羟基红花黄色素A钠及其生产方法和制药用途与流程

本发明涉及一种新化合物，具体地说，提供一种羟基红花黄色素A钠化合物，以及该化合物生产方法和医药用途。属于天然药物化学领域。

背景技术：
中药红花为菊科植物CarthamustinctouiusL.的干燥花，是一种常见的活血化淤中药，可用于冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍疾病的治疗。羟基红花黄色素A(hydroxysaffloryellowA)是具有单查尔酮苷类结构的化合物，是红花药理功效的最有效水溶性部位，可抑制血小板激活因子诱发的血小板聚集与释放，可竞争性地抑制血小板激活因子与血小板受体的结合，是红花黄色素的活血化瘀有效成分。研究表明，它具有多方面的心血管药理作用，可抗凝、促进纤溶、抗血栓形成、改善微循环等。现有技术中已经公开了羟基红花黄色素A及其各种提取、分离和纯化方法，以及羟基红花黄色素A注射液(包括冻干粉针剂)。然而，现有的羟基红花黄色素A产品纯度和稳定性依然存在一定问题。从现有的红花黄色素的纯度上来看，基本都存在10％以上的杂质，且这类杂质的结构性质均都未能定性，存在一定的质量不可控性。从红花药材提取的红花黄色素杂质谱也不能完全保证一致。CN102675379A中公开了一种从红花中提取精制羟基红花黄色素A的方法，并具体公开了从中药红花中经过提取、弱碱性离子交换树脂纯化、中极性大孔吸附树脂纯化和非极性大孔吸附树脂纯化、冷冻干燥五个步骤，得到含量为80％以上的羟基红花黄色素A，转移率20％以上。CN101195647A、CN101215307A、CN1475272A中公开从红花中提取精制羟基红花黄色素A的方法，得到含量高于90％的羟基红花黄色素A。然而，羟基红花黄色素A稳定性不好，导致羟基红花黄色素A制剂长期放置后纯度下降，影响药物疗效，特别是引起对羟基红花黄色素A注射制剂的用药安全性担忧。药物研究的主要内容包括药物的安全性、有效性、稳定性和可控性，四者缺一不可。对已生产并临床使用的红花黄色素注射剂，由于经过了药效学测试、临床评价，羟基红花黄色素A化合物本身的安全性与有效性已经得到证明。但是，由于羟基红花黄色素A的提取工艺以及化合物稳定性因素，从上市的现有的羟基红花黄色素A原料的纯度上来看，基本都存在10％以上的杂质，且这类杂质的结构性质均都未能定性，存在一定的质量不可控性。从红花药材提取的红花黄色素杂质谱也不能完全保证一致。因此，现有的羟基红花黄色素A药品，特别是注射液药品，有效成分的稳定性和纯度仍然是制约或者影响药品安全性、质量可控性改善的主要方面。

技术实现要素：
为克服现有技术的缺陷，本发明提供一种新的羟基红花黄色素A化合物，具体地说，提供一种羟基红花黄色素A钠的新化合物。该新化合物是由天然药材红花为原料，通过优异的工艺提取、分离和纯化步骤而获得的新化合物。经试验研究表明，该羟基红花黄色素A钠比起羟基红花黄色素A是更安全有效、更稳定可控的单体化合物，将应用于冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍疾病的治疗上。本发明技术方案分别如下：本发明提供了一种式(I)所示的羟基红花黄色素A钠：分子式：C27H31O16Na本发明的另一目的，还提供了式(I)的羟基红花黄色素A钠的制备方法，其特征在于包括由下式(II)的羟基红花黄色素A制得式(I)的羟基红花黄色素A钠的步骤。优选地，上述所述的制备方法，其中式(II)的羟基红花黄色素A通过如下方法制得式(I)的羟基红花黄色素A钠：式(II)的羟基红花黄色素A通过钠离子交换树脂柱制得式(I)的羟基红花黄色素A钠，或者式(II)的羟基红花黄色素A与钠盐反应制得式(I)的羟基红花黄色素A钠，其中所述的钠盐选自氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠中的一种或者两种以上。