本发明涉及一种药物中手性中间体杂质的拆分方法，特别是一种毛细管电泳法手性拆分2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的方法，属于医药技术领域。
背景技术：
2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯是合成gpr40激动剂tak-875及其类似物的重要原料，其分子结构中含有一个手性中心，控制2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的纯度对控制终产物的手性杂质有着非常重要的作用。因此，建立一种能够快速分离2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的方法十分必要。
文献曾报道应用硅胶表面涂敷有直链淀粉-三-(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的chiralpakad-h手性柱可以拆分2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯，但该方法有以下的不足，如用有机溶剂作为洗脱溶剂，污染环境，且手性柱的价格昂贵，分离时间较长等。毛细管电泳(capillaryelectrophoresis，ce)具有高效，高速，微量和低能耗等优点，所以又被称为hpce。其具有多种分离模式，可以根据待分析物的存在状态选择不同的分离模式，扩宽了毛细管电泳的应用范围。其中毛细管区带电泳(cze)是毛细管电泳中应用最广泛，操作最简单的分离模式，主要适用于以离子状态存在的样品，也常用于手性化合物的手性拆分。其主要的工作原理是在背景缓冲液中添加不同的手性选择剂，提供一个手性环境，由于对映体与手性选择剂的相互作用强度不同，导致形成的瞬时复合物的电泳淌度有差异，从而达到手性拆分的目的。常用的选择剂有环糊精及其衍生物，大环内脂类抗生素，手性冠醚，蛋白等。目前国内外还没有运用毛细管电泳法手性拆分2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的报道。
2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯对映体的结构式如下：
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法。
本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，该方法以磺酸-β-环糊精为选择剂，四硼酸钠为缓冲液，通过毛细管电泳色谱法使对映体实现基线分离。
根据本发明优选的，一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，具体步骤如下：
a.样品的配制：样品贮备液的配制，精密称取2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体粉末8-10mg，置于10ml容量瓶中，用过滤后的乙腈溶解并定容至刻度，摇匀，得样品浓度为0.8-1.0mg/ml的贮备液，4℃冰箱保存；样品供试品溶液的配制，精密量取贮备液1ml于10ml容量瓶中，以缓冲液四硼酸钠定容至刻度，摇匀，得80-100μg/ml供试品溶液；
b.分离步骤及条件：
配制含有选择剂磺酸-β-环糊精的运行缓冲液，用硼酸调至ph8-9，经0.45μm微孔滤膜过滤，并超声脱气备用；毛细管柱洗柱方式：依次用0.1mol/l氢氧化钠溶液，三蒸水，运行缓冲液25pis各冲洗2min后进样；进样间用运行缓冲液冲洗5min后进行下次进样；进样方式：压力进样，正极进样负极检测；运行电压为15～25kv。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法a.样品的配制：供试品溶液经0.45μm微孔滤膜过滤后备用。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，b.分离步骤及条件中：运行缓冲液为ph8.9的25mmol/l四硼酸钠，含有质量浓度为1.8％的磺酸-β-环糊精。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，b.分离步骤及条件中：进样压力为0.5psi，进样时间为10s。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，b.分离步骤及条件中：所述毛细管总长60.2cm，有效长度50cm，内径75μm。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，b.分离步骤及条件中：毛细管柱温为15℃，检测波长为214nm。
进一步优选的，所述的一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，b.分离步骤及条件中：运行电压为25kv。
本发明的优点与效果是：
本发明提供了分离2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体的毛细管电泳法，用磺酸-β-环糊精作为选择剂，四硼酸钠为缓冲液，通过毛细管电泳色谱法使对映体实现基线分离。本方法能有效拆分2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体，其分离度大于2，并在10min内完成检测。本发明操作简单，分析时间短，所用试剂用量少且不污染环境，可用于该化合物的光学纯度快速检测。
附图说明
图1为分离2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体的色谱图；其中，横坐标为时间，单位：min，纵坐标为电信号，单位：au。
具体实施方式
下面参照附图及实施例对本发明进行详细说明。
实施例：
一种2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯的手性拆分方法，步骤如下：
a.样品的配制：精密称取2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体粉末8mg，置于10ml容量瓶中，用过滤后的乙腈溶解并定容至刻度，摇匀，得样品浓度为0.8mg/ml的贮备液，4℃冰箱保存。精密量取贮备液1ml于10ml容量瓶中，以缓冲液定容至刻度，摇匀，得80μg/ml供试品溶液，经0.45μm微孔滤膜过滤后备用。
b.分离步骤及条件：配制25mmol/lna2b4o7含1.8％磺酸-β-环糊精作为运行缓冲液，用硼酸调至ph8.9，经0.45μm微孔滤膜过滤，并超声脱气备用；每日分析前依次用0.1mol/l氢氧化钠溶液，三蒸水，运行缓冲液25pis各冲洗2min；采用压力进样方式，0.5psi，进样10s，运行电压为25kv，柱温设为15℃，检测波长214nm。记录色谱图，如图1所示，2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯消旋体的两对映体之间能完全分离，分离时间在10min内，分离度大于2。进样间用运行缓冲液冲洗5min后进行下次进样。