免疫调节剂及其组合物和制备方法与流程

j immunol 2002，32(3)：634
‑
43；freeman等，j exp med 2000，192(7)：1027
‑
34)。该机制涉及募集shp
‑
2或shp
‑
1磷酸酶以抑制t细胞受体信号转导例如syk和lck的磷酸化(sharpe et al，nat immunol 2007，8，239
‑
245)。pd
‑
1信号轴的激活还减弱了pkc
‑
θ激活环的磷酸化，这对于nf
‑
κβ和api途径的激活以及il
‑
2，ifn
‑
γ和tnf等细胞因子的产生是必不可少的(sharpe等人，nat immunol 2007，8，239
‑
245；carter等，eur j immunol 2002，32(3)：634
‑
43；freeman等，j exp med 2000，192(7)：1027
‑
134)。
6.临床前动物研究的一些证据表明，pd
‑
1及其配体会对免疫反应产生负调节作用。pd
‑
1敲除小鼠会发展出狼疮样肾小球肾炎和扩张性心肌病(nishimura等，immunity 1999，11：41
‑
151；nishimura等，science 2001，291：319
‑
322)。在慢性lcmv病毒感染模型中，已显示pd
‑
1/pd
‑
l1相互作用可抑制病毒特异性cd8 t细胞的效应子功能的激活，扩展和获得(barber等，自然2006，439，682
‑
7))。
7.这些数据支持我们开发一种通过阻断pd
‑
1介导的抑制性信号传导级联反应来增强或“拯救”t细胞反应的治疗方法。目前在免疫疗法中批准的大多数药物都是单克隆抗体。但是，直接靶向pd
‑
1或pd
‑
l1的小分子抑制剂仍未被批准，只有ca170进行了临床评估。
8.因此仍然强烈需要针对pd
‑
1和pd
‑
l1蛋白/蛋白相互作用的更有效更易于施用的治疗药物。在本发明中，申请人发现了一种有效的小分子可以作为pd
‑
l1与pd
‑
1的相互作用的抑制剂，因此可用于治疗性给药以增强针对癌症和/或传染病的免疫力。这些小分子有望成为具有良好稳定性，溶解性，生物利用度，治疗指数和毒性值的药物，这对于成为促进人类健康的有效药物至关重要。


技术实现要素：

9.本发明涉及用作pd
‑
l1和pd
‑
1相互作用抑制剂的化合物。pd
‑
1和pd
‑
l1相互作用抑制剂可以用于治疗癌症和其他感染病。
10.本发明的化合物具有如式i所示的一般结构。一种式i所示的化合物，或其立体异构体，互变异构体，药学上可接受的盐，前药，螯合物，非共价复合物或溶剂化物，
[0011][0012]
其中，
[0013]
x选自c或n；
[0014]
为单键或双键。
[0015]
r1选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑4卤代烷基，或
‑
oc1‑8烷基；
[0016]
r2，r3和r4分别独立地选自h，
‑
oh，卤素，
‑
cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c2‑8烯基，
‑
c1‑8烷氧基，
‑
o
‑
c1‑4烷基
‑
c5‑
10
杂环基，
‑
c3‑
10
杂芳基，
‑
nhco
‑
c8‑
10
杂芳基，
‑
nhco
‑
c1‑4烷基
‑
c5‑
10
杂环基；其中，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑8烷氧基，
‑
o
‑
c1‑4烷基
‑
c5‑
10
杂环基，
‑
c3‑
10
杂芳基，
‑
nhco
‑
c8‑
10
杂芳基，
‑
nhco
‑
c1‑4烷基
‑
c5‑
10
杂环基可被
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑8烷氧基，
‑
c3‑
10
环烷基，
‑
c3‑
10
环烷基
‑
o
‑
c1‑8烷
基所取代；或
[0017]
r3和r4与它们所连接的原子共同组成5
‑
至6
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；
[0018]
y选自，不存在，o，s，
‑
nr9‑
；
[0019]
r9选自h，
‑
c1‑8烷基，或
‑
c1‑8卤代烷基；
[0020]
r5选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑4卤代烷基，
‑
c2‑8烯基，磺酰基，亚磺酰基，条件是如果y为o，则r5不为c1‑8烷基；
[0021]
r6是h，或r5和r6与它们所连接的原子共同组成5
‑
至6
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；所述杂环可任选地被氧代基，
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代；
[0022]
r7和r8分别独立地选自h，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑6烷基
‑
cooh，
‑
c5‑6芳基，其中
‑
c1‑6烷基
‑
cooh和
‑
c5‑6芳基可任选地被
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代；或
[0023]
r7和r8与它们所连接的原子共同组成3
‑
至7
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；所述杂环可任选地被氧代基，
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代；
[0024]
r5和r8与它们所连接的原子共同组成6
‑
至10
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；所述杂环可任选地被氧代基，
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代。
[0025]
式i的一些实施例，其中y选自不存在，
‑
o
‑
，
‑
s
‑
，
‑
nh
‑
。
[0026]
式i的一些实施例，其中r1选自ch3和cn。
[0027]
式i的一些实施例，其中r5选自h，
‑
ch3，
‑
chf2，
‑
cf3，
‑
ch2cf3，f，cl，cn，条件为如果y为o，则r5不为
‑
ch3。
[0028]
式ii的化合物，或其立体异构体，互变异构体，药学上可接受的盐，前药，螯合物，非共价复合物或溶剂化物，
[0029][0030]
其中，
[0031]
r1选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑4卤代烷基，或
‑
oc1‑8烷基；
[0032]
r2，r3和r4分别独立地选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，或
‑
c1‑4卤代烷基；
[0033]
r5选自h，
‑
c1‑4卤代烷基，
‑
so2‑
c1‑4烷基；
[0034]
r7和r8分别独立地选自h，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑6烷基
‑
cooh，
‑
c5‑6芳基，其中
‑
c1‑6烷基
‑
cooh和
‑
c5‑6芳基可任选地被
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代；或
[0035]
r7和r8与它们所连接的原子共同组成3
‑
至7
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；所述杂环可任选地被氧代基，
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代。
[0036]
式ii的一些实施例，其中r1选自ch3和cn。
[0037]
式ii的一些实施例，其中r2，r3和r4分别独立地选自h，cn，或f。
[0038]
式ii的一些实施例，其中r5为
‑
c1‑4卤代烷基。
[0039]
式ii的一些实施例，其中r5为被1
‑
3个氟原子取代的
‑
c1‑4烷基。
[0040]
式ii的一些实施例，其中r5是甲基或被2
‑
3个氟原子取代的甲基或乙基。
[0041]
式ii的一些实施例，其中r5是
‑
cf3，
‑
chf2，
‑
ch2chf2，或
‑
ch2cf3。
[0042]
式ii的一些实施例，其中r5是
‑
so2‑
c1‑4烷基。
[0043]
式ii的一些实施例，其中r5是
‑
so2‑
ch3。
[0044]
式ii的一些实施例，其中r7和r8分别独立地选自h，ch3，，
[0045]
式ii的一些实施例，其中r7和r8与它们所连接的原子共同组成4
‑
至6
‑
元杂环；其中所述杂环可被
‑
c1‑4烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，或
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代。
[0046]
式ii的一些实施例，其中杂环是式ii的一些实施例，其中杂环是
[0047]
式ii的一些实施例，其中所述取代杂环选自式ii的一些实施例，其中所述取代杂环选自
[0048]
式iii的化合物，或其立体异构体，互变异构体，药学上可接受的盐，前药，螯合物，非共价复合物或溶剂化物，
[0049][0050]
其中，
[0051]
r1选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑4卤代烷基，或
‑
oc1‑8烷基；
[0052]
r2，r3和r4分别独立地选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，或
‑
c1‑4卤代烷基；
[0053]
r5选自h，卤素，cn，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑4卤代烷基，
‑
nh
‑
c1‑4烷基，或
‑
s
‑
c1‑4烷基，磺酰基，或亚磺酰基；
[0054]
r7和r8分别独立地选自h，
‑
c1‑8烷基，
‑
c1‑6烷基
‑
cooh，
‑
c5‑6芳基，其中
‑
c1‑6烷基
‑
cooh和
‑
c5‑6芳基可任选地被
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代；或
[0055]
r7和r8与它们所连接的原子共同组成3
‑
至7
‑
元杂环；其中所述杂环任选地包含1，2或3个独立选自n，s或o的杂原子；所述杂环可任选地被氧代基，
‑
c1‑8烷基，
‑
c0‑4烷基
‑
cooh，
‑
c0‑4烷基
‑
oh所取代。
[0056]
式iii的一些实施例，r1选自ch3，或cn。
[0057]
式iii的一些实施例，其中r2，r3和r4分别独立地选自h，cn，或f。
[0058]
式iii的一些实施例，其中r5选自f，cl，
‑
ch3，
‑
cf3，
‑
s
‑
ch3，
‑
so
‑
ch3，
‑
so2‑
ch3，
‑
cn，或
‑
nhch3。
[0059]
式iii的一些实施例，其中r7和r8分别独立地选自h，ch3，，
[0060]
式iii的一些实施例，其中r7和r8与它们所连接的原子共同组成5
‑
至6
‑
元杂环；其中所述杂环可被
‑
c0‑4烷基
‑
cooh取代。
[0061]
式iii的一些实施例，其中所述取代的杂环选自式iii的一些实施例，其中所述取代的杂环选自
[0062]
式i的化合物，其中所述化合物为
[0063]
1)(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0064]
2)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0065]
3)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
别苏氨酸；
[0066]
4)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
别苏氨酸；
[0067]
5)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
丙氨酸；
[0068]
6)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丙氨酸；
[0069]
7)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
脯氨酸；
[0070]
8)(1
‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
基)甲醇；
[0071]
9)(s)
‑4‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吗啉
