专利名称：一种复方微孔淀粉粉体止血剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于医用制剂技术领域，具体涉及一种微孔淀粉粉体止血剂及其制备方法。
背景技术：
出血是围手术期的常见问题之一。局部止血药物、材料可以控制创面渗血、保证术野 清晰，对减少创伤、提高手术效率、加速患者术后恢复具有积极意义。局部止血材料尤其 对于实质性脏器(脑、肾及肝等)创面出血(脆性大，血流丰富，缝扎易致组织破损、针 眼出血且难以奏效)的治疗更具极重大意义；同时，因为它能减少病人出血量而降低手术 时的输血量，从而极大地减缓患者个人、家庭和社会的经济负担；所以，十分有必要开发 临床有效且价廉的局部止血材料。
目前临床常用的数种局部止血材料，包括氧化纤维素及氧化再生纤维素、胶原蛋白材 科制剂、壳聚糖及其衍生物材料、纤维蛋白胶、明胶海绵及明胶纤维网、褐藻胶材料和微 孔多糖止血球。各种动物实验和临床应用已给予了充分肯定，但不同止血材料，有着不同 的止血机制，以及相应优点和使用的局限性。
其中的微孔多糖止血球，即微孔淀粉止血材料，是从植物淀粉中提取并经微孔化处理 的球形颗粒。微孔多糖止血颗粒，当置于出血创面上时，颗粒的分子迅速吸收血液中的水 分，并将血液中有形成分(如血小板、红细胞、白蛋白、凝血酶、纤维蛋白等)聚集在颗 粒表面，形成一种凝胶状混合物，达到即刻出血的功效；同时加速内源性凝血因子的激活， 縮短凝血时间，形成局部凝血块，止血作用在数十秒内完成。约3天时间，微孔多糖颗粒， 可以被人体体液中淀粉酶分解为麦芽糖或葡萄糖，在体内完全吸收，吸收过程在止血作用 完成后即开始，局部不留任何痕迹；它也可以降解为小的水溶性片段，从尿液中排出，不 会引起体腔内粘连。微孔淀粉止血材料，能有效减少出血量和输血量，最大限度降低血源 性感染和利于病人康复；同时，它不含任何牛源、猪源或人源的成分，无免疫反应，无过 敏反应，对伤口愈合无毒副作用，是一种较为优秀的局部止血材料。
目前在中国临床使用的阿里斯泰止血粉，是系美国进口并从马铃薯淀粉中制备的微孔 淀粉止血材料，吸水性不够高，且价格昂贵；同时，因其交联马铃薯淀粉颗粒时，使用表 氯醇，故有对人体潜在毒性的可能性。国内也有研究从甘薯淀粉中制备微孔淀粉止血粉， 虽吸水性较好，但其形成的凝胶状混合物，粘弹性差而更多表现为刚性，易破碎，从而可 能影响局部凝血块的牢固可靠，而波及止血功效。这与马铃薯淀粉和甘薯淀粉的不同理化性质有关。
马铃薯淀粉颗粒较大，多为卵形，表面光滑，颗粒完整；甘薯淀粉颗粒较小，多为圆 形，也有多角形，表面光滑，无裂纹。多角形淀粉的糊化度高，淀粉凝胶粘弹性差而更多 表现为刚性，易破碎。加上各自直链/支链淀粉含量比例的不同，使得马铃薯淀粉表现为 粘性好，凝胶强度较大；虽因其糊化温度较低，吸水膨润速率较大；但是，马铃薯淀粉吸 水性能较差。而甘薯淀粉表现为吸水性更好，但粘性较差。
因而，将各自的原淀粉制备为微孔淀粉并交联后，经一定比例混合，可制成吸水性能
优秀并兼顾粘弹性的复方微孔淀粉，从而使得这一止血粉体的局部止血性能更佳。 微孔淀粉的局部止血能力，吸水能力的大小是其中重要因素之一。而吸水能力源于微孔淀
