多肽衍生物及钙代谢改善剂的制作方法

专利名称：多肽衍生物及钙代谢改善剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及钙代谢改善剂。更具体地说，本发明涉及具有抑制骨钙吸收(抑制钙与骨分离)、降低血钙浓度、止痛、抑制胃液分泌等活性的新型多肽衍生物、其酸加成盐及其复合物。本发明还涉及钙代谢改善剂，它含有至少一种新型多肽衍生物、其酸加成盐或其复合物作为活性成分以及蛋白分解酶抑制剂和/或可作药用的酸。
在化学领域已普遍知道降钙素为具有降低血钙浓度作用的多肽衍生物。它可从人和其它哺乳动物的甲状腺、鸟以及鱼和两栖动物的鳃器官中提取得到。自然界中存在各种类型的降钙素，根据其不同的种属来源它们具有不同的组成氨基酸。通过各种自然途径获得的这些降钙素均为多肽，且这些多肽由32个氨基酸组成，其相同化学结构在于其第1个和第7个氨基酸均为L-半胱氨酸，且所说的L-半胱氨酸中的巯基形成二硫键，其相同之处还在于每种多肽的末端羧基形成脯酰胺(Prolinamide)。
但是，在这些天然降钙素中存在的二硫键据信在溶液中是非常不稳定的。因此，当将这些降钙素作为药剂用于治疗由超常高浓度的血钙所引起的各种症状如高钙血、Peget氏病及骨质疏松症时，有可能会导致降钙素的生理活性降低，且会出现由其副产物所引起的抗原性。
由于降钙素为肽化合物，因此通常在消化道被分解，且由于它们是大分子量化合物，因此也难以从消化器官被吸收。由于这些原因，作为药物制品的降钙素只能以肌内注射制剂及静脉注射制剂等注射制剂的形式服用。但是，当使用以上注射制剂时难以在医院外进行治疗。因此，使用降钙素进行治疗的病人必须在每次注射给药时上医院，从而限制了降钙素为药用制剂的用途。
近年来，已报道许多人工合成的降钙素具有类似于以上所述的天然降钙素的化学结构。在这些合成降钙素中，包括具有基于天然鲑降钙素的氨基酸顺序的多肽，其中上面所述的二硫键在这里已被通过纯化氨基酸顺序中的第一个半胱氨酸，用低级亚烷基所取代，同时用具有特定低级亚烷基的α-氨基酸取代氨基酸序列中的第七个半胱氨酸，再将上述α-氨基酸侧链上的羧基与氨基酸序列中的第二个丝氨酸的氨基进行闭环反应以形成上述低级亚烷基键。〔见日本专利公开号51-128993(1976)(对应于美国专利4，086，221)及日本专利公开号61-112099(1986)〕。但是，据报导，这些天然降钙素中存在的上述二硫链是维持其生理活性所必需的。因此，与相应的天然类型降钙素相比，上述不含二硫键的合成多肽的稳定性可能得到一定程度的改善，但是，与相应天然类型降钙素所显示的基本生理活性相比，以上合成多肽的生理活性可能受到一定程度的降低。
本发明的目的之一就是提供一种新型合成多肽，即新型降钙素衍生物，它不具有上述二硫键，从而避免了其不稳定性，而且它还改善了相应天然降钙素的基本生理活性，即降低血钙浓度、止痛、抑制胃液分泌等。因此，这些合成降钙素可用作治疗高血钙，止痛、抗溃疡等的有效药剂。
本发明的另一个目的就是提供制备上述合成多肽的方法。
本发明的目的之三是提供一种药用组合物，它含有至少一种由下述通式(1)和(2)所代表的合成多肽衍生物作为活性成分，它还含有蛋白分解抑制剂和/或可作药用的酸。
本发明人经过深入研究达到了本发明的以上目的。其结果是他们已成功地合成了具有通式(1)和(2)所表示的特定化学结构式的新型多肽衍生物。而且他们还发现，这些新型多肽衍生物具有在上述目的中所提到的极好性质，以满足作为药物的要求，因此，本发明已经完成。
本发明涉及由通式(1)或通式(2)所代表的多肽衍生物，其酸加成盐以及其复合物
其中(A)为低级亚烷基;(B)为-NHCO-基团、-S-基轩、或羟亚苯基;(D)为低级亚烷基;(E)为缬氨酸残基、甘氨酸残基或异亮氨酸残基;(F)为组氨酸残基、天冬酰胺残基、甘氨酸残基、丙氨酸残基、丝氨酸残基、亮氨酸残基或谷氨酰胺残基、(G)为精氨酸残基或谷氨酰胺残基;l，m，n均为0或1;条件是当l为0、(A)为亚甲基时(D)为亚甲基或亚乙基。
其中(A′)为低级亚烷基、(B′)为-NHCO-基团;(D′))为低级亚烷基;(G′)为组氨酸残基、天冬氨酸残基或甘氨酸残基、(H′)为精氨酸残基或谷氨酰胺残基;p和q均为0或1。
在本说明书中，氨基酸、多肽、保护基团及活性基团等均按现有技术中常用的IUPAC(国际生物化学联合会)的规则以缩写或代号的形式表示。对于旋光异构体的叙述，除非另有特别说明，一般均指异构体的L-构型(左旋型)，这些缩写或代号的例子如下Ala丙氨酸β-Alaβ-丙氨酸Arg精氨酸Asp天冬氨酸Asn天冬酰胺Cys半胱氨酸Gln谷氨酰胺Glu谷氨酸Gly甘氨酸His组氨酸Ile异亮氨酸Leu亮氨酸Lys赖氨酸Pro脯氨酸Thr苏氨酸Ser丝氨酸Val缬氨酸Tyr酪氨酸
Bzl苄基But叔-丁基基团Boc叔-丁氧羰基OBZL苄氧基OsuN-羟琥珀酰亚胺ONp对-硝基苯氧基Z苄氧羰基cl-Z邻-氯苄氧羰基Tos对-甲苯磺酰基OEt乙氧基DCCN，N′-二环己基碳二亚胺TFA三氟乙酸DMF二甲基甲酰胺WSCN-乙基-N′-二甲基氨丙基-碳二亚胺THF四氢呋喃HOBT1-羟苯并噻吩HOSuN-羟基琥珀酰亚胺HONBN-羟基-5-降冰片烯-2，3-二碳酰亚胺Acpε-氨基己酸Abuγ-氨基丁酸CpcS-(3-羧基丙基)半胱氨酸CecS-(2-羧乙基)半胱氨酸OcHex环己氧在cl-Bzl2，6-二氯苄基除此之外，在本说明书中，由通式(1)中的符号(A)、(B)、和(D)、所定义的基团及通式(2)中的符号(A′)、(B′)和(D′)所定义的基团的具体实例如下对于低级亚烷基，具有1-6个碳原子的直链或支链亚烷基如亚甲基、亚乙基、三亚甲基、1-甲基亚乙基、四亚甲基、2-三亚乙基、亚戊基和亚己基等可以作为其实例。
羟亚苯基是指邻羟亚苯基，间羟亚苯基和对羟亚苯基。
由上述通式(1)中
式所代表的优选实例及由上述通式(2)中
式所代表的优选实例可以下列各式的基团作为举例
根据本发明，由上述通式(1)所代表的多肽衍生物、其酸加成盐及其复合物具有比基于每一通式的特定化学结构的天然降钙素更优异的降低血钙浓度活性、止痛活性、抑制胃酸分泌活性及其它药理活性。除此之外，即使在以溶液状态保存的情况下这些多肽衍生物的稳定性仍被明显改善，上述各种药理活性没有降低。另外，本发明的多肽衍生物具有良好的长效性质及吸收性，而且，它们具有抗原性、增加血糖活性、减少体重作用、肠运动抑制作用以及降低摄食作用等副作用小的性质。因此，本发明的多肽衍生物可用作治疗由超常高血钙水平所引起的各种症状如骨eget氏病、骨质疏松症的有效药剂，止痛剂以及抗溃疡剂。由于这些性质，本发明的多肽衍生物、其酸加成盐以及其复合物是用作上述药物的非常合适的化合物。
下面接着详细介绍由通式(1)和(2)所代表的多肽衍生物的制备方法。
根据本发明，由上述通式(1)和(2)代表的多肽衍生物可基本上按照常规的多肽合成法(如所谓的“分段法”)制备，因此，按照上述氨基酸序列中的化学结构，将氨基酸与末端氨基酸逐步缩合从而延长序列中的酰胺键(肽键)，或通过首先将上述多肽的化学结构分为几个片段，然后合成这些片段，再缩合这些片段就可制备多肽。为此，首先制备与上述化学结构相对应的多肽链，然后将多肽制备过程中形成的特定N-末端氨基酸中的游离官能团与第七个氨基酸或相关化合物的侧链官能团结合，以便通过闭环制备所需多肽衍生物。
第七氨基酸的相关化合物中有些为新型化合物，这些新型化合物为按照下述方法从作为起始物质的合适被保护氨基酸或其相应的卤代化合物制备。因此，在碱性化合物存在的情况下将Z-Tyr-OCH3中的羟基或Hcl-H-Cys-OCH3中的巯基在合适溶剂中与其羧基已被保护的卤代低级烷基羧酸反应。可用于这一反应的碱性化合物包括三乙基胺;金属氢化物，如氢化钠、氢化钾、氢化锂等;无机碱性化合物，如碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾、氢氧化钠、氢氧化钾等。可使用的溶剂包括卤代烃，如二氯甲烷、四氯化碳、氯仿、四氯乙烷等;醚，如二恶烷、THF(四氢呋喃)、二甲氧乙烷等;酮，如丙酮、甲基乙基酮等;乙腈，乙酸乙酯，DMF(二甲基甲酰胺)，二甲基乙酰胺，二甲基亚砜等。所有这些溶剂最好以无水状态的形式使用，与上述氨基酸反应的卤代低级烷基羧酸中的羧基保护基可以是能够形成普通酯的任何基团。从这些基团形成的酯的典型例子有烷基酯(甲基、乙基、丙基、丁基、叔-丁基等)或苄基酯，对上述反应中起始物质的数量比没有任何特定限制，通常是等摩尔量至5倍摩尔量、优选等摩尔量至1.5倍摩尔量的上述羧酸可用于氨基酸。上述反应一般在约0-100℃、优选室温-60℃的温度下进行。反应一般在30分钟至120小时内完成。
对于上面所述的用于合成多肽的方法，在以下文献中已有具体叙述ThePeptides”〔Vol.(1979)，pp66-100，Chapter2，byJohanH.Jones，TheFormationofPeptideBonds(EditedbyErhardGrossandJohannesMeienhofer，publishedfromAcademicPress，Inc，NewYork，N.Y.，U.S.A.〕;“PEPTIDE-GOHSEI-NO-KISO-TO-JIKKEN〔FundamentalsandExperimentsintheSynthesisofPeptides)，byIrumiya，etal，publishedfromMaruzenPublishingCo.Ltd.，Tokyo，Japan〕。例如，可以用于举例的例子有叠氮化物法，酰基氯法，酸酐法，混合酸酐法，DCC(N，N′-二环己基羰二亚胺)法，活化酯法(如对-硝基苯基酯法，N-羟琥珀酰亚胺法，氰甲基酯法等)，Woodward-K试剂法，羧基二咪唑法，氧化-还原法和DCC/加成物(如HONB、HOBT和HOSU)法。在实施上述方法时，可使用固相合成法或液相合成法。当使用固相合成法时，首先是将C-末端氨基酸(其末端氨基被保护的氨基酸)通过其羧基与一种不溶性载体偶联。对不溶性载体没有任何特别限制，它可以选自对反应性羧基具有偶联能力的任何物质，如卤代甲基树脂、苯酚树脂、叔-烷氧羰基酰肼树脂、二苯甲基胺树脂。接着，在除去氨基保护基之后，按照上述通式(1)和(2)所代表的氨基酸序列，将每一种氨基被保护的氨基酸通过反应性羧基与反应性氨基的缩合反应(肽键形成反应和酰胺键形成反应，以下均简称为“缩合反应”)依次与另一种氨基被保护的氨基酸偶联，从而通过逐步法进行多肽的合成，将链长延长至在整个氨基酸序列的第32至第8位置之内的适当长度、然后将如此得到的多肽与对应于本发明多肽的剩余部分的另一个多肽偶联，这另一个多肽是通过液相合成法等方法单独合成的。再通过除去不溶性载体就得到了由通式(1)或(2)所代表的多肽。按照本发明，所需的多肽成环反应是通过类似于上述缩合反应的酰胺形成反应而实现的。
在实施上述各种方法时，对于某些具有侧链官能团的氨基酸，如Arg、Tyr、Glu、Thr、Asp、Lys、His和Ser等，最好是使用常规的保护基团通过保护其侧链官能团而将这些氨基酸保护起来，然后在上述反应完成之后除去所说保护基。与上述反应相关的官能团通常被活化。以上反应均是现有技术中已知的，其中所用的试剂可从已知试剂中适当选用。
例如，氨基保护基有苄氧羰基、叔-丁氧羰基、叔-戊氧羰基、异冰片氧基羰基、对-甲氧基苄氧羰基、2-氯苄氧羰基、硬石基羰基、三氟乙酰基、邻苯二酰基、甲酰基、邻-硝基苯基亚磺酰基、二苯基硫膦基和9-芴基甲氧羰基等。
对于羧基保护基，任何能够形成烷基酯(链烷酯或环烷基酯，如甲基、乙基、丙基、丁基、叔-丁基和环己基酯)、Bzl酯、对-硝基苄基酯、对-甲氧基苄基酯、对-氯苄基酯、二苯甲基酯、苄氧羰基酰、叔-丁氧羰基酰肼及三苯甲基酰肼等的基团均可使用。
Arg的胍基保护基的例子有对-甲苯磺酰基、硝基、苄氧羰基及戊氧羰基等。
Ser和Thr的羟基可通过酯化法或醚化法加以保护，但这种保护并不是必需的。适于酯化羟基的基团有低级链烷酰基(如乙酰基)、芳酰基(如苯甲酰基)以及得自羧酸的基团(如苄氧羰基、乙氧羰基)等。适于醚化羟基的基团有苄基、四氢吡喃、叔-丁基等。
Tyr的羟基保护基有苄基、2，6-二氯苄基、苄氧羰基、乙酰基及对-甲苯磺酰基等。
Lys的侧链氨基保护基有苄氧羰基、2-氯苄氧羰基、2，6-二氯苄氧羰基、Boc及对-甲苯磺酰基等。
His的亚氨保护基有对-甲苯磺酰基及Bzl基团等。
Asp和Glu的羧基可通过与苄醇、甲醇、乙醇、叔-丁醇、环己醇等醇类酯化而被保护。
活化羧基的例子有相应的酰基氯、酸酐或混合酸酐、叠氮化物、活化酯(戊氯苯酚、对-硝基苯酚、N-羟琥珀酰亚胺、1-羟苯并三唑及N-羟基-5-降冰片烯-2，3-碳二亚胺的酯)等。
在上述方法，反应性氨基与反应性羧基的缩合反应可在碱性化合物存在的条件下于合适溶剂中进行，可以使用的合适碱性化合物有有机碱性化合物(如三乙基胺、三甲基胺、N，N-二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基苯胺、N-甲基吗啉、1，5-二氮杂二环(4，3，0)-5-乇烯(DBN)、1，5-二氮杂二环(5，4，0)-5-十一碳烯(DBU)、1，4-二氮杂二环-(2，2，2)辛烷(DABCO)等);无机碱性化合物(如碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾、碳酸氢钠等)。已知适用于这类缩合反应的任何溶剂，如无水或含水DMF、二甲基亚砜(DMSO)、吡啶、氯仿、二噁烷、二氯甲烷、THF、乙酸乙酯、N-甲基吡咯烷酮、六甲磷酰胺(HMPA)及其混合溶剂等均可使用。对于这一反应中起始物质的数量比没有任何特定限制，一般是等摩尔量至5倍摩尔量的一种物质对另一种起始物质，优选的是等摩尔量至1.5倍摩尔量的一种物质对另一种起始物质。反应温度可在该类缩合反应通常所使用的温度范围之内，一般选择从约-40℃至60℃之内的合适温度，优选-20℃-40℃。反应通常进行几分钟至120小时。
在上述缩合反应中，混合酸酐法是在碱性化合物存在的情况下于合适的溶剂中进行，其中使用了烷基卤代羧酸，如氯甲酸甲酯、溴甲酸甲酯、氯甲酸乙酯、溴甲酸乙酯、氯甲酸异丁酯等。可以使用的碱性化合物有有机碱性化合物(如三乙胺、三甲胺、N，N′-二异丙基乙胺、吡啶、二甲基苯胺、N-甲基吗啉、DBN、DBU和DABCO等);无机碱性化合物(如碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钾及碳酸氢钠)等。任何适用于混合酸酐法的溶剂均可以用作溶剂，例如卤代烃(如二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷)、芳烃(如苯、甲苯、二甲苯等)、醚(如二乙醚、THF、二甲氧乙烷)、酯(如乙酸甲酯、乙酸乙酯)以及非质子传递极性溶剂(如DMF、HMPA、DMSO等)。反应通常在-20-100℃、优选约-20-50℃进行，且反应通常在几分钟-约10小时、优选约几分钟-2小时内完成。
上述叠氮化物法的详细过程如下首先用甲醇、乙醇、苄醇等醇类活化氨基酸的羧基，然后在合适的溶剂中将所获得的活化羧基与水合肼反应，得到所需叠氮化合物，溶剂可使用二恶烷、DMFDMSO、HMPA、醇或其混合溶剂。水合肼的摩尔用量通常为活化羧基的5-20倍，优选5-10倍。该反应通常在低于50℃、优选-20-30℃的温度下进行，以得到羧基部分被肼取代的化合物(肼衍生物)。进而在酸存在的情况下于合适溶剂中将上述肼衍生物与亚硝酸化合物反应而制备出羧基部分被叠氮取代的化合物。该反应中通常所使用的酸为盐酸，可使用的亚硝酸化合物有亚硝酸钠、歪硝酸异戊酯、亚硝酰氯等。该亚硝酸化合物的用量通常为肼化合物的等摩尔量至2倍摩尔量，优选等摩尔量至1.5倍摩尔量。该反应通常在约-20-0℃、优选-20--10℃进行，反应时间约几分钟至30分钟。
上述各种缩合反应可在合适缩合剂存在的情况下进行，缩合剂的例子有碳化二亚胺试剂(如DCC，WSC，Hcl等);N，N′-羰基二咪唑，焦磷酸四乙酯等。该缩合剂的摩尔用量为起始物质的1-4倍。使用缩合剂的上述反应是在合适的溶剂中进行。溶剂的例子有卤代烃(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、四氯乙烷等);醚(如二恶烷、THF、二甲氧乙烷);酮(如丙酮、甲基乙基酮);乙腈、乙酸乙酯、DMF、二甲基乙酰胺及DMSO等，且优选的是其无水溶剂，反应温度一般约为-10-60℃，优选0℃-室温。反应时间为约几十分钟至120小时。
在上述各个反应步骤及最终反应步骤中，当必须除去保护基时，除去反应可按类似于除去保护基的通常反应中所使用的方法进行。除去保护基的方法有使用钯-炭、钯黑等催化剂的氢化法;在液氨中使用金属钠作为还原剂的还原法在碱性条件下使用哌啶的除去反应;使用三氟乙酸、盐酸、氟化氢、甲磺酸、氢溴酸等强酸的酸水解法。
使用上述催化剂进行氢化反应时，该反应可在1个大气氢气压及0-40℃的条件下进行，催化剂的用量一般在约100mg-1g的范围内，反应时间为约1小时至数天。上述酸水解反应可在溶剂存在的情况下于-40-60℃、优选约-20-20℃进行约几分钟至几小时。其中酸的用量一般要比起始物质大大过量。在酸水解过程中，当只除去氨基保护基时最好使用三氟乙酸或盐酸作为酸。当使用金属钠在氨水中进行还原反应时，所使用的金属钠的量应使反应混合物在30秒-10分钟内永久保持蓝色，且反应温度一般为约-40～-70℃。
在本发明中，通过上述缩合反应及随后的获得多肽的上述制备步骤就可制备出链结构的多肽衍生物，在这一过程中重要的是使用类似于缩合反应的特定环化反应步骤，从而使在制备上述多肽过程中形成的N-末端氨基酸的游离官能团与第7个氨基酸或其相关化合物的侧链官能团发生闭环反应。
下面的实施例1演示了制备本发明多肽衍生物的优选实施。在该实例中，首先制备被保持的多肽〔Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser-(Bzl)-Thr(Bzl)-NH-CH-COOBzl〕(它对应于从N-末端CH2-CH2COOH计数的第1-第7氨基酸序列)，然后通过在无水吡啶中加入TFA-ONp而将该产物转化成活性酯，再通过用TFA除去BOC基团，将所得到的被保护多肽(THA.H-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-NH-CH-COOBzl)溶于DMF，所得溶液CH2-CH2COONp
滴加至50℃的大量的无水吡啶中。将其在剧烈搅拌条件下放置几小时，混合物经再次搅拌几小时后得到所需环化被保护多肽，接着通过片段缩合将氨基酸序列第8至第10位置的肽缩合，得到被保护的十肽。
另一方面，通过逐步法或片段缩合法合成氨基酸序列中第11-32氨基酸的被保护多肽。然后将这一多肽与前面制备的被保护十肽偶联，最后除去保护基团。
按如上所述各种方法得到的多肽可按照分离多肽时所常用的方法如溶剂萃取法、分配法及柱层析法等进行分离和纯化，从而得到由本发明的通式(1)和(2)所代表的所需多肽衍生物。
如此获得的本发明多肽通常以游离碱或其盐的形式存在，且具有与相应的原始天然多肽相类似的生物活性。因此，它们可用作各种药用制品。可按照常规方法将它们转化成可作药用的酸加成盐或其复合物。用于制备上述酸加成盐的酸的例子有无机酸(如盐酸、氢溴酸、磷酸);有机酸(甲酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、水杨酸、低级烷基磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸)。通过加入某些类型的使多肽具有长效性质的无机式有机物质可以制备出上述复合物。用于形成这些复合物的无机物包括得自钙、镁、钴、锌等金属的无机化合物，尤其是这些金属的磷酸盐、焦磷酸盐，多磷酸盐(这些盐具有轻微的可溶性)、以及其氢氧化物;其它无机化合物还有碱金属的多磷酸盐。所说有机物质的例子有非抗原性白明胶，CMC(羧甲基纤维素)，藻酸的磷酸酯或磺酸酯，葡聚糖，肌醇六磷酸，多聚谷氨酸，鱼精蛋白等。
本发明钙代谢改善剂很重要的一点就是将通式(1)和(2)所代表的多肽衍生物、其酸加成盐和其复合物中至少一种物质与蛋白分解酶抑制剂和/或可作药用的酸结合使用。蛋白分解酶抑制剂的例子有胰蛋白酶抑制剂〔见LifeSeience，Vol.31，pp2837，(1982);BiochemicalPharmacoloqy，Vol.36，PP1035;(1987);IGAKU-NO-AYUMI(ProgressoftheMedicine)，Vol.138，P.59，(1986)〕。胰凝乳朊酶抑制剂〔JapanesePatentKokai(Laid-open)No.58-225080(1983);TheJournalofBiochemistry，Vol.95，pp319，(1984);Biochemistry;Vol2，pp252(1963);JournaloftheAmericanChemicalSocietyVol.93，pp.2351，(1971);JournalofPharmacyandPharmacology，Vol.32，pp182，(1980);以及TheJournalofAntibiotics，Vol.23pp425(1970)。上述蛋白分解酶抑制剂的具体实例有抑糜蛋白酶素，亮肽素，抗痛素，大豆胰蛋白酶抑制剂(如由Sigma&Co.公司生产的SBTI等I-S型)，抑肽酶，N-α-对-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮，Gabexate甲磺酸盐，Urinastatin，Nafamostat甲磺酸盐，FK-448〔4-(4-异丙基哌嗪羰基)苯基-1，2，3，4-四氢-1-萘甲烷磺酸盐的商标，由KOWA公司生产〕。