‑3‑
羧酸；
[0072]
10)(s)
‑2‑
(((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)氨基)丁酸；
[0073]
11)(r)
‑2‑
(((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)氨基)丁酸；
[0074]
12)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丝氨酸；
[0075]
13)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
丝氨酸；
[0076]
14)((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0077]
15)((2
‑
(2,2'
‑
二氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0078]
16)2
‑
甲基
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吡咯烷
‑2‑
羧酸；
[0079]
17)((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
甲基苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
脯氨酸；
[0080]
18)((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
甲基苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0081]
19)(s)
‑4‑
((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
甲基苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吗啉
‑3‑
羧酸；
[0082]
20)((6
‑
氯
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0083]
21)((6
‑
羟基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0084]
22)(s)
‑1‑
((6
‑
甲基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0085]
23)(s)
‑1‑
((6
‑
氟
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吡咯烷
‑3‑
醇；
[0086]
24)((6
‑
氟
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0087]
25)(s)
‑1‑
((6
‑
氟
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0088]
26)1
‑
((6
‑
氰基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0089]
27)1
‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基氨基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0090]
28)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(三氟甲基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0091]
29)(s)
‑1‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0092]
30)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲
基)
‑
d
‑
别苏氨酸；
[0093]
31)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
别苏氨酸；
[0094]
32)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
盐酸酪氨酸；
[0095]
33)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
丙氨酸；
[0096]
34)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丙氨酸；
[0097]
35)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)甘氨酸；
[0098]
36)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0099]
37)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
脯氨酸；
[0100]
38)(1
‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
基)甲醇；
[0101]
39)(s)
‑4‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吗啉
‑3‑
羧酸；
[0102]
40)(s)
‑2‑
(((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)氨基)丁酸；
[0103]
41)(r)
‑2‑
(((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)氨基)丁酸；
[0104]
42)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丝氨酸；
[0105]
43)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
丝氨酸；
[0106]
44)((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0107]
45)((2
‑
(2,2'
‑
二氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0108]
46)1
‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑2‑
甲基吡咯烷
‑2‑
羧酸；
[0109]
47)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(3
‑
(2,3
‑
二氢苯并[b][1,4]二噁英
‑6‑
基)
‑2‑
甲基苯基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0110]
48)1
‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)氮杂环丁烷基
‑2‑
羧酸；
[0111]
49)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(3
‑
(2,3
‑
二氢苯并[b][1,4]二噁英
‑6‑
基)
‑2‑
甲基苯基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0112]
50)1
‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑2‑
甲基吡咯烷
‑2‑
羧酸；
[0113]
51)((2
‑
(2'
‑
氰基
‑2‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)脯氨酸；
[0114]
52)((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2'
‑
氟
‑2‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0115]
53)(s)
‑3‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)恶唑烷
‑4‑
羧酸；
[0116]
54)(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0117]
55)1
‑
((6
‑
(2,2
‑
二氟乙氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0118]
56)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丙氨酸；
[0119]
57)(s)
‑4‑
((2
‑
(2
‑
氰基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吗啉
‑3‑
羧酸；
[0120]
58)(s)
‑4‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吗啉
‑3‑
羧酸；
[0121]
59)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
丙氨酸；
[0122]
60)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0123]
61)2
‑
甲基
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)吡咯烷
‑2‑
羧酸；
[0124]
62)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
丙氨酸；
[0125]
63)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(三氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0126]
64)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
((甲磺酰基氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0127]
65)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0128]
66)((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸；
[0129]
67)8
‑
甲基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷；
[0130]
68)1
‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑8‑
氧代
‑
7,8
‑
二氢苯并呋喃[5,4
‑
d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0131]
69)1
‑
((8
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)恶唑并[5,4
‑
c][1,2,4]三唑并[1,5
‑
a]吡
啶
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸；
[0132]
70)(s)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷
‑7‑
羧酸；
[0133]
71)2
‑
(2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7
‑
二氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷
‑
8(9h)
‑
基)乙酸；
[0134]
72)(r)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷
‑7‑
羧酸；
[0135]
73)1
‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑8‑
氧代
‑
7,8
‑
二氢苯并呋喃[5,4
‑
d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸.
