专利名称：非晶形(喹啉-2-基甲氧基)吲哚的制作方法
EP419，049(Prasit等，1991年3月27日)公开了一系列作为白三烯生物合成抑制剂的喹啉-2-基甲氧基吲哚。本文的实施例1和1A叙述了作为结晶化合物的3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲啉-2-基]-2，2-二甲基丙酸(L-686，708)的合成。其钠盐也能以结晶固体游离出来，它是用碱如NaOH水解其甲酯制备的，并显示出极好的固态特性，如非吸湿性，物理稳定性等，但它显示极低的水溶性(约0.005-0.03mg/ml)。这使它不适用于通常的静脉注射，并且导致低的口服生物有效性。
目前已经发现了非晶形的L-686，708的钠盐，于25℃时它在去离子水中的溶解度为55mg/ml。
本发明涉及式(Ⅰ)的非晶形化合物
在文本中“L-708Na+盐”是指结晶形的L-686，708钠盐，“非晶形L-708”是指本发明化合物，即非晶形的L-708Na+盐。
将游离酸(L-686，708)悬浮于或溶解于水和一种或多种有机共溶剂的混合物中可制备非晶形的L-708。上述有机共溶剂如甲醇，乙醇，异丙醇，乙醚，丙酮，2-丁酮，乙腈等。然后用一当量的氢氧化钠，优选其水溶液，中和上述游离酸的溶液或悬浮液。为了得到均匀的溶液，必要时可将混合物加热和/或需要的话再加水和有机溶剂。再真空中温热，蒸发掉大部分有机溶剂。通过冷冻干燥除去其余的主要是含水的溶剂，得到本发明的化合物，是无定形的粉末。
如果混合物是被冻干的，那么最好是将它继续进行蒸馏，直到该混合物的浓度达到77-120mg/ml并且变成油一样的稠度。上述这种附加的浓缩步骤不仅改进了冻干步骤的效率，而且使残留的有机溶剂的浓度减少到＜1%。
另外，非晶体形L-708能从它的相应的结晶形式来制备。将L-708Na+盐溶于或悬浮于水和一种或几种如上所述的有机共溶剂的混合物中，一当得到均匀的溶液，就可通过如上所述的蒸发和冻干的方法得到它的非晶形式。
所得到的非晶物保留了其晶形的同素异形体的生理学性质，但在水中极易溶解。
另一种干燥的方法是喷雾干燥上述的均匀溶液，这种方法的优点是在喷雾干燥之前，不必蒸发有机共溶剂。
使用“非晶形”这一术语来描述本文所述的通过干燥其钠盐水溶液得到的L-686，708的钠盐的物理状态。除了大大增加了水溶解性外，和结晶形式相反，非晶形式不出现X-光粉末衍射图(例如用Philips PW 1840衍射仪)。关于晶态和非晶态方面的研究见Solid State Chemistry of Drugs(S.R.Byrn，Academic Press N.Y.，1982，pp10-11)及Int.J.Pharm.Vol24，pp1-17(R.Suryanarayanan和A.G.Mitchell，1985)用于鉴定本发明的另一物理参数可通过示差扫描量热法(DSC)得到。本发明的非晶形物质在180和190℃之间明显放热。此时它转变为晶形物。随着继续加热，当该物质熔化时，于325℃出现吸热。相反，L-708Na+盐的DSC在180和195℃之间不出峰，在335℃时出现吸热的熔化峰。
在N2保护下使用带有系统-4控制器的PerkinElmerDSC-4，得到于卷曲的铝盘中制备的试样的热扫描图。DSC用铟(156.6±0.2℃)来标定。在约190℃时非晶形的L-708结晶，其结晶
约为-30kJ/mol。一般随后在约259℃时出现第二次小的放热(△H＝-7.6kJ/mol)。
非晶形L-708于约190℃时的结晶
(△H，由DSC测定)与x-射线衍射时试样中非晶物质的含量相关。在一套设计的试验中，假定L-708NA+盐是100%结晶的，且于190℃的结晶
为零;非晶形L-708是100%非晶的，且结晶
约为-30kJ/mol。将0-80%的研磨了的L-708Na+盐和非晶形L-708掺合，用DSC测定该掺合物的结晶
，并对晶体含量作图，得到一条相关系数为0.9985的直线，标准偏差为0.06-0.7。能获得一条直线这一事实说明，非晶物当用研细的结晶物作晶种时，在x-光衍射试验中未发现晶核生成及结晶的生长。
使人惊异的是，非晶的L-708的饱和水溶液极为稳定。也就是说，即使用晶形的同素异形体作晶种，它们也不易沉淀出晶体。该固体物质也极稳定。当在环境湿度下于30℃和60℃及30℃/79%。相对湿度下存放三个月时，仍看不出在水中溶解度的变化。非晶形L-708在固态及在溶液状态下对于化学分解也极稳定。
