本发明涉及的是海洋水产品生化深加工技术领域，更具体地说是一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺。
背景技术：
乌贼亦称乌贼鱼，乌贼属于海产头足类软体动物，与章鱼和枪乌贼近缘，乌贼分布于世界各大洋，主要生活在热带和温带沿岸浅水海域，冬季常迁至较深海域，乌贼是我国四大海产之一,在生产中占有非常重要的地位。乌贼不仅具有较高的营养价值，而且还富含药用价值，乌贼每百克肉含蛋白质13克，脂肪仅0.7克，同时还含有碳水化合物和维生素A、B族维生素以及钙、磷、铁等人体所必需的各种物质元素，是一种高蛋白低脂肪的滋补食品。科研人员在研究中发现，乌贼的墨囊中含有一种粘多糖，粘多糖是一种含有氮的不均一多糖，是构成细胞间结缔组织的主要成分，它的主要化学组成为糖醛酸和酪氨基己糖交替出现，有时含硫键，研究发现与证实，粘多糖具有多种药理活性，包括抗凝血、降血脂、抗病毒、抗肿瘤及抗放射等作用。如何从乌贼墨囊中提取粘多糖是本领域科研工作的研究方向。
中国专利授权公告号为：CN 103936877B公开的一种从乌贼墨囊中提取粘多糖的方法，采用超微破壁将其制成细粉，降低了加工过程中对产品所含有的营养物质及功效成分的破坏，极大地保留了原有的生物活性成份及功效成分，其粒度小、均匀度好和溶出率高，采用该提取方法，可以提高粘多糖的制得率。但是，该提取工艺在提取过程中先通过中性蛋白酶进行酶解，得到酶解液后需要再通过使用有机溶剂和化学品进行分离、提纯，然后在提取制备后还需要对使用的有机溶剂进行回收，避免其造成环境污染，同时，该提取工艺的粘多糖的纯度还需提高，分子量还需要更加稳定，技术还需进一步地完善。
技术实现要素：
本发明公开的是一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺，其主要目的在于克服现有技术存在的上述不足和缺点，提供一种从乌贼墨囊中提取和制备粘多糖的工艺，它不仅可以有效地提高乌贼墨小分子硫酸粘多糖的提取率，而且所制得的硫酸粘多糖含量纯度更高，分子量更稳定，同时，本工艺不需要使用有机溶剂及化学品，是一种纯天然的提取制备工艺，更加环保无污染。
本发明采用的技术方案如下：
一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺，所述工艺包括以下具体步骤：
（1）原料处理：先将乌贼新鲜或冻鲜的墨囊去杂质、去外囊膜，再使用真空双锥回转式烘干机对墨囊进行烘干处理，然后使用超微粉碎机将烘干好的干燥墨囊进行粉碎处理，得到200目以上的墨囊粉；
（2）一次酶解：将步骤（1）得到的墨囊粉加入到酶解罐中，并按照墨囊粉：水＝1：4的重量比加入水，然后搅拌均匀，得到悬浮液；然后用碱调节PH至8.5～9.5，接着向酶解罐内加入占悬浮液重量百分比为0.3%～0.5%的碱性复合酶，再加入占该碱性复合酶重量1/10的专用稳定剂A，最后升温并控制料液温度在40 ℃～50 ℃，保温搅拌1.5～2小时，得一次酶解液；
（3）二次酶解：将步骤（2）中得到的一次酶解液用酸调节PH至中性6.5～7.5，接着加入占该一次酶解液重量百分比为 0.2%～0.4%的糖苷复合酶进行酶解，再加入占该糖苷复合酶重量1/10的专用催化剂B，先升温并控制料液温度在50℃～60 ℃，保温1.5～2小时，最后升温至90℃～95℃，保温 15 min～20min，得二次酶解液；
（4）分离纯化干燥：将步骤（3）中得到的二次酶解液经过高速离心和超滤膜过滤后，再进行喷雾干燥，得到乌贼墨小分子硫酸粘多糖。
