一种人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测方法及试剂盒与流程

文档序号:11126218阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒,其特征在于:所述检测试剂盒包括用于特异性扩增人果糖二磷酸醛缩酶B基因上3个多态性位点的引物对,3个多态性位点分别为A150P、A175D、N335K,所述引物对包括公共上游引物和分型下游引物,所述分型下游引物包括野生型特异引物和突变型特异引物,对应3个多态性位点的公共上游引物、野生型特异引物和突变型特异引物如下表所示:

F代表公共上游引物,W代表野生型特异引物,M代表突变型特异引物。

2.根据如权利要求1所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒,其特征在于:每个公共上游引物的5'端标记有荧光染料。

3.根据如权利要求2所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒,其特征在于:所述荧光染料是FAM、HEX、TAMRA、ROX、Cy3、Cy5、JOE、VIC、PET中的一种或多种。

4.根据如权利要求1所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒,其特征在于:还包括对照基因序列,所述对照基因序列包括正常序列和突变序列。

5.根据如权利要求4所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒,其特征在于:还包括PCR缓冲液、热启动Taq酶、超纯水、荧光分子量内标和等位基因分型标准物。

6.一种人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测方法,其特征在于:使用如权利要求1~5任一项所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测试剂盒对样品中人果糖二磷酸醛缩酶B基因的3个多态性位点的扩增采用聚合酶链式反应,其扩增产物的检测采用高效液相色谱、多重荧光毛细管电泳或聚丙烯酰氨凝胶电泳。

7.根据权利要求6所述的人果糖二磷酸醛缩酶B基因检测方法,其特征在于:聚合酶链式反应的扩增程序为:95℃2分钟;94℃30秒、60℃30秒、72℃30秒,共10个循环;94℃30秒、59℃30秒、72℃30秒,共18个循环;72℃10分钟。

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