一种达沙替尼N-6无水晶型的制备方法与流程

本发明涉及一种达沙替尼n-6无水晶型的制备方法、其药物组合物，以及其在制备治疗肿瘤疾病的药物中的应用。

背景技术：

蛋白质络氨酸激酶(ptk)作为一类催化atp上γ-磷酸转移到蛋白酪氨酸残基上的激酶，是细胞信号传导的调控(包括细胞增殖和细胞分化)的关键因素，其与作为底物的atp共同作用，将肽和蛋白质中的酪氨酸残基磷酸化。ptk特别还包括受体酪氨酸激酶(rptk)和非受体酪氨酸激酶。其中，rptk主要由表皮生长因子激酶家族(例如her1和her2)、血小板衍生生长因子(pdgf)和在血管形成中起作用的激酶(tie-2hekdr)组成；非受体酪氨酸激酶包括syk、jak和src家族。许多恶性和非恶性增生性疾病都显示出ptk活性增强现象。该酶同时在免疫系统的细胞调控中起到关键作用。

蛋白质络氨酸激酶(ptk)抑制剂可通过抑制src家族激酶，例如lck、fyn、lyn、src、yes、hck、fgr和blk，治疗免疫学和肿瘤学疾病。其中，lck抑制剂可阻断t细胞活化，治疗t细胞介导的疾病(如自身免疫性疾病)。ptk抑制剂还可通过抑制rptk，可用于治疗增生性疾病，例如牛皮癣和癌症。此外，ptk抑制剂抑制her1和其他受体激酶的能力还使其可作为抗血管形成剂用于治疗糖尿病视网膜病等病症。

达沙替尼(dasatinib)是由百时美施贵宝公司研发并于2006年2月在美国上市的一种ptk抑制剂，其包括src激酶和bcr/abl抑制剂，并也称作src/abl抑制剂，临床用于肿瘤疾病的治疗。该药化学名为n-(2-氯-6-甲基苯基)-2-[[6-[4-(2-羟乙基)-1-哌嗪基]-2-甲基-4-嘧啶基]氨基]-5-噻唑甲酰胺，式(ⅰ)为其结构式。

根据现有文献显示，达沙替尼存在一水合物h1-7晶型、正丁醇溶剂合物bu-2晶型、乙醇溶剂合物e2-1晶型、n-6无水晶型和t1n1-7晶型等。我们知道，通过药物的多晶型研究，可不同程度地影响药物的稳定性、生物利用度、溶出度等特性，因此，在药物研发中，会全面考虑药物的多晶型问题。

在现有技术报道的对达沙替尼n-6无水晶型的制备过程中，存在如下几个方面的不足：1、由于达沙替尼的溶解度较差，在水、醇类等有机溶剂中为微溶或几乎不溶状态，在加热条件下需加入大量溶剂使之完全溶解，因此，如选择溶解达沙替尼后析晶的方法制备达沙替尼的晶型，需消耗大量有机溶剂并产生大量难于处理的有机废液，给环境保护带来巨大压力；2、制备过程操作繁杂，需要多次阶段性控温和趁热操作，不利于工业生产操作；3、现有制备方法中普遍采用了含水溶剂，在实际操作中存在使n-6无水晶型转晶，成为h1-7晶型的风险；4、现有制备方法在生产过程中难以有效的兼顾产品收率和纯度，单个杂质含量很难达到0.1％以下，且基本没有提及产品的质量、稳定性等方面的影响。

对于药物本身或者药物的多晶型而言，不同的多晶型产品具有不同的稳定性、物理性质、溶解度等；对于同一种晶型产品，其产品的纯度、最大单杂的含量等方面，同样直接影响原料药和制剂的稳定性和生物利用度等。

因此，开发一种高效制备达沙替尼n-6无水晶型的工艺方法，以提高达沙替尼药物n-6无水晶型的纯度、稳定性，提高其生物利用度，使其成为具有优良品质的药物具有非常重要的意义。