与通式(1)和/或(2)所代表的多肽衍生物一起使用的可作药用的酸包括常用的有机酸、无机酸及其盐。无机酸的具体实例有盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸等;有机酸的实例有甲酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、琥珀酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、水杨酸，低级烷基磺酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、抗坏血酸、酸性氨基酸、脂肪酸等;盐的实例有乳酸钠、乳酸钾、柠檬酸钠、柠檬酸钾、酒石酸钠、水杨酸钠、抗坏血酸钠。酸性氨基酸的例子有谷氨酸、焦谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸等。不饱和脂肪酸的例子有油酸、亚油酸、花生四烯酸等。在这些酸中，一般使用有机酸，特定的固态有机酸较好，弱酸性有机酸最好。
上述蛋白分解酶抑制剂及可作药用的酸与由通式(1)或(2)所代表的多肽衍生物的数量比没有特别限制，它可在很宽的范围内选择，一般来说，所使用的蛋白分解酶掏剂的重量份(或摩尔)为通式(1)或(2)所示的多肽衍生物的重量份500-1×106倍，优选1，500-3×105倍。与此类似，所使用的可作药用的酸的重量份一般为通式(1)或(2)所示多肽衍生物重量份的1，000-1×106倍，优选5，000-2×105倍。
通过与蛋白分解酶抑制剂和可作药用酸结合使用可显著增加通式(1)或(2)所示多肽衍生物的可吸收性，尤其是肠内可吸收性，从而进一步改善降低血钙逍度的活性。当蛋白分解酶抑制剂和可作药用酸中的一种或两种与通式(1)或(2)所示的多肽衍生物结合使用时可明显看到由通式(1)和(2)所示多肽衍生物引起的肠内吸收促进作用，且当三种成分(即蛋白分解酶抑制剂、可作药用的酸以及由通式(1)和/或(2)所所的多肽衍生物)结合使用时可以看到协同作用。
制备本发明的钙代谢改善剂，是将通式(1)和/或(2)所示的多肽衍生物与蛋白分解酶抑制剂和可作药用的酸中至少一种配制成含有以上各个成分的单一制剂，然后服用这种单一制剂;或者是将这些成分单独配制成单一药剂，然后服用分别含有一种成分的各个药剂。在每一种情况下，均可使用常规稀释剂或赋形剂(如填料、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、表面活性剂、润滑剂等)来制备上述药用制品。根据治疗的目的，药剂的类型可在很宽的范围内选择，药用组合物的例子有片剂、丸剂、粉末、液体、悬浮液、乳化液、颗粒、胶囊、栓剂、鼻滴液、口腔粘膜吸收剂(如锭剂，颊、舌下片剂，可咀嚼片剂，以及滴液)、眼睛洗液及软膏等。
为了将该药物制剂加工成片剂，可使用该领域广泛使用的载体，例如，赋形剂，如乳糖、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、淀粉、碳酸钙、高岭土、结晶纤维素、硅酸等，粘合剂如水、乙醇、丙醇、简单糖浆、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明胶溶液、羧基甲基纤维素、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾聚乙烯吡咯烷酮等，崩解剂如干燥的淀粉、藻酸钠、琼脂粉末、昆布粉末、碳酸氢钠、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯、十二烷基硫酸钠、硬脂酸单甘油酯、淀粉、乳糖等，崩解抑制剂如蔗糖、硬脂精、椰子黄油、氢化油等，吸收促进剂如季铵碱、十二烷基硫酸钠等，润湿剂，如甘油、淀粉等;吸收剂如淀粉、乳糖、高岭土、膨润土、胶体硅酸等，润滑剂如纯化的滑石、硬脂酸盐、硼酸粉末、聚乙二醇等。在制备片剂时，可用常规的包衣材料再将片剂包衣，以制成糖衣片剂、明胶膜包衣片剂、用肠包衣材料包衣的片剂、用膜包衣的片剂或双层片剂和多层片剂。
为了将该药物制剂加工成丸剂，也可使用该领域已知的并已广泛使用的载体，例如，赋形剂如葡萄糖、乳糖、淀粉、椰子黄油、氢化植物油、高岭土、滑石等，粘合剂如粉末状阿拉伯树胶、粉未状西黄蓍胶、明胶、乙醇等，崩解剂如昆布(laminalia)、琼脂等。
为了将该药物制剂加工成栓剂，也可使用该领域已知的并广泛使用的载体，例如，聚乙二醇、椰子黄油、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成的甘油酯等。
为了将该药物制剂加工成胶囊剂，可将活性组分(本发明的多肽衍生物和蛋白酶抑制剂以及药用酸)与上述载体混合，将由此获得的混合物填入固状明胶胶囊内或软质胶囊内以制成胶囊剂。
为了加工成注射制剂，要对这些活性组分的溶液、乳液或悬浮液进行消毒并最好使之等渗到血液中。在制造这些制剂时可使用稀释剂，如水、乙醇、聚乙二醇、聚丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、聚氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯等。在这些情况下，为了使所需的制剂等渗到血液中，可往制剂中加入适量的氯化钠、葡萄糖或甘油、另外还可加入常规的溶解剂、缓冲剂、止痛剂等。除上述之外，也可往所述的注射制剂中加入着色剂、防腐剂、香料、调味剂、增甜剂以及其它药物。
为了加工成糊剂，乳膏和胶体，也可使用该领域内已知的并已广泛使用的稀释剂，例如，白凡士林、石蜡、甘油、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、皂粘土等。
为了加工成滴鼻制剂和口粘膜吸收型制剂，可通过常规方法，使用合适的粘合剂、稀释剂、推进剂等制成粉末型、气溶胶型和液态型制剂，从而通过喷雾和喷洒的形式给药。在制备上述粉末型产品时，宜使用吸水材料，如纤维素、淀粉、聚丙烯酸酯等。在制备上述气溶胶型产品时，宜使用水、二元醇、非离子表面活性剂等。在制备上述喷洒推进剂型产品时，可使用液化的石油气、二氧化碳气、氟化低级烷作为推进剂。
本发明的钙代谢改善剂中的活性组分的含量没有特殊的限制且可在较宽的范围内选择，用通式(1)或(2)表示的多肽衍生物在药物制剂中的含量通常为1ug至1mg，在药物制剂中蛋白酶抑制剂和药用酸的含量约为100mg至2g。
对上述药物制剂的给药方式没有特殊的限制，可根据制剂形式、患者年龄、性别和其它状况、症状的程度等进行选择，例如片剂、丸剂、液体、悬浮液、乳液、颗粒剂和胶囊剂可口服，注射制剂可简单地静脉给药或与注射输液如葡萄糖溶液和氨基酸溶液混合，如果需要，注射制剂可简单地肌内、皮内、表皮下和腹膜内给药，栓剂可直肠内给药，滴鼻剂可通过吸入鼻腔内的方法给药，口腔粘膜吸收型制剂可施用于口腔粘膜。
上述药物制剂的剂量可根据使用方式、患者的年龄、性别和其它状况、症状的程度适当地加以选择。通式(1)或(2)代表的多肽衍生物的通常给药量约为20ng到20ug/千克体重/天，这些药物制剂每天可分别地给药1-4次。
本发明可提供含降钙素衍生物(多钛衍生物)的药物制剂，特别是可提供含新的降钙素衍生物的钙代谢改善剂，该改善剂具有极好的抑制骨钙吸收、降低血液中钙的浓度的活性，此外，该改善剂作为止痛剂也具有极好的活性，且对抑制胃液的分泌具有活性作用。这些药理活性起作用时仅有很小的副作用。除上述叙述外，本发明的多肽衍生物甚至在处于溶液状况也是稳定的，以致于它们对于肠内(小肠和直肠)给药具有良好的吸收能力。另外，多肽衍生物对鼻的粘膜和嘴的粘膜具有良好的吸收能力。
本发明的多肽衍生物具有几个极好的特性，即(1)在水中的高溶解度，(2)良好的吸收能力，(3)良好的长效性，(4)良好的稳定性，(5)强的药理活性，(6)低毒性，(7)低抗原剂和(8)低的抑制食欲活性。因此，鉴于上述极好特性，本发明的多肽衍生物可用于多种药物应用。
为了更详细地说明本发明，下面将制备本发明的多肽衍生物所用原料的制备例称之为参考实施例，而将制备本发明的多肽衍生物的实例称之为实施例。
另外，下面还要叙述本发明的多肽衍生物的药理试验。
在各个实施例中，按照下述步骤进行氨基酸分析将6N盐酸(往其中加入苯酚)加到试验化合物中，在110℃水解试验化合物24小时或48小时，真空干燥反应混合物，用氨基酸分析仪分析得到的残余物。
参考实施例1Boc-Thr(Bzl)-Glu-OBzl的制备在冰冷却下2.83gH-Glu-OBzl溶于40ml乙腈的溶液中加入3.3ml三乙胺和5.00gBoc-Thr(Bzl)-OSu.在室温下搅拌混合物过夜。减压浓缩反应混合物，将残余物溶于50ml乙酸乙酯中并用30ml水洗涤得到的溶液二次。用无水硫酸镁干燥乙酸乙酯层。蒸馏除去溶剂并干燥乙酸乙酯层，从而获得5.50g(产率87.2%)上述标题化合物，为粉末状产品。
参考实施例2Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl.H2O的制备在冰冷却下将5.50gBoc-Thr(Bzl)-Glu-OBzl溶于15mlTFA中，在室温下搅拌混合物30分钟。减压浓缩反应混合物，在氢氧化钠上对残余物进行真空干燥。
将得到的产物溶于50ml乙腈中，然后在冰冷却下用三乙胺中和。往其中加入4.20gBoc-Ser(Bzl)-OSu并在室温下搅拌混合物过夜。减压浓缩反应混合物，将残余物溶于50ml乙酸乙酯。乙酸乙酯层用20ml1N盐酸洗涤二次，再用20ml水洗涤二次。然后减压浓缩乙酸乙酯层。用正己烷洗涤残余物，获得6.90g(产率91.6%)上述标题化合物，为粉末状产品。
元素分析(C38H47N3O10.H2O)理论值(%)C63.06，H6.82，N5.81实测值(%)C63.33，H0.60N5.80氨基酸分析Thr0.98(1)Ser0.93(1)Glu1.09(1)参考实施例3Boc-Asn-Leu-OEt的制备将5.00gH-Leu-OEt.HCl，5.95gBoc-Asn-OH和4.11gHOBT.HO悬浮于100mlTHF中。在冰冷却下往该悬浮液中加入4.70mlWSC，在室温下搅拌混合物7小时。往反应混合物中加入100ml乙酸乙酯和200ml水以进行萃取。乙酸乙酯层依次用50ml饱和碳酸氢钠水溶液洗涤三次，用50ml饱和氯化钠水溶液洗涤一次，用50ml1N盐酸洗涤三次，最后用饱和氯化钠水溶液洗涤一次，用无水硫酸镁干燥和减压浓缩。用异丙醚固化残余物，获得7.00g(产率72.9%)上述标题化合物，熔点155-157℃。
参考实施例4Boc-Ser(Bzl)-Asn-leu-OEt的制备在冰冷却下将6.90gBoc-Asn-Leu-OEt溶于25mlTFA中，在室温下搅拌混合物30分钟，减压浓缩反应混合物，用异丙醚和正己烷混合残余物。滗析分离得到的沉淀，在氢氧化钠上减压干燥。
将得到的产物溶于50mlTHF中，在冰冷却下往其中加入5.18ml三乙胺和7.30gBoc-Ser(Bzl)-OSu。在室温下搅拌混合物5小时，将反应混合物与100ml乙酸乙酯和50ml水混合以进行萃取。用50ml水洗涤乙酸乙酯层三次，然后减压浓缩。将残余物与异丙醚混合，过滤收集得到的沉淀并干燥，获得8.20g(产率80.6%)上述标题化合物，熔点149-151℃。
参考实施例5Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt的制备在冰冷却下将3.00gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于10mlTFA中，在室温下搅拌混合物30分钟。减压浓缩反应混合物，将残余物与异丙醚混合，过滤收集得到的沉淀，并在氢氧化钠上减压干燥。
将得到的产物溶于50mlTHF中，然后在冰冷却下用三乙胺中和。往其中加入1.50gBoc-Gly-OSu。在室温下搅拌混合物过夜，然后减压浓缩反应混合物。将残余物溶于50ml乙酸乙酯中，得到的溶液用20ml1N盐酸洗涤二次，再用饱和的氯化钠水溶液洗涤二次，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩，用异丙醚洗涤残余物，获得2.90g(产率87.7%)上述标题化合物，熔点165-167℃。
参考实施例6
Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Lu-NHNH2的制备将2.80g Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于30ml甲醇中，往其中加入2.25ml NH2NH2H2O。在室温下静置混合物2天，过滤收集得到的沉淀并用甲醇洗涤，获得2.16g(产率79.0%)上述标题化合物，熔点221-224℃。
参考实施例7Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl的制备在冰冷却下将0.56g Boc-Ser(Bzl)-Glu-OBzl.H2O溶于5ml TFA中，在室温下搅拌溶液30分钟。减压浓缩反应混合物。在氢氧化钠上减压干燥残余物。
在-15℃和搅拌下，依次将0.73ml 4N盐酸/二恶烷和0.18ml亚硝酸异戊酯加到0.78g Boc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-N3H3溶于10ml DMF的溶液中以形成叠氮化物。然后加入三乙胺以进行中和。
将TFA处理获得的上述产物溶于10mlDMF中，在冰冷却下用三乙胺中和。往其中加入上述叠氮化合物，在4℃静置混合物一夜。减压浓缩反应混合物，用水混合残余物以固化，过滤收集得到的沉淀，用甲醇重结晶，得到1.10g(产率79.4%)上述标题化合物，熔点194-196℃。
的制备将1.00gBoc-Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl溶于10ml无水吡啶中，往其中加入1.00gTFA-ONp，将混合物在40℃静置8小时。减压浓缩反应混合物，用异丙醚固化残余物。过滤收集得到的沉淀，用异丙醚洗涤并干燥，在冰冷却下将产物溶于8mlTFA，在室温下搅拌溶液30分钟。减压浓缩反应混合物，在氢氧化钠上减压干燥残余物。
将上述TFA处理过和产物溶于15mlDMF。在室温和搅拌下将该溶液滴入700ml无水吡啶中，历时30分钟，在50℃搅拌混合物5小时，减压浓缩反应混合物，将残余物与50ml乙酸乙酯混合，得到的混合物用30ml1N盐酸洗涤三次，30ml饱和的氯化钠水溶液三次，用无水硫酸镁干燥，减压浓缩以除去乙酸乙酯，将残余物与甲醇-乙酸乙酯混合，过滤除去不溶物，浓缩滤液。将残余物与异丙醚混合，过滤收集得到的沉淀，用异丙醚和少量乙酸乙酯洗涤获得0.46g(产率50.7%)上述标题化合物，熔点203-207℃。
参考实施例9
1/2 H2O溶于100ml甲醇，往其中加入2.00ml NH2NH2H2O，在室温下静置混合物2天，减压浓缩反应混合物，用异丙醚洗涤残余物。过滤收集不溶物，然后将不溶物悬浮在甲醇-乙酸乙酯混合物中。减压浓缩悬浮液，滤出上不溶物并干燥，获得1.98(产率65.2%)上述标题化合物，熔点230-233℃。
参考实施例10Boc-Leu-Gly-OEt的制备在冰冷却下将9.10gWSC逐步加入到12.47gBoc-Leu-OH.HO，6.98gHcl.H-Gly-OEt和6.76gHOBT溶于二氯甲烷形成的100ml溶液中，在室温下搅拌混合物42小时。用100ml1N盐酸混合反应混合物，过滤除去生成的沉淀，得到的滤液依次用100ml1N盐酸洗涤、二份100ml饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤和100ml饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。往残余物中加入石油醚以使残余物结晶，用乙酸乙酯-石油醚对得到的晶体进行重结晶，获得8.68g(产率56.6%)上述标题化合物，熔点79.5-82.5℃。
参考实施例11Boc-Val-Leu-Gly-OEt的制备在冰冷却下将7.66gBoc-Leu-Gly-OEt溶于30mlTFA中，在室温下搅拌溶液30分钟。减压浓缩反应混合物，用石油醚洗涤残余物，在氢氧化钠上减压干燥，将得到的产物溶于60mlDMF中并在冰冷却下用三乙胺调节pH至6。往其中加入5.43gBoc-Val-OH、3.38gHOBT和4.79mlWSC，在室温下搅拌混合物20小时，将200ml水加入反应混合物中，用二份70ml的乙酸乙酯萃取得到的反应混合物，合并二份有机层，用1N盐酸、饱和的碳酸氢钠水溶液和饱和的氯化钠水溶液各洗涤二次，然后用无水硫酸镁干燥，减压浓缩得到的溶液以除去乙酸乙酯，用石油醚混合残余物以使残余物节晶，用乙醚-石油醚对得到的晶体进行二次重结晶，获得8.03g(产率79.2%)上述标题化合物，熔点69-73.5℃。
参考实施例12Boc-Val-leu-Gly-OH的制备将7.3gBoc-Val-leu-Gly-OEt溶于50ml乙醇中，在冰冷却下往其中加入20ml1N氢氧化钠水溶液，搅拌混合物1小时。用1N盐酸调节反应混合物的pH值至7并减压浓缩，用乙醚洗涤残余物，在冰冷却下用1N盐酸调节含水层的pH值至2，并用60ml乙酸乙酯萃取三次。合并有机层，用饱和的氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥。减压浓缩得到的溶液以除去乙酸乙酯。用石油醚混合残余物以使残余物结晶，从而获得5.33g(产率78.4%)上述标题化合物。
熔点99-118℃氨基酸分析Val0.95(1)Leu0.95(1)Gly1.10(1)参考实施例13Gly-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-Val-Leu-Gly-OH的制备在冰冷却下将2.20gBoc-Val-Leu-Gly-OH溶于10mlTFA中，在室温下搅拌溶液30分钟，减压浓缩反应混合物，在氢氧化钠上减压浓缩残余物。
在-15℃和搅拌下依次将1.00ml 4N盐酸/二恶烷和0.40ml亚硝酸异戊酯加入1.90g
溶于20ml DMF的溶液中，以形成叠氮化合物，然后加入三乙胺以进行中和。
在冰冷却下将上述TFA处理过的产物溶于40mlDMF中，然后用三乙胺中和。往其中加入上述叠氮化合物，在冰冷却下搅拌混合物过夜，减压浓缩反应混合物。用0.5W盐酸混合残余物，过滤收集得到的沉淀，并依次用水和热甲醇洗涤，以获得1.78g(产率74.2%)上述标题化合物，熔点244-250℃。
参考实施例14Boc-Ser(Bzl)-Gly-OH的制备在冰冷却下往含6.80gH-Gly-OH和9.20g碳酸氢钠的水溶液中加入含27.5gBoc-Ser(Bzl)-Osu的120mlTHF溶液中并在室温下搅拌混合物过夜。
减压浓缩反应混合物，用乙醚(50ml，二次)洗涤得到的残余物。然后在冰冷却下通过加入1N，盐酸来调节含水层的pH值至2，用乙酸乙酯(150ml，三次)萃取，用100ml饱和的氯化钠水溶液洗涤有机层。合并乙酸乙酯层，用无水硫酸镁干燥，然后减压浓缩，干燥得到的油状残余物，得到25.10g(产率101.7%)上述标题产品，为油状物。
参考实施例15Boc-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)Pro-NH2的制备在冰冷却下通过加入50ml THF以溶解25.5g Boc-Thr(Bzl)-Pro-NH2[参照日本专利公开No.61.112099(1986)]，然后在室温下搅拌所得溶液30分钟，减压浓缩反应混合物，往由此得到的残余物中加入乙醚，过滤收集由此形成的沉淀，在氢氧化钠上减压干燥。
将上述生成的产物溶于150mlTHF中，在冰冷却下用三乙胺中和，然后往其中加入25.00gBoc-Ser(Bzl)-Gly-OH、9.60gHOBT和14.20mlWSC，调节pH值至7。在冰冷却下搅拌整个混合物2小时，然后在室温下搅拌过夜。
减压浓缩反应混合物，用500ml乙酸乙酯萃取由此得到的残余物。分别用1N盐酸(200ml，二次)，饱和碳酸氢钠水溶液(150ml，5次)和饱和氯化钠水溶液(200ml)洗涤乙酸乙酯，然后用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙酸乙酯，然后通过加入乙醚-正己烷以固化得到的残余物，获得30.60g(产率75.9%)上述标题产品，熔点56-65℃。
氨基酸分析Thr1.01(1)Ser0.96(1)Gly1.02(1)Pro1.01(1)参考实施例16Boc-Thr(Bzl)-Gly-OH的制备使用5.40gH-Gly-Oh和22.40gBoc-Thr(Bzl)-Osu，重复与参考实施例14相同的步骤，获得19.60g(产率97.3%)上述标题产品。
熔点63-66℃参考实施例17Boc-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用30.00g Boc-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和19.60g Boc-Thr(Bzl)-Gly-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得32.36g(产率77.7%)上述标题产品。
熔点83-88℃参考实施例18Boc-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备在冰冷却下通过加入70ml TFA以溶解27.00g Boc-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，在室温下搅拌得到的溶液30分钟，减压浓缩反应混合物，往由此得到的残余物中加入乙醚，过滤收集由此形成的沉淀，在氢氧化钠上减压干燥。
将上述产物溶于200mlTHF中，并在冰冷却下，用三乙胺中和，然后往其中加入10.74gBoc-Asn-ONp和4.10gHOBT并保持pH值在7-8，在冰冷却下搅拌混合物1小时，然后再在室温下搅拌过夜，再加入30mlDMF，再搅拌过夜。
减压浓缩反应混合物，往由此得到的残余物中加入300ml冷水，滗析混合物，再往其中加入300ml水，过滤收集得到的沉淀并干燥，用甲醇-乙醚对由此获得的粗产品再进行三次再沉淀得到22.26g(产率73.1%)上述标题产品，熔点161-168℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr1.94(2)Ser0.96(1)Gly2.06(2)Pro1.04(1)参考实施例19
Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用21.00g Boc-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和9.37g Boc-Thr(Bzl)-Osu，重复与参考实施例18相同的步骤，获得23.4g(产率93.6%)上述标题产物，熔点110-113℃。
参考实施例20Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bxl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用8.35g Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.30g Boc-Arg(Tos)-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得7.60g(产率70.5%)上述标题产品，熔点120-132℃。
氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.00(3)Ser0.97(1)Gly2.00(2)Arg0.97(1)Pro1.03(1)参考实施例21Boc-Tyr(Cl2-Bzl)Pro-OBzl的制备使用5.00g Boc-Tyr(Cl2-Bzl)-OH和2.89g H-pro-OBzl.HCl，重复与参考实施例15相同的步骤，获得6.89g(产率95.6%)上述标题产品。
外观油状物。
参考实施例22Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl的制备使用6.84gBoc-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl和4.43g Boc-Thr(Bzl)-OSu，重复与参考实施例18相同的方法，获得5.54g(产率62.1%)上述标题产品，熔点119-121℃。
参考实施例23Boc-Thr(Bzl)-Tyr-(Cl2-Bzl)-Pro-OH的制备使用5.34g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-OBzl，重复与参考实施例12相同的步骤，获得2.03g(产率42.7%)上述标题产品，熔点72-85℃。
氨基酸分析Thr0.91(1)Tyr1.02(1)Pro1.05(1)参考实施例24Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用3.00g Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.89g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-OH，重复与参考实施例15相同的方法，获得3.30g(产率78.2%)上述标题产品，熔点166-167℃。
参考实施例25Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用3.20g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和666mg Boc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，获得3.25g(产率95.8%)上述标题产品，熔点148-151℃。
参考实施例26Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用1.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和305mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH(参见日本专利公开No.61-112099(1986))，重复与参考实施例15相同的步骤，获得1.06g(产率89.6%)上述标题产品，熔点140-143℃。
参考实施例27Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用900mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，180mg Boc-His(Tos)-OH和代替HOBT的79mgHOWB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得950mg(产率95.1%)上述标题产品，熔点133-137℃。
参考实施例28Boc-Glu(OcHex)-Leu-OBzl的制备使用13.2gBoc-Glu(OcHex)-OH和15.7gH-Leu-OBzl.Tos-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得23.19g(产率108.8%)上述标题产品。
外观油状物参考实施例29Boc-Gln-Glu-(OcHex)-Leu-OBzl的制备使用23.19gBoc-Glu(OcHex)-Leu-OBzl和14.7gBoc-Glu-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，获得22.42g(产率84.4%由参考实施例28计算而得)产品。
熔点128-131℃参考实施例30Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH的制备将21.0gBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OBzl溶于200mlTHF中，在2.00g5%钯-碳催化剂存在下对溶液进行催化还原，还原反应结束后，过滤除去催化剂，减压浓缩滤液。往得到的残余物中加入二乙醚-正己烷进行结晶，获得17.86g(产率95.5%)上述标题产品。
熔点111-114℃参考实施例31Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH的制备在冰冷却下将12.00gBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH溶于30mlTFA中，并在室温下搅拌溶液30分钟。减压浓缩反应混合物，加入乙醚和异丙醚以处理由此得到的残余物，过滤收集生成的沉淀，在氢氧化钠上减压干燥。
将产物溶于THF-DMF(200ml-30ml)中并在冰冷却下用三乙胺中和，然后往其中加入10.2gBoc-Ser(Bzl)-OSu，调节pH值至7-8，搅拌混合物过夜。减压浓缩反应混合物，加入1N盐酸使pH值调节到2，然后用乙酸乙酯(100ml×3次萃取。用饱和氯化钠水溶液(100ml×3次)洗涤乙酸乙酯层，然后用无水硫酸镁干燥，减压浓缩。加入乙醚使由此得到的残余物结晶，用乙酸乙酯-乙醚重结晶四次，获得6.97g(产率44.3%)上述标题产品。
熔点149-153℃。
参考实施例32Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用500mg Boc-His(Tos)-Lys-(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和162mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的39mgHONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得543mg(产率89.3%)上述标题产品。
熔点216-221℃参考实施例33
Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用500mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和96mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH以及代替HOBT的33mg HONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得489mg(产率88.0%)上述标题产品。
熔点204-213℃参考实施例34Boc-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用2.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和594mg Boc-Lys(cl-Z)-OSu，重复与参考实施例18相同的步骤，获得2.20g(产率97.1%)上述标题产品。
熔点125-127℃。
参考实施例35Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用2.00g Boc-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和419mg Boc-His(Tos)-OH以及代替HOBT的183mgHONB。重复与参考实施例15相同的步骤，获得2.11g(产率94.6%)上述标题产品。
熔点123-128℃。
参考食施例36Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)pro-NH2的制备使用700mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和235mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的58mg HONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得800mg(产率93.5%)上述标题产品。
熔点210-213℃。
参考实施例37Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用700mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和139mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH以及代替HOBT的47mgHONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得701mg(产率90.0%)上述标题产品。
熔点197-204℃。
参考实施例38Boc-Thr(Bzl)Pro-OBzl的制备使用8.66Boc-Thr(Bzl)-OH和7.42gHCl.H-Pro-OBzl，重复与参考实施例15相同的步骤，获得13.25g(产率95.3%)上述标题产品。
外观油状物。
参考实施例39Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH的制备使用13.25gBoc-Thr(Bzl)-Pro-OBzl，重复与参考实施例12相同的步骤，获得9.72g(产率89.6%)上述标题产品。
外观粉末状参考实施例40Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用2.50g Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和811mg Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重复与参考实施例15相同的方法，获得2.42g(产率81.4%)上述标题产品。
熔点164-170℃。
参考实施例41Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH的制备使用2.30g Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和564mg Boc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的方法，获得2.14g(产率87.1%)上述标题产品。
溶点128-142℃。
氨基酸分析Asp1.04(1)
Thr3.39(4)Ser0.94(1)Glu1.00(1)Gly2.14(2)Arg1.00(1)Pro1.97(2)参考实施例42Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用1.00g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和358mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的方法，获得1.17g(产率96.4%)上述标题产品。
熔点114-124℃氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.95(4)Ser0.97(1)Glu1.02(1)Gly2.07(2)Leu1.09(1)Lys1.07(1)Arg0.96(1)
Pro1.99(2)参考实施例43Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用1.00g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和228mg Boc-His(Tos)-OH以及代替HOBT的100mgHONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得1.03g(产率91.4%)上述标题产品。
熔点125-131℃参考实施例44Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用850mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和234mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及代替HOBT的75mgHONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得780mg(产率78.3%)上述标题产品。
熔点140-158℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.98(4)
Ser0.96(1)Glu3.00(3)Gly2.01(2)Leu2.02(2)Lys1.01(1)His1.03(1)Arg0.98(1)Pro1.94(2)参考实施例45Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH的制备使用4.61gBoc-Leu-Ser(Bzl)-OH(日本专利公开No.61-112099(1986)和5.61gBoc-Lys(Cl-z)-OSu，重复与参考实施例31相同的步骤，获得4.92g(产率64.0%)上述标题产品熔点88-92℃参考实施例46Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用700mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和209mg Boc-Lys(Cl-z)Leu-Ser(Bzl)-OH以及代替HOBT的78mgHONB，重复与参考实施例15相同的步骤，获得751mg(产率90.0%)上述标题产品。
熔点171-195《017-(分解)氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.95(4)Ser1.75(2)Glu3.03(3)Leu2.99(3)Lys2.06(2)His1.00(1)Arg0.96(1)Pro1.98(2)参考食施例47Boc-Asn-Lys-(Cl-z)-Leu-OH的制备使用2.00gBoc-Lys(Cl-z)-Leu-OH和1.48gBoc-Asn-ONp，重复与参考实施例31相同的步骤，获得1.76g(产率72.3%)上述标题化合物。
熔点160-163℃参考实施例48Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用500mg Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和200mg Boc-Asn-Lys(Cl-Z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得582mg(产率91.6%)上述标题产品。
熔点117-122℃参考实施例49Boc-Ser(Bzl)-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用500mg Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和195mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得561mg(产率89.1%)上述标题产品。
熔点206-227℃。(分解)氨基酸分析Asp2.00(2)Thr3.90(4)Ser1.90(2)Glu3.16(3)Gly1.97(2)Leu2.07(2)Lys0.98(1)Arg0.91(1)Pro1.92(2)参考实施例50Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备使用520mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和117mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，获得553mg(产率93.5%)标题产品。
熔点198-217℃(分解)氨基酸分析Asp1.95(2)Thr3.72(4)Ser1.85(2)Glu3.11(3)Gly1.93(2)Leu3.11(3)Lys1.99(2)Arg0.91(1)Pro1.85(2)参考食施例51Boc-Thr-(Bzl)-Asp-OEt的制备在冰冷却下往由2.3gH-Asp-OEt，5.8gBoc-Thr(Bzl)-Osu，20mlTHF和20mlDMF组成的悬浮液中加入2ml三乙胺，搅拌混合物1小时，然后将反应混合物的pH值控制在7左右，在室温下继续反应36小时，减压浓缩反应混合物，加入1N盐酸对由此得到的残余物进行酸化，然后用乙酸乙酯(80ml×3次)萃取。得到的有机层用水，然后再用饱和氯化钠水溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后减压浓缩。用乙醚-石油醚进行结晶和重结晶，获得5.59g(产率86.6%)上述标题产物。
参考实施例52Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制备在冰冷却下，将20mlTFA加入4.25gBoc-Thr(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt中进行溶解，然后在室温下搅拌溶液30分钟，减压浓缩反应混合物，然后在氢氧化钠上减压干燥获得的残余物。将由此获得的产物溶于20mlTHF中，在冰冷却条件下加入三乙胺调节该溶液的pH至7。然后往其中加入3.29gBoc-Ser(Bzl)-OSu并搅拌混合物20小时，减压浓缩反应混合物后，加入150ml乙酸乙酯以溶解得到的残余物。得到的溶液分别用1N盐酸(50ml×2次)、饱和碳酸氢钠水溶液(50ml×2次)和饱和氯化钠水溶液(50ml×2次)洗涤，用无水硫酸镁干燥，然后减压蒸除乙酸乙酯，往得到的残余物中加入乙醚进行结晶，用乙酸乙酯-石油醚进行重结晶，获得3.61g(产率57.3%)上述标题产品。
溶点90-92℃参考实施例53Boc-Acp-Asn-Leu-OEt的制备使用4.00gBoc-Asn-Leu-OEt和3.40gBoc-Acp-Osu，重复与参考实施例18相同的步骤，获得4.98g(产率95.5%)上述标题产品。
熔点145-146℃参考实施例54Boc-Acp-Asn-Leu-NH-NH2的制备使用4.90gBoc-Acp-Asn-Leu-OEt，重复与参考实施例6相同的步骤，获得4.26g(产率86.2%)上述标题产品。
熔点200-202℃参考实施例55Boc-Acp-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制备使用2.66gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt和220gBoc-Acp-Asn-Leu-NHNH，重复与参考实施例7相同的步骤，获得3.22g(产率78.5%)上述标题产物。
熔点200-203℃参考实施例56
的制备使用3.00gBoc-Acp-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt，重复与参考实施例8相同的步骤，获得700mg(产率26.6%)上述标题产品。
熔点228-231℃参考实施例57
的制备使用650mgAcp-Asn-Leu-Ser(Bzk)-Thr(Bzl)-Asp-OEt，重复与参考实施例9相同的步骤，获得400mg(产率62.6%)上述标题产品。
熔点212-218℃参考实施例58
的制备通过采用350mg
324mg Boc-Val-Leu-Gly-OH，重复参考实施例13的步骤，可以获得320mg(产率70.0%)上述目的产物。