优选地，上述所述的制备方法，其中所述的钠离子交换树脂是用001*7钠离子交换树脂或大孔HB-8钠离子交换树脂。这两种树脂均有市售产品，例如可购自上海华震科技有限公司。作为一具体实施方案，上述所述的制备方法，其特征在于以红花药材为原料，经过包括如下的提取、转钠盐、分离和纯化的步骤，制得式(I)的羟基红花黄色素A钠：(1)提取：红花药材用水进行提取；(2)转钠盐：步骤(1)得到的红花提取液通过钠离子交换树脂柱，红花黄色素生成了式(I)的羟基红花黄色素A钠；(3)分离：将步骤(2)收集到的含式(I)的羟基红花黄色素A钠的洗脱液通过大孔吸附树脂柱分离，得到式(I)羟基红花黄色素A钠的粗品；(4)纯化：将步骤(3)得到的式(I)羟基红花黄色素A钠的粗品用葡聚糖凝胶柱层析分离，再用超滤膜进行超滤，制得式(I)的羟基红花黄色素A钠的精品。优选地，上述所述的制备方法，其中所述步骤(1)为红花用10～30倍重量的水在50～100℃下提取2～3次，每次0.5～24小时，收集提取液冷却后即得。优选地，上述所述的制备方法，其中所述步骤(2)为将步骤(1)制得的提取液过钠离子交换树脂柱，所述的钠离子交换树脂为001*7钠离子交换树脂或大孔HB-8钠离子交换树脂，收集含式(I)的羟基红花黄色素A钠的洗脱液。优选地，上述所述的制备方法，其中所述步骤(3)为将步骤(2)得到含式(I)的羟基红花黄色素A钠的洗脱液用大孔吸附树脂HZ801柱分离，以水为洗脱剂，收集洗脱液，得式(I)的羟基红花黄色素A钠粗品。优选地，上述所述的制备方法，其中所述步骤(4)为将步骤(3)得到的羟基红花黄色素A钠的粗品用SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱层析分离，用纯水为洗脱剂，收集含式(I)的羟基红花黄色素A钠洗脱液，减压浓缩得浓缩液，再用截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜进行超滤得到超滤液，经冷冻干燥，制得式(I)的羟基红花黄色素A钠的精品。作为另一具体实施方式，上述所述的制备方法，其特征在于以红花药材为原料，经过包括如下的提取、分离、纯化、酸化和转钠盐的步骤，制得式(I)的羟基红花黄色素A钠：(1)提取：红花药材用水进行提取，得到红花提取液；(2)分离：将步骤(1)得到的红花提取液通过大孔吸附树脂柱分离，得到红花黄色素粗品；(3)纯化：将步骤(2)得到的红花黄色素粗品用葡聚糖凝胶柱层析分离，再用超滤膜进行超滤，冻干后得到红花黄色素精品；(4)酸化：将步骤(3)得到的红花黄色素精品加水，加酸(优选为盐酸)调pH值为1.5-2.5，收集所析出的淡黄色固体，得到式(II)的羟基红花黄色素A；(5)转钠盐：将步骤(4)得到的式(II)的羟基红花黄色素A，加水后用0.1mol/L～10mol/L氢氧化钠或者碳酸钠或者碳酸氢钠(优选氢氧化钠)溶液调pH至4-7，式(II)的羟基红花黄色素A生成式(I)的羟基红花黄色素A钠，反应产物用超滤膜进行超滤，滤液冻干，得到式(I)的羟基红花黄色素A钠的精制品。优选地，上述所述的制备方法，其中所述的大孔吸附树脂是用HZ801型大孔吸附树脂。优选地，上述所述的制备方法，其中所述的葡聚糖凝胶柱层析是用SephadexLH-20葡聚糖凝胶柱层析分离，用纯水为洗脱剂；所述的超滤是用截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜进行超滤。红花药材水提取液主要包含红花黄色素化学成分。本发明令人意外地发现，红花药材水提取液通过钠离子交换树脂柱(如001*7钠离子交换树脂或大孔HB-8钠离子交换树脂)，红花水提取液中的红花黄色素将全部转化为本发明所述的式(I)所示的羟基红花红色素A钠新化合物。