粉颗粒的孔洞多少和大小。而目前淀粉颗粒制孔的方法(酶穿孔加交联法)有一定局限性，
因影响颗粒成孔效率而波及止血效果其一，没有对原淀粉进行预处理，例如预糊化和超
声波处理，然后再行酶水解穿孔来制备微孔淀粉，达不到生成更多有效微孔颗粒的效率和
效果。例如现行微孔淀粉的制备。其二，在现行的制备微孔淀粉过程中，湿微孔淀粉、温
交联微孔淀粉均采用真空干燥法；而用此法制备的微孔淀粉颗粒，孔洞结构会受到一定程
度的破坏；尤其是在干燥后的研碎过程中，这影响了它们的吸水性能。
发明内容
本发明克服了上述缺点，提出了 一种新的微孔淀粉粉体止血剂及其制备方法。 本发明提出的微孔淀粉粉体止血剂，由下述步骤制备获得以马铃薯淀粉和甘薯淀粉 为原料。分别将马铃薯淀粉、甘薯淀粉先进行糊化和超声波预处理之后，再分别经酶水解 法，制备得马铃薯微孔淀粉和甘薯微孔淀粉，在酶水解制备微孔淀粉过程中，采用真空冷 冻干燥法干燥。再分别用三偏磷酸钠交联处理，使微孔淀粉分子交联而强化其结构，得到 马铃薯交联微孔淀粉与甘薯交联微孔淀粉，最后将两种交联微孔淀粉混合，即得复方微孔 淀粉粉体止血剂。
(1) 原料淀粉预处理(糊化与超声波预处理)将原料淀粉配制成30y。一40y。(w/v)的 淀粉乳浊液，加热至50°C 9CTC，优选60°C 70°C，搅拌1 30分钟，优选5 10 分钟，停止加热，离心，沉淀30—50分钟，常压干燥，粉碎。测淀粉糊化度，确定糊化 度10% 40%，优选25% 35%。将糊化后的淀粉配制成乳浊液，超声波IO 50 kHz处理 3.Q分钟 50分钟，优选20 30 kHz处理30分钟 45分钟。
(2) 酶水解法制备微孔淀粉分别将预处理过的淀粉乳浊液，加入用缓冲液配置的 酶液(o—淀粉酶l份；或糖化酶0—淀粉酶=4份l份的双酶)，反应20—24小时，得 各自湿微孔淀粉。(3) 真空冷冻干燥将湿微孔淀粉用蒸馏水配成悬浮液后，放置于冰箱中制成冰块， 再于-10°C -90°C，优选-35°C -55°C的真空冷冻干燥箱中，进行真空冷冻干燥至恒重， 即得两种微孔淀粉(干粉)。
(4) 微孔淀粉的交联取上述的微孔淀粉放于烧杯中，加入三偏磷酸钠和碳酸钠的
水溶液，调浆，其中，三偏磷酸钠用量为微孔淀粉质量的5-8%，碳酸钠的用量为微孔淀粉 质量的2-4%;置于45t: 55'C恒温水浴锅中，搅拌；预热8 12分钟，再用1.0mol/L的 NaOH溶液调pH为9. 5 11. 5，搅拌反应20 28小时。反应结束后，用1. 0mol/L HCL中 和过量的碱，将悬浮液离心分离，取沉淀的淀粉用蒸馏水洗涤后再离心，如此重复2 4 次，将所得淀粉进行真空冷冻干燥，即得交联微孔淀粉。
复方微孔淀粉止血粉体将马铃薯交联微孔淀粉(干粉)，与甘薯交联微孔淀粉(干粉)， 以1% 99%:99% 1%(w/w)比例混合，优选25% 75%:75% 25%(w/w)比例混合，消毒后， 即得复方微孔淀粉止血粉体。
马铃薯交联微孔淀粉干粉与甘薯交联微孔淀粉干粉混合比例，可以为1: 99、 5: 95、
