荸荠皮提取6,8-二甲基木犀草素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然有机化学领域，涉及一种6, 8-二甲基木犀草素的分离纯化方法， 特别是涉及一种从荸荠皮中提取分离6, 8-二甲基木犀草素的方法。
【背景技术】
[0002] 6, 8-二甲基木庫草素（6, 8-dimethylluteolin)，黄色晶体，化学名为6, 8-二甲 基_5,7,3'，4'-四羟基黄酮，为木犀草素的C-甲基化衍生物。该类衍生物具有多种 药理活性，如抗氧化、抗菌、抗肿瘤等。6, 8-二甲基木犀草素结构独特，自然界分布少，相 关文献很少，没有发现从天然植物中提取分离6, 8-二甲基木犀草素的技术介绍。荸荠 (Eleocharis tuberosa)，又称马蹄，属莎草科多年生浅水草本植物荸养的地下球莖，我国 大部分地区都有栽培。其中，广西荸荠产量占全国70 %，贺州荸荠产量占广西70 %。据文献 报道，荸荠有抗菌、抗肿瘤、防治呼吸道疾病、利肠通便和利尿排淋等作用；临床上可用于治 疗咽喉疼痛、痰热咳嗽、热病烦渴、小便不利、痢疾等症。研宄表明，荸荠的活性物质主要富 集在果皮和果肉之间。在荸荠加工过程中，被丢弃的荸荠皮质量约占新鲜荸荠质量的25%， 资源非常丰富。我们在研宄中发现荸荠皮中含有6, 8-二甲基木犀草素，但目前未见从荸荠 皮中提取分离该化合物的文献报道。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于：提出一种荸荠皮提取6, 8-二甲基木犀草素的方法。
[0004] 6, 8-二甲基木犀草素，其化学结构式如下：
[0005]
【主权项】
1. 一种荸荠皮提取6, 8-二甲基木犀草素的方法，其具体步骤如下： (1) 将新鲜的荸荠皮风干，粉碎，备用；以重量计，称取荸荠皮粉末1份，加入提取罐中， 每次加入4-10份70%体积百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次，过滤，合并 滤液，减压浓缩至膏状，获得提取物； (2) 以重量计，将提取物1份分散在5份水中制成悬浊液，用1-2倍水体积的乙酸乙酯 萃取3次，合并萃取液，减压浓缩至干，获得萃取物； (3) 往萃取物中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍萃取物质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发 至干，装柱，连接MCI柱进行中压分离，以40-100%体积百分比的甲醇水溶液为流动相梯度 洗脱，薄层色谱法检测，收集合并流动相浓度为70-90%体积百分比的洗脱液，减压浓缩，获 得粗品A ; (4) 往粗品A中加入甲醇至完全溶解，用2-4倍质量的聚酰胺拌样，将甲醇挥发至干，转 入聚酰胺色谱柱进行分离，用体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液洗脱，薄层色谱法检测， 收集合并含有6, 8-二甲基木犀草素的洗脱液，减压浓缩，获得粗品B ; (5) 以重量计，将粗品B1份溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇体积的水制成悬浊液，用 Sephadex LH-20凝胶色谱柱纯化，用甲醇洗脱，薄层色谱法检测，收集合并含有6, 8-二甲 基木犀草素的洗脱液，减压浓缩，获得粗品C ; (6) 将所得粗品C经甲醇或乙醇重结晶纯化，干燥，获得含量达95%以上的6, 8-二甲 基木犀草素产品。
2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（3)中的所述的MCI柱规格 为70X460mm，填充材料为MCI-gel CHP-20P，柱色谱条件为：柱压为80Psi，流动相流速为 50mL/min，检测波长为245nm ;所述的流动相为40-100%体积百分比的甲醇水溶液。
3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（4)中所述的聚酰胺规格为 200-300目；所用洗脱液为体积比为3:1-1:1的氯仿-甲醇溶液。
【专利摘要】本发明的荸荠皮提取6,8-二甲基木犀草素的方法，属于天然有机化学领域，其特征在于，以丙酮水溶液为溶剂，提取荸荠皮中的6,8-二甲基木犀草素，提取物用乙酸乙酯萃取后，经中压MCI柱色谱和聚酰胺柱色谱分离，然后用Sephadex LH-20凝胶色谱纯化，经重结晶，获得含量在95％以上的6,8-二甲基木犀草素产品。本发明开辟了从天然植物中提取分离6,8-二甲基木犀草素的新途径，分离效果好，产品纯度高，使一贯被视为废弃物的荸荠皮变废为宝，所选用的层析材料MCI、聚酰胺和凝胶均可反复使用，原料易得，资源丰富，生产成本低，可进行规模化生产，具有较好的应用前景。
【IPC分类】C07D311-40, C07D311-30
【公开号】CN104529978
【申请号】CN201410833111
【发明人】罗杨合, 何星存, 李行任, 陈振林, 陈海伦
【申请人】贺州学院
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月29日