一种提高肝素钠效价的方法
【专利摘要】本发明公开了一种提高肝素钠效价的方法，属于生化原料药【技术领域】。开发研制新工艺如下：将酶解后的肝素钠粗品溶液用氢氧化钠溶液调节pH值，然后加入过氧化氢，后经过乙醇沉淀，干燥，得到肝素钠精品效价可达到170-180IU／mg。此方法操作简单，产量高，且得到的肝素钠效价远远高于国内外药典对肝素钠的要求。
【专利说明】一种提高肝素钠效价的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物【技术领域】，具体涉及到利用控制温度，加入适量过氧化氢来达到提闻肝素纳精品效价的目的。
【背景技术】
[0002]肝素钠是一种粘多糖的钠盐，存在哺乳动物的平滑肌中，平时与蛋白分子结合，不显示活性，只有在与蛋白分子分离时才有活性。肝素是在二十世纪初叶被科学家从哺乳动物的肝脏中获得，取名肝素，后来人们发现，在哺乳动物的小肠平滑肌中含量最高，现在市场商品肝素钠大多为肠肝素，又因为近年来疯牛病的流行，故牛羊肝素钠在国际市场上已趋于绝迹，现在生产的肝素钠即为猪小肠肝素钠。肝素钠的活性主要是抗凝血性，二十世纪四十年代，用于临床以来其适用范围不断扩大，尤其是二十世纪九十年代以来。该产品临床上主要用于防止血栓形成，治疗心血管病、血液病、尿毒症等。西方国家已开始研究肝素对癌症的防治作用，其新用途不断增加。进入二十世纪七十年代以来，我国成为生产肝素钠产量最大的国家，国际市场上的肝素钠产品有60%以上来自中国。生产工艺不断改进，并且日趋合理:粗品生产有最早的络合法到树脂吸附法(离子交换法)，精品生产有高锰酸钾氧化法，到过氧化氢氧化法，目前采用过氧化氢氧化法结合、醇洗分离法，可将大量的杂质用乙醇冲洗到废乙醇中。[0003]肝素钠在碱性溶液中稳定，但在酸性溶液中则不稳定，活性基团-N-S03 =在热酸中很快水解失去活性。肝素钠在还原剂存在的条件下，相当稳定，有人做过试验，有还原剂存在的肝素溶液中，肝素的活性三年无任何改变，而在氧化剂存在的情况下，肝素则逐步被降解为氨基葡萄糖，葡萄糖醛酸，醋酸、硫酸等。肝素分子为螺旋状细长分子，但在强酸或强热的情况下，肝素收缩变粗变短，成为变性肝素，变性肝素没有活性。所以本工艺提供的氧化过程，在添加氧化剂的同时，将溶液温度下降到15-27°C，在保证肝素钠活性的同时也达到了氧化肝素钠的目的，使生产的精品肝素钠质量更好。
【发明内容】
[0004]本发明提供一种肝素钠的氧化方法，通过对氧化剂最佳反应条件的控制，更加快捷有效的完成纯化脱色过程，操作简单，生产周期短，产品收率高、质量可靠，经此方法纯化得到的肝素钠效价超过药典要求。
[0005]本发明提出的提高肝素钠效价的具体方法，包括以下步骤:
[0006]1、开启水阀，按(10_12)Kg /亿单位比例加入纯化水，再将已知总效价的肝素钠粗品加入到反应罐中，边开搅拌边加。
[0007]2、加入体积比为15-25%的盐酸调节溶液pH至5.8-7.9，升温至45_48°C后，加入10-20g /亿单位的胰酶。
[0008]3、调节溶液温度至15_27°C，用体积比为30_35%的氢氧化钠调pH至10_12，然后按溶液体积的0.3-0.7%加入过氧化氢氧化，在保持pH不变的情况下，氧化10-13小时。[0009]4、溶液中加入0.016Kg / L氯化钠，用体积比15-25%的盐酸调节pH至5-7，保持温度在15-27°C，边搅边加乙醇，沉淀10-12小时。
[0010]5、虹吸上清液，沉淀物抽干后转移至干燥箱进行干燥。
【具体实施方式】
[0011]实施例1
[0012]1、开启水阀，按(10-12)Kg/亿单位比例加入纯化水，再将已知总效价的肝素钠粗品加入到反应罐中,边开搅拌边加。
[0013]2、加入体积比为15-25%的盐酸调节溶液pH至5.8-7.9，升温至45_48°C后，加入10-20g /亿单位的胰酶。
[0014]3、调节溶液温度至15_27°C，用体积比为30-35%的氢氧化钠调pH至10_12，然后按溶液体积的0.3-0.7%加入过氧化氢氧化，在保持pH不变的情况下，氧化10-13小时。
[0015]4、溶液中加入0.016Kg / L氯化钠，用体积比15-25%的盐酸调节pH至5-7，保持温度在15-27°C，边搅边加乙醇，沉淀10-12小时。
[0016]5、虹吸 上清液，沉淀物抽干后转移至干燥箱进行干燥。
【权利要求】
1.一种肝素钠的制备方法，其包括以下步骤: (1)向肝素钠粗品中加入盐酸调节溶液pH，加入胰酶。 (2)调节溶液温度,用氢氧化钠调pH，然后加入过氧化氢氧化，每两小时测定一次pH值。 (3)溶液中加入氯化钠，用盐酸调节pH，边搅边加乙醇，进行沉淀分离。
2.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(1)中，加入的盐酸溶液的体积浓度为15-25%。
3.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(1)中，溶液pH值调至5.8-7.9。
4.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(2)中，溶液温度控制在15-27°C。
5.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(2)中，加入的氢氧化钠溶液体积浓度为30-35%。
6.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(2)中，溶液pH调至10-12。
7.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(2)中，加入的过氧化氢占溶液体积的0.3-0.7%。
8.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(3)中，加入的盐酸体积浓度为15-25%。
9.根据权利要求1所述，其特征在于，步骤(3)中，溶液pH调节至5-7。
【文档编号】C08B37/10GK103665193SQ201310613230
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2013年11月23日 优先权日:2013年11月23日
【发明者】刘乃山, 魏伟, 迟培升, 夏衬来 申请人:青岛九龙生物医药有限公司