发明人推测，可能在钠离子交换树脂分离过程中，红花黄色素游离的式(II)的羟基红花黄色素A阴离子，结合交换出的钠离子进而再生成得到了式(I)所示的羟基红花黄色素A钠。这也得到如下实验的验证。用含式(II)所示的羟基红花黄色素A的样品，用001*7钠离子交换树脂，按本发明实施例1方法进行钠离子交换树脂分离，收集得到的洗脱液，经测定含有如式(I)所示的羟基红花黄色素A钠。同样地，本发明还发现，可以通过将红花黄色素精品酸化后得到羟基红花黄色素A，再用氢氧化钠、碳酸钠或者碳酸氢钠等钠盐处理，也可以高收率、高纯度获得式(I)所示的羟基红花黄色素A钠的新化合物。作为本发明另一发明目的，还提供了一种药物制剂，其含有上述所述的式(I)的羟基红花黄色素A钠作为药物活性成分和药学上可接受的载体；优选地，所述的药物制剂为冻干粉针剂，通过将上述所述的羟基红花黄色素A钠或者按照上述所述方法所制得的式(I)的羟基红花黄色素A钠的精品，溶解于注射用水，经采用0.22μm的微孔滤膜或者截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜过滤后分装于瓶中，冷冻干燥后，得到式(I)的羟基红花黄色素A钠的冻干粉针剂。单位制剂中羟基红花黄色素A钠的量可以为50mg-200mg。例如，可制备成：(1)注射用羟基红花黄色素A钠冻干粉针剂，每瓶含50mg-200mg；(2)羟基红花黄色素A钠氯化钠注射液，每100ml氯化钠注射液含羟基红花黄色素A钠50mg-200mg；(3)羟基红花黄色素A钠葡萄糖注射液。每100ml葡萄糖注射液含羟基红花黄色素A钠50mg-200mg。作为本发明一个具体实施方式，本发明的式(I)所示的羟基红花黄色素A钠及其冻干粉针剂，其通过包括红花药材的提取、钠离子交换树脂的转换、大孔树脂分离、葡聚糖凝胶层析分离和超滤的步骤的方法制备得到，具体是：(1)以红花药材为原料，加入适量的温度为50～100℃的水抽提，抽提是以水抽提2～3次，每次0.5～24小时，抽提用水量为红花生药重量的10～30倍。抽提后滤除药渣，将提取液冷却至5～30℃：，静置2～24小时；(2)将提取液过钠离子交换树脂，流速1～30ml/min，最后用一倍柱体积水，将柱子里的提取液排出；(3)大孔吸附树脂分离：步骤(2)得到的红花提取液用大孔吸附树脂HZ801柱分离，大孔吸附树脂柱的柱内径与柱高的比值为1∶8～15，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速10～30ml/min，收集洗脱液，减压浓缩，得羟基红花黄色素A钠浓缩液粗品；(4)葡聚糖凝胶层析分离：步骤(3)得到的羟基红花黄色素A钠浓缩液粗品过滤或离心后用SephadexLH-20葡聚糖凝胶层析分离，层析柱的径高比为1∶5～20，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速控制线性流速为1～10cm/h，收集含羟基红花黄色素A钠洗脱液，减压浓缩得浓缩液；(5)超滤：步骤(4)所得浓缩液经过滤或离心后采用截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜进行超滤得到超滤液；(6)冻干：步骤(5)所得超滤液经冷冻干燥，即得羟基红花黄色素A钠。(7)将步骤(6)得到的羟基红花黄色素A钠精品，溶解于注射用水，经采用0.22μm的微孔滤膜或者截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜过滤后分装于瓶中，冷冻干燥后，得到羟基红花黄色素A钠冻干粉针。