一种提高绒促性素效价的方法与流程

文档序号:11095840阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种绒促性素纯化方法,采用三次层析进行纯化,所述三次层析依次为亲和层析、疏水层析和离子交换层析,最终得到高纯度绒促性素固体。

2.根据权利要求1所述的绒促性素纯化方法,其特征在于:所述亲和层析的填料为 capto blue(high sub)、所述疏水层析的填料为Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)、所述离子交换层析的填料为DEAE Sepharose Fast Flow。

3.根据权利要求2所述的绒促性素纯化方法,其特征在于:包括以下各步骤:

(1)预处理:绒促性素粗品溶于溶解液中,再加入乙醇溶液至混合溶液中存在低浓度乙醇后沉淀、取上清液,所述上清液再加入乙醇溶液至混合溶液中存在高浓度乙醇,取沉淀得固体;

(2)第一步层析:步骤(1)得到的固体进行capto blue(high sub)亲和层析得蛋白溶液A;

(3)第二步层析:步骤(2)得到的蛋白溶液A经Phenyl Sepharose 6 Fast Flow(high sub)疏水层析得蛋白溶液B;

(4)第三步层析:将步骤(3)得到的蛋白溶液B经DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析得蛋白溶液C;

(5)后处理:步骤(4)得到的蛋白溶液C加乙醇溶液至混合溶液中存在高浓度乙醇,沉淀后收集固体,即得绒促性素固体。

4.根据权利要求3所述的绒促性素纯化方法,其特征在于:步骤(1)预处理:绒促性素粗品溶于溶解液中,加浓度为100%乙醇至混合溶液中乙醇浓度为45-55%,搅拌、沉淀后取上清液,所述上清液加浓度为100%乙醇至混合溶液中乙醇浓度为80-90%,取沉淀,离心,常温减压干燥,得固体。

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