本发明涉及化学制药，具体涉及药物的制备方法，尤其涉及一种抗肿瘤药色瑞替尼及其中间体的制备方法。
背景技术：
肺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一，而且由于环境等各种因素影响，其发病率正在以每年超过3％的速度增加。在已经确诊的肺癌患者中有80-85％的为非小细胞肺癌(NSCLC)，其中2％-7％病例由ALK基因的重排(rearrangement)所驱动，导致癌细胞的加速生长，病情恶化。色瑞替尼是一种口服、间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制剂，临床研究中在治疗转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者中取得了突破性进展。2014年4月29日美国食品药品监督管理局[FDA]批准了色瑞替尼用于经Xalkori(crizotinib)治疗后病情恶化或对Xalkori不耐受的间变性淋巴瘤激酶阳性(ALK+)转移性非小细胞肺癌(NSCLC)患者的治疗。
色瑞替尼的化学名为：5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺；CAS号：1032900-25-6；结构式如下：
目前，色瑞替尼采用汇聚式合成法，先合成两个相应的关键片段，然后将两个片段对接而成。专利CN103641816A报道，片段一(化合物1-Boc，叔丁基4-(4-氨基-5-异丙氧基-2-甲基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯)在合成过程中需要采用40％(wt/wt)的二氧化铂进行催化，加氢36小时，而收率仅为60％，所得哌啶类化合物用Boc(叔丁氧羰基)保护，与片段二(化合物3)对接，再脱除保护基，最终得到色瑞替尼(见路线1)。但是，由于二氧化铂催化剂的昂贵费用使制备色瑞替尼的成本非常高；此外，哌啶类化合物环上的胺基在对接步骤中会优先参与反应，产生副产物；反应过程对原料化合物采取加保护及脱保护基等步骤，使制备操作繁琐，不宜规模生产。
专利WO2011140338A1报道，化合物3(2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺)是以邻氟硝基苯为原料，经过异丙硫醇取代、氧化、氢化还原、亲核取代等步骤制备(见路线2)。该反应路线较长，尤其最后使用NaH，不仅昂贵，而且有操作风险，收率亦仅为32％。
因此，设计开发更低成本、更方便简单的色瑞替尼制备方法具有重要意义。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题在于克服上述不足之处，研究设计反应步骤少，操作简单，成本低，收率高的制备色瑞替尼的方法。
本发明提供一种色瑞替尼的制备方法，该方法包括下列步骤：
(1)于溶剂中，化合物1-二盐酸盐与2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺化合物3偶联生成5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺二盐酸盐化合物4；
(2)于溶剂中，化合物4加碱游离生成色瑞替尼：
(见反应式一)
本发明方法
所述步骤(1)：化合物3与化合物1的摩尔比为1.0～1.3﹕1，优选为1.1﹕1；反应温度50℃～95℃，优选87℃～95℃回流；反应时间10～36小时，优选18～24小时；反应溶剂为异丙醇。
所述步骤(2)：碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾或碳酸钠；优选氢氧化钠；氢氧化钠与化合物4的摩尔比为2.0～3.0﹕1，优选2.3～2.5﹕1；反应温度为10℃～70℃，优选50℃～60℃；反应溶剂为乙醇。
本发明的另一目的是提供了制备色瑞替尼关键中间体(4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-氨基-苯基)-哌啶盐酸盐(化合物1-二盐酸盐)的制备方法：(见反应式二)
包括下列步骤：
(1)由(4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基-苯基)-吡啶于溶剂中，使用还原剂还原反应得2-异丙氧基-5-甲基-4-(吡啶-4-基)苯胺；
(2)由2-异丙氧基-5-甲基-4-(吡啶-4-基)苯胺在溶剂中，加入盐酸，以金属催化剂催化氢化还原得(4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-氨基-苯基)-哌啶盐酸盐，化合物1-二盐酸盐。