非晶形L-708以L-686，708在EP419，049中所述的相同方式用作白三烯生物合成的抑制剂。其优点是它比L-708Na+盐的生物利用率高得多。将EP419，049列入本文作为参考，特别是5-10页，25页及26页。
因此，本发明的一个方面是提供一种药物组合物，它包括治疗有效量的非晶形L-708和药学上可接受的载体。
本发明的另一方面是提供一种还含有有效量的第二种活性成份的上述药物组合物。上述第二种活性成份选自非类固醇抗炎药，外周止痛药，环氧合酶抑制剂，白三烯拮抗药，白三烯生物合成抑制剂，H1和H2-受体拮抗药，抗组胺药，前列腺素拮抗药及ACE拮抗药。特别优选的是其中第二活性成份为非类固醇抗炎药的药物组合物。其中非晶形L-708与所述第二活性成份的重量比约为1000∶1到至1∶1000的药物组合物也是特别优选的。
本发明的另一方面是提供一种在哺乳动物中防止SRS-A或白三烯的合成、活动或释放的方法，该方法包括对所述的哺乳动物施用有效量的非晶形L-708，特别是其中所说的哺乳动物是人。
另一方面是提供了治疗哺乳动物哮喘的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用治疗有效量的非晶形L-708，其中哺乳动物特别是人。
本发明的另一方面是提供了治疗哺乳动物眼睛的炎性疾病的方法，该方法包括对需要治疗的哺乳动物施用治疗有效量的非晶形L-708，其中哺乳动物特别是人。
参见实施例可进一步说明本发明，这些实施例是用来阐明而不是限制本发明的。温度指摄氏度。
制备例1和2是EP419，049中的实施例1和1A，抄录于本文中以便参考，原料也是EP419，049中公开的。
制备例13-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸步骤A3-[N-对氯苄基-3-(叔丁基硫代)-5-甲氧基吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸甲酯。
往39g5-(叔丁基硫代)-2，2-二甲基-4-氧代戊酸甲酯于300ml甲苯和150ml冰醋酸的混合物中的溶液中加15g NaOAc和50g 1-(4-甲氧苯基)1-(对氯苄基)肼氢氯化物，在氩气氛中，于暗处室温下持续搅拌反应三天。把混合物倾入3L水中，用3×500ml EtoAc萃取，用3×500ml水洗涤乙酸乙酯，然后加入固体NaHCO3。将混合物过滤，将滤液用水洗两次。用MgSo4干燥有机相并蒸发至干，得到标题化合物。M.P.102-103℃。
步骤B3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-甲氧基吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸用于325ml THF，600ml MeOH和325ml 1.0M的LiOH水解由步骤A得到的化合物。将溶液于80℃加热3小时，用1N HCl酸化溶液并用3×200mlEtDAc萃取。用水(2×150ml)洗涤有机相并用MgSO4干燥。将溶液蒸发至干，得到标题化合物。M.P.190-191℃。元素分析(C、H、N)计算值C，65.27;H，6.57;N，3.04
测定值C，65.28;H，6.58;N，3.04步骤C3-[N-(对氯苄基)-5-羟基-3-(叔丁基硫代)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸甲酯61ml叔丁基硫醇于650ml无水HMPA中的溶液于0℃下分次用26g于矿物油中的50%NaH处理(用己烷除去油)。于室温搅拌反应物30分钟并加入46g由步骤B得到的化合物。
然后于氮气氛中175℃下加热反应物5小时。将溶液冷却并倒入碎冰中，其后用2N HCl处理至PH5并用EtOAc(3×500ml)萃取。用水(3×200ml)洗有机相，用MgSO4干燥并蒸发。将残留物溶于300ml乙醚中，再加入乙醚-重氮甲烷直到全部酸被消耗。除去过量的溶剂，用己烷研制油状的残留物，得到结晶物，再用EtOAc/己烷重结晶，得到标题化合物，为白色晶状固体，M.P.170-171℃。