[0136]
本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含本发明任意一种化合物和一种药学上可接受的辅料。比如羟丙基甲基纤维素。在药物组合物中所述化合物与所述辅料的重量比范围是0.0001
‑
10。
[0137]
本发明还提供了包含式i的药物组合物在制备用于治疗受试者疾病的药物中的用途。
[0138]
关于上述用途，本发明还提供了一些优选的技术方案。
[0139]
在一些实施例中，制备的药物可以用于治疗或预防，或者用于延缓或防止癌症，癌症转移，免疫系统相关疾病的发生或进展。所述癌症包括结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。
[0140]
本发明提供了一种抑制pd
‑
1/pd
‑
l1相互的方法，所述方法包括向患者施用权利要求1
‑
12任一所述的化合物或药学上可接受的盐或立体异构体。
[0141]
本发明提供了一种治疗与抑制pd
‑
1/pd
‑
l1相互作用有关的疾病的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体。所述疾病为结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。
[0142]
本发明提供了一种可以增强，刺激和/或者增加患者免疫应答的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐或立体异构体。
[0143]
本发明还提供了本发明化合物或其药物组合物在制备药物中的用途。
[0144]
在一些实施例中，所述药物用于治疗或预防癌症。
[0145]
在一些实施例中，所述癌症为结肠癌，胃癌，甲状腺癌，肺癌，白血病，胰腺癌，黑色素瘤，多发性黑色素瘤，脑癌，肾癌，前列腺癌，卵巢癌或乳腺癌。
[0146]
在一些实施例中，所述药物用作pd
‑
1/pd
‑
l1相互作用抑制剂。
[0147]
上式中使用的一般化学术语具有其通常的含义。例如，除非另有说明，本文所使用的术语“卤素”，指的是氟，氯，溴或碘。优选地卤素为f，cl和br。
[0148]
除非另有说明，本文使用的烷基包括具有直链，支链或环状部分的饱和一价烃基。例如，烷基包括甲基，乙基，丙基，异丙基，环丙基，正丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，环丁基，正戊基，3
‑
(2
‑
甲基)丁基，2
‑
戊基，2
‑
甲基丁基，新戊基，环戊基，正己基，2
‑
己基，2
‑
甲基戊基和环己基。类似地，c1‑8在c1‑8烷基中被定义为含有1，2，3，4，5，6，7或者8个碳原子的直连或者支链的碳原子结构。
[0149]
烯基和炔基包括直链，支链或环状的烯烃和炔烃。同样地，“c2‑8烯基”和“c2‑8炔基”是指具有2，3，4，5，6，7或8个碳原子的线性或分支排列的烯基或炔基。
[0150]
烷氧基是由前述直链，支链或环状烷基形成的氧醚。
[0151]
除非另有说明，本文使用的术语“芳基”包括含有碳环原子的未取代或取代的单环或多环系统。优选的芳基是单环或双环的6
‑
10元芳族环系统。苯基和萘基是优选的芳基。最优选的芳基是苯基。
[0152]
除非另有说明，本文使用的术语“芳基”包括含有碳环原子的未取代或取代的单环或多环系统。优选的芳基是单环或双环的6
‑
10元芳族环系统。苯基和萘基是优选的芳基。最优选的芳基是苯基。
[0153]
除非另有说明，本文使用的术语“杂环基”表示未取代或取代的稳定的三至八元单环饱和环系统，其由碳原子和选自n，o或s的1
‑
3个杂原子组成，并且其中氮或硫杂原子可任选被氧化，并且氮杂原子可任选被季铵化。杂环基可以连接在任何杂原子或碳原子上，以形成稳定的结构。这些杂环包括但不限于氮杂环丁烷基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，氧哌嗪基，氧哌啶基，氧杂庚基，庚啶基，四氢呋喃基，二氧戊环基，四氢咪唑基，四氢噻唑基，四氢恶唑基，四氢吡喃基，吗啉基，硫代吗啉基，噻吗啉基亚砜，噻吗啉基砜和恶二唑基。
[0154]
除非另有说明，本文使用的术语“杂芳基”表示未取代或者取代的稳定的5至6元单环芳族环系或未取代或者取代的稳定的9至10元苯并稠合杂芳族环系或双环杂芳族环系，其有碳原子或者选自n，o或s的1
‑
4个杂原子组成。其中氮或硫杂原子可任选被氧化，而氮杂原子可任选被季铵化。杂芳基可以连接在任何杂原子或碳原子上，以形成稳定的结构。杂芳基包括但不限于噻吩基，呋喃基，咪唑基，异恶唑基，恶唑基，吡唑基，吡咯基，噻唑基，噻二唑基，三唑基，吡啶基，哒嗪基，吲哚基，氮杂吲哚基，吲唑基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并噻吩基，苯并异恶唑基，苯并恶唑基，苯并吡唑，苯并噻唑基，苯并噻二唑，苯并三唑基腺嘌呤基，喹啉基或异喹啉基。
[0155]
术语“烯基氧基”是指
‑
o
‑
烯基基团，其中烯基如上定义。
[0156]
术语“炔基氧基”是指
‑
o
‑
炔基基团，其中炔基如上定义。
[0157]
术语“环烷基”是指具有3至12个碳原子的环状饱和烷基链，例如环丙基，环丁基，环丁基，环丁基。
[0158]
术语“取代”是指基团中的一个或多个氢原子被分别独立地被相同或不同的取代基取代。常见的取代基包括但不限于卤素(f，cl，br或i)，c1‑8烷基，c3‑
12
环烷基，
‑
or1，sr1，＝o，＝s，
‑
c(o)r1，
‑
c(s)r1，＝nr1，
‑
c(o)or1，
‑
c(s)or1，
‑
nr1r2，
‑
c(o)nr1r2，氰基，硝基，
‑
s(o)2r1，
‑
os(o2)or1，
‑
os(o)2r1，
‑
op(o)(or1)(or2)；其中r1和r2分别独立地选自
‑
h，低级烷基，低级卤代烷烃。在一些实施例中，所述取代基分别独立地任选自
‑
f，
‑
cl，
‑
br，
‑
i，
‑
oh，三氟甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，异丁氧基，t
‑
丁氧基，
‑
sch3，
‑
sc2h5，甲醛基，
‑
c(och3)，氰基，硝基，
‑
cf3，
‑
ocf3，氨基，二甲氨基，甲硫基，磺酰基和乙酰基。
[0159]
本文中术语“组合物”是指包含指定数量的指定成分的产品，以及直接或间接地由指定量的指定成分的组合产生的任何产品。含有本发明化合物作为活性成分或者化合物制备方法的均属于本发明。另外，化合物的一些晶体形式会以多晶型形态存在，这也包括在本发明范围内。此外，一些化合物可以与水(即水合物)或常见有机溶剂形成溶剂化物，这些溶剂化物也意欲包括在本发明范围内。
[0160]
取代的烷基实例包括但不限于2
‑
氨基乙基，2
‑
羟乙基，五氯乙基，三氟甲基，甲氧基甲基，五氟乙基和哌嗪基甲基。
[0161]
取代的烷氧基实例包括但不限于氨基甲氧基，三氟甲氧基，2
‑
二乙基氨基乙氧基，2
‑
乙氧基羰基乙氧基，3
‑
羟基丙氧基。
[0162]
本发明化合物也可以药学上可接受的盐形式存在，医药用途中，本发明化合物的盐形式是指无毒的药学上可接受的盐。药学上可接受的盐形式包括药学上可接受的酸性/阴离子或碱性/阳离子盐。药学上可接受的酸性/阴离子盐通常采用碱性氮被无机或有机酸质子化的形式。代表性的有机或无机酸包括盐酸，氢溴酸，氢氟酸，高氯酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，乙醇酸，乳酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，苹果酸，酒石酸，柠檬酸，苯甲酸，扁桃酸，甲磺酸，羟基乙磺酸，苯磺酸，草酸，帕莫酸，2
‑
萘磺酸，对甲苯磺酸，环己烷氨基磺酸，水杨酸，糖精或三氟乙酸。药学上可接受的碱性/阳离子盐包括但不限于铝，钙，氯普鲁卡因，胆碱，二乙醇胺，乙二胺，锂，镁，钾，钠和锌。
[0163]
在本发明领域内还包括了本发明化合物的前药。通常，前药是该化合物的功能性衍生物，其易在体内转化为所需的化合物。因此，在本发明中的治疗方法中，术语“施用”应包括应用具体公开的化合物或可能未具体公开但是在患者体内可以转化成特定化合物的化合物来治疗各种疾病。选择和制备常规的前药的常规方法描述于例如“design of prodrugs”,ed.h.bundgaard,elsevier,1985。
[0164]