步骤(1)所述还原剂选自钯碳、雷尼镍、锌粉或铁粉；优选为钯碳,；所述还原剂使用量为原料(4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基-苯基)-吡啶的0.5％～10％，优选为2％～5％，最优选为3％；反应溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇，优选为甲醇；反应温度为10℃～60℃，优选为20℃～50℃，最优选为30℃～40℃；加氢化压力为0.1Mpa～1.0Mpa,优选为0.2Mpa～0.6Mpa,最优选为0.4Mpa～0.5Mpa；反应时间为1小时～25小时，优选为3小时～20小时，最优选为4小时～16小时。
步骤(2)所述金属催化剂为铂碳，使用量为中间体2-异丙氧基-5-甲基-4-(吡啶-4-基)苯胺的1％～30％，优选为5％～15％，最优选为10％；反应溶剂选自甲醇、乙醇或异丙醇，优选为甲醇；反应温度为10℃～60℃，优选为20℃～50℃，最优选为30℃～40℃；加氢压力为0.1Mpa～2.0Mpa,优选为0.7Mpa～1.2Mpa,最优选为1.0Mpa；反应时间为1小时～25小时，优选为6小时～20小时，最优选为12小时～16小时。
本发明的又一目的是提供了制备色瑞替尼关键中间体2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(化合物3)的制备方法。
该方法包括下列步骤：
(1)于溶剂中，加入碱，以2-巯基苯胺为原料与2-溴丙烷发生取代反应生成2-(异丙基)苯胺盐酸盐。
(2)于溶剂中，2-(异丙基)苯胺盐酸盐与2,4,5-三氯嘧啶在碱作用下，与嘧啶环4位氯发生取代反应，偶联生成2,5-二氯-N-(2-(异丙基硫基)苯基)嘧啶-4-胺，化合物2；
(3)于溶剂中，化合物2再经氧化剂发生氧化反应生成色瑞替尼关键中间体2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺，化合物3，
(见下列反应式三)
所述步骤(1)2-溴丙烷与原料2-巯基苯胺的摩尔比为1.0～1.3﹕1，优选1.0﹕1；反应时间2小时～16小时，优选2小时；反应溶剂为乙醇。
所述步骤(2)反应温度为70～110℃，优选100～110℃回流。反应时间2～24小时，优选3～5小时；反应溶剂为异丙醇。
所述步骤(3)氧化剂为双氧水或间氯过氧苯甲酸；优选双氧水；双氧水与化合物2的摩尔比为2.5～4.0﹕1，优选为2.5～3.5﹕1，最优选为2.8﹕1；反应时间2～24小时，优选3～5小时；反应溶剂为醋酸。
本发明的有益效果：本发明方法将化合物1和化合物3直接反应制备色瑞替尼，从而省去了现有技术中加保护及脱保护基等繁琐步骤，操作简便，节约成本。本发明提供的制备关键中间体化合物1，使用钯碳及铂碳替代二氧化铂作为催化剂，并经实验证明，在后续批次的生产中，钯碳和铂碳均可重复套用，大大降低成本。制备关键中间体化合物2时，选择了更高效、便捷、安全的方法，使得产品收率及生产效能大幅提升。因此，本发明方法成本低，收率高，每步中间体的纯度均在99.5％以上，保证了色瑞替尼的高纯度质量。本发明步骤少，操作简单，宜于工业化生产，有较大的应用价值。
具体实施方式
实施例1：2-异丙氧基-5-甲基-4-(4-哌啶基)苯胺盐酸盐(化合物1-二盐酸盐的制备)
向1000L氢化反应釜中加入400.0L的甲醇，50.0kg的4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)吡啶,釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入5.0kg 10％的湿钯碳(干基1.5kg)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力0.5MPa，温度30℃，反应5小时。过滤反应液，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液加入至1000L氢化反应釜中，加入30.6L浓盐酸，釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入14.5kg 10％湿铂碳(干基5.0kg)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力1.2MPa，温度30℃，反应16小时。过滤，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液在50℃以下，减压浓缩至100L。加入150.0L异丙醇，在50℃以下，减压浓缩至100L。再次加入150.0L异丙醇，在50℃以下，减压浓缩至约100L。加入100L异丙醇，30℃搅拌3小时，降温至0℃，搅拌2小时，过滤，异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥12小时，得到55.0kg类白色固体(化合物1-二盐酸盐)。收率：93％，纯度99.7％。
