本发明涉及18f-fdg用c18/tc18spe柱的活化分离制备18f-fdg，具体是一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法。
背景技术
正电子发射计算机断层显像(positronemissiontomography,pet)是一种利用正电子放射性核素示踪进行活体功能成像的技术。目前临床上最常用的pet显像药物是18f(t1/2＝110分钟)标记的2-18f-β-d-脱氧葡萄糖(18f-fdg)，它可以准确反映体内器官/组织的葡萄糖代谢水平，揭开了功能影像的新纪元，被誉为“世纪分子”。
回旋加速器靶内产生18f，使用阴离子交换树脂柱捕获18f，用含有氨基聚醚k2.2.2(4,7,13,16,21,24-六氧杂-1，10-二氮杂双环(8.8.8)-二十六烷，又称为穴醚2.2.2或隐配体2.2.2)和碳酸钾的乙腈溶液将阴离子交换树脂柱捕获的18f洗脱进入反应管，在105℃共沸蒸干，冷却后加入前体1,3,4,6-四-o-乙酰基-2-o-三氟甲磺酰基-β-d-吡喃甘露糖(简称三氟甘露糖)发生亲核反应，c-2位的三氟甲磺酰基被18f取代，空间重排后获得18f标记的四乙酰基葡萄糖酯(18f-ftag)。将18f-ftag使用酸或碱水解后获得18f-fdg粗产品，纯化后过无菌滤膜即为18f-fdg注射液。
《中华人民共和国药典》2015版二部(以下简称“药典”)收录了18f-fdg，其中规定了残留溶剂的检测方法。柱水解制备的18f-fdg在残留溶剂检测时出现一个未知残留溶剂峰，通常与乙腈的溶剂峰重叠，造成18f-fdg中“残留乙腈”超标。模拟柱水解过程，用2mnaoh溶液过c18/tc18，保持120s，按照18f-fdg残留溶剂的检测方法检测，仅检测到一个色谱峰，保留时间与乙腈相同，而且大于药典规定的0.4mg/ml，显然出现的色谱峰不是乙腈，gc-ms鉴定该峰为三甲基硅醇(cas编号：1066-40-6)。将三甲基硅醇标准品加入水中，按照18f-fdg残留溶剂的检测方法检测，同样在乙腈的位置出现残留溶剂峰。将柱水解制备的18f-fdg溶液用gc-ms分析，保留时间与乙腈相同的位置出现的残留溶剂峰，鉴定为三甲基硅醇。通过以上实验可以得出，柱水解制备的18f-fdg中含有三甲基硅醇，造成残留溶剂检测时乙腈假性超标。具体是：c18/tc18在使用前，用1-10ml的无水乙醇(或乙腈)过柱，然后用10ml水冲洗，吹干，这个预处理过程称为活化。
乙腈假性超标的产生，严重影响18f-fdg产品检测结果的准确性。再者，药品中含有三甲基硅醇杂质，虽然药典中未提到该物质并规定该杂质的允许浓度，但是，药品所含的杂质越少，药品的安全性越好。然而，目前针对上述技术缺陷，至今未有一种较为实施有效的方式解决。
技术实现要素：
(一)解决的技术问题
针对上述现有技术存在的不足，本发明提供一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现:
一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1、将c18plusspe柱或者tc18plusspe柱以1-20ml的naoh溶液从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为0.5-30min，加注完毕，以1-20ml的注射用水洗脱，得到洗脱柱；
s2、将步骤s1中制备得到的洗脱柱注入1-20ml的有机溶剂进行洗脱，洗脱完毕，用1-20ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干，得到活化的c18spe或者tc18spe柱；
s3、将氟化反应生成的18f-ftag除部分乙腈后，用注射用水稀释，稀释完毕，过步骤s2中的c18spe或者tc18spe柱，其中，18f-ftag保留在c18spe或者tc18spe柱上；
s4、采用40-60ml的注射用水冲洗步骤s3中的c18spe柱或者tc18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干；
s5、往步骤s4中氮气吹干后的c18spe柱或者tc18spe柱注入2-10ml的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡c18spe柱或者tc18spe柱的时间为1.5-2min；
s6、将8-15ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的c18spe柱或者tc18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为0.5-1.5ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
优选地，所述naoh溶液的浓度为0.2-10mol/l。
优选地，所述有机溶剂为无水乙醇、乙腈中的任一一种溶剂。
优选地，所述步骤s1中以10ml的naoh溶液从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为2min。
优选地，所述步骤s2中将步骤s1中制备得到的洗脱柱注入10ml的有机溶剂进行洗脱，洗脱完毕，用10ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干，得到活化的c18spe或者tc18spe柱。
优选地，所述步骤s4中采用50ml的注射用水冲洗步骤s3中的c18spe柱或者tc18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干。
优选地，所述s5中往步骤s4中氮气吹干后的c18spe柱或者tc18spe柱注入2ml2mol/l的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡c18spe柱或者tc18spe柱的时间为2min。
优选地，所述步骤s6中将15ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的c18spe柱或者tc18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为1ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
有益效果
本发明提供了一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，通过本发明公开的活化方案所得到的spe柱，在制备的18f-fdg中不含有三甲基硅醇杂质，也不产生残留乙腈假性超标。
尤为重要的时，采用本发明公开的活化方法，最终得到的产品按照药典规定的残留溶剂检测方法检测18f-fdg中残留溶剂，乙腈含量小于0.4mg/ml。gc-ms对乙腈峰检测，不含或仅含有痕量三甲基硅醇。检测结果表明：本发明公开的技术方案已经完全克服了现有技术中，终产品中含有杂质三甲基硅醇，并造成残留乙腈假性超标，严重影响18f-fdg产品检测结果的准确性的技术问题。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1:
