一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法与流程

文档序号:12742674阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:该方法按以下步骤进行:

一、原料制备

取干植物,除掉植物中的杂质与灰尘并烘干,然后将烘干后的植物粉碎至粒度为60~120目颗粒原料备用;

或取新鲜植物,除掉植物中的杂质与灰尘,粉碎匀浆后,离心过滤得到上清液原料备用;

二、冰球的制备

在硅胶冰格的每个冰孔位置放置玻璃球,向冰孔注蒸馏水,然后置于-18℃的冰箱中冷冻,得到冰球;

三、冰结构蛋白提取液的制备

将步骤一制备的颗粒原料与磷酸盐缓冲溶液按料液比为1g:(5~30mL)混合得到混合液,或将步骤一制备的上清液原料与磷酸盐缓冲溶液按料液比为1mL:(5~30mL)混合得到混合液;

将得到的混合液置于室温下,进行搅拌提取0.5~3.0h,然后将提取液置于离心机中,在离心机中离心10~15min得到上清液;

四、冰法提取

向上清液加入冰球,置于-18℃冰箱中,提取2~5min,此时冰球吸附冰结构蛋白达到饱和,滤出冰球,冰球自然融化后,取出其中的玻璃球,得到冰结构蛋白提取液,滤出冰球后得到剩余的上清液;

五、冰结构蛋白的复提

向剩余的上清液中加入步骤二制备的冰球,重复步骤四2~4次,收集每次提取得到的冰结构蛋白溶液,即完成。

2.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤一所述粉碎匀浆的步骤为:将新鲜植物切成0.5cm方块,利用组织匀浆机,在匀浆机中以10000~16000r/min条件下,匀浆时间为10s/次,匀浆间隙30s,连续匀浆3~5次。

3.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤一所述离心过滤的步骤为:用200目滤布挤出匀浆产物得到滤液,并于4000~6000r/min条件下离心8~15min,得到上清液,覆盖保鲜膜,防止氧化。

4.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤一所述植物为苜蓿、冬黑麦、冬小麦、胡萝卜、沙冬青或欧白英。

5.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤二所述玻璃球的直径为1cm;所述得到的冰球的直径为2cm;所述硅胶冰格为耐温为-40℃的硅胶冰格,硅胶冰格为板状,长为24cm,宽为7.3cm,板上设置有10×2个球形冰孔,每个冰孔的内径为2cm。

6.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤三所述磷酸盐缓冲溶液的pH为6.0~8.5,磷酸根浓度为10~150mmol/L。

7.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤三所述搅拌提取时采用磁力搅拌器,磁力搅拌器的转速为800~1000r/min。

8.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤三所述离心时离心机的转速为8000~10000r/min。

9.根据权利要求1所述的一种冰法提取植物冰结构蛋白的方法,其特征在于:步骤四所述加入上清液的冰球量为每100mL上清液10~50个冰球。

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