步骤D3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸甲酯3-[N-(对氯苄基)-5-羟基-3-(叔丁基硫代)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸甲酯(33.6g，由步骤C制得)溶解于500ml无水DMF中，往溶液中加2.4gKI，30.3g K2CO3，4.77g Cs2CO3和23.5g 2-(氯甲基)-喹啉氢氯化物。于N2气氛及室温下搅拌反应物72小时，然后倒入水(1.5L)中。用1N HCl酸化，用CH2Cl2(3×200ml)萃取。有机相用水(3×150ml)洗涤，干燥并蒸发，残留物溶在热的EtOAc中，冷却下结晶。沉淀出22.0g标题化合物。M.P.166-167℃。
步骤E3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸采用步骤B的水解方法，但用步骤D得到的酯代替步骤A的酯，得到标题化合物，再用1∶1的EtOAc/己烷重结晶.M.P.208℃元素分析(C、H、N)计算值C，69.55;H，6.01;N，4.77测定值C，69.77;H，6.05;N，4.70制备例23-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸步骤AN-乙酰基-4-(喹啉-2-基甲氧基)苯胺含2-(氯甲基)喹啉氢氯化物(100.0g)，4-乙酰氨基苯酚(70.69g)和磨碎的无水碳酸钾(194g)的混合物于DMF(1.2L)中用机械搅拌器搅48小时。在激烈的搅拌下，将该混合物仔细倒入冰/水(3L)中。冰熔化之后，过滤出固体，充分用水淋洗，用95%乙醇重结晶，分三批得到标题化合物。
步骤B4-(喹啉-2-基甲氧基)苯胺于氮气氛下，将N-乙酰基-4-(喹啉-2-基甲氧基)苯胺(步骤A，108.9g)于1L 95%的含10M KOH(120ml)的乙醇中的悬浮液在加热套上加热回流。当水解完成时(约36小时)，将反应混合物冷却，于真空下除去部分乙醇。再用水(200ml)稀释反应混合物，收集细的灰白色晶体并用水充分淋洗。风干后得到标题化合物，用于下一步反应。
步骤C4-(喹啉-2-基甲氧基)苯肼将由步骤B制得的84g 4-(喹啉-2-基-甲氧基)苯胺悬浮于300ml去离子水和84ml 12M HCl中。激烈搅拌该悬浮液以便得到细粒的悬浮液。于5℃，25分钟内将预先冷却(5℃)的溶于75ml去离子水中的23.88g硝酸钠滴加到上述悬浮液中。5℃下将溶液搅拌60分钟以便得到亮褐色溶液的重氮盐。用KI淀粉试纸证明存在过量的亚硝酸，溶液的PH约为3。假如白色的悬浮液维持1小时，则通过玻璃毛塞过滤混合物，在滤液中得到重氮盐。
在这段时间中，把321g亚硫酸氢钠(纯度约85%)溶解于2L去离子水中冷却到0-5℃以制备亚硫酸氢钠溶液。往该溶液中加15ml 2N NaOH和2L乙醚。加入碎冰并激烈搅拌使该两相溶液维持接近0℃。在维持搅拌下将重氮盐溶液滴加到上述溶液中。加完后，得到一橙色固体物，再于30分钟内加入600ml NaOH(2L)。最后于25℃搅拌反应60分钟。收集固体，悬浮于乙醚(1L)中并过滤。用2L水重复上述过程，得到标题化合物，冻干过夜后是浅黄色的固体，M.P.73-85℃(分解)。
步骤D1-(对氯苄基)-1-[4-(喹啉-2-基甲氧基)苯基]肼将10g由步骤C制得的4-(喹啉-2-基甲氧基)苯基肼加到10.5ml二异丙基乙基胺和150ml CH2Cl2的溶液中。往黄色悬浮液中加9.11g对氯苄基氯，随后加3.64g Bu4NBr和50ml CH2Cl2。将反应物搅拌约24小时。当原料消耗完时，用H2O稀释反应物并用CH2Cl2萃取3次。将合并的有机相用水洗一次并干燥(MgSO4)，过滤、蒸发至干。固体残留物于真空下干燥过夜，随后在乙醚/甲醇(90/10)中洗涤得到标题化合物，为浅黄色固体，M.P.130℃。
步骤E3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸标题化合物的甲基酯按实施例1步骤A所述的方法制备，但使用实施例1A步骤D的苯肼作原料。
标题化合物在实施例1步骤β所述条件下制备。