技术实现要素：

针对现有技术的上述问题，本发明的目的之一是提供一种达沙替尼n-6无水晶型的制备方法。

本发明提供一种达沙替尼n-6无水晶型的制备方法，包括如下步骤：将达沙替尼加入乙腈中，得到混浊液；加热搅拌浆洗混浊液；降温，过滤，干燥。

作为本发明的一种实施方案，达沙替尼与乙腈的质量体积比(克/毫升)为1:2-1:9。

作为本发明的一种实施方案，达沙替尼与乙腈的质量体积比(克/毫升)为1:6-1:9。

若乙腈加入量过少，浆洗混浊液不易搅拌均匀，晶型转化不完全，存在杂晶；乙腈加入量过多，影响达沙替尼n-6无水晶型的收率，且浪费试剂，增加成本。

作为本发明的一种实施方案，浆洗温度为50℃-85℃。

作为本发明的一种实施方案，浆洗温度为70℃-85℃。

作为本发明的另一种实施方案，浆洗温度为78℃-85℃。

浆洗温度若低于50℃，达沙替尼的晶型转化不完全，存在杂晶；反之，若浆洗温度过高，远超过乙腈沸点，纯化效果无明显提高，存在原料和产物降解的风险且浪费能源。

作为本发明的一种实施方案，浆洗时间为15分钟-5小时。

作为本发明的一种实施方案，浆洗时间为40分钟-4小时。

作为本发明的一种实施方案，浆洗时间为1小时-3小时。

浆洗时间若低于15分钟，达沙替尼的晶型转化不完全，杂晶含量高。若浆洗时间过长，达沙替尼降解，杂质增加。

作为本发明的一种实施方案，所述降温为自然冷却降温。

作为本发明的一种实施方案，降温至20℃-40℃。

作为本发明的一种实施方案，降温至20℃-30℃。

作为本发明的一种实施方案，所述干燥操作可以为鼓风干燥、真空干燥、自然晾干的一种或几种。

作为本发明的一种实施方案，干燥温度为20℃-50℃。

作为本发明的一种实施方案，干燥温度为25℃-35℃。

干燥温度过高，易导致达沙替尼降解，杂质含量增加；本发明选用的干燥温度节约能源、操作方便。

作为本发明的一种实施方案，干燥时间为5-24小时。

作为本发明的一种实施方案，干燥时间为5-12小时。

应当指出，本发明达沙替尼n-6无水晶型的制备过程中始终无澄清液生成，均为达沙替尼固体悬浮液状态。

本发明所述浆洗混浊液，即为达沙替尼固体悬浮液。

应当指出，本发明制备n-6无水晶型的方法中，使用的达沙替尼原料药为达沙替尼化合物、达沙替尼溶剂合物、达沙替尼水合物、达沙替尼无定形形式的一种或几种。

本发明所述的达沙替尼溶剂合物为正丁醇合物，所述达沙替尼水合物为一水合物，所述达沙替尼无定形形式为上述达沙替尼化合物、达沙替尼溶剂合物、达沙替尼水合物的无定形形式。

本发明的达沙替尼n-6无水晶型制备工艺简单，无需过多的过程控制，便于工业生产。

本发明通过对有机溶剂的巧妙选择和工艺过程技巧的控制，制备得到了收率和纯度都非常优良的达沙替尼n-6无水晶型，克服了现有技术中使用甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二氯甲烷、丙酮、异丙醚等有机溶剂难溶，而需添加大量有机溶剂使之溶解的缺陷；也避免了现有技术中不得不添加相对溶解性较好的高沸点溶剂(如二甲亚砜、n,n-二甲基甲酰胺等)导致溶剂体系复杂，晶型质量难以控制的不足。

本发明的目的之二是提供以上述方法制备得到的达沙替尼n-6无水晶型。

本发明所述的达沙替尼n-6无水晶型，其xrpd图谱的代表性峰值为下列2θ值：6.8±0.2，11.1±0.2，12.3±0.2，13.2±0.2，13.7±0.2，16.7±0.2，21.0±0.2，24.3±0.2，和24.8±0.2。

本发明所述的达沙替尼n-6无水晶型是由上述达沙替尼原料药根据本发明所述方法制备得到。

本发明的目的之三是提供一种包含达沙替尼及药学上可接受的辅料的药物组合物，所述达沙替尼为上述制备方法制备，具有达沙替尼n-6无水晶型。

本发明所述的“药学上可接受的辅料”包括乳糖一水合物、微晶纤维素、羟丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁。

