预定量的活性物质，这一量经计算能产生所希望的治疗效果。
施用剂量可以为每天约0.5-300mg/kg，最好为0.5-20mg/kg本发明化合物;当然，不难理解，实际施用的(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍的量将由医生根据所有有关情况来决定，这些情况包括所要治疗的病症、所施用的化合物的选择及施用途径的选择，因此上述优选剂量范围决不是要限制本发明的范围。
下列制剂实例只是说明性的，决不是要限制本发明的范围。
制剂1用下列成分制备硬明胶胶囊量(mg/胶囊)(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍盐酸盐250干燥淀粉200硬脂酸镁10总计460mg将上述各成分混合后装入硬明胶胶囊，每胶囊460mg。
制剂2用下列各成分制备片剂
量(mg/片)(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍250微晶纤维素400锻制二氧化硅10硬脂酸5总计665mg将各成分混合后压成片剂，每片重665mg。
制剂3制备含下列成分的气雾剂溶液%重量(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍硫酸盐0.25乙醇29.75抛射剂22(氯代二氟甲烷)70.00总计100.00将活性化合物与乙醇混合，将该混合物加到一部分抛射剂22中，冷却至-30℃后送入填装机中，然后将所需的量加到不锈钢容器中，用剩下的抛射剂稀释。然后给该容器装上阀装置。
制剂4如下制备每片含60mg活性成分的片剂(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍
2-萘磺酸盐60mg淀粉45mg微晶纤维素35mg聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液)4mg羧甲基淀粉钠4.5mg硬脂酸镁0.5mg滑石1mg总计150mg使活性成分、淀粉和纤维素通过45目美国筛并充分混合。将聚乙烯吡咯烷酮溶液与所得到的粉末混合，然后通过14目美国筛。在50℃下干燥所产生的颗粒并令其通过18目美国筛。然后将预先通过了60目美国筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石加到该颗粒中，混合后用压片机压成每片重150mg的片剂。
制剂5如下制备每胶囊含80mg药物的胶囊剂(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍80mg淀粉59mg微晶纤维素59mg硬脂酸镁2mg总计200mg将活性成分、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，通过45目美国筛，然后装入硬明胶胶囊，每胶囊200mg。
制剂6可以如下制备每剂含225mg活性成分的栓剂(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍225mg饱和脂肪酸甘油酯2，000mg总计2，225mg使活性成分通过60目美国筛后，悬浮于预先用必需最低热量熔化的饱和脂肪酸甘油酯中。然后将该混合物倒入公称容量为2g的栓剂模具中并使其冷却。
制剂7如下制备悬浮剂，每剂剂量为5ml，内含50mg药物。
(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍50mg羧甲基纤维素钠50mg糖浆1.25ml苯甲酸溶液0.10ml调味剂适量颜料适量纯水至总体积为5ml使药物通过45目美国筛，然后与羧甲基纤维素钠和糖浆混合形成均匀糊状物。用一些水稀释苯甲酸溶液、调味剂和颜料，并在搅拌下加入。然后加入足量的水达所要求的体积。
制剂8可如下制备静脉内用制剂
(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍盐酸盐100mg等渗盐水1000ml上述成分的溶液以每分钟1ml的速度静脉内施用于需治疗的患者。
权利要求
1.一种制备(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍或其药学上可接受的酸加成盐的方法，该方法包括a)拆分外消旋的N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍；或b)使(-)-N-3-吡啶基-N′-(1，2，2-三甲基丙基)硫脲与碳化二亚胺试剂和氨基氰反应；及c)视需要将所得到的产物转化成其药学上可接受的酸加成盐。
全文摘要
本发明提供化合物(-)-N″-氰基-N-3-吡啶基-N′-1，2，2-三甲基丙基胍、它的盐和药物制剂，及其用于开启哺乳动物钾通道的使用方法。
文档编号C07D213/75GK1044654SQ9010048
公开日1990年8月15日 申请日期1990年2月2日 优先权日1989年2月3日
发明者戴维·韦恩·罗伯特逊, 米歇尔·欧文·斯坦伯格 申请人:伊莱利利公司