本发明涉及一种胃膜素、胃蛋白酶联产方法,属于药物生产技术领域。
背景技术:
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胃膜素又称胃黏膜素。自猪胃黏膜提取而得的一种抗胃酸糖蛋白。白色至黄白色粉末,或黄褐色颗粒。有蛋白胨样臭味,微咸,着水涨为黏浆,呈微溶状态。水溶液呈灰色或乳白色,遇弱酸即沉淀。等电点pi3.3~5。胃膜素是治疗胃和十二指肠溃疡的天然药物,能在胃内壁形成黏附状态的膜,覆盖在溃疡面,保护溃疡创口。胃黏膜激活,提取↓水,盐酸脱脂,分层上清液减压浓缩分步沉淀↓丙酮沉淀洗涤胃膜素母液脱脂干燥胃蛋白酶将胃黏膜200kg绞碎,加入100kg水和约4l盐酸,调整ph=3~3.5,在40~45℃搅拌3~4h。过滤,除去杂质。提取液冷至30℃以下,加入氯仿16kg,充分搅拌均匀,室温下静置48h以上。将上层清液吸入到浓缩罐内,减压下在35℃浓缩至原体积的1/3。然后将浓缩液预冷至5℃以下,搅拌下缓慢加入5℃以下的冷丙酮,即得到长丝状的胃膜素沉淀。静置数小时后,滤出胃膜素。母液经过处理可得胃蛋白酶。将得到的胃膜素用适量的冷丙酮清洗2次,再用70%的丙酮浸洗过夜,在70℃以下真空干燥,即得成品。收率1.2%~1.4%。
胃蛋白酶是一种消化性蛋白酶,由胃部中的胃粘膜主细胞所分泌,功能是将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。主细胞分泌的是胃蛋白酶原,胃蛋白酶原经胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶,胃蛋白酶不是由细胞直接生成的。
技术实现要素:
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本发明的目的是针对上述存在的问题提供一种胃膜素、胃蛋白酶联产方法,采用酸性水溶液代替丙酮提取分离胃蛋白酶和胃膜素,再通过离心、过滤、超滤、干燥等步骤制备得到胃蛋白酶和胃膜素,通过该方法制备猪胃蛋白酶和胃膜素,不仅保护了胃蛋白酶活性,同时因不使用有机溶剂,提高了操作的安全系数,对工人身体无任何伤害,而且降低了成本,扩大了产能,具有广阔的市场前景。
上述的目的通过以下的技术方案实现:
一种胃膜素、胃蛋白酶联产方法,该方法包括如下步骤:
(1)原料预处理:取猪胃粘膜,绞碎后加入盐酸调节ph在2.6-2.8,升温到45-48℃进行消化,消化后过滤并收集滤液;
(2)粗提液的制备:在步骤(1)得到的滤液中加入盐酸,搅拌均匀后静置3-4h,上层清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,下层沉淀离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,离心后的滤渣备用;
(3)胃膜素的制备:用上述离心后的滤渣加入等体积的0~5℃的丙酮,搅拌,静置5-8h,过滤,得到胃膜素粗品,将胃膜素粗品用95%乙醇,洗涤2~3次真空干燥胃膜素,得胃膜素精品;
(4)胃蛋白酶的制备:用上述胃蛋白酶清液浓缩、透析、干燥得胃蛋白酶。
所述的胃膜素、胃蛋白酶联产方法,步骤(1)中所述的消化时间为4-6h。
所述的胃膜素、胃蛋白酶联产方法,所述的盐酸采用体积分数为4%~6%的盐酸溶液。
所述的胃膜素、胃蛋白酶联产方法,步骤(3)所述的真空干燥的干燥温度为70-80℃。
所述的胃膜素、胃蛋白酶联产方法,步骤(4)所述的干燥温度为70-80℃。
有益效果:
本发明的方法采用酸性水溶液代替丙酮提取分离胃蛋白酶和胃膜素,再通过离心、过滤、超滤、干燥等步骤制备得到胃蛋白酶和胃膜素,通过该方法制备猪胃蛋白酶和胃膜素,不仅保护了胃蛋白酶活性,同时因不使用有机溶剂,提高了操作的安全系数,对工人身体无任何伤害,而且降低了成本,扩大了产能,具有广阔的市场前景。
具体实施方式:
实施例1:
一种胃膜素、胃蛋白酶联产方法,该方法包括如下步骤:
(1)原料预处理:取猪胃粘膜,绞碎后加入盐酸调节ph在2.6-2.8,升温到45-48℃进行消化,消化后过滤并收集滤液;
(2)粗提液的制备:在步骤(1)得到的滤液中加入盐酸,搅拌均匀后静置3-4h,上层清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,下层沉淀离心,取离心清液过滤至澄清得胃蛋白酶清液,收集备用,离心后的滤渣备用;
(3)胃膜素的制备:用上述离心后的滤渣加入等体积的0~5℃的丙酮,搅拌,静置5-8h,过滤,得到胃膜素粗品,将胃膜素粗品用95%乙醇,洗涤2~3次真空干燥胃膜素,得胃膜素精品;
(4)胃蛋白酶的制备:用上述胃蛋白酶清液浓缩、透析、干燥得胃蛋白酶。
本实施例中,步骤(1)中所述的消化时间为6h。
本实施例中,所述的盐酸采用体积分数为4%的盐酸溶液。
本实施例中,步骤(3)所述的真空干燥的干燥温度为80℃。
本实施例中,步骤(4)所述的干燥温度为70℃。
实施例2:
本实施例与实施例1的不同之处在于,本实施例中,步骤(1)中所述的消化时间为4h。
本实施例中,所述的盐酸采用体积分数为6%的盐酸溶液。
本实施例中,步骤(3)所述的真空干燥的干燥温度为70℃。
本实施例中,步骤(4)所述的干燥温度为80℃。
实施例3:
本实施例与实施例1的不同之处在于,本实施例中,步骤(1)中所述的消化时间为5h。
本实施例中,所述的盐酸采用体积分数为45%的盐酸溶液。
本实施例中,步骤(3)所述的真空干燥的干燥温度为75℃。
本实施例中,步骤(4)所述的干燥温度为75℃。
以上仅是本发明的最佳实施例,本发明的方法包括但不限于上述实施例,本发明的未尽事宜,属于本领域技术人员的公知常识。