桔梗多糖的提取方法与流程

文档序号:12639672阅读:2600来源:国知局

本发明属于多糖提取技术领域,具体涉及桔梗多糖的提取方法。



背景技术:

桔梗,别名包袱花、铃铛花、僧帽花,是多年生草本植物,茎高30-130厘米,通常无毛,偶密被短毛,不分枝,极少上部分枝。叶全部轮生,部分轮生至全部互生,无柄或有极短的柄,叶片卵形,卵状椭圆形至披针形,叶子卵形或卵状披针形,花暗蓝色或暗紫白色,可作观赏花卉;其根可入药,有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用,中医常用药。

桔梗是我国传统常用中药材,功效具有宣肺、祛痰、利咽、排脓等功能,主治咳嗽痰多、咽喉肿痛等症状。药食两用,需求量较大。桔梗喜光、喜温和湿润凉爽气候。苗期怕强光直晒,须遮荫,成株喜阳光,怕积水。抗干旱,耐严寒,怕风害。适宜在土层深厚、排水良好、土质疏松而含腐殖质的砂质壤土上栽培。

多糖是由糖苷键结合的糖链,至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的单糖组成的多糖称为同多糖,如淀粉、纤维素和糖原;以不同的单糖组成的多糖称为杂多糖,如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是纯粹的化学物质,而是聚合程度不同的物质的混合物。多糖类一般不溶于水,无甜味,不能形成结晶,无还原性和变旋现象。多糖也是糖苷,所以可以水解,在水解过程中,往往产生一系列的中间产物,最终完全水解得到单糖,但现有多糖提取纯度受到限制。



技术实现要素:

为了解决上述的技术问题,本发明提供了得率较高,纯度高的桔梗多糖的提取方法。

本发明桔梗多糖的提取方法是通过下述的技术方案来实现的:

桔梗多糖的提取方法,包括下述的步骤:

选择晒干的桔梗,粉碎后过40-80目筛,得桔梗粉,在桔梗粉中加水并搅拌均匀,桔梗粉与水的重量比例为1:5-10,在水中浸泡8-16小时,纯净水含有0.1~1组的十二烷基二甲基甜菜碱和5~10%的异丙醇,促进蛋白质脱除,从而蛋白含量低,相对的桔梗多糖高纯度,再加入纤维素酶,纤维素酶的添加量为0.5-0.9%、酶解温度45℃、pH值5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h;再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶的加入量为0.3-0.6%,菠萝蛋白酶的加入量为0.3-0.5%,酶解温度45℃、pH值5.5-6.5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h,酶解后在100-105℃下灭酶5-10min,得酶解液;将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩,减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3,得桔梗粗多糖浓缩液;在桔梗粗多糖的浓缩液中加入活性炭,活性炭占桔梗粗多糖浓缩液重量的3-6%,搅拌0.3-0.5h,过滤滤出活性炭;离心10-30 min ,离心转速为4500 rpm,将上清液与沉淀分别收集;取上清液过滤去渣,过滤后得到的滤液在60-70℃下浓缩,浓缩至其浓度为60-70%,浓缩液按1:4比例加入95%乙醇沉淀静置10-30小时、离心10-30 min ,离心转速为4500rpm,收集沉淀并用乙醇反复清洗3-3次,冷冻干燥至水分含量为4-6%后,再在-1-4℃下进行粉碎,得可溶性多糖;

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

优选的,桔梗与水的重量比例为1:9;

优选的,无花果蛋白酶的用量是0.45%;

菠萝蛋白酶的添加量为0.4%。

优选的,桔梗多糖的提取方法,该方法包括下述的步骤:

选择晒干的桔梗,粉碎后过60目筛,得桔梗粉,在桔梗粉中加水并搅拌均匀,桔梗粉与水的重量比例为1:7,在水中浸泡10小时,加入纤维素酶,纤维素酶的添加量为0.8%、酶解温度45℃、pH值5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h;

再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶的加入量为0.45%,菠萝蛋白酶的加入量为0.4%,酶解温度45℃、pH值6.0,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为500W,频率为800MHZ,酶解0.3h,酶解后在100℃下灭酶6min,得酶解液;

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩,减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3,得桔梗粗多糖浓缩液;

在桔梗粗多糖的浓缩液中加入活性炭,所述的活性炭占桔梗粗多糖浓缩液重量的4%,搅拌0.3h,过滤滤出活性炭;离心15 min ,离心转速为4500 rpm,将上清液与沉淀分别收集;取上清液过滤去渣,过滤后得到的滤液在65℃下浓缩,浓缩至其浓度为65%,浓缩液按1:4比例加入95%乙醇沉淀静置10-30小时、离心15 min ,离心转速为4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反复清洗3-3次,冷冻干燥至水分含量为5%后,再在-1-4℃下进行粉碎,得可溶性多糖;

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

本发明的有益效果在于,采用酶作用条件温和,采用各种不同的酶将桔梗中的脂肪、纤维素酶解,同时从桔梗中提取多糖,最大限度的利用桔梗,而且采用本发明的方法得到的多糖,其得率和纯度高。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明,以便本领域的技术人员更了解本发明,但并不因此限制本发明。