熔点235-240℃(分解)参考实施例59Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用2.5g Boc-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和921mg Boc-Gln-ONp;重复参考实施例18的步骤，可以获得2.59g(产率94.1%)上述目的产物。
熔点200-204℃。
参考实施例60Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl-Pro-NH2的制备方法通过采用2.48g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.14g Boc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重复参考实施例15的步骤，可以获得2.72g(产率90.4%)上述目的产物。
熔点185-190℃参考实施例61Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用2.65gBoc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和907mg Boc-Gln-ONp重复参考实施例18的步骤，可以获得274g(产率95.5%)上述目的产物。
熔点195-200℃参考实施例62Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用206mg Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和320mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得730mg(产率84.0%)上述目的产物。
熔点216-220℃参考实施例63Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用712mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和204mg Boc-His(Tos)-OH以及57mg用来替代HOBT的HOSu生复参考实施例15的步骤，可以获得759mg(产率94.0%)上述目的化合物。
熔点200-216℃(分解)氨基酸分析
Asp1.02(1)Thr3.87(4)Ser0.92(1)Glu2.06(2)Gly2.04(2)Leu1.01(1)Lys0.99(1)His1.05(1)Pro2.05(2)参考实施例64Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用715mg Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和244mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH以及51ml用于替代HOBT的HOSu重复参考实施例15的步骤，可以获得720mg(产率85.0%)上述目的产物。
熔点190-205℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.95(4)Ser0.94(1)Glu3.93(4)Gly2.05(2)
Leu1.96(2)Lys1.01(1)His1.00(1)Pro2.06(2)参考实施例65Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用684mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和251mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH以及41mg用于替代HOBT的HOSu重复参考实施例15的步骤，可以获得617mg(产率74.9%)上述目的产物。
熔点220-228℃(分解)参考实施例66Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gln-Thr(Bzl)-Pro-NH的制备方法通过采用1.41gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和781mgBoc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得1.79g(产率98.0%)上述目的产物。
熔点212-220℃。
参考实施例67
Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用1.81g Boc-Asn-Lys-(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和666mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得1.96g(产率90.5%)上述目的产物。
熔点219-227℃。
参考实施例68Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法通过采用869mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Prp-NH2和339mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得967mg(产率91.5%)上述目的产物。
熔点241-245℃(分解)。
参考实施例69制备 Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
首先通过采用2.00gBoc-Lys(Cl-z)-Leu-OH和1.10gBoc-Gly-OSu重复参考实施例31的步骤，可以获得1.69g(产率76.0%)Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-OH。
表观粉状物质氨基酸分析Gly0.94(1)Leu1.04(1)Lys1.03(1)随后，采用500mgBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和198mg上述Boc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得575mg(产率92.6%)上述目的产物。
熔点127-131℃。
参考实施例70制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2通过采用520mgBoc-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和212mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得652mg(产率99.0%)上述目的产物。
熔点183-217℃(分解)氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.86(4)Ser1.87(2)Glu3.07(3)Gly3.05(3)Leu2.04(2)Lys1.00(1)Arg0.92(1)Pro1.96(2)参考实施例71制备 Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助620mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和141mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，可以获得680mg(产率96.3%)上述目的产物。
熔点198-208℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr3.83(4)Ser1.85(2)
Glu3.11(3)Gly3.08(3)Leu3.07(3)Lys1.99(2)Arg0.91(1)Pro1.91(2)参考实施例72Boc-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制备方法将2ml三乙胺在冰冷却条件下加至由2.3gH-Asp-OEt、5.8gBoc-Thr(Bzl)-Osu于20mlTHF和20mlDMF中形成的悬浮液中并且将该混合物搅拌1小时，从而将该反应混合物的pH值调节至7左右，反应继续进行36小时。在减压下浓缩该反应混合物并且通过添加1N-盐酸酸化如此形成的残余物，随后用乙酸乙酯(80ml×3次)萃取。先用水然后用饱和氯化钠水溶液洗涤有机层，并且用无水硫酸镁进行干燥。在减压下浓缩乙酸乙酯萃取液，经过在乙醚-石油醚中对所形成的残余物进行结晶与重结晶处理可以获得5.5g(产率86.6%)上述目的产物。
熔点93-95℃。
参考实施例73Boc-ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制备方法在冰冷却条件下，通过添加20mlTFA将4.5gBoc-Thr(Bzl)-Asp-OEt溶解，在室温下将其搅拌30分钟。在减压下浓缩该反应混合物，在减压下用氢氧化钠干燥所获得的残余物。将上述产物溶于20mlTHF，在冰冷却条件下用三乙胺调节其pH值。随后加入3.29gBoc-Ser(Bzl)-OSu并且搅拌20小时。减压浓缩该反应混合物，通过添加150ml乙酸乙酯溶解如此获得的残余物，随后分别用1N-盐酸(50ml×2次)、饱和碳酸氢钠水溶液(15ml×2次)和饱和氯化钠水溶液(50ml×2次)洗涤该溶液，用无水硫酸镁干燥。减压浓缩乙酸乙酯萃取液并且通过添加乙醚与石油醚使如此获得的残余物结晶，然后使其在乙酸乙酯-石油醚中重结晶。获得3.61g(产率57.3%)上述目的产物。
熔点90-92℃。
参考实施例74Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt的制备方法在冰冷却条件下，通过添加20mlTFA溶解4.41gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Lru-OEt并且将其在室温下搅拌30分钟。减压浓缩该反应混合物，将乙醚加至如此得到的残余物并且过滤收集沉淀的产物，在减压下用氢氧化钠干燥。将上述产物溶于100mlTHF和21mlDMF的混合物中，然后在冰冷却条件下通过添加三乙胺将该混合物的pH值调至7左右。随后向其中加入2.75gBoc-β-Ala-OSu并且在室温下将全部混合物搅拌过夜。减压浓缩该反应混合物，向所形成的残余物中添加200ml水，过滤收集所形成的沉淀并且分别二次将其置于甲醇中使其重结晶。借助上述步骤获得3.41g(产率68.6%)上述目的产物。
熔点190-192℃。
参考实施例75Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2的制备方法将3g Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-OEt溶于20ml甲醇，随后向该溶液中添加2.4ml NH2NH2.H2O并且将该混合物搅拌过夜，此后向该反应混合物中添加20ml DMF并且溶解所形成的沉淀，将其搅拌过夜。减压浓缩该反应混合物，向如此形成的残余物中添加15ml水，过滤收集所形成的沉淀并且用乙醇对其进行二次重结晶处理。获得1.72g(产率58.7%)上述目的产物。
熔点241-245℃。
参考实施例76Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt的制备方法在冰冷却条件下，通过添加30mlTFA溶解6.6gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt并且在室温下将该溶液搅拌30分钟。减压浓缩该反应混合物，通过添加石油醚处理所形成的残余物并且过滤收集所形成的沉淀物，随后在减压下用氢氧化钠进行干燥。
另外，将7.0g Boc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2溶于30ml DMF中，随后在-15℃到-20℃的冷却下与搅拌条件下向其中添加7.2ml4N-盐酸/二恶烷，随后加入2ml亚硝酸异戊酯以便形成其叠氮化合物，并且通过添加三乙胺将其中和。
将经过TFA处理的上述产物溶于20mlDMF并且在冰冷却条件下用20mlDMF进行中和。然后向其中添加上述叠氮化合物，并且将该混合物的pH值保持在7-8，在4℃下将该混合物搅拌20小时。减压浓缩该反应混合物，向如此形成的残余物中添加30ml0.5N盐酸并且过滤收集所形成的沉淀物，用甲醇对其进行二次重结晶处理。获得10.46g(产率90.4%)上述目的产物。
熔点236-245℃(分解)。
参考实施例77
的制备方法将4.3gBoc-β-Ala-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Asp-OEt溶于45ml无水吡啶之中，向该溶液中添加3.66gTFA-ONP并且在40℃下将该混合物放置4小时。减压浓缩该反应混合物，将乙醚加至所获得的残余物中。随后通过在冰冷却条件下添加50mlTFA溶解沉淀物，在室温下将其搅拌45分钟。减压浓缩反应混合物，将乙酸乙酯加至如此形成的残余物中，并且过滤收集所形成的结晶，用氢氧化钠干燥。
将经过TFA处理的上述产物溶于50mlDMF之中，随后在搅拌条件下向其中滴加800ml被加热至50℃的无水吡啶，历时6小时。滴加完毕，在室温下将该反应混合物搅拌过夜，然后进行减压浓缩。向如此获得的残余物中添加100ml水并且过滤收集如此形成的沉淀物，通过加热将其溶解于乙醇之中，随后将该溶液放置在室温下使其冷却，并滤除溶液中形成的沉淀物。将乙酸乙酯加至滤液中并且过滤收集所形成的沉淀物。获得1.9g(产率49.5%)上述目的产物。
熔点230-233℃。
参考实施例78
的制备方法将1.89g
溶于50ml甲醇与15ml DMF的混合物中，随后加入1.7ml NH NH HO并且在室温下将该混合物搅拌过夜。向该反应混合物中添加200ml水并且过滤收集所形成的沉淀物。充分干燥沉淀物并且将其悬浮于甲醇-乙酸乙酯之中，随后在减压下浓缩并且过滤收集所形成的沉淀物。获得620mg(产率34.4%)目的产物。
熔点235-238℃。
参考实施例79
的制备方法在冰冷却条件下，通过添加5mlTFA溶解440mgBoc-Val-Leu-Gly-OH，在室温下将该溶液搅拌30分钟。减压浓缩反应混合物，通过添加乙醚处理如此获得的残余物，过滤收集如此形成的沉淀物并且在减压条件下用氢氧化钠干燥。
另外，将550mg
溶于20mlDMF，然后在冷却至-15℃至-20℃与搅拌条件下向其中依次加入0.43ml 4N盐酸/二恶烷、0.11ml亚硝酸异戊酯以便形成其叠氮化合物。
并且将该混合物的pH值保持在7-8，在4℃下将该混合物搅拌4小时。减压浓缩该反应混合物，向如此形成的残余物中添加30ml0.5N盐酸并且过滤收集所形成的沉淀物，经过依次用乙醇、乙酸乙酯洗涤得到580mg(产率83.8%)上术目的产物。
熔点228-248℃(分解)。
氨基酸分析Asp2.07(2)β-Ala0.85(1)Thr1.06(1)Ser2.02(2)Gly1.07(1)Val0.92(1)Leu2.00(2)参考实施例80HCl.H-Cpc(OBut)-OCH3的制备方法在冰冷却条件下将12，1ml三乙胺加至30ml含有7.42HCl.H-Cys-OCH3和11.58g BrCH2(CH2)2COO But的DMF溶液中，在室温下将该混合物搅拌2天。将该反应混合物倒入100ml冰水之中，随后用乙酸乙酯(50ml×3次)萃取，合并有机层并且分别用50ml水和50ml饱和氯化钠水溶液(二次)洗涤，然后用无水硫酸镁干燥并且进行减压浓缩。将20ml 4N盐酸/二恶烷在冰冷却条件下加至如此获得的残余物中，减压浓缩该混合物并且通过加入乙醚使所产生的残余物结晶并自乙酸乙酯-乙醚中重结晶。得到9.30g(产率68.5%)上述目的产物。
熔点90-93℃。
参考实施例81Boc-Thr(Bzl)-Cpc(OBut)-OCH3的制备方法通过采用1.30gHCl.H-Cpc(OBut)-OCH和1.85gBoc-Thr(Bzl)-OSu以及550mgHOBT重复参考实施例18的步骤，可以获得1.92g(产率81.5%)上述目的产物。
熔点53-55℃。
参考实施例82Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3的制备方法通过采用1.85g Boc-Thr(Bzl)-Cpc(OBut)-OCH3和1.30g Boc-Ser(Bzl)-OSu重复参考实施例18的步骤，可以获得1.46g(产率60.2%)上述目的产物。
表观油状物质。
参考实施例83Boc-Sre(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH的制备方法通过采用1.46gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-CH和1.36gBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH重复参考实施例7的步骤，可以获得1.66g(产率73.6%)上述目的产物。
熔点183-186℃。
参考实施例84Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3的制备方法通过采用950mgBoc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cpc-OCH3重复参考实施例8的步骤，可以获得450mg(产率55.9%)上述目的产物。
熔点158-161℃。
参考实施例85
熔点208-213℃。
参考实施例86
通过采用380mg
NHNH2和301mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重复参考实施例13的步骤，可以获得371mg(产率77.5%)上述目的产物。
熔点246-256℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr1.01(1)Ser1.92(2)Gly1.00(1)Val0.96(1)Leu2.07(2)Cpc1.00(1)
参考食实施例87HCl.H-Cec(OBut)-OCH3的制备方法将8.58g HCl.H-Cys-OCH3和11.78g Br-CH2CH2COOBut溶于30ml DMF，在冰冷却条件下将14.7ml三乙胺加至该溶液中，在室温下将该反应混合物搅拌48小时。将100ml冰水加至该反应混合物中并且用乙酸乙酸萃取(50ml×3次)。合并乙酸乙酯层并且分别用水(50ml×1次)和饱和氯化钠水溶液(50ml×二次)洗涤，随后用无水硫酸镁干燥并且进行减压浓缩。在冰冷却条件下将20ml 4N盐酸/二恶烷加至如此形成的残余物中，随后减压浓缩，该混合物，通过添加乙醚使如此形成的残余物结晶并且使其在乙酸乙酯-乙醚中重结晶，得到11.4g(产率76.0%)上述目的产物。
熔点65-67℃。
参考实施例88Boc-Thr(Bzl)-Cec(OBut)-OCH3的制备方法通过采用7.22g Boc-Thr(Bzl)-OSu和7.7g HCl.H-Cec(OBut)-OCH3重复参考实施例18步骤，可以获得9.31g(产率71.9%)上述目的产物。
表观油状物质参考实施例89Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH的制备方法通过采用9.05gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec(OBut)-OCH和6.28gBoc-Ser(Bzl)-OSu重复参考实施例18的步骤，可以获得10.2g(产率92.5%)上述目的产物。
表观油状物质。
参考实施例90Boc-Abu-Asn-Leu-OEt的制备方法通过采用6.23gBoc-Abu-Asn-Leu-OEt重复参考实施例6的步骤，可以获得4.47g(产率74.0%)上述目的产物。
熔点205-208℃。
参考实施例92Boc-Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3的制备方法通过采用2.63g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3和2.00g Boc-Abu-Asn-Leu-NHNH2重复参考实施例7的步骤，可以获得2.75g(产率67.9%)上述目的产物。
熔点194-198℃。
参考实施例93
的制备方法通过采用2.50g Boc-Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-OCH3重复参考实施例8的步骤，可以得到1.04g(产率47.1%)上述目的产物。
熔点222-226℃。
参考实施例94Abu-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Cec-NHNH2的制备方法通过采用950mg
重复参考实施例9的步骤，可以获得641mg(产率66.8%)上述目的产物。
熔点205-220℃。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr1.00(1)Ser0.94(1)Leu1.06(1)Abu1.21(1)Cec0.98(1)参考实施例95
的制备方法通过采用508mg Boc-Val-Leu-Gly-OH和550mg
重复参考实施例13的步骤，可以获得504mg(产率70.2%)上述目的产物。