其中，所述的钠离子交换树脂是用001*7钠离子交换树脂或大孔HB-8钠离子交换树脂；所述的大孔树脂分离是用大孔吸附树脂HZ801；所述的葡聚糖凝胶层析分离是用葡聚糖凝胶LH-20；所述的超滤是用截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜。本发明还提供了上述所述的式(I)所示的羟基红花黄色素A钠在制备药物中的应用，其中所述药物具有抗PAF或ADP诱导的血小板聚集作用，用于预防及治疗涉及心肌缺血或脑缺血或者血栓形成所致损伤疾病。其临床应用剂量可以为50-200mg/每天。本发明以天然药材红花为原料，通过优异的提取方式，提供了新型单体药物化合物式(I)的羟基红花黄色素A钠，纯度能保证达到98.5％以上，杂质个数控制在5个以下，更主要的是，比起羟基红花黄色素A，本发明的羟基红花黄色素A钠更稳定，更有利于用药安全性和可控性，将成为应用于冠心病、心绞痛等诸多血液循环障碍疾病的治疗上相较于羟基红花黄色素A更安全有效、更稳定可控的单体化合物。药效学研究试验一：试验目的：观察羟基红花黄色素A钠与注射用红花黄色素(50mg/瓶)静脉注射对狗急性心肌梗塞的保护作用。受试药物注射用红花黄色素(50mg/瓶)，来源：浙江永宁药业股份有限公司，含量：50mg/瓶含羟基红花黄色素A42.5mg。羟基红花黄色素A钠冻干粉(按照实施例1所制得)动物健康杂种狗18只，雌雄各半，随机分为三组。上述药物均静脉注射给药，与临床拟用途径(静脉注射)一致，给药次数为一次。实验方法动物称重后3％戊巴比妥钠30mg/kg静脉注射麻醉。气管插管，接麻醉呼吸机开胸后行机械通气，呼吸频率16-18次/分，吸气与呼气之比为1∶2，潮气量350-550ml，并根据血气分析结果调整通气指标。以针状电极插入四肢及胸前皮下，监测标准肢导及V1、V3、V5心电图。沿胸骨左缘第3肋间开胸，并切断第4肋骨充分暴露心脏。剪开心包并作心包吊床。静脉注射利多卡因2mg/kg预防心律失常。分离左冠状动脉前降起始部位，于前降支下绕两段1号丝线打松结，将一段直径1mm的钢丝插入第一松结内，结扎第一结，将钢丝与冠状动脉一起结扎，抽出钢丝。30分钟后结扎第二结(同时静脉注射受试药物〕。观察第二结结扎后5分、10分、30分及1、2、3、4小时心电图变化。4小时后取心脏，称全心重量，沿主动脉根部左右冠状动脉开口处加压注入10％碳素墨汁10ml，显示心肌非缺血区(被染黑的心肌)和缺血区(未被染黑区〕，剪取缺血区称重。然后将缺血区切成0.5～1cm厚的心肌片，用生理盐水洗净，置37℃0.025％氯化硝基四氮唑蓝(NBT)液染色。染色过程中不时摇动染色液使之与心肌充分接触。30分钟后立即用水冲动多余染料。梗死心肌不着色，非梗死心肌被染成黑色，剪去着色部分，将未着色的梗死区称重。观察指标给药后主要观察指标为胸导联心电图ST段抬高程度及心肌梗死范围等定量指标，具体如下。1.ST段抬高程度：ΔST，以结扎前之ST为0点。观察时间为给药后5分、15分、30分、1小时、2小时、3小时、4小时2心肌梗死程度缺血区心肌重量(g)：即被结扎冠脉供血区的心肌重量。梗死区心肌重量(g)：即心肌染色的未着色部分。心肌梗死率(％)：(梗死区/缺血区)*100％试验对照阴性对照组生理盐水1mg/kg统计分析试验结果以X±S表示，采用非配对t检验法统计，P＜0.05为具有显著的统计学差异。试验结果1.药物对麻醉犬心肌梗死后ST段抬高程度的影响与生理盐水比较，静脉注射注射用红花黄色素和羟基红花黄色素A钠从给药后的五分钟到4小时均可显著降低麻醉开胸犬冠状动脉结扎引起的ST段抬高程度。结果见表1。表1对麻醉开胸狗心肌梗塞后ST段抬高程度的影响2.注射用红花黄色素和羟基红花黄色素A钠均可显著缩小麻醉开胸犬急性心肌梗死的心肌梗死范围，其中以羟基红花黄色素A钠注射组效果为最好。结果见表2。