经检测，产品确证为2-异丙氧基-5-甲基-4-(4-哌啶基)苯胺盐酸盐(化合物1-二盐酸盐)
1H-NMR(DMSO):1.26(6H,d)；1.75(2H,d)；1.96(2H,m)；2.21(3H,d)；3.00(3H,m)；3.30(3H,d)；4.63(1H,m)；6.90(1H,s)；7.16(1H,s)；9.20(1H,m)；9.90(2H,br)。m/z(+ESI)＝249.1[M+H]+。
实施例2 化合物1-二盐酸盐的制备
向1L氢化反应釜中加入400mL的甲醇，50g的4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)吡啶,釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入8.3g 10％的湿钯碳(干基2.5g)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力0.2MPa，温度20℃，反应16小时。过滤反应液，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液加入至1L氢化反应釜中，加入30.6mL浓盐酸，釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入14.5g 10％湿铂碳(干基5g)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力1.2MPa，温度30℃，反应16小时。过滤，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液在50℃以下，减压浓缩至基本无馏分滴出。加入150mL异丙醇，30℃搅拌3小时，降温至0℃，搅拌2小时，过滤，异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥12小时，得到52g类白色固体(化合物1-二盐酸盐)。收率：88％，纯度99.5％。
产品经检测确证为化合物1-二盐酸盐。
实施例3：化合物1-二盐酸盐的制备
向1L氢化反应釜中加入400mL的甲醇，50g的4-(5-异丙氧基-2-甲基-4-硝基苯基)吡啶,釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入5g 10％的湿钯碳(干基1.5g)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力0.5MPa，温度30℃，反应5小时。过滤反应液，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液加入至1L氢化反应釜中，加入30.6mL浓盐酸，釜内使用真空及0.5MPa氩气置换三次，加入14.5g 10％湿铂碳(干基5g)，釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力1.8MPa，温度50℃，反应20小时。过滤，催化剂暂存，可于后续批次重复套用。滤液在50℃以下，减压浓缩至基本无馏分滴出。加入150mL异丙醇，30℃搅拌3小时，降温至0℃，搅拌2小时，过滤，异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥12小时，得到53g类白色固体(化合物1-二盐酸盐)。收率：90％，纯度99.2％。
产品经检测确证为化合物1-二盐酸盐。
实施例:4：2,5-二氯-N-(2-(异丙基硫基)苯基)嘧啶-4-胺(化合物2的制备)
向100L搪瓷反应釜中加入13.6kg的2-(异丙基硫代)苯胺盐酸盐，12.2kg的2,4,5-三氯嘧啶和5.8kg的异丙醇，滴加19.3kg的N,N-二异丙基乙胺。升温至100～110℃回流，反应回流保温3小时。反应釜降温至75～80℃，滴加入39.2kg的异丙醇。缓慢降温至5℃。搅拌3小时。过滤。将过滤所得湿品投入100L搪瓷反应釜中，再加入45.0kg的异丙醇。升温至75～80℃，搅拌至溶清，缓慢降温至5℃，搅拌2小时。过滤，0℃的异丙醇淋洗湿品。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到17.8kg紫色固体(化合物2)。收率85％，纯度99.9％。
产品经检测确证为2,5-二氯-N-(2-(异丙基硫基)苯基)嘧啶-4-胺(化合物2)。