熔点242-249℃(分解)。
参考实施例96Z-Tyr(CH2COOBzl)-OCH3的制备方法在冰冷却条件下，将692mg氢化钠(浓度60%)加至25ml含有5.70g Z-Tyr-OCH3的DMF溶液中并且将该混合物搅拌30分钟，随后向其中加入3.96g溴代乙酸苄酯并且在50℃下将全部混合物搅拌1小时。减压浓缩该反应混合物并且用100ml乙酸乙酯萃取如此形成的残余物。分别用水和饱和氯化钠水溶液洗涤乙酸乙酯层，然后用无水硫酸钠干燥并且进行减压浓缩。采用石+醚-氯仿(1∶4)作为洗脱剂对如此获得的残余物进行硅胶柱层析分离，得到6.00g(产率72.6%)上述目的产物。
表观油状物质。
NMR(CDCl3)δ7.32(5H，s，
)7.31(5H，s，
)7.00(2H，d，J＝9Hz，
)6.77(2H，d，J＝9Hz，
)5.21(2H，
)5.07(2H，
)4.70-4.55(3H，m，NH-CH-CO，-OCH2-COO-)3.67(3H，s，-OCH3)3.02(2H，d，J＝6Hz，
)参考实施例97Boc-Thr(Bzl)-Tyr(CH2CooH)-OCH3的制备方法将12ml 1N盐酸和300mg10%钯/炭加至50ml含有5.80g Z-Tyr(CH2COOBzl)-OCH3的THF溶液中，该混合物在氢气流中被催化还原。待反应完毕，滤除10%钯/炭，将滤液减压浓缩至干燥。
通过采用如此形成的残余物和4.92gBoc-Thr(Bzl)-OSu重复参考实施例72的步骤，可以获得5.00g(产率75.7%)上述目的产物。
熔点101-106℃。
参考实施例98Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2-COOH)-OCH3的制备方法。
通过采用4.90g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3和4.23 Boc-Ser(Bzl)-OSu重复参考实施例18的步骤，可以茆4.51g(产率69.5%)上述目的产物。
表观油状物质。
参考实施例99Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3的制备方法通过采用2.50g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3和2.23g Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-NHNH2重复参考实施例7的步骤，可以得到2.49g(产率63.8%)上述目的产物。
熔点186-190℃。
参考实施例100
的制备方法通过采用2.43g Boc-Ser(Bzl)-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Tyr(CH2COOH)-OCH3重复参考实施例8和9的步骤，可以获得950mg(产率43.8%)上述目的产物。
熔点202-208℃。
参考实施例101
通过采用450mg
和349mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重复参考实施例13的步骤，得到430mg(产率75.6%)上述目的产物。
熔点229-232℃(分解)。
参考实施例102Z-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制备方法通过添加15mlTFA溶解5.00gZ-Lys(Boc)-OCH并且在室温下将该溶液搅拌30分钟。减压浓缩该反应混合物，将石油醚加至如此形成的残余物中并且通过滗析分离所形成的油状产物，在减压下用氢氧化钠干燥。
在冰冷却条件下将上述产物溶于40ml吡啶之中，将3.08g琥珀酸酐加至该溶液中，随后在室温下将全部混合物搅抖18小时。减压浓缩该反应混合物，用100ml乙酸乙酯萃取如此形成的残余物，然后依次用1N盐酸、饱和氯化钠水溶液将乙酸乙酯相洗涤三次并且用无水硫酸钠干燥，进行减压浓缩。将如此产生的残余物溶于氯仿，然后将该溶液加至硅胶柱中并且用200ml氯仿、再用400ml3%甲醇/氯仿洗提以便将其纯化，得到3.63g(产率71.9%)上述油状目的产物。
NMR(CDCl3)δ7.72-7.33(6H，m，CH2C6H5，OCONH or CONH)6.34-6.07(1H，bs，OCONHorCONH)5.10(2H，s，CH2C6H5)4，41-4，15(1H，m，NHCHCO)3.71(3H，s，OCH3)3.25-3.13(2H，m，NHCH2-)2.76-2.34(4H，m，COCH2CH2CO)1.89-1.15(6H，m，NHCH2(CH2)3)参考实施例103Boc-Trh(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制备方法将3.60g Z-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3溶于30ml甲醇之中，将100mg 5%-钯/炭和9.13ml 1N盐酸加至该溶液中，该混合物在氢气流中被催化还原。待反应完毕，滤除催化剂，减压浓缩滤液，在减压条件下用氢氧化钠干燥如此形成的残余物。然后将如此获得的残余物溶于30ml THF和5ml水的混合物中并且在冰冷却条件下通过添加三乙胺将该混合物的pH值调至6-7。向该混合物中添加4.08g Boc-Thr(Bzl)-OSu，然后通过添加N-甲基吗啉将该混合物的pH值调节至7-8，在冰冷却条件下将其搅拌1小时，随后在室温下将其搅拌18小时。减压浓缩该反应混合物并且用50ml乙酸乙酯萃取如此形成的残余物。用1N盐酸，再用饱和氯化钠水溶液分三次洗涤乙酸乙酯层，然后用无水硫酸钠干燥，在减压下进行浓缩。将如此获得的残余物溶解于氯仿之中并且加至硅胶柱中，用200ml氯仿、再用500ml2%甲醇/氯仿洗提，得到含有目的产物的馏份，然后进行减压浓缩并且通过添加乙醚使如此获得的残余物结晶。得到960mg(产率19.1%)上述目的产物。
溶点60-63℃。
参考实施例104Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3·1/2H2O的制备方法通过添加2ml TFA溶解900mg Boc-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3，在室温下将溶液搅拌30分钟。减压浓缩该反应混合物，在减压条件下用氢氧化钠干燥如此形成的残余物。向该残余物中添加30mlTHF，在冰冷却条件下将该溶液的pH值调至6-7。向该溶液中添加768mgBoc-Ser(Bzl)-OSu，通过添加N-甲基吗啉将该混合物的pH值调至7-8，然后在冰冷却条件下将其搅拌1小时，再于室温下将其搅拌40小时。减压浓缩反应混合物，用30ml乙酸乙酯萃取如此获得的残余物，分别用1N盐酸、饱和氯化钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液二次、用水三次洗涤乙酸乙酯层，然后进行减压浓缩。将乙醇加到如此获得的残余物中并且再次进行减压浓缩，通过添加乙醚使如此形成的残余物结晶并且使其在甲醇-乙醚中重结晶。获得810mg(产率67.4%)上述目的产物。
熔点81-83℃。
参考实施例105Boc-Asn-Leu-NHNH2的制备方法通过采用3.00gBoc-Asn-Leu-OEt重复参考实施例6的步骤，可以获得2.45g(产率81.7%)上述目的产物。
熔点219-221℃。
参考实施例106Bco-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3的制务备方法借助3.60g Boc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2COOH)-OCH3和2.21g Boc-Asn-Leu-NHNH2重复参考实施例7的步骤，可以得到3.37g(产率71.4%)上述目的产物。
熔点206-209℃。
参考实施例107
的制备方法借助3.27g Boc-Asn-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Lys(COCH2CH2-COOH)-OCH3重复参考实施例8的步骤，得到1.00g(产率34.9%)上述产物。
溶点115-117℃。
参考实施例108
的制备方法借助850mg
重复参考实施例9的步骤，得到630mg(产率73.8%)上述目的产物。
溶点170-183℃。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr0.99(1)Ser0.93(1)Leu1.07(1)Lys0.85(1)参考实施例109
的制备方法通过采用580mg
和535mg Boc-Val-Leu-Gly-OH重复参考实施例13的步骤，得到540mg(产率71.7%)上述产物。
熔点245-249℃(分解)。
参考实施例110Boc-Leu-Gly-OH的制备方法将2.63gH-Gly-OH和3.50g碳酸氢钠悬浮于50ml水中，在冰冷却条件下向该悬浮液中添加50ml含有10.0gBoc-Leu-OSu的二恶烷溶液并且搅拌30分钟，然后在室温下继续将该混合物搅拌15小时。减压浓缩该反应混合物并且用乙酸乙酯(70ml)萃取如此获得的残余物。用1N盐酸和饱和氯化钠水溶液洗涤乙酸乙酯层，然后用无水硫酸镁干燥并且进行减压浓缩。所获得的残余物经过用乙酸乙酯-正己烷重结晶处理后，形成6.65g(产率75.7%)上述目的产物。
熔点115-123℃。
参考实施例111Boc-Gly-Leu-Gly-OH的制备方法通过采用6.41gBoc-Leu-Gly-OH和6.04gBoc-Gly-OSu重复参考实施例31的步骤，获得4.67g(产率61.4%)上述目的产物。
溶点67-70℃。
参考实施例112
的制备方法借助550mg
和280mg H-Gly-Leu-Gly-OH重复参考实施例13的步骤，获得310mg(产率46.2%)上述目的产物。
熔点208-211℃。
参考实施例113Boc-lle-Leu-Gly-OEt的制备方法借助2.00g Boc-Leu-Gly-OEt和1.67g Boc-lle-OH.1/2H2O重复参考实施例15的步骤，获得1.99g(产率73.3%)上述目的产物。
熔点123-124℃。
参考实施例114Boc-Ile-Leu-Gly-OH的制备方法借助1.89gBoc-Ile-Leu-Gly-OEt重复参考实施例12的步骤，获得1.53g(产率86.6%)上述目的产物。
表观油状物质。
氨基酸分析Gly1.07(1)Ile0.96(1)Leu0.97(1)参考实施例115
-OH的制备方法借助600g Boc-Ile-Leu-Gly-OH和500mg
重复参考实施例13的步骤，获得580mg(产率90.9%)上述目的产物。
熔点243-247℃。
参考实施例116
Boc-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2的制备方法借助700mg Boc-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和83mg Boc-Ala-OH重复参考实施例15的步骤，获得664mg(产率91.4%)上述目的产物。
熔点135-140℃。
制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mg Boc-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和310mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，获得842mg(产率98.5%)上述目的产物。
熔点212-226℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr3.87(4)Ser2.05(2)Glu3.59(3)Gly2.04(2)
Ala1.00(1)Leu2.20(2)Lys1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.00(2)参考实施例118制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助800mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu-(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和210mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，获得839mg(产率90.8%)上述目的产物。
熔点215-217℃(分解)。
参考实施例119制备 Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和215mg Boc-Ser(Bzl)-OSu重复参考实施例18的步骤，得到722mg(产率94.3%)上述目的产物。
熔点168-177℃。
参考实施例120制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(TOS)-Thr-(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和318mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，获得902mg(产率99.1%)上述目的产物。
熔点214-223℃分解。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.79(4)Ser2.73(3)Glu3.21(3)Gly2.00(2)Leu2.04(2)Lys0.99(1)Arg1.00(1)Pro1.95(2)参考实施例121制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
借助850mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和214mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，获得862mg(产率88.2%)上述目的产物。
熔点222-225℃。
参考实施例122制备 Boc-Leu-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和180mg Boc-Leu-Osu重复参考实施例18的步骤，得到714mg(产率96.2%)上述目的产物。
熔点178-184℃。
参考实施例123制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Crl-(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助670mgBoc-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和314mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，得到811mg(产率92.3%)上述目的产物。
熔点223-236℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.84(4)Ser1.89(2)Glu3.33(3)Gly2.04(2)Leu3.16(3)Lys1.00(1)Arg1.03(1)Pro2.00(2)参考实施例124制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助250mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和193mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，得到763mg(产率88.0%)上述目的产物。
熔点220-234℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.74(4)
Ser1.76(2)Glu3.23(3)Gly2.02(2)Leu4.02(4)Lys1.95(2)Arg1.01(1)Pro1.98(2)参考实施例125制备 Boc-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助700mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和161mg Boc-Gln-ONp重复参考实施例18的步骤，得到697mg(产率93.2%)上述目的产物。
熔点128-133℃。
参考实施例126制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mgBoc-Glu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和302mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，得到786mg(产率92.6%)上述目的产物。
溶点210-219℃(分解)。
参考实施例127制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助750mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和192mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，得到783mg(产率90.6%)上述目的产物。
熔点217-228℃(分解)。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.73(4)Ser1.93(2)Glu4.62(4)Gly2.01(2)Leu3.28(3)Lys2.05(2)Arg1.01(1)Pro1.99(2)
参考实施例128制备 Boc-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助650mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和74mg Boc-Ala-OH重复参考实施例15的步骤，得到616mg(产率91.6%)上述目的产物。
熔点217-223℃。
参考实施例129制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2借助580mg Boc-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和229mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcGex)-Leu-OH重复参考实施例15的步骤，获得754mg(产率101%)上述目的产物。
熔点237-141℃(分解)
参考实施例130制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用720mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和174mgBoc-Lys(cl-z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到619mg(产率75.1%)上述标题产物。
熔点207-238℃(分解)氨基酸分析Asp1.04(1)Thr3.94(4)Ser1.72(2)Glu4.23(4)Gly2.03(2)Ala0.95(1)Leu2.72(3)Lys1.66(2)Pro2.04(2)
参考实施例131制备 Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用650mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和154mgBoc-Ser(Bzl)-OSu，重复与参考实施例18相同的步骤，得到648mg(产率92.0%)上述标题产物。
熔点214-220℃(分解)参考实施例132制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用600mg Boc-Ser(Bzl)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和209mgBoc-Ser(Bzl)-Glu(OcHex)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到759mg(产率99.5%)上述标题产物。
熔点228-236℃(分解)参考实施例133制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用720mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和155mgBoc-Lus(cl-z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到762mg(产率92.8%)上述标题产物。
熔点211-232℃(分解)氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.81(4)Ser2.84(3)Glu4.25(4)Gly1.97(2)Leu3.13(3)Lys1.99(2)Pro2.01(2)
