本发明属于医药技术领域，涉及一种新型乌苯美司重结晶方法。
背景技术：
乌苯美司是从链霉菌属(Streptomycesofivorecticuli)的培养液中分离所得的化合物，可竞争性地抑制氨肽酶B(aminopeptidaseN/CD13)及亮氨酸肽酶(Leucineamino-Peptidase)。乌苯美司能够增强T细胞的功能，使NK细胞的杀伤活力增强，且可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓细胞的再生及分化。本品能干扰肿瘤细胞的代谢，抑制肿瘤细胞增生，使肿瘤细胞凋亡，并激活人体细胞免疫功能，刺激细胞因子的生成和分泌，促进抗肿瘤效应细胞的产生和增殖，用于抗癌化疗、放疗的辅助治疗，老年性免疫功能缺陷等。可配合化疗、放疗及联合应用于白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合症及造血干细胞移植后，以及其它实体瘤患者。
现有乌苯美司粗品重结晶工艺是将乌苯美司粗品溶于稀盐酸(pH约等于0)中，再向乌苯美司的盐酸盐水溶液中滴加碱溶液调节pH，使乌苯美司析出。该方法使用单向滴加的结晶方式，在体系PH在2～4时，会生成分子间聚合物，会产生瞬间结块的现象，如果浓度较大结块会导致搅拌器无法运转，使生产无法继续，同时也容易损坏搅拌器电机，此时需加入大量的纯化水将结块化开,才能继续生产，这样就会降低收率。
同时中国专利CN103360277A还公开了一种乌苯美司重结晶的方法，是将乌苯美司盐酸盐溶液和碱溶液同时滴加至重结晶容器中，控制滴加速度使体系的pH值保持在3-6之间，然后析晶过滤制得乌苯美司精制品，采用该方法虽然一定程度上提高了乌苯美司的纯度，但依然存在部分结块的问题，影响生产进程，且其整体收率未达到生产要求，有待进一步地深入研究。
技术实现要素：
本发明为解决现有技术中的上述问题，提供一种新型乌苯美司重结晶方法，该方法使用原料酸溶液与碱夜双向同时滴加的方式并精准控制PH，避免了原双向滴加方式中产生物料结块的问题。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
本发明提供一种新型乌苯美司重结晶方法，包括以下步骤：
(1)在PH值为7的磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液中，加入乌苯美司粗品，搅拌，加热至温度为55-65℃，滴加浓度为16-20％的盐酸溶液至乌苯美司粗品完全溶解，过滤，得乌苯美司盐酸溶液；
(2)在冰水浴控制体系温度在4℃以下的纯化水中，同时滴加乌苯美司盐酸溶液和浓度为3-7％的氨水，控制两种溶液的滴加速度，使反应体系的PH值保持在5-7，乌苯美司盐酸溶液滴加完毕后，搅拌析晶10-24h，过滤；
(3)采用纯化水对过滤后的滤饼进行洗涤，抽滤，于温度35-45℃下减压干燥至恒重，制得乌苯美司精品。
进一步地，所述步骤(1)中磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液的用量是乌苯美司粗品质量的2-5倍。
进一步地，所述步骤(1)中所述温度为60℃。
进一步地，所述步骤(1)中盐酸溶液的浓度为18.5％。
进一步地，所述步骤(2)中氨水的浓度为5％。
进一步地，所述步骤(3)干燥温度为40℃。
进一步地，所述步骤(1)中还加入乌苯美司粗品质量0.5-1.5％的蔗糖。
进一步地，所述步骤(1)中还加入乌苯美司粗品质量0.1-0.5％的氯化钠或氯化钾。在提纯过程中加入NaCl或蔗糖能够有效减少结块现象的产生。
本发明的还提供了另一种采用有机溶剂对乌苯美司粗品重结晶方法，将乌苯美司粗品或上述采用双向滴加重结晶后的乌苯美司精品加入甲醇和乙酸乙酯或甲苯的混合溶液中，加热挥发甲醇，乌苯美司结晶析出，过滤，干燥，得高纯度的乌苯美司精品。该方法可用在对上述第一种结晶的乌苯美司结晶做进一步提纯，也可以单独对乌苯美司粗品进行结晶提纯。
进一步地，所述乌苯美司粗品在混合溶液的质量分数为,15-30％，优选的为 25％。所述甲醇或乙醇在混合溶液的质量分数为40-60％，优选的为50％。所述加热挥发的温度45-60℃；搅拌转速为40-50rpm，时间为0.5-1小时。所述干燥采用真空鼓风干燥，温度为60-65℃，干燥时间为0.5-1小时。
进一步地，所述乌苯美司粗品采用以下步骤制备：
在20L三口烧瓶中依次加入369g(2S,3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基-丁酸、569g 4，6-二甲基嘧啶基-2-硫代甲酸苄酯、1.79L四氢呋喃、7.09L水和288g三乙胺，搅拌下室温反应3h。反应完毕，减压蒸干，水洗，用12L乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥、过滤。减压蒸去部分溶剂，加入2L石油醚，搅拌低温析晶，过滤。滤饼45℃减压干燥，得产物535g(I)(2S,3R)-4-苯基-3-苄氧甲酰胺基-2-羟基-丁酸。