1H-NMR(CD3Cl):1.26(6H,d)；3.14(1H,m)；7.09(1H,t)；7.44(1H,m)；7.56(1H,m)；8.21(1H,s)；8.63(1H,d)；9.27(1H,s)。m/z(+ESI)＝314.0[M+H]+。
实施例5 化合物2的制备
向500mL玻璃反应瓶中加入50g的2-(异丙基硫代)苯胺盐酸盐，44.9g的2,4,5-三氯嘧啶和21.3g的异丙醇，滴加70.9g的N,N-二异丙基乙胺。升温至80℃，反应保温10小时。滴加入144.1g的异丙醇。缓慢降温至5℃。搅拌3小时。过滤。将过滤所得湿品投入反应瓶中，再加入165.4g的异丙醇。升温至75～80℃，搅拌至溶清，缓慢降温至5℃，搅拌2小时。过滤，0℃的异丙醇淋洗湿品。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到61.5g紫色固体(化合物2)。收率80％，纯度99.5％。
产品经检测确证为化合物2。
实施例6：2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(化合物3的制备)
向500L搪瓷反应釜中加入17.8kg实施例4所得的化合物2和106.0kg的冰醋酸。控制温度30℃以下，滴加事先配好的0.93kg钨酸钠二水合物和8.75kg纯化水的水溶液，搅拌0.5小时。控制温度20-30℃，滴加18.1kg的30％双氧水，滴加时间控制在2-4小时以内。在20℃搅拌5小时。控制温度20-30℃，滴加事先配好的6.5kg无水亚硫酸钠和74.0kg纯化水的水溶液，搅拌1.0小时。加入149.0kg的纯化水，搅拌3小时。过滤，纯化水淋洗湿品。将过滤所得湿品投入反应釜中，再加入140.0kg的异丙醇。加热至85～95℃，回流搅拌0.5小时。缓慢降温至5℃，搅拌2小时。过滤，用预冷至0℃的异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到18.0kg类白色固体(化合物3)。收率92％，纯度99.9％。
产品经检测确证为2,5-二氯-N-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-4-胺(化合物3)
1H-NMR(CD3Cl):1.31(6H,d)；3.22(1H,m)；7.31(1H,t)；7.73(1H,m)；7.92(1H,m)；8.30(1H,s)；8.63(1H,d)；10.06(1H,s)。m/z(+ESI)＝346.0[M+H]+。
实施例7：化合物3的制备
向1L玻璃反应瓶中加入50g实施例4所得的化合物2和297.9g的冰醋酸。控制温度30℃以下，滴加事先配好的2.6g钨酸钠二水合物和24.6g纯化水的水溶液，搅拌0.5小时。控制温度20-30℃，滴加63.6g的30％双氧水，滴加时间控制在2-4小时以内。在20℃搅拌16小时。控制温度20-30℃，滴加事先配好的18.3g无水亚硫酸钠和207.9g纯化水的水溶液，搅拌1.0小时。加入418.7g的纯化水，搅拌3小时。过滤，纯化水淋洗湿品。将过滤所得湿品投入反应瓶中，再加入393.4g的异丙醇。加热至85～95℃，回流搅拌0.5小时。缓慢降温至5℃，搅拌2小时。过滤，用预冷至0℃的异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到47.0g类白色固体(化合物3)。收率85％，纯度99.9％。
产品经检测确证为化合物3。
实施例8：化合物3的制备(参考专利WO2011140338A1)
向1L玻璃反应瓶中加入10g 1-氟-2-硝基苯、100mL N,N-二甲基甲酰胺、5.4g2-丙硫醇以及25g碳酸钾。反应升温至100℃，搅拌16～20小时。反应液冷却至室温，加入水，乙酸乙酯提取，有机相使用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩得到异丙基(2-硝基苯基)硫醚。(13.3g，摩尔收率95.27％)
向反应瓶中加入13g异丙基(2-硝基苯基)硫醚、120mL二氯甲烷，25.7g间氯过氧苯甲酸在室温下，分批加入反应液中。加完后，反应液在室温下搅拌16～20小时。过滤反应液，滤液浓缩得到粗品。粗品经柱层析分离得到1-(异丙基磺酰基)-2-硝基苯。(10.7g，摩尔收率70.5％)
向氢化釜中加入10.3g 1-(异丙基磺酰基)-2-硝基苯、125mL甲醇以及1g 10％钯碳。釜内使用真空及0.5MPa氢气置换三次，保持反应压力0.5MPa，温度30℃，反应6小时。反应液经硅藻土过滤，浓缩得到所得2-(异丙基磺酰基)苯胺。(9.0g，摩尔收率100％)