参考实施例134制备 Boc-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2在冰冷却条件下，将10.35gBoc-Val-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于30mlTFA，室温下搅拌该溶液30分钟。减压浓缩反应混合物，加入乙醚处理所得残余物，过滤收集所沉淀的产物，减压下用氢氧化钠干燥，将该产物溶于100mlTHF，在冰冷却条件下，用三乙胺中和该溶液，然后，向该溶液中加入5.36gBoc-Asp(OcHex)-OH，2.30gHOBT和3.10mlWSC，然后在冰冷却条件下搅拌混合物2小时，接着在室温下搅拌过夜。减压浓缩反应混合物，用300ml氯仿萃取所得残余物。用1N盐酸(100ml×2)、饱和碳酸氢钠水溶液(100ml×2)和饱和氯化钠水溶液(100ml×2)依次洗涤氯仿层，然后用无水硫酸镁干燥并减压浓缩。加入乙醚使所得残余物结晶，过滤所形成的结晶，得到11.05g(产率83.0%)上述标题产物。
熔点228-230℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr0.99(1)Gly2.01(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Pro1.01(1)
参考实施例135制备 Boc-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用10.00gBoc-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和5.50gBoc-Thr(Bzl)-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到10.29g(产率84.5%)上述标题产物。
熔点168-171℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr1.95(2)Gly2.03(2)Ala1.00(1)Val1.01(1)Pro1.02(1)参考实施例136制备 Boc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用10.00gBoc-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和5.79gBoc-Arg(Tos)-OH·CH3COOC2H5·1/5HO，重复与参考实施例15相同的步骤，得到11.55g(产率89.7%)上述标题产物。
熔点221-226℃。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr1.96(2)Gly1.99(2)Ala0.98(1)Val1.04(1)Arg1.01(1)Pro1.03(1)参考实施例137制备 Boc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.00gBoc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和878mgBoc-Thr(Bzl)-Pro-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.00(产率82.8%)上述标题产物。
熔点199-201℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.96(3)Gly2.00(2)Ala0.99(1)Val1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.04(2)参考实施例138制备 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2将1.95gBoc-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于6mlTFA，室温下搅拌该溶液30分钟。减压浓缩反应混合物，加入乙醚处理所得残余物。过滤收集所沉淀的产物产并减压下用氢氧化钠干燥。加10mlDMF使上述产物溶解，然后在冰冷却条件下用三乙胺中和，随后加入639mgBoc-Gln-ONp和235mgHOBT，用N-甲基吗啉维持混合物的PH并于室温下搅拌18小时。加入60ml水处理反应混合物，过滤收集所形成的沉淀，干燥后，用热乙酸乙酯洗涤，得到2.02g(产率96.5%)上述标题产物。
熔点185-189℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.91(3)Glu1.03(1)Gly2.01(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.03(2)参考实施例139制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.97gBoc-Gln-Thr(Bzl)-ProArg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和863mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.31g(产率95.7%)上述标题产物。
熔点177-182℃。
氨基酸分析Asp1.00(1)Thr2.96(3)Glu1.03(1)Gly2.03(2)Ala1.02(1)Val1.01(1)Leu0.99(1)Lys0.97(1)Arg0.98(1)Pro2.01(2)参考实施例140制备 Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.26g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2，和626mgBoc-His(Tos)-OH和用HOSU代替HOBT，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.55g(产率99.7%)上述标题产物。
熔点168-175℃。
氨基酸分析
Asp1.02(1)Thr2.93(3)Glu1.03(1)Gly2.00(2)Ala1.04(1)Val1.02(1)Leu0.98(1)Lys0.93(1)His1.02(1)Arg1.01(1)Pro2.02(2)参考实施例141制备 Boc-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Glu-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.50g Boc-His(Tos)-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和493mgBoc-Leu-Osu，重复与参考实施例18相同的步骤，得到2.31g(产率88.2%)上述标题产物。
熔点176-178℃。
氨基酸分析
Asp1.04(1)Thr3.04(3)Glu1.07(1)Gly2.07(2)Ala1.02(1)Val1.04(1)Leu1.78(2)Lys0.95(1)His0.87(1)Arg1.05(1)Pro2.08(2)参考实施例142制备 Boc-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.26g Boc-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和424mgBoc-Glu(OcHex)-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.33g(产率95.7%)上述标题产物。
熔点174-177℃。
氨基酸分析Asp1.07(1)Thr3.11(3)Glu1.86(2)Gly2.08(2)Ala1.04(1)Val1.06(1)Leu1.81(2)Lys0.96(1)His0.87(1)Arg1.06(1)Pro2.07(2)参考实施例143制备 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.28g Boc-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和446mgBoc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，得到2.19g(产率91.4%)上述标题产物。
熔点178-180℃。
氨基酸分析Asp1.08(1)Thr3.14(3)Glu2.70(3)Gly2.10(2)Ala1.06(1)Val1.07(1)Leu1.83(2)Lys0.97(1)His0.87(1)Arg1.08(1)Pro2.09(2)参考实施例144制备 Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.14g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和393mgBoc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到1.30g(产率91.4%)上述标题产物。
熔点189-193℃。
氨基酸分析Asp1.07(1)Thr3.09(3)Ser0.75(1)Glu2.73(3)Gly2.13(2)Ala1.10(1)Val1.05(1)Leu2.79(3)Lys1.92(2)His0.79(1)Arg1.03(1)Pro2.08(2)参考实施例145制备 Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.00gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和427mgBoc-Asn-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到1.22g(产率94.3%)上述标题产物。
熔点168-173℃参考实施例146制备 Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用800mg Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和301mgBoc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到965mg(产率95.0%)上述标题产物。
熔点236-243℃(分解)参考实施例147制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用850mg Boc-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和197mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到871mg(产率90.0%)上述标题产物。
熔点230-245℃(分解)氨基酸分析Asp1.99(2)Thr2.90(3)Ser0.94(1)Glu3.10(3)Gly1.97(2)Ala1.00(1)Val1.00(1)Leu3.10(3)Lys2.03(2)Arg0.96(1)Pro2.02(2)参考实施例148制备 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.51gBoc-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.66gBoc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，得到3.41g(产率87.9%)上述标题产物。
熔点192-195℃(分解)
参考实施例149制备 Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.08gBoc-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和1.52gBoc-Thr-(Bzl)-Pro-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到3.21g(产率85.4%)上述标题产物。
熔点190-193℃(分解)参考实施例150制备 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用3.15g Boc-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.16gBoc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，得到3.07g(产率89.8%)上述标题产物。
熔点173-178℃。
参考实施例151制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用2.02g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和982mgBoc-Lys-(cl-z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.41g(产率95.3%)上述标题产物。
熔点204-209℃。
参考实施例152制备 Boc-Leu-His-Lys(cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.36g Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和639mgBoc-Leu-His-OH以及用HOSU，代替HOBT，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.46g(产率91.3%)上述标题产物。
熔点209-215℃。(分解)参考实施例153制备 Boc-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用1.82g Boc-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和498mgBoc-Glu(OcHex)-Osu，重复与参考实施例18相同的步骤，得到1.87g(产率95.9%)上述标题产物。
熔点209-217℃。(分解)参考实施例154制备 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.87g Boc-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和404mgBoc-Gln-ONp，重复与参考实施例18相同的步骤，得到1.77g(产率90.3%)上述标题产物。
熔点200-217℃。
氨基酸分析Asp1.03(1)Thr2.96(3)Glu3.87(4)Gly2.02(2)Ala1.00(1)
Val1.01(1)Leu2.06(2)Lys1.03(1)His0.94(1)Pro2.08(2)参考实施例155制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用501mg Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OBzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和198mgBoc-Lys(cl-Z)-Leu-Ser(BZL)-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到554mg(产率92.0%)上述标题产物。
熔点230-241℃。(分解)氨基酸分析Asp1.02(1)Thr2.93(3)Ser0.78(1)Glu3.86(4)Gly2.01(2)Ala1.01(1)
Val1.01(1)Leu3.08(3)Lys2.12(2)His0.89(1)Pro2.07(2)参考实施例156制备 Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用2.55g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和1.21gBoc-Asn-Lys(cl-z)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到2.75g(产率81.5%)上述标题产物。
熔点207-214℃。
参考实施例157制备 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用2.65g Boc-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和887mgBoc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到3.09g(产率96.6%)上述标题产物。
熔点224-241℃。(分解)氨基酸分析Asp1.99(2)Thr2.90(3)Glu4.06(4)Gly1.99(2)Ala1.01(1)Val1.00(1)Leu2.04(2)Lys1.03(1)Pro1.98(2)
参考实施例158制备 Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用1.00g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和336mgBoc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到1.08g(产率88.0%)上述标题产物。
熔点235-249℃(分解)氨基酸分析Asp2.01(2)Thr2.93(3)Ser0.84(1)Glu4.08(4)Gly2.00(2)Ala1.00(1)Val1.01(1)Leu3.01(3)Lys2.03(2)Pro1.92(2)
参考实施例159制备 Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用9.00gBoc-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH和5.67gBoc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl-Bzl)-Pro-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到12.28g(产率94.7%)上述标题产物。
熔点195-198℃。
参考实施例160制备 Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.00g Boc-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和2.65gBoc-Gln-ONp，重复与实施例18相同的步骤，得到12.48g(产率97.7%)上述标题产物。
熔点185-187℃(分解)参考实施例161制备 Boc-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.25g Boc-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.54gBoc-Lys-Osu，重复与参考实施例18相同的步骤，得到13.01g(产率93.2%)上述标题产物。
熔点179-182℃。
参考实施例162制备 Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.80g Boc-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
和3.24gBoc-His(Tos)-OH，以及用910mgHOSU代替HOBT，重复与参考实施例15相同的步骤，得到13.05g(产率91.0%)上述标题产物。
熔点171-176℃。
参考实施例163制备 Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-ALa-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2使用12.85g Boc-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和4.05gBoc-Gln-Glu(OcHex)Leu-OH，以及用816mgHOSU代替HOBT，重复与参考实施例15相同的步骤，得到13.85g(产率92.4%)上述标题产物。
熔点177-180℃。
参考实施例164制备 Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
使用13.60g Boc-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和3.63gBoc-Lys(cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-OH，以及用592mgHOSU代替HOBT，重复与参考实施例15相同的步骤，得到14.87g(产率92.3%)上述标题产物。
熔点190-195℃。