表2对犬急性心肌梗死范围的影响*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001vs生理盐水组试验结论羟基红花黄色素A钠与注射用红花黄色素比较，对防止缺血区心肌坏死有更好的作用。药效学研究试验二：羟基红花黄色素A钠抗血小板聚集的作用，对急性脑缺血有防治作用。受试药物羟基红花黄色素A钠冻干粉(按照实施例1所制得)实验内容1.对犬离体心、脑血管的选择性：该实验将Beagle犬大脑基底动脉环和冠状动脉环固定在离体血管测量装置上，调整张力传感器并向浴杯液中加入10-6mol/L的苯肾上腺素使血管维持适度张力，然后每间隔5min向浴杯液中按每毫升10mg的剂量加入注射用羟基红花黄色素A钠，直到血管环反应很弱或不再出现反应为止(一般加药次数为4-5次)。计算血管收缩或舒张变化值。实验结果，注射用羟基红花黄色素A钠对心脏血管环的舒张作用为30.9％，而对脑血管环的舒张作用为72.8％，说明注射用羟基红花黄色素A钠对脑血管具有非常好的选择性和舒张作用。2.对急性脑缺血的影响：实验用SD大鼠，静脉注射羟基红花黄色素A钠后用常规的大脑中动脉栓塞(MCAO)线栓法制备急性脑缺血模型。饲养24h后先对其进行神经行为学评分，然后断头处死大鼠，取出大脑，放入模具中切成7片，予以TTC染色，存活脑组织被染成红色，坏死脑组织不着色，用图形分析软件计算坏死脑组织占大脑半球的比例。结果，脑梗死面积溶剂对照组为38％，尼莫地平阳性对照组为15.4％，注射用羟基红花黄色素A钠低中高三个剂量组分别为38.0％、27.2％和21.5％，与溶剂对照组比较中高剂量有显著减轻急性脑缺血引起脑组织坏死的作用。3.对大鼠脑血管通透性的影响：大鼠静脉注射给药，每天一次，连续7天，最后一次给药后将大鼠麻醉，静脉注射伊文思蓝50mg/kg，5分钟后结扎双侧颈总动脉，3小时后断头处死动物，取出大脑，称重后浸泡于甲酰胺溶液中，置45℃恒温箱中72h，此时脑血管中的伊文思蓝能够浸出到甲酰胺溶液中，用分光光度计检测甲酰胺溶液中伊文思蓝析出量的多少表示脑血管通透性的高低。实验结果显示：注射用羟基红花黄色素A钠中高剂量组有非常显著的减少伊文思蓝从脑血管中的溢出的作用，说明该药对降低血管通透性有较好作用。4.对犬脑血流量的影响：实验动物用Beagle犬，犬用戊巴比妥钠麻醉后手术分离出一侧颈外静脉、颈内静脉和椎动脉，结扎颈外静脉，放置流量探头在颈内静脉和椎动脉，两处探头记录的血流量相加乘2代表全脑供血量，实验结束取出大脑称重计算每100g大脑组织血流量。试验结果，注射用羟基红花黄色素A钠在静脉给药后中高剂量两个组有明显增加血流量的作用，但血流量增加维持时间较短(约15min)，该实验提示今后在临床用于治疗急性脑缺血时应选用静脉滴注的方法给药。5.对急性脑缺氧的影响：实验用昆明种小鼠和SD大鼠进行，将动物放入缺氧环境中，记录存活时间，了解动物用药后是否能增加对急性缺氧的耐受性。实验结果：小鼠在密闭的容器中，溶剂对照组存活时间为32min，而注射用羟基红花黄色素A钠低中高三个剂量组的小鼠存活时间分别为37、37、37min，经统计学处理与溶剂对照组比较有显著差异(P＜0.05～0.01)；大鼠实验在含97％的氮气和3％氧气的环境中进行，动物放入容器后到呼吸停止，各组的生存时间为，溶剂对照组平均3分43秒；阳性对照组(尼莫地平)为5分45秒，两者间比较差别非常显著；注射用羟基红花黄色素A钠低中高三个剂量组分别为3分30秒、4分35秒和4分12秒，和溶剂对照组比较中高剂量组存活时间差别显著。6.抗血小板聚积：实验分为用仪器检测和活体实验两部分：1)仪器检测方法：家兔静脉注射羟基红花黄色素A钠，每天一次连续5天，最后一次给药结束2小时内从心脏取血4ml，血液经低速离心得到富含血小板的血清；经高速离心得到贫血小板血清，血小板聚积诱导剂选用二磷酸腺苷(adenosinediphosphate；ADP)和血小板聚集活化因子(Platelet-ActivatingFactorPAF)两种，用血小板聚集仪进行测试。