1.一种基于镁试剂I的LAMP可视化检测方法,其特征在于,包括:
A.提取检测目标基因组DNA作为模板;
B.制备基于镁试剂I的LAMP可视化检测反应体系,所述反应体系包括:Bst DNA聚合酶缓冲液、Bst DNA聚合酶、甜菜碱、镁离子、dNTP Mix、LAMP引物以及DNA模板;
C.对B步骤获取的反应体系进行扩增,扩增结束后加入镁试剂I溶液,根据试管颜色变化,获取检测结果。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述镁试剂I溶液是由0.4-0.6mol/L的NaOH配制而成。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中镁试剂I溶液的浓度为0.1-0.4mmol/L。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中镁离子的浓度为3.0-10.0mmol/L。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中Bst DNA聚合酶用量为每25μL体系中含6-8U。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中甜菜碱浓度为8-12mmol/L。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中dNTP Mix浓度为1.2-1.6mmol/L。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中每25μL体系中含DNA模板1-2μL。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应体系中LAMP引物包含外引物(F3和B3)、内引物(FIP和BIP)、环引物(LF和LB),各引物浓度和比例如下:外引物(F3和B3)的浓度为0.1-0.3μM/L,内引物(FIP和BIP)的浓度为1.2-1.8μM/L,环引物(LF和LB)的浓度为0.2-0.6μM/L;外引物(F3和B3)、内引物(FIP和BIP)、环引物(LF和LB)的摩尔比为:1∶8∶2。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,扩增条件为在61-65℃下反应15-60分钟,并在80℃反应2-3分钟。根据颜色变化判断结果;其中,黄色表示阴性,紫红色表示阳性。