1.一种检测棉花植株对黄萎病菌抗性的方法,其特征在于,该方法包括:
(1)将待测棉花植株的种子用浸种液浸泡;所述浸种液是将死于黄萎病的棉花植株的组织粉碎,用水浸泡,过滤得到的菌悬液;
(2)将浸泡后的种子种植于病圃中;所述病圃是将死于黄萎病的棉花植株的组织粉碎掺入土壤之后构建的;
(3)选择能够在病圃中存活的棉花植株作为初筛棉花植株;
(4)分别使用第一引物对和第二引物对初筛棉花植株的基因组DNA进行PCR扩增,得到第一扩增产物和第二扩增产物;所述第一引物对包括如SEQ ID NO:1所示的第一上游引物和如SEQ ID NO:2所示的第一下游引物,所述第二引物对包括如SEQ ID NO:3所示的第二上游引物和如SEQ ID NO:4所示的第二下游引物;
如果所述第一扩增产物中具有SEQ ID NO:5所示的核酸且所述第二扩增产物中具有SEQ ID NO:6所示的核酸,则指示待测棉花植株为抗黄萎病植株。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,如果所述第一扩增产物中具有SEQ ID NO:7所示的核酸且所述第二扩增产物中具有SEQ ID NO:8所示的核酸,则指示待测棉花植株为黄萎病易感植株。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述PCR扩增的条件包括:变性温度为93.5-94.5℃;退火温度为54.5-55.5℃。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述PCR扩增的条件还包括:PCR循环数为28-32轮。
5.根据权利要求1或2所述的方法,其中,制备浸种液时,相对于每重量份的死于黄萎病的棉花植株的组织,水的用量为4-6重量份。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,用浸种液浸泡种子时,相对于每重量份的种子,浸种液的用量为1-3重量份;用浸种液浸泡种子的时间为5-8小时。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其中,构建病圃时,相对于每平方米的土壤,死于黄萎病的棉花植株的组织的掺入量为1-5kg。
8.一种引物对,其中,该引物对包括第一引物对和第二引物对,所述第一引物对包括如SEQ ID NO:1所示的第一上游引物和如SEQ ID NO:2所示的第一下游引物,所述第二引物对包括如SEQ ID NO:3所示的第二上游引物和如SEQ ID NO:4所示的第二下游引物。
9.一种检测棉花植株对黄萎病菌抗性的试剂盒,其中,该试剂盒含有PCR试剂和权利要求8所述的引物对。
10.一种分子标记,其中,该分子标记包括抗病分子标记核酸和感病分子标记核酸,所述抗病分子标记核酸包括如SEQ ID NO:5所示的左侧抗病位点核酸和SEQ ID NO:6所示的右侧抗病位点核酸;所述感病分子标记核酸包括如SEQ ID NO:7所示的左侧抗病位点核酸和SEQ ID NO:8所示的右侧抗病位点核酸。