参考实施例165制备Boc-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用7.37gBoc-Ser(Bzl)-OH和5.00gH-Leu-OEt，重复与参考实施例15相同的步骤，得到7.53g(产率69.1%)上述标题产物。
外观油状物。
参考实施例166制备Boc-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用7.53gBoc-Ser(Bzl)-Leu-OEt和3.50gBoc-Ala-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到7.26g(产率82.9%)上述标题产物。
熔点97-97.5℃。
参考实施例167制备Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt使用3.50gBoc-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt和1.30gBoc-Gly-OH，重复与参考实施例15相同的步骤，得到3.03g(产率77.8%)上述标题产物。
熔点134-135℃。
参考实施例168制备 Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-NHNH2使用3.00gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-OEt，重复与参考实施例6相同的步骤，得到2.61g(产率89.2%)上述标题产物。
熔点195-197℃。
参考实施例169制备Boc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl使用2.56gBoc-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl和2.00gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-NHNH2，重复与参考实施例7相同的步骤，得到3.13g(产率76.8%)上述标题产物。
熔点209-212℃。
使用3.10gBoc-Gly-Ala-Ser(Bzl)-Leu-Ser(Bzl)-Thr(Bzl)-Glu-OBzl，重复与参考实施例8相同的步骤，得到2.17g(产率78.2%)上述标题产物。
熔点150-154℃。
参考实施例171制备
复与参考实施例9相同的步骤，得到1.90g(产率97.9%)上述标题产物。
熔点124-130℃。
参考实施例172
和1.20gBoc-Val-Leu-Gly-OH，重复与参考实施例13相同的步骤，得到1.90g(产率84.0%)上述标题产物。
熔点217-220℃。
实施例1
将150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2溶于2mlTFA，然后将该溶液在室温下放置40分钟。减压浓缩反应混合物，向所得残余物中加入乙醚，过滤收集所形成的沉淀，并在减压下用氢氧化钠干燥。将干燥的残余物溶于2mlDMF并在冰冷却条件下用三乙胺中和该溶液。接着，向该混合物
将混合物的PH调至PH7，将整个混合物在冰冷却条件下搅拌18小时，再于室温下搅拌18小时，将50ml水加到反应混合物中，过滤收集所形成的沉淀，干燥，用20ml热乙酸乙酯洗涤，得到180mg被保护肽的粗产物。
在冰冷却条件下，将150mg被保护肽的粗产物与15ml氟化氢和1.5ml茴香醚一起搅拌60分钟。然后在冰冷却条件下，减压蒸发除去氟化氢，用乙醚洗涤所得残余物，然后溶于10ml1M乙酸，接着冷干，得到86mg粉状物。
取50mg粉状物，在下列条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到11.6mg标题产物的活性粉末。
柱ODS-120T(21.5mmI.D.×30cm，日本，东京，TOSOh公司生产)洗脱方法线型浓度梯度洗脱(40分钟)洗脱剂0.1%TFA水溶液90%乙腈/0.1%TFA水溶液(80∶20)→(30∶70)速度15ml/分检测在UV210nm处氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.76(5)Ser3.62(4)Glu4.10(4)Gly3.98(4)Val1.01(1)Leu5.06(5)Tyr0.98(1)Lys1.99(2)His1.02(1)Arg1.02(1)Pro2.07(2)
实施例2
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到170mg被保护肽的粗产物。
取150mg被保护肽的粗产物，用氟化氢和茴香醚处理(处理方法同实施例1)，得到100mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到8.7mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.82(5)Ser3.67(4)Glu4.13(4)Gly3.98(4)Leu4.04(4)Tyr0.98(1)
Lys1.98(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.06(2)Val0.99(1)实施例3
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到180mg被保护肽的粗产物。
取150mg被保护肽的粗产物，按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理，得到110mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到25.5mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.01(2)Thr4.77(5)Ser3.64(4)Glu4.07(4)Gly3.98(4)Val1.01(1)Leu5.09(5)Lys2.01(2)His0.99(1)Arg0.99(1)Pro2.09(2)实施例4
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到190mg被保护肽的粗产物。
取150mg被保护肽的粗产物，按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理，得到102mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到17.7mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.97(3)Thr4.75(5)Ser3.68(4)Glu4.13(4)Gly4.04(4)Val0.99(1)Leu5.09(5)Lys1.99(2)Arg1.00(1)Pro2.04(2)实施例5
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到170mg被保护肽的粗产物。
取160mg被保护肽的粗产物，按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理，得到100mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到8.5mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.83(3)Thr4.77(5)Ser2.81(3)Glu3.10(3)Gly3.02(3)Val0.98(1)Leu5.03(5)Tyr0.98(1)Lys1.99(2)His1.00(1)Arg0.99(1)Pro2.12(2)Acp0.88(1)实施例6
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和51mg，
重复与实施例1相同的步骤，得到170mg被保护肽的粗产物。
取160mg被保护肽的粗产物，按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理，得到80mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到7.7mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.78(3)Thr4.84(5)Ser2.81(3)Glu3.09(3)Gly3.00(3)Val0.97(1)Leu4.03(4)Tyr0.97(1)
Lys1.98(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.09(2)Acp0.81(1)实施例7
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和54mg，
重复与实施例1相同的步骤，得到160mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理160mg被保护肽的粗产物，得到104mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到15.1mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.79(3)Thr4.84(5)Ser2.82(3)Glu3.03(3)Gly3.02(3)Val1.00(1)Leu5.15(5)Lys2.04(2)His0.98(1)Arg0.99(1)Pro1.94(2)Acp0.82(1)实施例8
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到180mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理150mg被保护肽的粗产物，得到100mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到19.3mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.89(5)Ser3.77(4)Glu5.14(5)Gly3.96(4)Val0.94(1)Leu5.03(5)Lys2.02(2)His0.99(1)Pro2.03(2)实施例9
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到190mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理150mg被保护肽的粗产物，得到104mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到13.4mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp3.03(3)Thr4.83(5)Ser3.72(4)Glu5.10(5)Gly3.93(4)Val0.95(1)Leu5.08(5)Lys2.06(2)Pro2.02(2)实施例10
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到180mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理150mg被保护肽的粗产物，得到74mg粉状物。
取50mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到14.9mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.86(5)Ser3.78(4)Glu4.12(4)Gly4.97(5)Val0.93(1)Leu5.10(5)Lys2.02(2)Arg0.98(1)Pro1.94(2)
实施例11
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到170mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理150mg被保护肽的粗产物，得到105mg粉状物。
取30mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到11.2mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.99(3)Thr4.86(5)Ser3.78(4)Glu4.11(4)Gly3.01(3)Val0.97(1)Leu4.99(5)
Lys2.02(2)His1.00(1)Pro2.06(2)β-Ala1.00(1)实施例12
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1相同的步骤，得到170mg被保护肽的粗产物。
按实施例1的方法，用氟化氢和茴香醚处理150mg被保护肽的粗产物，得到98mg粉状物。
取30mg粉状物，在与实施例1相同的条件下，用高效液相色谱法进行纯化和测定，得到9.6mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析
Asp2.04(2)Thr4.92(5)Ser3.85(4)Glu3.13(3)Gly3.04(3)Val0.97(1)Leu5.05(5)Lys1.97(2)His1.01(1)Arg1.01(1)Pro2.01(2)Cpc0.71(1)实施例13
使用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复与实施例1中的同样步骤，得到150mg被保护肽粗产物。
将150mg该保护的肽的粗产物按实施例1所述用氟化氢和苯甲醚处理，得到100mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉状物，在如实施例1的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到10.5mg上述产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.02(2)Thr4.85(5)Ser2.78(3)Gly3.02(3)Val0.99(1)Leu5.05(5)Lys2.04(2)His1.00(1)Arg1.00(1)Pro2.04(2)Abu1.22(1)
Cec和Glu不能检测出，因为显示它们的峰重叠了。
实施例14
Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-Asn-Lys-Leu-Gln-Thr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到170mg保护的肽的粗产物。
将150mg该保护的肽的粗产物用实施例1所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到94mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，通过高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到8.1mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Pro2.00(2)Asp3.02(3)Thr4.86(5)Ser3.83(4)
Glu3.15(3)Gly3.03(3)Leu5.05(5)Lys2.05(2)Arg1.00(1)Val和Tyr(CHCOOH)未检测到，因为显示它们的峰重叠了。
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2和59.0mg，
并重复实施例1中的同样步骤，得到160mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到96mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，通过高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到7.2mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp3.02(3)Thr4.83(5)Ser2.82(3)Glu4.13(4)Gly3.02(3)Val1.01(1)Leu5.07(5)Lys2.87(3)Pro2.06(2)实施例16
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到160mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到81mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到7.2mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.84(5)Ser3.77(4)Glu4.12(4)Gly5.96(6)Leu5.02(5)Lys2.04(2)Arg0.99(1)Pro2.02(2)实施例17
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，结果得到160mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到93mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到5.9mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.03(2)Thr4.80(5)Ser3.78(4)Glu4.13(4)Gly4.99(5)Ile1.00(1)Leu5.06(5)Lys2.03(2)Arg0.96(1)Pro1.99(2)实施例18制备
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
重复实施例1中的同样步骤，得到192mg保护的肽的粗产物。
将190mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到138mg粉末状物质。
取50mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到6.1mg上述标题产物的活性成份。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.71(5)Ser3.69(4)Glu4.12(4)Gly3.92(4)Ala0.99(1)
Val1.00(1)Leu4.96(5)Lys2.04(2)Arg0.99(1)Pro1.97(2)实施例19
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到196mg保护的肽的粗产物。
将196mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到124mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到7.3mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.10(2)Thr4.82(5)Ser4.60(5)Glu4.11(4)Gly3.98(4)Val1.05(1)Leu4.93(5)Lys2.03(2)Arg1.02(1)Pro2.05(2)实施例20
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Leu-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到189mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到101mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到4.9mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.00(2)Thr4.84(5)Ser3.70(4)Glu4.13(4)Gly3.94(4)Val0.97(1)Leu6.00(6)Lys2.04(2)Arg1.03(1)Pro2.05(2)实施例21
用150mg
Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gln-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到186mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到107mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到8.8mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.81(5)Ser3.66(4)Glu5.15(5)Gly3.95(4)Val0.99(1)Leu5.01(5)Lys2.05(2)Arg1.01(1)Pro2.02(2)
实施例22
