1.一种犬瘟热病毒的通用检测引物,其特征在于,所述的引物用于扩增犬瘟热病毒fsp基因保守区域,所述的引物由正向引物和反向引物组成,其中,所述的正向引物的核苷酸序列如seqidno.1所示,所述的反向引物的核苷酸序列如seqidno.2所示。
2.权利要求1所述的通用引物在制备检测犬瘟热病毒试剂中的用途。
3.一种犬瘟热病毒纳米pcr检测试剂盒,其特征在于,含有一对用于扩增犬瘟热病毒fsp基因保守区域的通用检测引物,所述引物由正向引物和反向引物组成,其中,所述的正向引物的核苷酸序列如seqidno.1所示,所述的反向引物的核苷酸序列如seqidno.2所示。
4.如权利要求3所述的犬瘟热病毒纳米pcr检测试剂盒,其特征在于,还含有用于纳米pcr检测的试剂。
5.如权利要求4所述的犬瘟热病毒纳米pcr检测试剂盒,其特征在于,所述的用于纳米pcr检测的试剂包括2×nanopcrbuffer以及taqdnapolymerase。
6.如权利要求3所述的犬瘟热病毒纳米pcr检测试剂盒,其特征在于,还含有标准品质粒,所述的标准品质粒是通过以下方法制备得到:提取cdv-3株病毒液的总rna,合成第一链cdna,以合成cdna为模板,通过pcr扩增得到cdv-3的f基因,将纯化的f基因连接至peasy-blunt载体上,即得,其中,优选的,用于扩增f基因的引物由正向引物和反向引物组成,其中,所述的正向引物的核苷酸序列如seqidno.3所示,所述的反向引物的核苷酸序列如seqidno.4所示。
7.如权利要求3-6任一项所述的犬瘟热病毒纳米pcr检测试剂盒,其特征在于,用于犬瘟热病毒检测时,按照以下步骤进行:
(1)提取待测样本的总rna,合成第一链cdna;
(2)以步骤(1)合成的cdna为模板,采用用于扩增犬瘟热病毒fsp基因保守区域的通用检测引物进行纳米pcr扩增;
反应体系12μl:2×nanopcrbuffer6μl,10μm正向引物以及反向引物各0.5μl,taqdnapolymerase0.2μl,模板0.2μl,用双蒸水补足至12μl;
反应条件:95℃2min,95℃20s、54℃20s、72℃15s,35cycles;
(3)扩增结束后对扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定。