化合物分子中特定位置的取代基或者变量的定义独立于该分子中的其他位置。这可以理解为化合物的取代基或者取代方式由本领域普通技术人员决定以提供一个稳定的化合物，并且该化合物可以通过本领域已知的技术方法合成。
[0165]
本发明描述的化合物可以包含一个或者多个不对称中心，并因此可产生非对应异构体和旋光异构体。本发明包括所有这些可能的非对映异构体及其外消旋混合物，其基本上纯的拆分的对映异构体，所有可能的几何异构体及其药学上可接受的盐。
[0166]
上述式ⅰ在某些位置没有确定的立体化学结构。本发明包括式ⅰ的所有立体异构体和其药学上可接受的盐。而且，立体异构体的混合物或者已经分离的特定立体异构体也包括在本发明范围内。在用于制备此类化合物的合成过程中，或在使用本领域技术人员已知的外消旋化或差向异构化方法的过程中，此类过程的产物可以是立体异构体的混合物。
[0167]
当存在式ⅰ化合物的互变异构体时，除非另有具体说明，本发明包括任何可能的互变异构体和其药学上可接受的盐，以及它们的混合物。
[0168]
当式i化合物及其药学上可接受的盐以溶剂化物或者多晶型形态存在时，本发明包括任何可能的溶剂化物或者多晶型物。形成溶剂化物的溶剂只要是药理学上可接受的在本发明中没有特别地限制。例如，水，乙醇，丙醇，丙酮等均可应用。
[0169]
术语“药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒的酸或碱制备得来的。当本发明化合物是酸性时，其相对应的盐可由药学上可接受的无毒的碱来制备，包括无机碱和有机碱。衍生自无机碱的盐包括铝，铵，钙，铜(一价和二价)，铁，亚铁，锂，镁，锰(一价和二价)，钾，钠，锌等盐。特别优选地为铵，钙，镁，钾和钠盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括伯，仲胺和叔胺的盐，以及环胺和取代的胺，例如天然存在的和合成的取代的胺。可以形成盐的其他药学上可接受的有机无毒碱包括离子交换树脂，例如精氨酸，甜菜碱，咖啡因，胆碱，n'，n'
‑
二苄基乙二胺，二乙胺，2
‑
二乙基氨基乙醇，2
‑
二甲基氨基乙醇，乙醇胺，
乙二胺，n
‑
乙基吗啉，n
‑
乙基哌啶，葡糖胺，葡糖胺，组氨酸，肼苯胺，异丙胺，赖氨酸，甲基葡糖胺，吗啉，哌嗪，哌啶，聚胺树脂，普鲁卡因，嘌呤，可可碱，三乙胺，三甲胺，三丙胺，丙胺等。
[0170]
当该化合物为碱性时，其相应的盐可由药学上接受的无毒的酸来制备，包括无机酸和有机酸。例如说这些酸包括醋酸，苯磺酸，苯甲酸，樟脑磺酸，柠檬酸，乙磺酸，甲酸，富马酸，葡萄糖酸，谷氨酸，氢溴酸，盐酸，等离子，乳酸，马来酸，苹果酸，扁桃酸，甲磺酸，粘胶，硝酸，帕莫酸，泛酸，磷酸，琥珀酸酒石酸，对甲苯磺酸等。优选的是柠檬酸，氢溴酸，甲酸，盐酸，马来酸，磷酸，硫酸和酒石酸，特别优选的是甲酸和盐酸。由于式i化合物旨在用于药物用途，因此它们优选以基本上纯的形式提供，例如至少60％的纯度，更合适地至少75％的纯度，尤其是至少98％的纯度(％为重量计)基础)。
[0171]
本发明的药用组合物包含式ⅰ所示的化合物(或其药学上可接受的盐)作为活性成分，药学可接受的载体和任选的其他有治疗作用的成分或者佐剂。该药用组合物可口服，直肠，局部和肠胃外(包括皮下，肌内和静脉内)给药，尽管在任何情况下最合适的活性成分给药途径将取决于特定的宿主，以及疾病的性质和严重程度。药物组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过药学领域公知的任何方法制备。
[0172]
在实践中，本发明的由式ⅰ表示的化合物或其前药，代谢物或药学上可接受的盐可以作为活性成分与药物载体按照常规药物混合技术紧密混合。载体可以采取多种形式，这取决于给药所需的制剂形式，例如口服或肠胃外(包括静脉内)。因此，本发明的药物组合物可以以适合口服的离散单位存在，例如分别含有预定量的活性成分的胶囊，扁囊剂或片剂。此外，组合物可以粉末，颗粒，溶液，在水性液体中的悬浮液，非水液体，水包油型乳剂或油包水形式存在。液体乳液。除上述常见剂型外，式ⅰ代表的化合物或其药学上可接受的盐也可以通过控释装置和/或递送装置给药。所述组合物可以通过任何药学方法制备。通常，这样的方法包括使活性成分与构成一种或多种必要成分的载体结合的步骤。通常，通过将活性成分与液体载体或细分的固体载体或两者均匀和紧密地混合来制备组合物。然后可以将产品方便地成形为所需的外观。
[0173]
因此，本发明的药用组合物包括药学上可接受的载体和式ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐。式ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐也可包括在与一种或多种其他有治疗作用的化合物联合治疗的药用组合物中。
[0174]
药用载体可以为例如固体，液体或气体。固体载体的实例包括例如乳糖，石膏粉，蔗糖，滑石粉，明胶，琼脂，果胶，阿拉伯胶，硬脂酸镁和硬脂酸。液体载体的实例包括例如糖浆，花生油，橄榄油和水。气态载体的实例包括例如二氧化碳和氮气。在制备口服剂型的组合物中，可以使用任何方便的药物介质。例如，水，乙二醇，油，醇，矫味剂，防腐剂，着色剂等可用于形成口服液体制剂，例如混悬剂，酊剂和溶液；或用于制备口服液体制剂。载体如淀粉，糖，微晶纤维素，稀释剂，制粒剂，润滑剂，粘合剂，崩解剂等可用于形成口服固体制剂，如粉剂，胶囊剂和片剂。由于易于给药，使用固体药物载体的片剂和胶囊剂是优选的口服剂量单位。任选地，片剂可以通过标准的水性或非水性技术进行包衣。
[0175]
含有本发明组合物的片剂可以通过压制或模制来制备，任选地与一种或多种辅助成分或佐剂一起制备。可以通过在合适的机器中将自由流动形式的活性成分例如粉末或颗粒压缩，任选地与粘合剂，润滑剂，惰性稀释剂，表面活性剂或分散剂混合来制备压制片剂。
模制片剂可以通过将用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物在合适的机器中模制来制备。每个片剂优选包含约0.05mg至约5g的活性成分，每个扁囊剂或胶囊优选包含约0.05mg至约5g的活性成分。例如，打算对人口服给药的制剂可含有约0.5mg至约5g的活性剂，与适当和方便量的载体材料混合，所述载体材料的量可为总组合物的约5％至约95％。单位剂型通常包含约1mg至约2g的活性成分，通常为25mg，50mg，100mg，200mg，300mg，400mg，500mg，600mg，800mg或1000mg。
[0176]
适用于肠胃外给药的本发明药物组合物可以制备成活性化合物在水中的溶液或悬浮液。可以包含适当的表面活性剂，例如羟丙基纤维素。分散剂也可以在甘油，液体聚乙二醇及其在油中的混合物中制备。此外，也可以包含防腐剂以防止微生物的有害生长。
[0177]
适用于注射用途的本发明药物组合物包括无菌水溶液或分散液。此外，该组合物可以是用于临时制备这种无菌注射溶液或分散液的无菌粉末形式。在所有情况下，最终的可注射形式必须是无菌的，并且必须有效地流动以易于注射。药物组合物在生产和储存条件下必须是稳定的；因此，最好保存在防微生物如细菌和真菌的污染的条件下。载体可以是含有例如水，乙醇，多元醇(例如甘油，丙二醇和液态聚乙二醇)，植物油及其合适混合物的溶剂或分散介质。
[0178]
本发明的药物组合物可以是适合局部使用的形式，例如气雾剂，乳膏，软膏剂，洗剂，撒粉剂等。此外，该组合物可以是适用于透皮装置的形式。这些包含本发明的式i所示化合物或其药学上可接受的盐的制剂可以通过常规加工方法制备。例如，乳膏剂或软膏剂可以通过将亲水性材料和水以及约5wt％至约10wt％的化合物混合以制备具有所需稠度的乳膏或软膏来制备。
[0179]
本发明的药物组合物可以是适于直肠给药的形式，其中载体是固体。优选混合物形成单位剂量的栓剂。合适的载体包括可可脂和本领域常用的其他材料。通过首先将组合物与软化或熔融的载体混合，然后在模具中冷却和成形，可以方便地形成栓剂。
[0180]
除上述载体成分外，上述药物制剂还可酌情包括一种或多种其他载体成分，例如稀释剂，缓冲剂，调味剂，粘合剂，表面活性剂，增稠剂，润滑剂，防腐剂(包括抗氧化剂)等等。此外，可以包含其他佐剂以使制剂与预期接受者的血液等渗。含有式i描述的化合物或其药学上可接受的盐的组合物也可以以粉末或液体浓缩物的形式制备。
[0181]
通常，每天约0.01mg/kg至约150mg/kg的剂量水平可用于治疗上述病症，或者每位患者每天可选约0.5mg至约7g的剂量。例如，结肠癌，直肠癌，套细胞淋巴瘤，多发性骨髓瘤，乳腺癌，前列腺癌，胶质母细胞瘤，鳞状细胞食管癌，脂肪肉瘤，t细胞淋巴瘤黑素瘤，胰腺癌，胶质母细胞瘤或肺癌可以通过以下方法有效治疗：每天每公斤体重施用约0.01至50mg化合物，或者每人每天施用约0.5mg至约3.5g化合物。