在羟基红花黄色素A钠注射液抗ADP和PAF诱导的血小板聚集实验中，均显示有非常好的抗血小板聚集作用，在三个剂量之间显示出有良好的量-效关系存在。2)活体方法：用乳胶管在大鼠动静脉之间形成短路，乳胶管内固定有手术用丝线，利用血小板粘附的特点，开放短路使血液经乳胶管跨动静脉流动15分钟，取出丝线称重，减去丝线干重即是粘附在丝线上的血小板重量，实验结果，在丝线上粘附的血小板重量溶剂对照组为14.8±1.57mg，阳性对照组为8.62±2.79mg，注射用羟基红花黄色素A钠低中高三个剂量组的粘附血小板重量分别为13.8±1.95mg，9.87±1.50mg和9.02±1.29mg，中高剂量组和溶剂对照组比较相差非常明显，说明注射用羟基红花黄色素A钠有非常好的抗大鼠血小板聚集的作用。7.对血液粘滞度的影响：家兔静脉给药，每天一次，连续5天，最后一次给药2小时心脏取血抗凝后直接用血液流变仪检测。结果显示，与溶剂对照组比较羟基红花黄色素A钠治疗组随着用药剂量的增加，血液粘滞度低切、中切和高切三个指标也随之降低，降低幅度随剂量增加而增加，高剂量组效果优于阳性对照药尼莫地平注射用液组，说明注射用羟基红花黄色素A钠对降低血液粘滞度有显著作用。二、稳定性试验试验目的：观察式(I)的羟基红花黄色素A钠与羟基红花黄色素A稳定性以及理化数据受试药物羟基红花黄色素A按CN102675379A方法自制纯度89.9％羟基红花黄色素A钠自制(按照实施例1)纯度98.6％结果见表3。表3羟基红花黄色素A钠稳定性试验结果羟基红花黄色素A按实施例2中方法自制，红花黄色素酸化后制得，纯度99.2％。羟基红花黄色素A钠自制(按照实施例2)纯度99.2％结果见表4。表4羟基红花黄色素A钠稳定性试验结果羟基红花黄色素A钠的理化数据，见表5。表5羟基红花黄色素A钠理化数据结果试验结果表明，本发明的新颖的式(I)的羟基红花黄色素A钠，与羟基红花黄色素A的稳定性比较试验，说明羟基红花黄色素A钠稳定性更好，从而质量更安全可靠。羟基红花黄色素A酸性较强，超出人体耐受pH，注射时引起疼痛等不适感觉，且溶解性很差。本发明的新颖的式(I)的羟基红花黄色素A钠，有更好的耐受性和溶解性。实施例1所制得的羟基红花黄色素A钠化合物，经红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、COSY谱、DEPT135谱以及HSQC谱结构确认，结构如下：1.红外吸收光谱仪器型号：BrukerVECTOR-22型红外吸收光谱仪IR(溴化钾压片)IR谱主要特征峰见表6。表6红外光谱特征峰2.质谱仪器型号：美国FINNIGAN公司液质联用多级离子阱质谱系(LCQ-DECAXP)测试条件：ESI质谱MS+cESI635.14(M)+-cESI611.25(M-Na)-3.核磁共振氢谱和碳谱仪器型号：BRUCKERAVANCEIII500型超导核磁共振仪测试条件：溶剂：DMSO，内标：TMS式(I)的羟基红花黄色素A钠的核磁共振1H-NMR(图1)、13C-NMR(图2)、COSY谱(图3)、DEPT135谱(图4)以及HSQC谱(图5)，如说明书附图。羟基红花黄色素A钠的1H-NMR数据归属如下：化学位移δ(ppm)2.84～4.14(14H)归属于糖部分氢G1～G6和G’1～G’6；4.39～4.77(8H)归属于糖上羟基氢；7.26(1H)7.39(1H)归属于8和9；6.75～7.42(4H)归属于11～15；18.65(1H)归属于3-OH；4.70(1H)归属于4-OH；9.72(1H)归属于13-OH。