一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，包括以下步骤：
s1、将waterssep-pakc18plusspe柱以10ml2mol/lnaoh溶液从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为2min，加注完毕以10ml的注射用水洗脱，得到洗脱柱；
s2、往步骤s1中制备得到的洗脱柱注入10ml的无水乙醇进行洗脱，洗脱完毕，用10ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干得到活化的c18spe柱；
s3、将氟化反应生成的18f-ftag除部分乙腈后，用注射用水稀释，稀释完毕，过步骤s2中的c18spe柱，其中，18f-ftag保留在c18spe柱上；
s4、采用60ml的注射用水冲洗步骤s3中的c18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干；
s5、往步骤s4中氮气吹干后的c18spe柱注入2ml2mol/l的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡c18spe柱的时间为1.5min；
s6、将10ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的c18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为1ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
用药典规定的残留溶剂检测方法检测18f-fdg中残留溶剂，乙腈含量小于0.4mg/ml。gc-ms对乙腈峰检测，未检测到三甲基硅醇。
实施例2:
一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1、将waterssep-paktc18plusspe柱以1mol/l的naoh溶液5ml从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为5min，加注完毕以20ml的注射用水洗脱，得到洗脱柱；
s2、往步骤s1中制备得到的洗脱柱注入5ml的乙腈进行洗脱，洗脱完毕，用20ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干得到活化的tc18spe柱；
s3、将氟化反应生成的18f-ftag除部分乙腈后，用注射用水稀释，稀释完毕，过步骤s2中的tc18spe柱，其中，18f-ftag保留在tc18spe柱上；
s4、采用50ml的注射用水冲洗步骤s3中的tc18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干；
s5、往步骤s4中氮气吹干后的tc18spe柱注入2ml2mol/l的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡tc18spe柱的时间为1.5min；
s6、将15ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的tc18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为1ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
用药典规定的残留溶剂检测方法检测18f-fdg中残留溶剂，乙腈含量小于0.4mg/ml。gc-ms对乙腈峰检测，未检测到三甲基硅醇。
实施例3:
一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1、将graceextract-cleanc18spe柱柱以1ml4mol/l的naoh溶液从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为0.5min，加注完毕以20ml的注射用水洗脱，得到洗脱柱；
s2、往步骤s1中制备得到的洗脱柱注入5ml的无水乙醇进行洗脱，洗脱完毕，用20ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干得到活化的c18spe柱；
s3、将氟化反应生成的18f-ftag除部分乙腈后，用注射用水稀释，稀释完毕，过步骤s2中的c18spe柱，其中，18f-ftag保留在c18spe柱上；
s4、采用50ml的注射用水冲洗步骤s3中的c18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干；
s5、往步骤s4中氮气吹干后的c18spe柱注入2ml2mol/l的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡c18spe柱的时间为2min；
s6、将8ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的c18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为1ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
用药典规定的残留溶剂检测方法检测18f-fdg中残留溶剂，乙腈含量小于0.4mg/ml。gc-ms对乙腈峰检测，含有痕量三甲基硅醇。
实施例4:
一种柱水解18f-fdg用c18/tc18spe柱分离制备18f-fdg的方法，其特征在于，包括以下步骤：
s1、将graceextract-cleanc18spe柱以10ml0.2mol/l的naoh溶液从柱口处加注洗脱，控制加注持续时间为30min，加注完毕20ml的注射用水洗脱，得到洗脱柱；
s2、往步骤s1中制备得到的洗脱柱注入10ml的无水乙醇进行洗脱，洗脱完毕，用10ml的注射用水进行冲洗，冲洗完毕，氮气吹干得到c18spe柱；
s3、将氟化反应生成的18f-ftag除部分乙腈后，用注射用水稀释，稀释完毕，过步骤s2中的c18spe柱，其中，18f-ftag保留在c18spe柱上；
s4、采用50ml的注射用水冲洗步骤s3中的c18spe柱，冲洗完毕，氮气吹干；
s5、往步骤s4中氮气吹干后的c18spe柱注入2ml2mol/l的naoh溶液，控制naoh溶液浸泡c18spe柱的时间为2min；
s6、将12ml的注射用水注入到步骤s5中naoh溶液浸泡后的c18spe柱得到洗脱液，控制注射用水的流速为1ml/min，洗脱液依次通过graceic-hspe柱、碱性watersal2o3bspe柱、watersc18spe柱后，收集所有液体即为18f-fdg。
用药典规定的残留溶剂检测方法检测18f-fdg中残留溶剂，乙腈含量小于0.4mg/ml。gc-ms对乙腈峰检测，未检测到三甲基硅醇。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。