更进一步，所述步骤（2）中的碱性复合酶包括碱性海洋蛋白酶和碱性脂肪酶，两者的重量比例为：1：0.2～0.4。
更进一步，所述碱性海洋蛋白酶和碱性脂肪酶的重量比例为：1：0.3。
更进一步，所述步骤（3）中的糖苷复合酶包括β-葡萄糖苷酶和β-果糖苷酶，两者的重量比为1：0.8～1.0。
更进一步，所述β-葡萄糖苷酶和β-果糖苷酶的重量比为1：0.9。
更进一步，所述步骤（2）中的专用稳定剂A为CaCl。
更进一步，所述步骤（3）中的专用催化剂B为N-乙酰氨基葡萄糖
更进一步，所述乌贼墨小分子硫酸粘多糖的分子量小于等于5000Da。
一种包含有所述权利要求1至8任一所述制备工艺制得的乌贼墨小分子硫酸粘多糖的硫酸粘多糖制品。
通过上述对本发明描述可知，和现有技术相比，本发明的优点在于：
1、本发明的通过创新乌贼墨小分子硫酸粘多糖提取的方法，利用分段复合酶解法提取技术、高速离心和超滤膜过滤方法以及喷雾干燥技术，提高了制备硫酸粘多糖的提取率。
2、本发明在复合酶解过程采用了专用的稳定催化剂技术，提高了硫酸粘多糖的纯度，并使其分子量更加稳定。
3、本发明在提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的全程中未使用化学溶剂，从而避免了溶剂回收及环境污染，节能环保又安全。
具体实施方式
实施例一
一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺，所述工艺包括以下具体步骤：
（1）原料处理：先将乌贼新鲜或冻鲜的墨囊去杂质、去外囊膜，再使用真空双锥回转式烘干机对墨囊进行烘干处理，然后使用超微粉碎机将烘干好的干燥墨囊进行粉碎处理，得到200目以上的墨囊粉；
（2）一次酶解：将步骤（1）得到的墨囊粉加入到酶解罐中，并按照墨囊粉：水＝1：4的重量比加入水，然后搅拌均匀，得到悬浮液；然后用碱调节PH至8.5～9.5，接着向酶解罐内加入占悬浮液重量百分比为0.3%的碱性复合酶，再加入占该碱性复合酶重量1/10的专用稳定剂A，最后升温并控制料液温度在40 ℃～50 ℃，保温搅拌1.5～2小时，得一次酶解液；
（3）二次酶解：将步骤（2）中得到的一次酶解液用酸调节PH至中性6.5～7.5，接着加入占该一次酶解液重量百分比为 0.2%的糖苷复合酶进行酶解，再加入占该糖苷复合酶重量1/10的专用催化剂B，先升温并控制料液温度在50℃～60 ℃，保温1.5～2小时，最后升温至90℃～95℃，保温 15 min～20min，得二次酶解液；
（4）分离纯化干燥：将步骤（3）中得到的二次酶解液经过高速离心和超滤膜过滤后，再进行喷雾干燥，得到乌贼墨小分子硫酸粘多糖。
更进一步，所述步骤（2）中的碱性复合酶包括碱性海洋蛋白酶和碱性脂肪酶，两者的重量比例为：1：0.2。
更进一步，所述步骤（3）中的糖苷复合酶包括β-葡萄糖苷酶和β-果糖苷酶，两者的重量比为1：0.8。
更进一步，所述步骤（2）中的专用稳定剂A为CaCl。
更进一步，所述步骤（3）中的专用催化剂B为N-乙酰氨基葡萄糖
更进一步，所述乌贼墨小分子硫酸粘多糖的分子量小于等于5000Da,外观为黑褐色粉末。
实施例二
一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺，所述工艺包括以下具体步骤：
（1）原料处理：先将乌贼新鲜或冻鲜的墨囊去杂质、去外囊膜，再使用真空双锥回转式烘干机对墨囊进行烘干处理，然后使用超微粉碎机将烘干好的干燥墨囊进行粉碎处理，得到200目以上的墨囊粉；