[0182]
但是，应理解，可能需要比上述剂量更低或更高的剂量。任何特定受试者的具体剂量水平和治疗方案将取决于多种因素，包括所用特定化合物的活性，年龄，体重，一般健康状况，性别，饮食，给药时间，给药途径，排泄速度，药物联用，正在接受治疗的特定疾病的严重程度和病程，以及治疗医师的判断。
[0183]
本发明的以下说明书描述将使这些和其他方面变得显而易见。
[0184]
提供以下实施例以更好地说明本发明。除非另有明确说明，所有份数和百分比均以重量计，所有温度均为摄氏度。
[0185]
将通过具体实施例更详细地描述本发明。以下实施例仅用于说明性目的，不以任何方式限制本发明。本领域技术人员将容易地认识到可以改变或修改以产生基本相同结果的各种非关键参数。实施例的化合物可以根据本文所述的至少一种测定法，以发现其抑制pd
‑
1/pd
‑
l1蛋白/蛋白相互作用的活性。
具体实施方式
[0186]
制备本发明化合物的实验步骤如下所述。利用开放获取制备型lcms在waters质量导向分馏系统上纯化了一些制备的化合物。用于这些系统操作的基本设备设置，协议和控制软件已在文献中进行了详细描述。参见，例如，blom，“用于制备型lc
‑
ms的两泵在柱稀释配置中”，k.blom，j.combi.chem，2002，4，295
‑
301；blom等人，“优化用于平行合成纯化的制备型lc
‑
ms配置和方法”，j.combi.chem，2003，5，670
‑
83；和blom等人，“制备型lc
‑
ms纯化：改进的化合物特异性方法优化”，j.combi.chem.，2004，6，874
‑
883。
[0187]
本文所述的化合物可以从商业来源获得或使用市售的起始原料和试剂通过如下所示的常规方法合成制得。实施例中使用了下列缩略语：
[0188]
acoh或hoac：醋酸；
[0189]
bsa：牛血清白蛋白；
[0190]
dcm：二氯甲烷；
[0191]
ddq：2，3
‑
二氯
‑
5，6
‑
二氰基对苯醌；
[0192]
dmso：二甲基亚砜；
[0193]
etoac：乙酸乙酯；
[0194]
h或hrs：小时；
[0195]
htrf：均相时间分辨荧光；
[0196]
meoh：甲醇；
[0197]
min：分钟；
[0198]
pe：石油醚；
[0199]
pd(dppf)cl2：[1，1'
‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯；
[0200]
rt或r.t.：室温；
[0201]
tbai：四丁基碘化铵；
[0202]
thf：四氢呋喃。
[0203]
实施例1化合物1的合成
[0204]
(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸
[0205][0206]
步骤1:4
‑
羟基
‑2‑
(甲硫基)
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯的制备
[0207]
[0208]2‑
氟
‑4‑
羟基苯甲酸甲酯(20.00g)溶于200ml乙酸中，冰浴条件下降温至0
‑
10℃，浓硝酸(10.1ml，0.236mol)溶于40ml乙酸中缓慢滴加至上述反应溶液；滴加完毕，移除冰浴并自然升至室温搅拌4
‑
6h。反应溶液倒入冰水中以淬灭反应。搅拌0.5h后，固体完全析出，过滤，滤饼水洗2
‑
3次，干燥，粗产品用快速色谱(a.正己烷；b.ea；b％从0至30％,20分钟)纯化得到13.00g2
‑
氟
‑4‑
羟基
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯，为淡黄色固体。
[0209]2‑
氟
‑4‑
羟基
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯(8.00g)和硫代甲醇钠固体(50％)(15.56g)于甲醇(80ml)中的混合物在室温下搅拌，然后在80℃搅拌20h。过滤得到固体残余物，然后真空干燥得到7.60g 4
‑
羟基
‑2‑
(甲硫基)
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯粗产物。
[0210]
步骤2:5
‑
氨基
‑
2,4
‑
二羟基苯甲酸甲酯制备
[0211][0212]4‑
羟基
‑2‑
(甲硫基)
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯(77.1g)和10％pd/c(11.5g)于甲醇(2l)的混合物在1.1氢气大气压下室温搅拌3h。过滤去除催化剂，固体残余物用甲醇(300ml)洗涤然后真空干燥得到72g 5
‑
氨基
‑4‑
羟基
‑2‑
(甲硫基)苯甲酸甲酯粗产品。
[0213]
步骤3:2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的制备
[0214][0215]5‑
氨基
‑4‑
羟基
‑2‑
(甲硫基)苯甲酸甲酯(32.9g)和3
‑
溴
‑2‑
甲基苯甲醛(32.5g)于甲醇(1l)的混合物在80℃搅拌2.5h，然后将混合物减压浓缩。向混合物中加入dcm(500ml)和ddq(55.6g)。混合物在室温搅拌1h。反应用dcm稀释并用na2s2o3水溶液和nahco3溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤，滤液浓缩。粗产物通过柱色谱(pe:dcm＝1:1)纯化得到45g 2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯为棕色固体。
[0216]
步骤4:2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的制备
[0217][0218]2‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(6.00g)，苯硼酸(2.70g)，k2co3(6.10g)，pd(dppf)cl2(1.10g)加入到二氧六环(50ml)中，氮气条件下在80℃保持120分钟。混合物冷却并用dcm稀释，然后用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤，滤液浓缩。粗产物通过柱色谱(pe:dcm＝1:5)纯化得到5g 2
‑
(2
‑
甲基
‑
[[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯。
[0219]
步骤5:(2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲醇的制备
[0220][0221]
0℃条件下，将lialh4的thf(2.5m，5ml)溶液滴加至2
‑
(2
‑
甲基
‑
[[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(1.30g)和thf(50ml)的溶液中，所述混合物升至室温。1h后，混合物用1ml h2o和1ml 10％naoh溶液淬灭，然后分别用1m hcl，水和盐水洗涤。有机相na2so4干燥，过滤，然后浓缩滤液得到(2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲醇为黄色固体(1.2g)。
[0222]
步骤6:2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛的制备
[0223][0224]
10℃下，向(2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲醇(1.40g)的干燥thf(15ml)溶液中加入dess
‑
martin(2.39g)。然后反应混合液室温搅拌1h。混合液硅藻土过滤。固体用dcm洗涤，然后合并滤液并依次用nahco3水溶液，水和盐水洗涤，干燥并浓缩。残余物通过柱色谱(以20:1至5:1的梯度用己烷
‑
etoac洗脱)纯化得到2
‑
(2
‑
甲基
‑
[[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛为固体(1.27g)。
[0225]