本发明的目的之四是提供一种含有上述制备方法制备得到的达沙替尼n-6无水晶型的药物组合物用于制备治疗肿瘤疾病的药物中的用途。

本发明所述的一种含有上述制备方法制备得到的达沙替尼n-6无水晶型的药物组合物治疗肿瘤疾病的用途，其中所述的肿瘤疾病选自慢性髓细胞性白血病(cml)、胃肠道间质瘤(gist)、急性髓性白血病(aml)、肥大细胞增殖病、生殖细胞瘤、小细胞肺癌(sclc)、黑素瘤、胰腺癌、前列腺癌或小儿肉瘤。

在医药产品的制备纯化领域，产品的纯度以及其中单杂的含量都极大的影响着最终医药产品的应用质量。由于化学制备纯化方法的特点，通常情况下，经过优化制备方法以及反应条件，医药产品化合物在达到一定的纯度基础上，进一步去除或降低与产品相关的单杂的含量，再提高产品的纯度到更高的阶段是非常困难的。另一方面，作为用于治疗疾病而施用于人体或其他动物的生命个体，为了降低医药产品中杂质可能产生的毒副作用，医药产品在纯度和含量方面有着极高的要求。所以，在既能满足工业放大生产的需求，又能提高医药产品纯度、减少单杂的含量，并且在不降低收率的基础上，对不同的医药产品的生产制备工艺进行改进并没有规律可循，也没有现成的启示可借鉴。

在医药产品的制备纯化方法的条件优化选择方面，尤其是晶型的制备方法中，溶剂的使用在本领域技术人员的普遍认知是：对于难溶产品化合物选用大极性溶剂，或者质子性溶剂，或者大极性溶剂与质子性溶剂的混合溶剂，使充分溶解后进行降温析晶操作，以得到纯的目标晶型化合物。具体到本发明，达沙替尼溶解度差，在大极性溶剂中溶解度也不很理想。经过大量的实验，发明人创造性的发现采用非大极性的乙腈溶剂进行对达沙替尼n-6无水晶型的制备，在不需要大量的乙腈溶剂，不需要将原料药达沙替尼完全溶解的情况下，筛选控制合适的反应条件，不仅制备得到合格的达沙替尼n-6无水晶型，还进一步降低了达沙替尼n-6无水晶型产品的单杂含量，使产品纯度达到99.9％以上。

本发明的有益效果如下：

1、本发明降低了有机溶剂的用量。相比于现有技术中为使达沙替尼充分溶解得到澄清溶液，而加入质量体积比(g/ml)为1:20-1:40的有机溶剂，本发明达沙替尼与有机溶剂乙腈的质量体积比最多仅需1:9，甚至在1:2的质量体积比例下也可制备得到本发明所述的n-6无水晶型。

2、本发明制备得到的达沙替尼n-6无水晶型具有非常优异的收率和纯度。本发明的达沙替尼n-6无水晶型收率可高达98％，纯度可高达99.9％以上。

3、本发明可有效降低成品晶型中的杂质种类和含量。特别指出，在达沙替尼n-6无水晶型制备过程中，存在着由达沙替尼起始物料中带入的杂质b，该杂质在制备和纯化过程中始终存在，极难除去，而本发明通过结晶工艺的改进，可有效降低该杂质的含量，使其符合药品质量标准的要求。

4、本发明溶剂体系单一，操作方法简便，达沙替尼始终处于固体悬浮液状态，无需过多过程控制。本发明方法仅需简单的加热、冷却、过滤、干燥操作；而现有技术制备n-6无水晶型时，由于达沙替尼原料药溶解度差，需消耗大量有机溶剂使之充分溶解，或添加高沸点溶剂，甚至添加水，不仅造成了溶剂体系复杂，还增加了转晶的风险，且制备过程中需要阶段性控温和趁热操作，为工业生产增加了难度。

