具有受限制的免疫球蛋白重链基因座的人源化非人动物的制造方法与工艺

技术特征：
1.一种制备小鼠的方法，所述方法包括：(a)将小鼠遗传修饰以在其种系中具有包含单个人VH基因区段、一个或多个DH基因区段和一个或多个JH基因区段的未经重排的人基因组序列，其中所述单个人VH基因区段、一个或多个DH基因区段和一个或多个JH基因区段可操作地连接至人、小鼠或嵌合的人/小鼠免疫球蛋白恒定区基因，其中所述单个人VH基因区段是VH1-69、VH2-26、VH2-70或其多态变体；和(b)将编码在雄性小鼠中具有功能的ADAM6蛋白的序列插入小鼠的种系中，其中编码ADAM6的序列位于与野生型小鼠的ADAM6基因座不同的位置。2.权利要求1的方法，其中所述单个人VH基因区段是VH1-69、VH2-26或VH2-70的多态变体。3.权利要求1的方法，其中所述编码ADAM6蛋白的序列是小鼠序列。4.权利要求1的方法，其中将所述编码ADAM6蛋白的序列插入以使得其与未经重排的人基因组序列是并列的或连续的。5.权利要求1的方法，其中未经重排的人基因组序列和编码ADAM6蛋白的序列存在于内源免疫球蛋白重链基因座。6.权利要求1的方法，其中未经重排的人基因组序列存在于内源免疫球蛋白重链基因座并且将编码ADAM6蛋白的序列插入在小鼠种系中非内源免疫球蛋白重链基因座的位置。7.权利要求1的方法，所述方法还包括将所述小鼠遗传修饰以在其种系中具有所有的或基本上所有的内源VH基因区段的删除。8.权利要求1的方法，其中所述单个人VH基因区段是VH1-69。9.权利要求1的方法，其中所述免疫球蛋白恒定区基因是小鼠免疫球蛋白恒定区基因。10.权利要求1的方法，其中免疫球蛋白恒定基因包含选自人CH1、人铰链、人CH2、人CH3及其组合的人序列。11.权利要求9的方法，其中所述小鼠免疫球蛋白恒定基因在内源免疫球蛋白重链基因座上。12.权利要求1的方法，其中所述未经重排的人基因组序列包含人VH1-69基因区段、27个人DH基因区段和6个人JH基因区段。13.权利要求1或12的方法，所述方法还包括将所述小鼠遗传修饰以在其种系中具有一个或多个人Vκ基因区段和一个或多个人Jκ基因区段。14.权利要求13的方法，其中所述一个或多个人Vκ基因区段和一个或多个人Jκ基因区段存在于内源免疫球蛋白轻链基因座。15.一种制备小鼠的方法，所述方法包括将小鼠遗传修饰以包含未经重排的人基因组序列，所述未经重排的人基因组序列包含可操作地连接于至少一个人DH基因区段和至少一个人JH基因区段的单个人VH基因区段，其中所述单个人VH基因区段、至少一个人DH基因区段和至少一个JH基因区段可操作地连接至人、小鼠或嵌合的人/小鼠免疫球蛋白恒定区基因，其中所述单个人VH基因区段是VH1-69、VH2-26、VH2-70或其多态变体，并且其中所述小鼠包含位于与野生型小鼠的ADAM6基因座不同的位置处的小鼠ADAM6序列。16.权利要求15的方法，其中所述小鼠ADAM6序列存在于异位的位置。17.权利要求15的方法，其中所述小鼠ADAM6序列存在于内源免疫球蛋白基因座。18.权利要求15的方法，其中所述小鼠ADAM6序列存在于小鼠基因组中非内源免疫球蛋白基因座的位置。19.权利要求1的方法，其中将小鼠遗传修饰以在其种系中具有包含单个人VH基因区段、一个或多个DH基因区段和一个或多个JH基因区段的未经重排的人基因组序列包括：在小鼠种系的内源免疫球蛋白重链基因座上利用单个人VH基因区段置换所有或基本上所有的内源VH基因区段。20.权利要求19的方法，其还包括在内源免疫球蛋白轻链基因座上利用一个或多个人VL基因区段置换所有或...