1Q: 90、 20: 80、 30: 70、 35: 65、 40: 60、 50: 50、 55: 45、 60: 40、 80: 20、及90: 10。
所述的消毒是以Co60辐照进行消毒。
本发明的止血剂可用于人体体表、组织器官及体腔内组织或器官的有血创面，包括皮 肤、皮下软组织、肌肉组织、骨组织、脑组织、神经组织、肝、肾、脾脏脏器组织；也可 用于外科手术、创伤、急救、内窥镜下(包括鼻镜、喉镜、胃镜、肠镜、腹腔镜及胸腔镜 下)的止血。
本发明的止血剂可用作外科术后防粘连材料、促进组织愈合的材料、外科密封剂、伤 口免缝组织胶中的一种或一种以上的组合。 .本发明止血剂包括止血粉末、止血颗粒、止血球、止血气雾剂和汽雾剂。 本发明止血剂可制成止血贴或止血绷带。 本发明止血剂可制成止血薄膜或止血海绵或止血纱布。
本发明的止血剂可用作哺乳动物、鸟类、爬行动物有血创面止血的止血材料。 本发明固体复合物干粉，还可以通过内镜导管插入消化道，喷涂到消化道出血及溃疡 创面上，能帮助控制消化性溃疡的出血；还可适用于腹腔镜手术中，手术时只需将固体复 合物干粉剂，通过腹腔镜送入腹腔，覆盖于创口表面，即可发挥良好的止血作用。
本发明还可以和其它有止血作用的成分复合，如凝血因子，氯化钙等，并可以制成干 粉及止血贴等不同剂型。本发明具备如下的优点 本发明制得的微孔淀粉孔洞多，且伴深洞道；有效带孔颗粒更多；因而微孔淀粉吸水性能
是现有止血材料的数倍，且吸水速度明显提高，更显著地增强局部止血效果；同时，因其
成份为复方，既表现为更优秀的吸水率，又兼顾了形成凝胶的粘弹性，保证血凝块的牢固
可靠，止血性能明显提高。
具体实施例方式
下面通过实施例进一步详细地说明本发明，但这些实施例决不以任何方式限制本发明。 实施例1
" 马铃薯、甘薯交联微孔淀粉的制备
马铃薯是茄科茄属一年生草本，又称土豆。马铃薯块茎含有76.3%的水分和23.7 %的干物质，其中包括17.5%的淀粉，0.5%的糖，1% 2%的蛋白质和1%的无机盐。 马铃薯淀粉颗粒较大，呈卵形或园形，颗粒直径25—100咖；其特点是粘性足，成糊稳定， 但吸水性稍差。微孔淀粉是将天然生粉经过酶水解处理后，在其颗粒表面形成蜂窝状多孔 性的淀粉颗粒。表面小孔直径lmn左右，孔的容积占颗粒体积的60%左右。它具有良好的 吸附性。
甘薯的主要成分是淀粉，约占鲜薯重量的]8%—25%,甘薯淀粉颗粒呈橢圆形，也有呈多 角形，结构疏松。甘薯淀粉颗粒经常由2-6个以上的颗粒团聚，每个颗粒直径约为5—50um, 内部有多个孔道结构，孔径约为0.5—5um，孔的容积约占颗粒体积的60%左右。甘薯淀粉 特点是吸水能力强，因而是制作吸水性能好的微孔淀粉理想原料，但其粘性较差，所形成 的凝胶粘弹性不足而更多表现为刚性，易碎裂。甘薯淀粉先交联后制孔，既利于颗粒结构 稳定，又利于保护孔洞，提高吸水效能。
原淀粉预处理预糊化与超声波处理配制30%~40% /^)的交联淀粉乳浊液，50 °C 9(TC,搅拌，1—30分钟后停止加热。离心，沉淀30—50分钟常压干燥，粉碎。测 淀粉糊化度，确定糊化度10%—40%。预糊化后的淀粉配制成乳浊液，在无搅拌下超声波 10 50 kHz处理30分钟一50分钟。