以下的检测方法,如无特殊说明,采用苯酚-硫酸法测多糖的含量。

实施例1

桔梗多糖的提取方法,该方法包括下述的步骤:

选择晒干的桔梗,粉碎后过60目筛,得桔梗粉,在桔梗粉中加水并搅拌均匀,桔梗粉与水的重量比例为1:7,在水中浸泡10小时,纯净水含有0.1~1组的十二烷基二甲基甜菜碱和5~10%的异丙醇,促进蛋白质脱除,从而蛋白含量低,相对的桔梗多糖高纯度,再加入纤维素酶,纤维素酶的添加量为0.8%、酶解温度45℃、pH值5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h;

再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶的加入量为0.45%,菠萝蛋白酶的加入量为0.4%,酶解温度45℃、pH值6.0,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为500W,频率为800MHZ,酶解0.3h,酶解后在100℃下灭酶6min,得酶解液;

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩,减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3,得桔梗粗多糖浓缩液;

在桔梗粗多糖的浓缩液中加入活性炭,活性炭占桔梗粗多糖浓缩液重量的4%,搅拌0.3h,过滤滤出活性炭;

离心15 min ,离心转速为4500 rpm,将上清液与沉淀分别收集;

取上清液过滤去渣,过滤后得到的滤液在65℃下浓缩,浓缩至其浓度为65%,浓缩液按1:4比例加入95%乙醇沉淀静置10-30小时、离心15 min ,离心转速为4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反复清洗3-3次,冷冻干燥至水分含量为5%后,再在-1-4℃下进行粉碎,得可溶性多糖;

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率为:36.44%,纯度为94.64%。

实施例2

桔梗多糖的提取方法,该方法包括下述的步骤:

选择晒干的桔梗,粉碎后过40目筛,得桔梗粉,在桔梗粉中加水并搅拌均匀,桔梗粉与水的重量比例为1:5,在水中浸泡8小时,加入纤维素酶,纤维素酶的添加量为0.5%、酶解温度45℃、pH值5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h;

再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶的加入量为0.3%,菠萝蛋白酶的加入量为0.3%,酶解温度45℃、pH值5.5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400W,频率为800MHZ,酶解0.3h,酶解后在100℃下灭酶5min,得酶解液;

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩,减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3,得桔梗粗多糖浓缩液;

在桔梗粗多糖的浓缩液中加入活性炭,活性炭占桔梗粗多糖浓缩液重量的4%,搅拌0.3h,过滤滤出活性炭;离心15 min ,离心转速为4500 rpm,将上清液与沉淀分别收集;

取上清液过滤去渣,过滤后得到的滤液在65℃下浓缩,浓缩至其浓度为65%,浓缩液按1:4比例加入95%乙醇沉淀静置10小时、离心15 min ,离心转速为4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反复清洗3-5次,冷冻干燥至水分含量为5%后,再在-1-4℃下进行粉碎,得可溶性多糖;

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率为:36.11%,纯度为93.15%。

实施例3

桔梗多糖的提取方法,该方法包括下述的步骤:

选择晒干的桔梗,粉碎后过80目筛,得桔梗粉,在桔梗粉中加水并搅拌均匀,桔梗粉与水的重量比例为1: 10,在水中浸泡16小时,加入纤维素酶,纤维素酶的添加量为0.9%、酶解温度45℃、pH值5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为400-600W,频率为800MHZ,酶解0.1-0.5h;

再加入无花果蛋白酶和菠萝蛋白酶,无花果蛋白酶的加入量为0.6%,菠萝蛋白酶的加入量为0.5%,酶解温度45℃、pH值6.5,将上述的原料置于微波提取设备中提取,微波的功率为500W,频率为800MHZ,酶解0.3h,酶解后在100℃下灭酶6min,得酶解液;

将上述的酶解液置于真空浓缩器中浓缩,减压低温浓缩至酶解液至原体积的1/3,得桔梗粗多糖浓缩液;

在桔梗粗多糖的浓缩液中加入活性炭,活性炭占桔梗粗多糖浓缩液重量的4%,搅拌0.3h,过滤滤出活性炭;离心15 min ,离心转速为4500 rpm,将上清液与沉淀分别收集;

取上清液过滤去渣,过滤后得到的滤液在65℃下浓缩,浓缩至其浓度为65%,浓缩液按1:4比例加入95%乙醇沉淀静置30小时、离心15 min ,离心转速为4500 rpm,收集沉淀并用乙醇反复清洗3-3次,冷冻干燥至水分含量为5%左右后,再在-1-4℃下进行粉碎,得可溶性多糖;

上述的加酶量均为酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率为:36.38%,纯度为93.94%。

虽然本发明已以实施例公开如上,但其并非用以限定本发明的保护范围,任何熟悉本领域的技术人员,在不脱离本发明的构思和范围内所做的

更动和润饰,均应属于本发明所附权利要求的保护范围。

当前第1页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1