将530g化合物(I)、697g亮氨酸苄酯对甲苯磺酸盐、257g 1-羟基苯并三唑、395g二环己基碳二亚胺和5.3L四氢呋喃依次投入反应容器，搅拌并冷却至0℃，滴加178g三乙胺，滴加完毕后于室温搅拌反应24小时。反应完毕，过滤，收集滤液，减压蒸干。加入13.5L乙酸乙酯溶解残留物，水洗，经无水硫酸钠干燥后减压蒸去部分溶剂，加入2L石油醚搅拌析晶。过滤，滤饼45℃减压干燥，得产物825g(II)N-[(2S,3R)-4-苯基-3-苄氧甲酰胺基-2-羟基-丁酰]-L-亮氨酸苄酯。
将上述产物(II)在Pa的作用下进一步反应生成N-[(2S,3R)-4-苯基-3-氨基-2-羟基丁酰]-L-亮氨酸，得乌苯美司粗品。
本发明采用上述技术方案，与现有技术相比，具有如下技术效果：
本发明方法使用乌苯美司酸溶液与碱夜双向同时滴加的方式控制PH，使用PH缓冲液作为分散体系，使PH控制更加精准，避免了现有技术中容易产生结块的问题，生产过程更加容易控制，质量更加稳定；提高了产品纯度，也增加了产率，减少氨水及盐酸的使用量，在降低成本的同时也减少了三废的产生，更加环保。
具体实施方式
本发明提供了一种新型乌苯美司重结晶方法。
下面通过具体实施例对本发明进行详细和具体的介绍，以使更好的理解本发 明，但是下述实施例并不限制本发明范围。
实施例1
(1)在三口烧瓶中加入1000mlPH值为7的磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液，加入乌苯美司粗品350g，搅拌，加热至温度为60℃，滴加18.5％的盐酸溶液102ml，粗品完全溶解，过滤，得乌苯美司盐酸溶液；
(2)另取三口烧瓶加入2000ml纯化水，冰水浴控制体系温度在4℃以下，同时滴加乌苯美司盐酸溶液和5％的氨水，控制两种溶液的滴加速度，使反应体系的PH值保持在5-7，乌苯美司盐酸溶液滴加完毕，氨水滴加量为74ml，搅拌析晶15h，过滤，得滤饼；
(3)滤饼采用少量纯化水对过滤后的滤饼进行洗涤，抽滤，于温度40℃下减压干燥至恒重。
实施例2
(1)在三口烧瓶中加入1000mlPH值为7的磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液，加入乌苯美司粗品350g，并加入1.7g氯化钠固体，搅拌，加热至温度为60℃，滴加18.5％的盐酸溶液96ml，粗品完全溶解，过滤，得乌苯美司盐酸溶液；
(2)另取三口烧瓶加入2000ml纯化水，冰水浴控制体系温度在4℃以下，同时滴加乌苯美司盐酸溶液和5％的氨水，控制两种溶液的滴加速度，使反应体系的PH值保持在5-7，乌苯美司盐酸溶液滴加完毕，氨水滴加量为77ml，搅拌析晶15h，过滤，得滤饼；
(3)滤饼采用少量纯化水对过滤后的滤饼进行洗涤，抽滤，于温度40℃下减压干燥至恒重。
实施例3
(1)在三口烧瓶中加入1000mlPH值为7的磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲液，加入乌苯美司粗品350g，并加入3.5g蔗糖，搅拌，加热至温度为60℃，滴加18.5％的盐酸溶液80ml，粗品完全溶解，过滤，得乌苯美司盐酸溶液；
(2)另取三口烧瓶加入2000ml纯化水，冰水浴控制体系温度在4℃以下，同时滴加乌苯美司盐酸溶液和5％的氨水，控制两种溶液的滴加速度，使反应体系的PH值保持在5-7，乌苯美司盐酸溶液滴加完毕，氨水滴加量为61ml，搅拌析晶15h，过滤，得滤饼；
(3)滤饼采用少量纯化水对过滤后的滤饼进行洗涤，抽滤，于温度40℃下减压干燥至恒重。
对比例 采用中国专利公开号为CN103360277A的方法，对乌苯美司粗品进行重结晶，对比例1-3。
具体方法：在三口烧瓶中加入1000ml纯化水，开启搅拌，加入乌本美司粗品350g，加热至60±2℃，滴加盐酸(18.5％)至粗品溶解，过滤，得到乌苯美司盐酸溶液。另取三口烧瓶加入2000ml纯化水，开启搅拌，冰水浴控制体系温度在0℃左右，同时滴加乌苯美司盐酸溶液和氨水(4％)，控制两种溶液的滴加速度，使反应体系的pH值保持在3-4左右。待酸液滴加完毕后，用氨水(1％)微调pH＝5-6，析晶24h后进行过滤，得乌苯美司产品。
采用上述方法分别进行三组对比例1-3，其实验结果与实施例1-3对比分析以及检测结果如下表：
总结：从上述对比例与本发明实施例的数据汇总表中可以看出，同样是350g 粗品投料，新工艺的盐酸及氨水用量大幅少于老工艺，总收率有大约10个百分点的提高，有关物质及含量没有明显差异，都符合标准，且在提纯过程中加入NaCl或蔗糖能够有效减少结块现象的产生，提高了总收率。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。