酶水解法制备微孔淀粉将预处理过的各自淀粉乳浊液，加入用缓冲液配置的酶液 (ci一淀粉酶l份；或糖化酶a--淀粉酶=4份1份)，反应20—24小时，得各自湿微孔 淀粉。
真空冷冻干燥将湿微孔淀粉用蒸馏水配成悬浮液后，放置于冰箱中制成冰块，再于
-i(rc -9(rc的真空冷冻干燥箱中，进行真空冷冻干燥至恒重，即得各自微孔淀粉干粉。
6微孔淀粉的交联取各自的微孔淀粉(200g，干基)于1， 000ml烧杯中，加入溶有 12g三偏磷酸钠和6g碳酸钠的蒸馏水500ml调浆，置于5CTC恒温水浴锅中，并用电动搅 拌剂匀速搅拌预热10分钟，用1. 0mol/L的NaOH溶液调pH为11. 5，搅拌反应24小时， 在此过程中用Na0H溶液维持pH值恒定在9.5—11.5范围。反应结束后，用1.0mol/LHCL 中和过量的碱，将悬浮液离心分离，取沉淀的淀粉用蒸馏水洗涤后再离心，如此重复3次， 将所得淀粉进行真空冷冻干燥法干燥(真空冷冻干燥的步骤和条件同湿微孔淀粉的真空冷 冻干燥)，即得马铃薯、甘薯交联微孔淀粉。
复方微孔淀粉止血粉体:将马铃薯交联微孔淀粉干粉和甘薯交联微孔淀粉干粉，以1% 99%:99% 1%(^/的比例混合，消毒后，即得复方微孔淀粉止血粉体。具体如
取马铃薯交联微孔淀粉28克，甘薯交联微孔淀粉72克，充分混合；经Co60辐照消 毒后，密封保存备用。
实施例2
止血效能测定与比较 经AccnSizer780/SIS(美国PSS)公司粒径测定系统测量止血粉粒径，马铃薯淀粉微 孔颗粒在15-100Mm;甘薯淀粉微孔颗粒在5-3lMffl。扫描电镜显示，马铃薯淀粉微孔颗粒 呈卵形，表面布有小孔及裂隙；甘薯淀粉微孔颗粒表面布有较多小孔，内部有多个孔道结 构，孔径约为lMffl，孔径大小基本相同。用创面渗出液模似体液环境，颗粒溶胀率在20秒 时达到320%;在兔肝出血模型中，止血效果与美国阿里斯泰止血粉相当。
实验动物及分组成年健康新西兰大白兔50只，体重2.0kg—2.5kg，雌雄不限；实 验组，对照组，每组各25只，每个压迫时间段5只。实验组使用复方微孔淀粉粉体止血 剂；对照组为美国阿里斯泰止血粉应用组。
实验方法及观察指标
肝创伤的止血实验用20%乌拉坦经腹腔注射麻醉家免(约5ml/kg)，腹壁备皮，常 规消毒，正中切开腹壁，进入腹腔。做肝叶切除手术，切口部位血液用称过重量的干燥纱 布吸干后，随机用lg复方微孔淀粉粉体止血剂、或lg美国阿里斯泰止血粉，对出血创面 进行止血。用纱布压迫创面，分别压迫10s、 20s、 30s、 40s、 50s并记录各时间组的出血 量及止血时间。
出血指标观察止血时间肝脏出血创面观察计算从微孔淀粉止血剂开始应用于创 面至创面血液渗出停止，或止血粉颗粒红染面积不再扩大，记录为止血时间。
出血量用分析天平预先准确称量实验组、对照组止血前和止血后干燥纱布重量，分别计算出血量。出血量二止血后重量一出血前重量/血液比重。
实验结果在压迫10s、 20s时，肝脏出血量大，出血时间长。压迫时间超过30s后， 出血量和出血时间变化较为明显，均明显縮短。压迫40s、 50s后，出血指标变化幅度进 一步减小。实验数据表明实验组需压迫25秒以上，对照组需压迫30秒以上，止血效果