步骤7:(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸的制备
[0226][0227]2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛(1.00g)，(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸(1.70g)，hoac(316mg)于meoh中的混合物室温搅拌0.5小时。然后加入nabh3cn(498mg)，60℃加热2h。混合物冷却并用dcm稀释，然后分别用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤并浓缩滤液。残余物通过柱色谱纯化得到(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸为白色固体。(671mg)。
[0228]
实施例2化合物2的合成
[0229]
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸
[0230][0231]
基本如实施例1所描述的方法，使用相应的中间体制备化合物2。例如，在上述最后步骤(步骤7)中使用“l
‑
脯氨酸”代替“(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸”。
[0232]
基本上按照实施例1所描述的方法，使用基本上按照实施例1所描述的方法，使用代替实施例29步骤1中的来制备如下实施例(表1中所示)，在一些实施例中，用其他酰胺酸(例如l
‑
脯氨酸)代替上述步骤7中的(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸。
[0233]
表1
[0234]
[0235]
[0236][0237]
[0238]
实施例29化合物29的合成
[0239]
(s)
‑1‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸
[0240][0241]
步骤1:2,4
‑
二羟基
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯的制备
[0242][0243]
2,4
‑
二羟基苯甲酸甲酯(850g，5.06mol)溶于acoh(3.6l)和ac2o(900ml)的混合液中。将所述澄清溶液冷却至10℃(冰浴)后，1h内加入hno3(65％)(455ml)于acoh(500ml)的混合物。加入完毕后，将反应混合物的温度升至15
‑
20℃然后继续搅拌1小时。直到原料基本上反应完全且反应终止。将反应溶液倒入h2o(3l)中，然后继续加入混合物30分钟而不搅拌。过滤沉淀物，并用少量h2o淋洗。然后将粗产物在搅拌下倒入meoh(2l)中。过滤沉淀物，并用少量meoh洗涤，真空干燥得到480g 2,4
‑
二羟基
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯。
[0244]
步骤2:5
‑
氨基
‑
2,4
‑
二羟基苯甲酸甲酯的制备
[0245][0246]
2,4
‑
二羟基
‑5‑
硝基苯甲酸甲酯(77.1g)和10％pd/c(11.5g)于甲醇(2l)中的混合物在1.1氢气大气压下室温搅拌3h。过滤去除催化剂，固体残余物用甲醇(300ml)洗涤，真空干燥得到72g 5
‑
氨基
‑
2,4
‑
二羟基苯甲酸甲酯粗产物。
[0247]
步骤3:2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
羟基苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的制备
[0248][0249]5‑
氨基
‑
2,4
‑
二羟基苯甲酸甲酯(32.9g)和3
‑
溴
‑2‑
甲基苯甲醛(32.5g)于甲醇(1l)的混合物在80℃搅拌2.5h，然后将混合减压浓缩。向混合中加入dcm(500ml)和ddq(55.6g)。混合物在室温搅拌1h。反应用dcm稀释并用na2s2o3水溶液和nahco3溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤，滤液浓缩。粗产物通过柱色谱(pe:dcm＝1:1)纯化得到45g 2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
羟基苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯为棕色固体。
[0250]
步骤4:2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的制备
[0251][0252]2‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
羟基苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(10.0g)，2
‑
溴
‑
2,2
‑
二氟乙酸钠(5.46g)，cs2co3(27.09g)，ki(4.59g)，tbai(10.22g)溶于dmf(200ml)中，混合物100℃搅拌3h，反应用dcm稀释，并用nacl水溶液洗涤，粗产物通过柱层析(pe:dcm＝1:1)纯化得
到5g 2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯。
[0253]
步骤5:6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的制备
[0254][0255]2‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(二氟甲氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(6.00g)，苯硼酸(2.70g)，k2co3(6.10g)，pd(dppf)cl2(1.10g)加入到二氧六环(50ml)中，氮气条件下在80℃保持120分钟。混合物冷却并用dcm稀释，然后用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤，滤液浓缩。粗产物通过柱色谱(pe:dcm＝1:5)纯化得到5g 6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯。
[0256]
步骤6:(6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲醇的制备
[0257][0258]
0℃条件下，将lialh4的thf(2.5m，5ml)溶液滴加至6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(1.30g)和thf(50ml)的溶液中，所述混合物升至室温。1h后，混合物用1ml h2o和1ml 10％naoh溶液淬灭，然后分别用1m hcl，水和盐水洗涤。有机相na2so4干燥，过滤，然后浓缩滤液得到(6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲
[0259]
醇为黄色固体(1.2g)。
[0260]
步骤7:6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛的制备
[0261][0262]
10℃下，向((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲醇(1.40g)的干燥thf(15ml)溶液中加入dess
‑
martin(2.39g)。然后反应混合液室温搅拌1h。混合液硅藻土过滤。固体用dcm洗涤，然后合并滤液并依次用nahco3水溶液，水和盐水洗涤，干燥并浓缩。残余物通过柱色谱(以20:1至5:1的梯度用己烷
‑
etoac洗脱)纯化得到6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛为固体(1.27g)。
[0263]
步骤8:(s)
‑1‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸的制备
