本发明属于化学合成领域，具体而言，本发明涉及制备熊去氧胆酸氧化物的方法。
背景技术：
熊去氧胆酸在医学上用于增加胆汁酸分泌，并使胆汁成分改变，降低胆汁中胆固醇及胆固醇脂，有利于胆结石中的胆固醇逐渐溶解。并且目前已有研究表明熊去氧胆酸及以其类似化合物为原料合成的胆酸类药物对非酒精性脂肪肝有很好的疗效。例如，奥贝胆酸是通过鹅去氧胆酸(熊去氧胆酸的差向异构体)氧化、缩合等一系列反应得到的，其中高纯度选择性氧化是关键。因此对熊去氧胆酸的氧化物(式i所示化合物)的有效合成，将为各种胆酸类药物的开发提供更多方向。
技术实现要素：
本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本发明的一个目的在于提出制备如式i所示的熊去氧胆酸氧化物的方法，由此可以实现熊去氧胆酸的定向选择性氧化。
在本文中所使用的术语“接触”应做广义理解，其可以是任何能使得至少两种反应物发 生化学反应的方式，例如可以是将两种反应物在适当的条件下进行混合。在本文中，“化合物n”在本文中有时也称为“式n所示化合物”，在本文中n为1－4的任意整数，例如“化合物2”在本文中也可以称为“式2所示化合物”。
在本发明的描述中，需要理解的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。
在本发明的一个方面，本发明提出了一种制备熊去氧胆酸氧化物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：
在酸性溶剂中，加入有机溶剂，使相转移催化剂与熊去氧胆酸接触，以便在低温条件下使得氧化剂与所述熊去氧胆酸反应，得到式i所示熊去氧胆酸氧化物。
由此，根据本发明实施例的制备熊去氧胆酸氧化物的方法通过使熊去氧胆酸与相转移催化剂接触，在低温条件下氧化剂对熊去氧胆酸进行选择性氧化，使得只氧化熊去氧胆酸两个羟基中一个，从而可以得到熊去氧胆酸氧化物，并且通过nmr和lc-ms确定其结构和分子量，同时本发明所得熊去氧胆酸氧化物可为胆酸类药物的开发提供更多方向，为药物筛选提供了更多的目标分子，且本发明的工艺适于工业化大生产。
根据本发明的实施例，酸性溶剂的具体类型并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，酸性溶剂可以为有机酸，优选为甲酸、乙酸、丁酸、甲基磺酸中的至少一种，最优选为乙酸。由此，可以对起始物料起到更好的溶解效果。
根据本发明的实施例，相转移催化剂的具体类型并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，相转移催化剂可以为选自季铵盐季磷盐和大环聚醚类中的至少一种，优选为四丁基铵盐、苄基三烷基铵盐、18-冠醚-6。由此，可以使氧化剂与产物的接触更加充分，从而使得反应更加完全。
根据本发明的实施例，相转移催化剂可以通过无机盐进行活化。由此，通过活化相转移催化剂，可以显著提高转化效率。
根据本发明的具体实施例，对相转移催化剂进行活化的无机盐的具体类型并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，无机盐可以为选自溴和碘的无机盐，优选为溴化钠、碘化钠。由此，可以显著提高转化收率。
根据本发明的实施例，溶剂的具体类型并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，溶剂可以为选自纯化水和有机溶剂中的至少一种，优选为纯化水、甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯、己 烷、庚烷、醚类、二甲基甲酰胺、n,n-二甲基苯胺中的至少一种，最优选为含有纯化水、甲醇和乙酸乙酯的混合溶剂。由此，可以在均相体系中反应，完成后会在体系中析出产品。
根据本发明的实施例，混合溶剂中纯化水、甲醇和乙酸乙酯的混合比例并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，混合溶剂中，纯化水、甲醇和乙酸乙酯的体积比为1:(10～14):(20～25)。由此，可以高效合成目标产物。
根据本发明的实施例，氧化剂的具体类型并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，氧化剂可以为选自次氯酸钠和双氧水中的至少一种，优选为次氯酸钠。由此，可以实现对熊去氧胆酸上的羟基进行选择性氧化(选择性氧化3号位羟基)。
根据本发明的实施例，氧化剂和熊去氧胆酸的反应比例并不受特别限制，本领域技术人员可以根据实际需要进行选择，根据本发明的具体实施例，氧化剂和熊去氧胆酸的摩尔比可以为(0.8～1.2):1，优选为1:1。由此，可以定量选择性氧化熊去氧胆酸3号位羟基，从而避免7号位的羟基的氧化。
根据本发明的实施例，低温条件为-30～10℃，优选为-5～5℃。由此，可以有利于选择性氧化熊去氧胆酸3号位羟基。
在本文中所使用的术语“有机酸”是指甲酸、乙酸、丁酸、甲基磺酸。
根据本发明实施例的制备如式i所示的熊去氧胆酸氧化物的方法可以实现下列优点至少之一：
1、根据本发明实施例的制备如式i所示的熊去氧胆酸氧化物的方法，可以高效制备熊去氧胆酸氧化物；
2、根据本发明实施例的制备如式i所示的熊去氧胆酸氧化物的方法，起始原料廉价易得，合成工艺简洁，易控制，提高生产效率，成本低，有利于工业化大批量生产；
3、根据本发明实施例的制备如式i所示的熊去氧胆酸氧化物的方法，提供了非常高纯度的目标产品，为其作为医药中间体生产新药时，减少产品杂质，控制药物质量提供保障。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
图1显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的质谱。