（2）一次酶解：将步骤（1）得到的墨囊粉加入到酶解罐中，并按照墨囊粉：水＝1：4的重量比加入水，然后搅拌均匀，得到悬浮液；然后用碱调节PH至8.5～9.5，接着向酶解罐内加入占悬浮液重量百分比为0.5%的碱性复合酶，再加入占该碱性复合酶重量1/10的专用稳定剂A，最后升温并控制料液温度在40 ℃～50 ℃，保温搅拌1.5～2小时，得一次酶解液；
（3）二次酶解：将步骤（2）中得到的一次酶解液用酸调节PH至中性6.5～7.5，接着加入占该一次酶解液重量百分比为0.4%的糖苷复合酶进行酶解，再加入占该糖苷复合酶重量1/10的专用催化剂B，先升温并控制料液温度在50℃～60 ℃，保温1.5～2小时，最后升温至90℃～95℃，保温 15 min～20min，得二次酶解液；
（4）分离纯化干燥：将步骤（3）中得到的二次酶解液经过高速离心和超滤膜过滤后，再进行喷雾干燥，得到乌贼墨小分子硫酸粘多糖。
更进一步，所述步骤（2）中的碱性复合酶包括碱性海洋蛋白酶和碱性脂肪酶，两者的重量比例为：1： 0.4。
更进一步，所述步骤（3）中的糖苷复合酶包括β-葡萄糖苷酶和β-果糖苷酶，两者的重量比为1： 1。
更进一步，所述步骤（2）中的专用稳定剂A为CaCl。
更进一步，所述步骤（3）中的专用催化剂B为N-乙酰氨基葡萄糖
更进一步，所述乌贼墨小分子硫酸粘多糖的分子量小于等于5000Da,外观为黑褐色粉末。
实施例三
一种分段复合酶解提取乌贼墨小分子硫酸粘多糖的工艺，所述工艺包括以下具体步骤：
（1）原料处理：先将乌贼新鲜或冻鲜的墨囊去杂质、去外囊膜，再使用真空双锥回转式烘干机对墨囊进行烘干处理，然后使用超微粉碎机将烘干好的干燥墨囊进行粉碎处理，得到200目以上的墨囊粉；
（2）一次酶解：将步骤（1）得到的墨囊粉加入到酶解罐中，并按照墨囊粉：水＝1：4的重量比加入水，然后搅拌均匀，得到悬浮液；然后用碱调节PH至8.5～9.5，接着向酶解罐内加入占悬浮液重量百分比为0.4%的碱性复合酶，再加入占该碱性复合酶重量1/10的专用稳定剂A，最后升温并控制料液温度在40 ℃～50 ℃，保温搅拌1.5～2小时，得一次酶解液；
（3）二次酶解：将步骤（2）中得到的一次酶解液用酸调节PH至中性6.5～7.5，接着加入占该一次酶解液重量百分比为 0.3%的糖苷复合酶进行酶解，再加入占该糖苷复合酶重量1/10的专用催化剂B，先升温并控制料液温度在50℃～60 ℃，保温1.5～2小时，最后升温至90℃～95℃，保温 15 min～20min，得二次酶解液；
（4）分离纯化干燥：将步骤（3）中得到的二次酶解液经过高速离心和超滤膜过滤后，再进行喷雾干燥，得到乌贼墨小分子硫酸粘多糖。
更进一步，所述步骤（2）中的碱性复合酶包括碱性海洋蛋白酶和碱性脂肪酶，两者的重量比例为：1：0.3。
更进一步，所述步骤（3）中的糖苷复合酶包括β-葡萄糖苷酶和β-果糖苷酶，两者的重量比为1：0.9。
更进一步，所述步骤（2）中的专用稳定剂A为CaCl。
更进一步，所述步骤（3）中的专用催化剂B为N-乙酰氨基葡萄糖
更进一步，所述乌贼墨小分子硫酸粘多糖的分子量小于等于5000Da,外观为黑褐色粉末。
本发明不仅可以有效地提高乌贼墨小分子硫酸粘多糖的提取率，而且所制得的硫酸粘多糖含量纯度更高，分子量更稳定，同时，本工艺不需要使用有机溶剂及化学品，是一种纯天然的提取制备工艺，更加环保无污染。
上述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的设计构思并不仅局限于此，凡是利用此构思对本发明进行非实质性地改进，均应该属于侵犯本发明保护范围的行为。