[0264][0265]6‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛(1.00g)，(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸(1.70g)，hoac(316mg)于meoh中的混合物室温搅拌0.5小时。然后加入nabh3cn(498mg)，60℃加热2h。混合物冷却并用dcm稀释，然后分别用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤并浓缩滤液。残余物通过柱色谱(dcm:meoh＝8％)纯化得到(s)
‑1‑
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸为白色固体。
[0266]
(671mg)。
[0267]
实施例30化合物30的合成
[0268]
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
d
‑
别苏氨酸
[0269][0270]
基本如实施例29所描述的方法，使用相应的中间体制备化合物30。例如，在上述最后步骤(步骤8)中使用代替
[0271]
实施例36化合物36的合成
[0272]
((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸
[0273][0274]
基本如实施例29所描述的方法，使用相应的中间体制备化合物36。例如，在上述最后步骤(步骤8)中使用“l
‑
脯氨酸”代替“(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸”。实施例29的示例制备过程描述如下：
[0275]6‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛(1.00g)，l
‑
脯氨酸(1.60g)，hoac(325mg)于meoh中的混合物室温搅拌0.5小时。然后加入nabh3cn(498mg)，60℃加热2h。混合物冷却并用dcm稀释，然后用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤并浓缩滤液。残余物通过柱色谱(dcm:meoh＝8％)纯化得到((6
‑
(二氟甲氧基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸为白色固体。(650mg)。
[0276]
基本上按照实施例29所描述的方法，使用实施例相应的中间体制备如下实施例(表2中所示)，即氨基酸，例如在上述步骤8中用l
‑
丙氨酸，甘氨酸，l
‑
脯氨酸代替(s)
‑
哌啶
‑
2
‑
羧酸。
[0277]
表2
[0278]
[0279]
[0280]
[0281][0282]
实施例54化合物54的合成
[0283]
(s)
‑1‑
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)哌啶
‑2‑
羧酸
[0284][0285]
基本如实施例1所描述的方法，使用相应的中间体制备化合物54。例如，在上述步骤4中使用代替制备2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的示例步骤如下：
[0286][0287]
向回流的丙酮(20ml)，2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
羟基苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(2.0g)和碳酸钾(3.1g)于40ml密封小瓶中的溶液中滴加2,2,2
‑
三氟乙基三氟甲磺酸盐(3.9g)。混合液回流搅拌过夜，然后减压浓缩。残余物溶于水(50ml)和二氯甲烷(50ml)中。分液，将水相层用二氯甲烷(3*50ml)萃取。合并的有机萃取液经干燥(na2so4)，过滤，然后浓缩得到粗2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
(2,2,2
‑
三氟乙氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯1.8g。
[0288]
基本上按照实施例54所描述的方法，使用实施例相应的中间体制备如下实施例(表3中所示)，即氨基酸，例如l
‑
丙氨酸，甘氨酸，l
‑
脯氨酸代替(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸。
[0289]
表3
[0290]
[0291][0292]
实施例64化合物64的合成
[0293]
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
((甲磺酰基氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸
[0294][0295]
基本上按照实施例29所描述的方法，使用实施例相应的中间体制备化合物64，例如，在上述最后步骤(步骤8)中使用“l
‑
脯氨酸”代替“(s)
‑
哌啶
‑2‑
羧酸”；并在上述步骤4中用替换制备2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
((甲基磺酰基)氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯的示例步骤如下：
[0296][0297]
向搅拌的2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
羟基苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(1g)于30ml二氯甲烷的溶液中加入三乙胺(1.2克)。混合液冷却到
‑
5至0℃，在0℃至5℃下于1小时内加入甲烷磺酰氯(1.13gm)的二氯甲烷(10ml)溶液，并在0℃保持1小时，然后升温至22
‑
25℃保持3小时。tcl显示转化率>98％，向反应体系中加入水20ml，在22
‑
25℃搅拌1小时。分离有机相，水相用20ml二氯甲烷萃取。合并的有机相用20ml水洗涤，溶剂蒸发得1.2g甲基2
‑
(3
‑
溴
‑2‑
甲基苯基)
‑6‑
((甲基磺酰基)氧基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲基羧酸盐。
[0298]
实施例65化合物65的合成
[0299]
步骤1:2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛的制备
[0300][0301]2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛的制备方法如实施例1步骤6所述。
[0302]
在0℃下，向2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲硫基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛(700mg)于干燥dcm(15ml)溶液中加入m
‑
cpba(336mg)。然后反应混合液在0℃搅拌0.5小时。混合液经硅藻土过滤。固体用dcm洗涤，合并的滤液分别用nahco3水溶液，水和盐水洗涤，干燥，浓缩。残余物通过柱色谱(用20:1至5:1的梯度用己烷
‑
etoac洗脱)纯化得到2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛为固体(1.27g)。
[0303]
步骤2:((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸的制备
[0304]
[0305]2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
甲醛，l
‑
脯氨酸(1.70g)，hoac(316mg)于meoh中的混合液室温搅拌0.5小时。然后加入nabh3cn(498mg)，60℃加热2h。混合物冷却并用dcm稀释，然后分别用h2o和nacl溶液洗涤。有机相mgso4干燥，过滤并浓缩滤液。残余物通过柱色谱(dcm:meoh＝8％)纯化得到((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲基亚磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸为白色固体(671mg)。