才能体现，二者之间无明显差异性。
实验组所用复方微孔淀粉粉体止血剂的止血效果，与对照组相当。
实验结论
本发明复方微孔淀粉粉体止血剂，形态上较多小孔及孔道较深，吸水溶胀率高，止血
效果好；较美国阿里斯泰止血粉使用更为安全(因为无利用表氯醇进行交联)；并因生产 成本低廉，从而极大地减轻病人、家庭及社会的经济负担。
8
权利要求
1.一种复方微孔淀粉粉体止血剂的制备方法，其特征在于具体步骤如下以马铃薯淀粉和甘薯淀粉为原料，首先，分别将马铃薯淀粉、甘薯淀粉进行糊化和超声波预处理；再分别经酶水解法，制备得两种微孔淀粉，并在酶水解制备微孔淀粉过程中，采用真空冷冻干燥法干燥；然后利用三偏磷酸钠作为交联剂分别对两种微孔淀粉进行交联处理，使淀粉分子交联而强化其结构；最后将经交联处理的马铃薯微孔淀粉与甘薯微孔淀粉以1％～99％∶99％～1％的重量比例混合，即成为复方微孔淀粉粉体止血剂；其中原料淀粉预处理配制30％--40％(w/v)的淀粉乳浊液，加热至50℃～90℃，搅拌1～30分钟，停止加热，离心，沉淀30-50分钟，常压干燥，粉碎；测淀粉糊化度，确定糊化度为10％～40％；将糊化后的淀粉配制成乳浊液，超声波10～50kHz处理30分钟～50分钟；酶水解法制备微孔淀粉分别将预处理过的淀粉乳浊液，加入用缓冲液配置的酶液，反应20-24小时，得各自湿微孔淀粉；真空冷冻干燥将湿微孔淀粉用蒸馏水配成悬浮液后，放置于冰箱中制成冰块，再于-10℃～-90℃的真空冷冻干燥箱中，真空冷冻干燥至恒重，即得两种微孔淀粉；微孔淀粉的交联分别取上述的两种微孔淀粉放于不同的烧杯中，再分别加入三偏磷酸钠和碳酸钠的水溶液，调浆，其中，三偏磷酸钠用量为微孔淀粉质量的5-8％，碳酸钠的用量为微孔淀粉质量的2-4％；置于45℃～55℃恒温水浴锅中，搅拌，预热8～12分钟，再用1.0mol/L的NaOH溶液调pH为9.5～11.5，搅拌反应20～28小时；反应结束后，用1.0mol/LHCL中和过量的碱，将悬浮液离心分离，取沉淀的淀粉用蒸馏水洗涤后再离心，如此重复2～4次，将所得淀粉进行真空冷冻干燥，分别得经交联处理的马铃薯微孔淀粉和甘薯微孔淀粉。
2. —种权利要求1所述方法制备的复方微孔淀粉粉体止血剂。
全文摘要
本发明属于医用制剂技术领域，具体公开了一种复方微孔淀粉粉体止血剂及其制备方法。该复方微孔淀粉粉体止血剂以马铃薯淀粉和甘薯淀粉为原料。将马铃薯淀粉、甘薯淀粉先预糊化和超声波预处理之后，再各自经酶水解处理制孔，制备各自微孔淀粉；在酶水解制备微孔淀粉过程中，采用真空冷冻干燥法干燥。利用三偏磷酸钠，使淀粉分子交联而强化其结构。马铃薯交联微孔淀粉与甘薯交联微孔淀粉以一定比例混合，即得复方微孔淀粉粉体止血剂。本发明制备的微孔淀粉吸水性强，吸水速度显著提高，且复方的成份较现有单一淀粉多糖类止血材料性能提高，止血效果好。
文档编号C08B30/06GK101559235SQ20091005167
公开日2009年10月21日 申请日期2009年5月21日 优先权日2009年5月21日
发明者官培龙, 蓉 饶 申请人:官培龙;饶 蓉