制备例3结晶形的3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(通过酯的水解制备L-708Na+盐)标题酸的甲酯(制备例1，步骤D)(6.25Kg，10.4moles)和EtOH(无水，45L)的混合物温热至50℃，加入NaOH(2.29L 5N的溶液，11.4moles)的水(5L)溶液。将反应物加热至回流，并维持此温度41小时。反应进程用HPLC监视，用ZorbaxRX柱，移动相为0.1%磷酸乙腈(20∶80)，流速为1.15mL/min，用UV监定器(220nm)。再加103.8mlNaoH溶液(5N，0.52moles)，使反应物回流24小时。冷至60℃，加EtOHH2O(25L，90∶10的混合物)，过滤反应物。将滤液共沸蒸馏除去水。在蒸馏期间如果需要的话加入乙醇，以便使体积维持在62.5L以上。用Karl Fischer滴定测定水份来监测蒸馏。将反应物浓缩至37.5L，冷至室温，过滤。用冷(5℃)EtOH(5×3.75L)洗滤饼，于50℃真空干燥72小时，得到5.58kg的标题化合物(产率88%)。
实施例1非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(从游离酸制备的非晶形L-708)往两升的爱伦美氏(Erlenmeyer′s)烧瓶中加12.25g(20.86mmol)标题化合物(制备例1)，除后加入100ml EtOH和100mlH2O。搅拌所得悬浮液再加入1N NaOH水溶液(20.86mmol)PH值约为8。为了溶解大部分悬浮物，于搅拌下再加100ml EtOH和300mlH2O。将所得混合物过滤除去少量的不溶物。用旋转蒸发器于30℃-50℃下从滤液中除去大部分EtoH。将所得溶液于-78℃下冻干，得标题化合物。
纯度(HPLC分析)98.9-99.2%水中溶解度至少为3mg/ml(至少5mM)(未进行溶解度更高的试验)实施例2非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(由L-708 Na+盐制备的非晶形L-708)于20℃下，将晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(25g)溶解于EtOH(2.75L)中。加入水(1L)，然后用旋转蒸发器蒸发使体积减少至0.5L。剩余溶液于-42℃在Virtis 10SRC冷冻干燥室内冻干，得标题化合物。
纯度(HPLC分析)99.4%X射线衍射证明为非晶形的。
实施例3非晶形3[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(从L-708Na+盐得到的非晶形L-708)将结晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(6g)溶解于EtOH(240ml)和预先加热到90℃的水(1L)中。然后于旋转蒸发器中使体积减少至0.9L。剩余溶液于-42℃在Virtis 10 SRC冷冻干燥室中冻干，得标题化合物。
纯度(HPLC分析) 99.4%X-射线衍射为非晶形的。
实施例4非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(由L-708Na+盐制备的非晶形L-708)将带有温度计套筒的50L三颈瓶放在蒸气套上，三颈瓶装有机械搅拌器，在回流冷凝管上口是氮气入口，在倾斜的冷凝器下带有接收瓶。往三颈瓶中加入22L H2O，2L绝对乙醇和1099g结晶形的标题化合物。再加3L绝对乙醇后，将混合物于81-82℃搅拌直到得到澄清的溶液(约20分钟)。接收瓶放在干冰中冷却，通过接收瓶使搅拌着的溶液的真空度达到-100kPa。继续蒸气加热维持在17℃。继续蒸发直到溶液开始变混浊(约2小时)。用烧结玻璃漏斗真空过滤混合物，将滤液(17.5L)分放在6个冷冻盘(18.25×23.75英寸)中。将冷冻盘放入冷冻干燥室(Virtis)中，于架温-55℃及真空下冻干2.5小时。
间隔时间(小时) 架温(℃)0 -55°4 -25°17.5 -15°66.5 0°98.5 25°
114.5 30°140.5 30°冻干的标题的产物重1084g。