[0306]
实施例66化合物66的合成
[0307]
((2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑6‑
(甲磺酰基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)甲基)
‑
l
‑
脯氨酸
[0308][0309]
基本如实施65所描述的方法，使用相应的中间体制备实施例66。
[0310]
实施例67化合物67的合成
[0311]8‑
甲基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷
[0312][0313]
步骤1:5
‑
(羟甲基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇的制备
[0314][0315]
氮气保护下，向6
‑
羟基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
羧酸甲酯(0.5g)中加入thf(15ml)，降至0℃，缓慢滴加lialh4(2.5m)的thf(0.56ml)溶液，反应完毕后，加入2ml ea淬灭反应，然后加入饱和nh4cl溶液(10ml)和ea(10ml)萃取。20ml nacl溶液洗涤两次。有机相na2so4干燥，过滤，滤液浓缩得到0.42g 5
‑
(羟甲基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇为白色固体。lcms:[m+h]
+
＝332.0。
[0316]
步骤2:1
‑
(6
‑
羟基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑5‑
基)乙
‑1‑
酮的制备
[0317][0318]
向5
‑
(羟甲基)
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇(0.42g)中加入dcm(15ml)，mno2(4g)，室温搅拌过夜。反应液经硅藻土过滤，并浓缩滤液。粗产物通过柱层析(正己烷/ea＝30/1)纯化得到0.1g 1
‑
(6
‑
羟基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基]苯并[d]恶唑
‑5‑
基)乙
‑1‑
酮为棕色固体。lcms:[m+h]
+
＝344.0。
[0319]
步骤3:2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑5‑
((甲基氨基))甲基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇
的制备
[0320][0321]
向1
‑
(6
‑
羟基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基]苯并[d]恶唑
‑5‑
基)乙
‑1‑
酮(0.1g)中加入meoh(2ml)，然后缓慢加入甲胺的meoh(5ml)溶液，室温搅拌2小时，然后加入nacnbh3(0.1g)。室温搅拌1小时，浓缩，粗产品经柱层析(dcm/meoh＝30/1)纯化得到0.06g 2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑5‑
((甲基氨基)甲基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇为淡黄色固体。lcms：[m+h]＝345.1。
[0322]
步骤4:8
‑
甲基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷的制备
[0323][0324]
向2
‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑5‑
((甲基氨基)甲基)苯并[d]恶唑
‑6‑
醇(60mg)中加入cs2co3(100mg)，thf(5ml)，和1,2
‑
二溴乙烷(2ml)，80℃搅拌3h，浓缩，粗产品经柱层析(正己烷/ea＝30/1)纯化得到9mg 8
‑
甲基
‑2‑
(2
‑
甲基
‑
[1,1'
‑
联苯]
‑3‑
基)
‑
6,7,8,9
‑
四氢恶唑并[5',4':4,5]苯并[1,2
‑
f][1,4]氧氮杂环庚烷为类白色固体。lcms:[m+h]＝371.1
[0325]
基本上如实施例67所述的方法，使用相应的起始原料和中间体制备以下实施例(表4所示)。
[0326]
表4
[0327]
[0328][0329]
对照实施例
[0330]
基本如wo2017087777中实施例26和实施例31所描述的方法制备如下对照实施例(如表5所示)。
[0331]
表5
[0332][0333]
*使用以下所述的pd
‑
1/pd
‑
l1均相时间分辨荧光(htrf)结合测定法获得上述对照实施例的数据。
[0334]
时间分辨荧光(htrf)结合试验
[0335]
测试在标准黑色384孔聚苯乙烯平板中进行，最终体积为20μl。首先在dmso中连续稀释抑制剂，然后在添加其他反应组分之前将其添加到板孔中。测定dmso的最终浓度为1％。该测定是在25℃，含0.05％吐温
‑
20和0.1％bsa的pbs缓冲液(ph 7.4)中进行的。c端带有his
‑
标签的重组人pd
‑
l1蛋白(19
‑
238)购自acrobiosy stems(pd1
‑
h5229)。c末端带有fc标签的重组人pd
‑
1蛋白(25
‑
167)同样购自acrobiosy stems(pd1
‑
h5257)。将pd
‑
l1和pd
‑
1蛋白在测定缓冲液中稀释，并将10μl加入到向板入。将板离心，并将蛋白质与抑制剂预孵育40分钟。孵育后，添加10μl htrf检测缓冲液，该缓冲液中补充了对fc有特异性的加密标记的抗人igg(perkinelmer
‑
ad0212)和与
‑
别藻蓝蛋白(allophycocyanin)(apc，perkinelmer
‑
ad0059h)偶联的抗his抗体。离心后，将孔板在25℃下孵育60分钟。在pherastar fs读板器(665nm/620nm比率)上阅读之前，测定中的最终浓度为3nm的pd1、10nm
的pd
‑
l1、1nm的抗人igg和20nm的抗his
‑
别藻蓝蛋白。使用graphpad prism 5.0软件拟合控制活性百分比与抑制剂浓度对数的曲线来进行ic
50
测定。
[0336]
本发明所涉及的化合物，如实施例中所示的，具有如下范围的ic
50
值：“*”代表“0.1nm<ic
50
≤10nm”；“**”代表“10nm<ic
50
≤100nm”；“***”代表“100<ic
50
≤1000nm”。
[0337]
表6中提供了使用实施例a中所述的pd
‑
1/pd
‑
l1均相时间分辨荧光(htrf)结合测定获得的实施例化合物的数据。
[0338]
表6
[0339]
[0340][0341]
如表5和表6所示，本发明所示的大部分示例性化合物均显示出与已知化合物例如表5中对照化合物1和对照化合物2相同水平的抑制活性。
[0342]
药代动力学试验
[0343]
健康的成年雄性大鼠接受单剂量的以10％dmso，10％hs 15和80％生理盐水作为赋形剂的测试化合物，大鼠以25mg/kg的剂量口服(胃内给药)给药。在实验之前，将动物禁食过夜，禁食时间从施用前的12小时持续至施用后的4小时。采血时间：15分钟，30分钟，1小时，2小时，4小时，7小时，24小时。从眶后静脉窦收集约0.3ml全血，并将其放入装有edta作为抗凝剂的试管中。将样品在4℃和4000rpm下离心5分钟。将血浆转移到离心管中，并保存在
‑
20℃以待分析。用液相色谱
‑
串联质谱法(lc
‑
ms/ms)分析血浆样品中测试化合物的浓度。使用winnonlin(4.1版；pharsight)软件分析单个动物的血浆浓度
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时间数据。在浓度分析中引入了非隔室模型。计算了测试化合物的药代动力学参数。数据结果见表7。
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表7
[0345][0346]
如表7所示，我们可以看到本发明的示例性化合物显示出比已知化合物表5中对照实施例1和2出乎意料的更好的药代动力学性质。