O型口蹄疫病毒新型基因工程亚单位疫苗的制作方法

文档序号:18733635发布日期:2019-09-21 00:52阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种免疫组合物,其特征在于包含:采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3蛋白;采用序列如SEQ ID NO:12所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:12的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1蛋白;以及,选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白或O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白的一种或两种的任意组合。

2.根据权利要求1所述的免疫组合物,其特征在于,所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3蛋白包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:19的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列;所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1蛋白包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:22的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的免疫组合物,其特征在于,所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白包含SEQ ID NO:21的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:21的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列;所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:23的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的免疫组合物,其特征在于,所述免疫组合物进一步包含O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白,所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白是通过序列如SEQ ID NO:4所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:4的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码获得。

5.根据权利要求4所述的免疫组合物,其特征在于,所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0蛋白包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:20的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的免疫组合物,其特征在于,其中,

所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2蛋白是通过序列如SEQ ID NO:8所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:8的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码获得;

所述的O型口蹄疫病毒结构蛋白VP4蛋白是通过序列如SEQ ID NO:16所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:16的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码获得。

7.权利要求1~6任意一项所述免疫组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:

S1、将O型口蹄疫病毒结构蛋白的基因克隆到对应的穿梭载体上,得到重组穿梭载体;

S2、将重组穿梭载体转化到含有杆状病毒基因组质粒的DH10Bac菌中,重组穿梭载体中目的基因表达框定向插入杆状病毒基因组质粒中,获得含有目的基因表达框的重组杆状病毒基因组质粒;

S3、将重组杆状病毒基因组质粒转染昆虫细胞获得重组杆状病毒;

S4、将获得的重组杆状病毒接种昆虫细胞,在反应器中大规模生产重组O型口蹄疫病毒结构蛋白;

S5、将S4步骤中获得的重组O型口蹄疫病毒结构蛋白加入到佐剂中,即得所述免疫组合物。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤S1包括:将O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3和VP1的编码基因以及选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2、VP4中的任意一种或两种的表达框均克隆到同一穿梭载体上,即得到所述的重组穿梭载体。

9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,步骤S1包括:将O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3和VP1的编码基因,选自O型口蹄疫病毒结构蛋白VP2、VP4中的任意一种或两种的表达框以及O型口蹄疫病毒结构蛋白VP0的表达框均克隆到同一穿梭载体上,即得到所述的重组穿梭载体。

10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,步骤S1包括:将O型口蹄疫病毒结构蛋白VP3、VP1、VP2、VP4、VP0的编码基因均克隆到同一穿梭载体上,即得到所述的重组穿梭载体。

11.权利要求1~6任意一项所述的免疫组合物用于生产用于在受试动物中诱导针对O型口蹄疫病毒抗原的免疫反应的药剂的用途。

12.权利要求1~6任意一项所述的免疫组合物用于生产用于预防动物受O型口蹄疫病毒感染的药剂的用途。

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