实施例5非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(喷雾干燥)将结晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(15g)溶于360ml 20% 乙醇/水中加热回流30分钟。将溶液冷至40-50℃并于约30分钟均匀地加入到BUCHI Model 190小型喷雾干燥器(Mini Spray Drier)，得到8g产品。入口和出口处的干燥空气温度分别是150℃和104℃。干燥后的产品是非晶形的(X-射线衍射)，含水1.4%(Karl Fischer分析)并含乙醇0.01%(色谱分析)。
实施例6非晶形L-708的溶解度于室温下搅拌含非晶形L-708(100mg/ml)的水(10ml)来测定其溶解度。在第48小时，将1ml的悬浮液取出并离心。除悬浮物稀释，用UV光谱法和HPLC两种方法测定非晶形L-708的含量，其浓度为55mg/ml。
实施例7非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐(从L-708Na+盐制备非晶形L-708)
将58L H2O加热到81℃，往其中加15L EtOH和3249g结晶形标题化合物。当溶解变澄清时(75℃)，将其冷却至环境温度，于约25mm的真空度下蒸馏EtOH。温度范围为18-21℃。继续蒸馏直到剩余32L浆状物(100mg/ml)。将浆状物分放在6个Virtis的冷冻干燥器的盘子中并于70℃冻干过液。然后将真空度提高到30μm。随后使架子温热到15℃，并维持该温度46小时。于约2小时内将架子温热至30℃并维持18.5小时。残留的乙醇为0.9%(1H NMR)。于Hull真空干燥器中将盘子加热到65℃19小时，得到冻干的标题化合物3161g。残留的乙醇为0.6%(1H NMR)。
权利要求
1.非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐。
2.于25℃下在去离子水中的溶解度为55mg/ml的权利要求1的化合物。
3.制备非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐的方法，它包括a)制备3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸和有机共溶剂的含水组合物;b)用当量的氢氧化钠中和上述含水的组合物;c)除去所说的有机共溶剂，产生实质上的水溶液;及d)干燥所说的上述水溶液。
4.按照权利要求3的方法，其中所述的有机共溶剂包括一种或多种下述溶剂甲醇，乙醇，异丙醇，乙醚，丙酮，2-丁酮及乙腈。
5.制备非晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐的方法，它包括a)制备结晶形3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐和有机共溶剂的含水组合物;b)除去所述的有机共溶剂，得到实质上的水溶液;c)干燥所述的水溶液。
6.按照权利要求5的方法，其中所述有机共溶剂包括一种或多种下述溶剂甲醇，乙醇，异丙醇，乙醚，丙酮，2-丁酮和乙腈。
7.包括治疗有效量的权利要求1的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
8.还包括有效量的第二活性组份的权利要求7的药物组合物，第二活性组份选自非类固醇类抗炎药，外周止痛药，环氧合酶抑制剂，白三烯拮抗剂，白三烯生物合成抑制剂，H1或H2受体拮抗剂，抗组胺药，前列腺素拮抗剂，和ACE拮抗剂。
9.在哺乳动物中预防SRS-A或白三烯的合成，活动或释放的方法，它包括给所述的哺乳动物施用有效量的权利要求1的化合物。
10.治疗哺乳动物哮喘病的方法，它包括给需要这种治疗的哺乳动物施用治疗有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
用冻干法或喷雾干燥法得到的3-[N-(对氯苄基)-3-(叔丁基硫代)-5-(喹啉-2-基甲氧基)吲哚-2-基]-2，2-二甲基丙酸钠盐形比其结晶形在水中更易溶解。该化合物用作抗哮喘剂，抗过敏剂，抗炎剂或细胞保护剂，还用于治疗腹泻，高血压，咽炎，血小板凝聚，大脑痉挛，早产，自然流产，痛经和偏头痛。
文档编号C07D401/12GK1073439SQ92114389
公开日1993年6月23日 申请日期1992年11月14日 优先权日1991年11月15日
发明者J·H·哈钦森, B·唐 申请人:麦克弗罗斯特(加拿大)有限公司