向反应瓶中加入9g 2-(异丙基磺酰基)苯胺、90mL N,N-二甲基甲酰胺。反应液冷却至0～5℃，2.2g钠氢分批加入反应液中，加完搅拌15分钟。控制温度0～5℃，9.9g 2,4,5-三氯嘧啶滴加至反应液中，滴完升至室温搅拌16～20小时。反应液用冰水淬灭，乙酸乙酯提取，有机相浓缩得到粗品。粗品使用柱层析分离得到化合物3。(5.1g，摩尔收率32.7％)。
产品经检测确证为化合物3。
对比例：本发明与专利WO2011140338A1对于化合物3的制备比对：
*注：氧化步骤中使用间氯过氧苯甲酸作为氧化剂；氢化还原步骤使用贵金属催化剂钯碳；最后取代步骤使用钠氢，且收率较低。
实施例9：5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺二盐酸盐(化合物4的制备)
向500L搪瓷反应釜中加入80.6kg的异丙醇、12.4kg实施例1所得的化合物1-二盐酸盐和14.7kg实施例6所得的化合物3，加热至回流，反应24小时。反应液降温至10℃，搅拌3小时，过滤。将过滤所得湿品加入搪瓷反应釜中，加入99.2kg的异丙醇和13.0kg的纯化水，回流搅拌至固体溶清。控制温度不低于85℃，滴加入99.2kg的异丙醇。缓慢降温至20℃，搅拌2小时，过滤。将过滤所得湿品再次加入搪瓷反应釜中，加入99.2kg的异丙醇和13.0kg的纯化水，回流搅拌至固体溶清。控制温度不低于85℃，滴加入99.2kg的异丙醇。缓慢降温至20℃，搅拌2小时，过滤，异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到16.4kg黄色固体(化合物4，色瑞替尼二盐酸盐)，收率67％，纯度99.9％。
产品经检测确证为5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺二盐酸盐(化合物4)。
m/z(+ESI)＝558.0[M+H]+,279.7[M/2+H]+。
实施例10 化合物4的制备
向1L玻璃反应瓶中加入325g的异丙醇、50g实施例1所得的化合物1-二盐酸盐和70g实施例6所得的化合物3，加热至65℃，反应36小时。反应液降温至10℃，搅拌3小时，过滤。将过滤所得湿品加入玻璃反应瓶中，加入399.8g的异丙醇和52.4g的纯化水，回流搅拌至固体溶清。控制温度不低于85℃，滴加入399.8g的异丙醇。缓慢降温至20℃，搅拌2小时，过滤。将过滤所得湿品再次加入玻璃反应瓶中，加入399.8g的异丙醇和52.4g的纯化水，回流搅拌至固体溶清。控制温度不低于85℃，滴加入399.8g的异丙醇。缓慢降温至20℃，搅拌2小时，过滤，异丙醇淋洗。将过滤所得湿品于55℃真空干燥16小时，得到60.2g黄色固体(化合物4，色瑞替尼二盐酸盐)，收率61％，纯度99.7％。
产品经检测确证为化合物4。
实施例11：5-氯-N2-(2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基)苯基)-N4-(2-(异丙基磺酰基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(色瑞替尼的制备)
向500L搪瓷反应釜中加入16.4kg实施例9所得的化合物4和167.0kg的纯化水，室温下搅拌至溶清。再加入196.8kg无水乙醇。氮气保护下，反应加热至50℃。将事先配好的2.3kg氢氧化钠和83.6kg纯化水的水溶液滴加至反应液中。滴完，反应液缓慢降温至20℃，搅拌2小时。过滤，用事先配好的13.0kg无水乙醇和18.0kg纯化水的混合溶液淋洗湿品。将过滤所得湿品于50～55℃真空干燥16小时，出烘得13.0kg类白色固体成品色瑞替尼。收率90％，纯度99.8％。
产物经检测确证为色瑞替尼。
1H-NMR(CD3Cl):1.32(6H,d)；1.37(6H,d)；1.62(3H,qd)；1.75(2H,d)；2.17(3H,s)；2.77(3H,m)；3.20(2H,d)；3.27(1H,m)；4.55(1H,m)；6.79(1H,s)；7.26(1H,t)；7.54(1H,s)；7.62(1H,t)；7.93(1H,dd)；7.99(1H,s)；8.11(1H,s)；8.53(1H,d)；9.50(1H,s)。m/z(+ESI)＝558.0[M+H]+,279.7[M/2+H]+。
实施例12：色瑞替尼的制备
向2L玻璃反应瓶中加入50g实施例9所得的化合物4和509g的纯化水，室温下搅拌至溶清。再加入600.2g无水乙醇。氮气保护下，控制温度25℃。将事先配好的9.0g氢氧化钠和255g纯化水的水溶液滴加至反应液中。滴完，反应液缓慢降温至20℃，搅拌2小时。过滤，用事先配好的39.7g无水乙醇和54.9g纯化水的混合溶液淋洗湿品。将过滤所得湿品于50～55℃真空干燥16小时，出烘得37g类白色固体成品色瑞替尼。收率84％，纯度99.5％。
产物经检测确证为色瑞替尼。