羟基红花黄色素A钠的13C-NMR数据归属如下：DEPT135显示化学位移δ(ppm)61.05(1C)、61.46(1C)(仲碳)归属于糖部分碳G6、G’6；68.60、69.62、69.83、70.86、73.80、78.25、79.15、80.19、80.62、85.57(10C)(叔碳)归属于糖部分碳G1～G5和G’1～G’5；115.52(2C)(叔碳)归属于12和14；129.26(2C)(叔碳)归属于11和15；123.22(1C)135.63(1C)(叔碳)归属于8和9；化学位移δ(ppm)189.37、105.96、195.29、85.24、182.69、99.24(6C)归属于1～6；179.06(1C)、127.27(1C)、158.34(1C)分别归属于7、10、13。附图说明图1：式(I)的羟基红花黄色素A钠的氢谱图2：式(I)的羟基红花黄色素A钠的碳谱图3：式(I)的羟基红花黄色素A钠的COSY谱图4：式(I)的羟基红花黄色素A钠的DEPT135谱图5：式(I)的羟基红花黄色素A钠的HSQC谱具体实施方式实施例1：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到已处理平衡好的001*7钠离子交换树脂，柱径高比为1∶10，柱体积为500ml，流速为3ml/min，最后用一倍柱体积水，将柱子里的提取液排出，收集含羟基红花黄色素A钠的流出液，缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得羟基红花黄色素A钠粗品浓缩液。以红花计每公斤红花得浓缩液100ml。羟基红花黄色素A钠粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速为每分钟5ml，收集含羟基红花黄色素A钠部分。收集液经60℃减压浓缩后，得羟基红花黄色素A钠精品浓缩液，以红花计，每公斤红花得浓缩液35～50ml，经冷冻干燥，即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品粉末，纯度为98.6％，收率按红花计为0.45％左右。将上述制得的羟基红花黄色素A钠精品，溶解于注射用水，经采用0.22μm的微孔滤膜过滤后分装于瓶中，冷冻干燥后，得到羟基红花黄色素A钠冻干粉针。实施例2：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得红花黄色素浓缩液。以红花计每公斤红花得浓缩液100ml。红花黄色素粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速为每分钟5ml，收集含红花黄色素部分。收集液经60℃减压浓缩后，得红花黄色素浓缩液，以红花计，每公斤红花得浓缩液35～50ml，经冷冻干燥，即得淡黄色的红花黄色素粉末，纯度约为90％。红花黄色素粉末加水溶解后用HCl酸化，放置冷处2～24小时析出固体。固体过滤后加水再用0.1mol/L～10mol/L的氢氧化钠溶液调pH至6.0左右，经冷冻干燥即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品，纯度为99.2％，收率按红花计为0.70％左右。经鉴定，所得到的羟基红花黄色素A钠结构如式(I)所示。将上述制得的羟基红花黄色素A钠精品，溶解于注射用水，经采用截留分子量8000-10000道尔顿的超滤膜过滤后分装于瓶中，冷冻干燥后，得到羟基红花黄色素A钠冻干粉针。实施例3：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到已处理平衡好的大孔HB-8钠离子交换树脂，柱径高比为1∶10，柱体积为500ml，流速为3ml/min，收集流出液，缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得羟基红花黄色素A钠粗品浓缩液。