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ala-Lys(Cl-Z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到160mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到106mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到5.2mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.85(5)Ser3.76(4)Glu5.15(5)Gly3.95(4)Ala1.01(1)
Val0.97(1)Leu4.99(5)Lys2.03(2)Pro2.04(2)实施例23
用150mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Ser(Bzl)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asn-Thr(Bzl)-Gly-Ser(Bzl)-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到160mg保护的肽的粗产物。
将150mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到104mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到8.1mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp2.01(2)Thr4.85(5)Ser4.74(5)Glu5.17(5)Gly4.00(4)Val0.96(1)Leu4.99(5)Lys2.02(2)Pro2.01(2)实施例24
用50mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Gly-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asn(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的步骤，得到60mg保护的肽的粗产物。
将60mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到40mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到5.8mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.02(1)Thr3.92(4)Ser2.87(3)Glu4.10(4)Gly5.00(5)Ala2.04(2)Val1.96(2)Leu5.00(5)Lys2.02(2)Arg1.00(1)Pro2.06(2)实施例25
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-ALa-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到50mg保护的肽的粗产物。
将50mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到40mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状物质，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到6.4mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.98(2)Thr3.89(4)Ser2.87(3)Glu4.15(4)Gly4.03(4)Ala2.03(2)Val1.98(2)Leu5.07(5)Lys2.03(2)Arg1.00(1)Pro1.96(2)
实施例26
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到50mg保护的肽的粗产物。
将50mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到40mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状产物，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到8.7mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr3.86(4)Ser2.83(3)
Glu5.06(5)Gly4.00(4)Ala2.02(2)Val2.02(2)Leu5.02(5)Lys2.03(2)His0.99(1)Pro2.02(2)实施例27
用50mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-Asn-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Gln-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到50mg保护的肽的粗产物。
将50mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到38mg粉末状物质。
取30mg上面得到的粉末状产物，在如实施例1中的同样条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到6.1mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.99(2)Thr3.87(4)Ser2.85(3)Glu5.12(5)Gly4.03(4)ALa2.03(2)Val1.99(2)Leu5.04(5)Lys2.03(2)Pro2.05(2)实施例28
用50mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Cl2-Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到42mg保护的肽的粗产物。
将42mg保护的肽的粗产物，用实施例1中所述的氟化氢和苯甲醚处理，得到30mg粉末状物质。
在如实施例1的同样条件下，将该30mg粉末物质用高效液相色谱进行纯化和检测，结果得到7.2mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp1.01(1)Thr3.90(4)Ser2.85(3)Glu4.10(4)Gly4.01(4)Ala2.03(2)Val2.02(2)Leu4.00(4)Tyr1.00(1)Lys2.02(2)His1.00(1)Arg1.01(1)Pro2.04(2)
实施例29
用100mg Boc-Lys(Z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OBzl)-Leu-His-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Tyr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(Bzl)-Asp(Obzl)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到123mg保护的肽的粗产物。
将100mg该保护的肽的粗产物，用氟化氢和苯甲醚处理，得到71mg粉末状物质。
取40mg该粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到5.9mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.99(1)Thr3.87(4)
Ser2.89(3)Glu4.09(4)Gly4.06(4)Ala2.05(2)Val2.00(2)Leu5.05(5)Tyr0.89(1)Lys2.01(2)His0.97(1)Arg0.99(1)Pro2.01(2)实施例30
用100mg Boc-Lys(Cl-z)-Leu-Ser(Bzl)-Gln-Glu(OcHex)-Leu-His(Tos)-Lys(Cl-z)-Leu-Gln-Thr(Bzl)-Pro-Arg(Tos)-Thr(bzl)-Asp(OcHex)-Val-Gly-Ala-Gly-Thr(Bzl)-Pro-NH2
并重复实施例1中的同样步骤，得到139mg保护的肽的粗产物。
将100mg该保护的肽的粗产物，用氟化氢和苯甲醚处理，得到78mg粉末状物质。
取40mg该粉末状物质，在如实施例1中的相同条件下，用高效液相色谱对其进行纯化和检测，结果得到8.5mg上述标题产物的活性粉末。
氨基酸分析Asp0.98(1)Thr3.88(4)Ser2.88(3)Glu4.10(4)Gly4.06(4)Ala2.04(2)Val2.01(2)Leu5.02(5)Lys2.03(2)His0.98(1)Arg1.00(1)Pro2.03(2)生物活性试验-Ⅰ将上述实施例得到的每个多肽衍生物用作试验样品并用1%乙酸钠水溶液(含0.1%牛血清白蛋白，PH为5.0)将其稀释到一适宜浓度，然后以0.2ml/100g体重的剂量静脉给药于wister雄性大鼠(体重约180g)。给药1小时后，用乙醚麻醉该大鼠，从其腹静脉的血中取血清样品。
用生化自化分析仪(COBASBIO，manufacturedbyHoffmann-LaRoehe&Co.，A.G.)，通过OCPC(邻甲酚酞复合酮)法的测热步骤〔BUNSEKI-KAGAKU-SHIM-PO-SOHSETSU(ReviewofProgressinAnalyticalChemistry)，Vol，17，pp.127-136，(1968)byMasayukiSaitoh;AmericanJournalofClinicalPathology，Vol.45，pp.290-296，(1966)byConnerty，H.V.，和Briggs，A.R.;RINSHOH-BYOHRI(ClinicalPathology)，Vol.17，SupplementolIssue，pp.85(1969)byEtsukoYoshidal〕检测每一血清样品中的钙浓度。
将给药的大鼠血清样品中钙浓度与末给本发明试验用多肽衍生物的对照组大鼠的血清样品中钙浓度比较，结果表明，试验组大鼠血清样品中的钙浓度(本发明试验用多肽衍生物样品来自各个实施例)随试验样品剂量的增加而逐渐降低。
试验组和对照组大鼠血清样品中钙浓度(mg/dl)见下面表1。
表1试验样品的剂量(ng/kg)试验组对照组作为试验样6.2512.525.00品的多肽的实施例号血清样品中的钙浓度(mg/dl)实施例19.048.167.6210.68实施例38.787.817.189.84实施例48.517.806.749.74实施例78.657.707.399.69实施例88.587.947.409.69实施例108.757.837.449.69实施例118.928.097.9110.50实施例129.228.087.6310.43实施例138.848.287.6610.50实施例149.057.957.7210.50实施例158.868.107.6510.43实施例179.288.067.5910.43实施例188.977.807.3410.09
实施例199.247.807.3310.09实施例208.967.957.2310.09实施例218.897.907.4910.50实施例229.378.367.5610.35实施例238.888.407.3310.35实施例249.028.007.2010.35实施例259.317.647.0710.35实施例269.228.297.6210.30实施例278.848.297.6210.30实施例289.118.017.449.99实施例299.358.577.729.99实施例309.028.147.319.99从表1中的结果可清楚地看到，本发明的任何一种多肽衍生物都具有良好的抵抗血清样品中钙浓度的活性。
〔生物活性试验-Ⅲ〕本发明实施例得到的每个多肽衍生物和含包们的钙代谢改善剂的肠吸收能力如下进行试验。
每试验组有3-4只Wister雄性大鼠(平均体重约250g，并空腹)用作试验动物。每只大鼠通过腹膜内给药，以40mg/kg的剂量，用戊巴比妥将其麻醉，然后通过大鼠的腹部，以0.5ml/100g的剂量将试验样品溶液十二指肠内给表2作为试验样品的添加剂(蛋白血清中多肽的实施例号分解酶抑制剂+枸椽酸钙浓度(1，000ng/kg)inhibitor)(50mg/kg)(mg/dl)实施例3SBTI+枸椽酸8.40(20mg/kg)(50mg/kg)实施例8抑肽酶7.70(20mg/kg)+″″11Urinastatin8.06(50，000U/kg)+″″12Camostat甲磺酸盐7.21(20mg/kg)+″″13加贝酯甲磺酸盐7.48(20mg/kg)+″″15Camostat甲磺酸盐7.46(20mg/kg)+″″17加贝酯甲磺酸盐7.28(20mg/kg)+″″18Nafamostat甲磺酸盐7.37(20mg/kg)+″″21FK-4487.47(20mg/kg)+″″23抑糜朊酶素7.71(20mg/kg)+″″24Nafamostat甲磺酸盐7.42(20mg/kg)+″″28亮肽素7.54(20mg/kg)+″″30FK-4487.63(20mg/kg)+″″15(不加)+(不加)9.83药。给药后1小时，将大鼠用乙醚麻醉，然后从腹静脉血中取得血清样品。
用生化自动分析仪(COBASBIO，manufacturedbyHoffmann-LaRoche&Co.，A.G.)，通过OCPC(邻甲酚酞复合酮)法的测热步骤〔AmericanJournalofClinicalPathologyVol.45，PP.290，(1966)byConnerty，H.V.，和Briggs，A.R.〕检测每个血清样品中的钙浓度(mg/dl)。
试验样品溶液的制备将用作标题药物组合物(用作钙代谢改善剂)的添加剂的蛋白分解酶抑制剂和枸椽酸溶解或悬浮在蒸馏水中，由此得到的溶液或悬浮液与用1%乙酸钠水溶液(含0.1%牛血清白蛋白(BAS)，PH为5.0)稀释到一定浓度的多肽衍生物水溶液相混合，由此得到的混合物用作十二指肠内给药的试验样品溶剂。
每只试验大鼠(每个试验组有3-4只大鼠)血清中的钙浓度平值值(mg/dl)见下面表2。
从表2中数据可明显看到，当所述多肽衍生物与蛋白分解酶抑制剂及酸一起合用时，实施例所制备的多肽衍生物通过腹内给药可达到良好的降低血清中钙浓度的作用。
药物制剂-1的实施例将300单位实施例1制备的化合物与150mg亮肽素混合，往该混合物中加入适当量的结晶纤维素，羧甲基纤维素钙，羟丙纤维素和硬脂酸镁，然后将整个混合物充分混合以使该混合物成为均一的组合物。将所述混合物压片，然后通过肠包衣法将它们制成肠包衣的片剂。
药物制剂-2的实施例将400单位实施例24制备的化合物与300mg抑糜朊酶素混合，往该混合物中加入适量的结晶纤维素，羧甲基纤维素钙和滑石，然后将整个混合物充分混合从而制成均匀组份的混合物。将所述混合物填充入明胶囊。用肠包衣法将所得到的填充的胶囊制成肠包衣的胶囊。
药物制剂-3的实施例将50单位实施例12制备的化合物与50mg抑肽酶混合，往该混合物中加入适量WitepsolH-15(脂肪酸甘油脂的商标名，DynamitNobel公司制造)，从而将该混合物制成栓剂。
药物制剂-4的实施例将350单位实施例25制备的化合物溶于枸椽酸钠水溶液中，然后加1N盐酸将该溶液PH调至7.4，往上述溶液中加入注射用纯水，从而制得注射制剂。
药物制剂-5的实施例将300单位实施例20制备的化合物和200mgCamostat甲磺酸盐溶于乳酸水溶液中，加1N氢氧化钠水溶液将该溶液的PH调至7.0，然后往上述溶液中加入适量水，以制备适用于鼻途径给药的液体制剂。
权利要求
1.由通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，
在式(1)中，(A)为低级亚烷基；(B)为-NHCO-，-S-或羟亚苯基；(D)为低级亚烷基；(E)为缬氨酸残基，甘氨酸残基或异亮氨酸残基；(F)为组氨酸残基，天冬酰胺残基，甘氨酸残基，丙氨酸残基，丝氨酸残基，亮氨酸残基或谷氨酰胺残基；(G)为精氨酸残基或谷氨酰胺残基；l，m和n分别为0或1；其条件是当l为0，(A)为亚甲基时，D为亚甲基或亚乙基；在式(2)中，(A′)为低级亚烷基；(B′)为-NHCO-；(D′)为低级亚烷基；(G′)为组氨酸残基，天冬酰胺残基或甘氨酸残基；(H′)为精氨酸残基或谷氨酰胺残基；p和q分别为0或1。
2.根据权利要求1的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物由通式(1)
代表，式中(A)，(B)，(D)，(E)，(F)，(G)，l，m和n均如上所定义。
3.根据权利要求1的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物由通式(2)
代表，式中(A′)，(B′)，(D′)，(G′)，(H′)p和q均如上所定义。
4.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物由通式(3)
代表，式中(A)为低级亚烷基;(B′)为-NHCO-;(D)为低级亚烷基;(F′)为组氨酸残基，天冬酰胺残基或甘氨酸残基;(G)为精氨酸残基或谷氨酰胺残基;l，m和n分别为0或1。
5.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽为下面的通式
(实施例18)
6.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物为下面的多肽
(实施例11)，
(实施例12)，
(实施例13)，
(实施例14)，和
(实施例15)。
7.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物为下面的多肽。
(实施例17)，
(实施例19)，
(实施例20)，
(实施例21)，
(实施例22)和
(实施例23)。
8.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物为下式的多肽
(实施例4)。
9.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该衍生物为下式的多肽
(实施例8)。
10.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物是下式多肽
(实施例10)
11.根据权利要求2的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物是下面的多肽
(实施例3)，
(实施例7)和
(实施例9)。
12.根据权利要求3的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，其中该多肽衍生物是下面的多肽
(实施例24)，
(实施例25)和
(实施例27)。
13.通式(3)代表的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物，
其中(A′)为低级亚烷基;(B′)为-NHCO-;(D′)为低级亚烷基;R为活性羧基或羟基，或-Val-Leu-Gly-R′(R′为活性的羧基或羟基)。
14.制备权利要求1中的由通式(1)和(2)代表的多肽衍生物的方法，该方法特征在于通过将氨基酸与氨基酸序列中具有上述化学结构的另一个未端氨基酸逐步缩合以延长序列中的酰氨键(肽键)，从而制备线性多肽，或者首先将上述化学结构的多肽分成几个片段，然后分别合成每一个片段，再将这些片段缩合来制备多肽，或在所述步骤中，利用环合反应步骤，通过将在上述制备线性多肽步骤中形成的N-未端氨基酸的游离官能基与通式(1)和(2)氨基酸序列中第7个氨基酸的侧链官能基或其相关化合物的侧链功官团进行缩合。
15.利用权利要求1中的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物治疗高钙血的药物组合物。
16.用于改善钙代谢的药物组合物，其特征在于其含由通式(1)或(2)代表的至少一种多肽衍生物，其酸加成盐或其复合物作为活性成份及蛋白分解酶抑制剂和/或药用酸。
17.用多肽衍生物，其酸加成盐或其复合物治疗高钙血的药物组合物，该多肽选自下面的多肽
(实施例4)，
(实施例8)，
(实施例10)，和
(实施例18)。
18.治疗高钙血的方法，其包括服用有效量的由权利要求1中通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成盐或其复合物。
19.将权利要求1中通式(1)或(2)代表的多肽衍生物，其酸加成盐或其复合物用于制备用来治疗高钙血的药物组合物。
全文摘要
具有抑制骨钙吸收，降低血钙浓度及作为镇痛药能抑制胃汁分泌活性的新的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物。改善钙代谢剂可通过将至少一种新的多肽衍生物，其酸加成盐和其复合物与蛋白分解酶抑制剂和/或药用酸混合来制备。改善钙代谢剂是治疗高血钙十分有效的药物及镇痛剂，抗溃疡剂等。
文档编号C07K7/02GK1047086SQ9010138
公开日1990年11月21日 申请日期1990年3月16日 优先权日1989年3月16日
发明者藤井节郎, 山本荣仁, 清水文夫, 稻井正敏, 木下直纯, 申村静夫, 广桥满, 坂本贵, 堤一彦, 白板哲彦 申请人:大制药株式会社, 株式会社大制药工场