综上所述，本发明的制备方法大大减少了有机溶剂的使用，降低了达沙替尼n-6无水晶型生产成本，减少了废液后处理操作和排放；优化制备条件参数后的制备方法降低了杂质的含量，尤其是关键杂质含量降低到现有检测技术未能检出的程度，使达沙替尼n-6无水晶型的收率和纯度进一步提高；而且优化制备条件参数后的制备方法简化了操作步骤，减少过程控制等操作，溶剂和条件安全可行，可实现环保绿色工业化生产，具有广阔的应用前景。

附图说明

图1为实验例1所得的达沙替尼n-6无水晶型的xrpd图谱。

图2为原料达沙替尼正丁醇合物的hplc谱图。

图3为浆洗后达沙替尼n-6无水晶型的hplc谱图。

具体实施方式

下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。

实验例1

取达沙替尼的正丁醇合物(1.5g，2.67mmol)于10ml乙腈中，于82℃加热搅拌浆洗2h。自然冷却降温至20℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，25℃真空干燥即可得到达沙替尼n-6无水晶型1.29g，收率为98.5％。

所得到的化合物的结晶形式可以由图1所示的xrpd表示，或者由样品的代表性峰值表示。所得n-6无水晶型的代表性峰值为下列2θ值：6.8±0.2，11.1±0.2，12.3±0.2，13.2±0.2，13.7±0.2，16.7±0.2，21.0±0.2，24.3±0.2，和24.8±0.2。

实验例2

取达沙替尼的一水合物(1.5g，2.96mmol)于13ml乙腈中，于78℃加热搅拌浆洗3h。自然冷却降温至30℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，40℃真空干燥即可得到达沙替尼n-6无水晶型1.43g，收率为98.8％。所得化合物的晶型谱图与实施例1一致。

实验例3

取达沙替尼的无定形形式(1.5g，3.07mmol)于13ml乙腈中，于70℃加热搅拌浆洗3h。自然冷却降温至25℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，35℃真空干燥即可得到达沙替尼n-6无水晶型1.47g，收率为98.3％。所得化合物的晶型谱图与实施例1一致。

实验例4

取达沙替尼的正丁醇合物(1.5g，2.67mmol)于13.5ml乙腈中，于80℃加热搅拌浆洗15分钟。自然冷却降温至30℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，50℃真空干燥即可得到达沙替尼n-6无水晶型1.29g，收率为98.6％。所得化合物的晶型谱图与实施例1一致。

实验例5

取达沙替尼的一水合物(1.5g，2.96mmol)于3ml乙腈中，于82℃加热搅拌浆洗5小时。自然冷却降温至40℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，35℃真空干燥即可得到达沙替尼n-6无水晶型1.43g，收率为98.5％。所得化合物的晶型谱图与实施例1一致。

试验例1

采用hplc，测试本发明实施例所得达沙替尼n-6无水晶型的有关物质含量。结合浆洗前(如图2)和浆洗后(如图3)的hplc谱图，测试结果如表1所示：

表1：杂质情况

应当指出，实施例1-5所得的达沙替尼n-6无水晶型均可有效除去/降低现有工艺中难以除去的杂质a和杂质b。

由上表数据可知，采用本发明方法，可除去由达沙替尼起始物料引入的杂质a至检测限以下，同时大大降低杂质b的含量，解决了现有技术中，这两种杂质难以除去的缺陷。

对比例1

取达沙替尼的一水合物(15g，29.6mmol)于15ml乙腈中，于78℃加热搅拌浆洗3h。自然冷却降温至30℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，40℃真空干燥即可得到达沙替尼晶型14.5g。

对比例2

取达沙替尼的正丁醇合物(15g，26.7mmol)于100ml乙腈中，于40℃加热搅拌浆洗3h。自然冷却降温至30℃，抽滤，并用乙腈洗涤滤饼，50℃真空干燥即可得到达沙替尼晶型14.2g。

对对比例1和2产品进行检测，结果显示，晶型转换不完全，产物为原料晶型和目标晶型的混合晶型。

综上，本发明制备纯化方法可以有效制备纯化达沙替尼n-6无水晶型，获得高纯度单一晶型的达沙替尼n-6无水晶型产品，而且收率高，工业应用前景良好。