以红花计，每公斤红花得浓缩液100ml。羟基红花黄色素A钠粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，洗脱流速为每分钟5ml，收集含羟基红花黄色素A钠部分。收集液经60℃减压浓缩后，得羟基红花黄色素A钠精品浓缩液，以红花计，每公斤红花得浓缩液35～50ml，经冷冻干燥，即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品粉，纯度为98.7％，收率按红花计为0.50％左右。经鉴定，所得到的羟基红花黄色素A钠结构如式(I)所示。实施例4：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得红花黄色素粗品浓缩液。以红花计每公斤红花得浓缩液100ml。红花黄色素粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速为每分钟5ml，收集含红花黄色素部分。收集液经60℃减压浓缩后，得红花黄色素浓缩液，以红花计，每公斤红花得浓缩液35～50ml，经冷冻干燥，即得淡黄色的红花黄色素粉末，纯度约为90％。红花黄色素粉末加水溶解后用HCl酸化，放置冷处2～24小时析出固体。固体过滤后加水再用0.1mol/L～10mol/L的碳酸钠溶液调pH至6.0左右，经冷冻干燥即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品，纯度为99.1％，收率按红花计为0.75％左右。经鉴定，所得到的羟基红花黄色素A钠结构如式(I)所示。实施例5：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得红花黄色素粗品浓缩液。以红花计每公斤红花得浓缩液100ml。红花黄色素粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速为每分钟5ml，收集含红花黄色素部分。收集液经60℃减压浓缩后，得红花黄色素浓缩液，以红花计，每公斤红花得浓缩液35～50ml，经冷冻干燥，即得淡黄色的红花黄色素粉末，纯度约为90％。红花黄色素粉末加水溶解后用HCl酸化，放置冷处2～24小时析出固体。固体过滤后加水再用.1mol/L～10mol/L的碳酸氢钠溶液调pH至6.0左右，经冷冻干燥即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品，纯度为99.3％，收率按红花计为0.69％左右。经鉴定，所得到的羟基红花黄色素A钠结构如式(I)所示。实施例6：羟基红花黄色素A钠称取红花，加12.5倍药材重量的去离子水，于100℃提取20-25分钟，过滤，滤渣加10倍药材重量的去离子水再按上述条件重复提取一次，过滤。合并二次提取液，冷却至室温，用离心机离心后，取离心液备用。将上述离心液缓缓加到大孔吸附树脂(型号HZ801)分离柱中，柱径高比为1∶12，上样流速为每分钟10ml。上样结束后，用常温的去离子水以每分钟20ml的流速洗脱。洗脱液于60℃减压浓缩，得红花黄色素粗品浓缩液。以红花计每公斤红花得浓缩液100ml。红花黄色素粗品浓缩液上葡聚糖凝胶LH-20柱，柱的径高比为1∶5，上样量为柱床体积的10％，以纯化水为洗脱剂，洗脱流速为每分钟5ml，收集含红花黄色素部分。将收集液加入平衡好的强酸性H型阳离子交换树脂，收集流出液。收集液经60℃减压浓缩后，得羟基红花黄色素A浓缩液，放置冷处2～24小时析出固体。固体过滤后加水再用0.1mol/L～10mol/L的氢氧化钠溶液调pH至6.0左右，经冷冻干燥即得淡黄色的羟基红花黄色素A钠精品，纯度为99.8％，收率按红花计为0.68％左右。经鉴定，所得到的羟基红花黄色素A钠结构如式(I)所示。