图2显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的氢谱1；
图3显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的氢谱2；
图4显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的碳谱1；
图5显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的碳谱2；
图6显示了根据本发明的实施例1，所得熊去氧胆酸氧化物的hplc图谱；
图7显示了根据本发明的实施例3，所得熊去氧胆酸双氧化物的质谱。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，需要说明的是下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。另外，如果没有明确说明，在下面的实施例中所采用的所有试剂均为市场上可以购得的，或者可以按照文本或已知的方法合成的，对于没有列出的反应条件，也均为本领域技术人员容易获得的。
一般方法
化学反应方程式：
(1)以熊去氧胆酸(udca)为起始物料，在纯化水、醋酸、甲醇和乙酸乙酯作为溶剂体系中，用四丁基溴化铵为相转移催化剂，溴化钠活化剂，在0℃左右，通过定量的次氯酸钠氧化剂选择性氧化3号位的羟基成羰基，7号位的羟基不被氧化，从而得到熊去氧胆酸氧化物i。
本发明涉及熊去氧胆酸氧化物的制备方法步骤中，在有机溶剂中，酸性溶剂下进行反应，其中纯化水、甲醇、乙酸乙酯的体积比为1:12:24，其中纯化水和起始物料熊去氧胆酸的质量比为1:4；氧化剂和起始物料熊去氧胆酸的摩尔比为1:1。
分析测试：
仪器与测试：
仪器：agilent1260hplc或等同
检测器：agilent380-elsd
色谱柱：thermobdsc8250*4.6mm5μm
流动相a：0.01％三氟乙酸水溶液
流动相b：乙腈
柱温：25℃
流速：1.0ml/min
进样量：10μl
elsd蒸发管温度：70℃
elsd气体流速：2.0l/min
运行时间：20min。
实施例1
室温下向干燥洁净1l三口瓶中加入甲醇20ml，后加udca(20g，51mmol)，开动搅拌，再依次加入溴化钠(0.26g，2.5mmol)、四丁基溴化铵(0.052g，0.16mmol)、甲醇40g、醋酸20g、水5g和乙酸乙酯120g，降温至0℃；开始缓慢滴加次氯酸钠水溶液76g。注意控温-5～5℃；滴完后将反应体系温度在0℃左右搅拌反应，用elsd监控熊去氧胆酸反应完全；向体系中滴加纯化水220g，析出大量固体，温度升至15℃，搅拌30min，后再降温至0～10℃，静置60min，过滤，用纯化水和乙酸乙酯(2:1)洗涤；湿品通过纯化水和乙酸乙酯打浆处理过滤，固体在45℃真空干燥，得到12.58g，收率63.2％，纯度100％。
结构解析数据
ms-esi(m/z)：391.2[m+h]+,781.5[2m+h]+，质谱见附图1。
1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ:0.62(s,3h,18),0.86～0.86(d,3h,21),0.93(s,3h,19),2.54～2.61(t,2h,23)，3.32(brs,1h,-oh),3.96～4.02(m,1h,7)，氢谱见附图2-3；
13c-nmr(100mhz,dmso-d6)δ:12.4,18.7,21.8,22.7,27.1,28.6,31.1,31.2,34.4,35.3,36.4,37.0,37.3,38.8,43.1,43.1,43.5,44.5,55.2,55.8,69.2,175.3,211.4，碳谱见附图4-5；
hplc:100％，纯度检测图谱见附图6。
实施例2
室温下向干燥洁净20l反应釜中加入甲醇200ml，后加udca(200g，509mmol),开动搅拌，再依次加入溴化钠(2.6g，25mmol)、四丁基溴化铵(0.5g，1.6mmol)、甲醇400g、醋酸200g、水500g和乙酸乙酯1.2kg，降温至0℃；开始缓慢滴加次氯酸钠水溶液760g。注意控温-5～5℃；滴完后将反应体系温度在0℃搅拌反应，用elsd监控至反应完成(或补加次氯酸钠至反应完全)；向体系中滴加纯化水2.2kg，析出大量固体，温度升至15℃，搅拌30min，后再降温至0～10℃，静置60min，过滤，湿品通过纯化水和乙酸乙酯打浆处理后过滤，固体在45℃真空干燥，得到1380g，收率69.4％，纯度100％。
对比例1
熊去氧胆酸双氧化产物
室温下向干燥洁净1l三口瓶中加入甲醇20ml，后加udca(20g，51mmol)，开动搅拌，再依次加入溴化钠(0.26g，2.5mmol)、四丁基溴化铵(0.052g，0.16mmol)、甲醇40g、醋酸20g、水5g和乙酸乙酯120g；开始缓慢滴加次氯酸钠水溶液168g。控温控温20～30℃；滴完后将反应体系温度在常温下搅拌反应，用elsd监控熊去氧胆酸反应完全；向体系中滴加纯化水220g，析出大量固体，搅拌30min，后再降温至0～10℃，静置60min，过滤，用纯化水和乙酸乙酯(2:1)洗涤；湿品通过纯化水和乙酸乙酯打浆处理过滤，固体在45℃真空干燥，得到15.78g，收率79.6％，纯度100％。ms-esi(m/z)：389.2[m+h]+,777.4[2m+h]+，质谱见附图7。
在不同温度下，氧化剂的量的改变，得到的为双氧化化合物，说明本工艺条件需要得到目标化合物需要严格控制。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。