植物油中动物源成分的lamp法检测引物和检测方法_4

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,其它操作按实施例2的步骤4操作。
[0051 ] 步骤5、用LAMP法检测DNA:用本实施例步骤I的牛肉末代替实施例2的步骤5中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤5操作,其最的检测结果也同于实施例2步骤5的D.观察两个试样的反应结果。即结果如下:
D.观察两个试样的反应结果:用肉眼观察Loopamp? “朗报? ”反应试管I和Loopamp? “朗报?”反应试管2中是否有白色浑池;结果为:Loopamp? “朗报?”反应试管I中有白色浑浊,Loopamp? “朗报?”反应试管2中无白色浑浊;反应试管I中是含动物源成分植物油的DNA样品,LAMP法检测有白色浑浊;反应试管2中是植物油的DNA样品,LAMP法检测无白色浑浊。
[0052]E.结论:按步骤3在10mL植物油中加入了 Ig的牛肉末爆炒的残余物,作为含动物源成分植物油的DNA样品,在本发明的引物组进行LAMP法检测,与对照组的植物油的区别可用肉眼观察出不同,说明本发明的引物组用LAMP法检测植物油中的动物源成分牛肉DNA是可行的,灵敏度达到能检出10mL植物油中加入了 Ig的牛肉末爆炒2分钟后,残余在植物油中动物DNA。
[0053]
所述植物油是纯玉米油、纯花生油或纯菜籽油的某一种,其中玉米油是建华牌四川省成都建华香油厂出品的标称纯玉米油;
花生油是惠宜牌山东玉皇粮油食品有限公司的标称纯花生油;
菜籽油是鲤鱼牌益海嘉里荣誉出品的称纯菜籽油。
[0054]
实施例4、植物油中混合有猪肉DNA成分的LAMP法检测方法其步骤如下:
步骤1、制备猪肉末样品:市场上购买新鲜的猪肉,用天平称取猪肉100g,装入烧杯I中;将烧杯I中的肉全部倒入绞肉机中绞碎混匀,直至所有的肉绞成肉末状并混合均匀,将绞肉机中的所有肉末装入烧杯2中,烧杯2中的肉末即猪肉末。
[0055]步骤2、提取植物油中的DNA:同于实施例2的步骤2。
[0056]步骤3、制作含动物源成分的植物油样品:用本实施例步骤I的猪肉末代替实施例2的步骤3的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤3操作。
[0057]步骤4、提取步骤3所得样品的DNA,即提取含动物源成分植物油中的DNA:用本实施例步骤I的猪肉末代替实施例2的步骤4中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤4操作。
[0058]步骤5、用LAMP法检测DNA:用本实施例步骤I的猪肉末代替实施例2的步骤5中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤5操作,其最的检测结果也同于实施例2步骤5的D.观察两个试样的反应结果。即结果如下:
D.观察两个试样的反应结果:用肉眼观察Loopamp? “朗报? ”反应试管I和Loopamp? “朗报?”反应试管2中是否有白色浑池;结果为:Loopamp? “朗报?”反应试管I中有白色浑浊,Loopamp? “朗报?”反应试管2中无白色浑浊;反应试管I中是含动物源成分植物油的DNA样品,LAMP法检测有白色浑浊;反应试管2中是植物油的DNA样品,LAMP法检测无白色浑浊。
[0059]E.结论:按步骤3在10mL植物油中加入了 Ig的猪肉末爆炒的残余物,作为含动物源成分植物油的DNA样品,在本发明的引物组进行LAMP法检测,与对照组的植物油的区别可用肉眼观察出不同,说明本发明的引物组用LAMP法检测植物油中的动物源成分猪肉DNA是可行的,灵敏度达到能检出10mL植物油中加入了 Ig的猪肉末爆炒2分钟后,残余在植物油中动物DNA。
[0060]所述植物油是纯玉米油、纯花生油或纯菜籽油的某一种,其中玉米油是建华牌四川省成都建华香油厂出品的标称纯玉米油;
花生油是惠宜牌山东玉皇粮油食品有限公司的标称纯花生油; 菜籽油是鲤鱼牌益海嘉里荣誉出品的称纯菜籽油。
[0061]
实施例5、植物油中混合有羊肉DNA成分的LAMP法检测方法其步骤如下:
步骤1、制备羊肉末样品:市场上购买新鲜的羊肉,用天平称取羊肉100g,装入烧杯I中;将烧杯I中的肉全部倒入绞肉机中绞碎混匀,直至所有的肉绞成肉末状并混合均匀,将绞肉机中的所有肉末装入烧杯2中,烧杯2中的肉末即羊肉末。
[0062]步骤2、提取植物油中的DNA:同于实施例2的步骤2。
[0063]步骤3、制作含动物源成分的植物油样品:用本实施例步骤I的羊肉末代替实施例2的步骤3的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤3操作。
[0064]步骤4、提取步骤3所得样品的DNA,即提取含动物源成分植物油中的DNA:用本实施例步骤I的羊肉末代替实施例2的步骤4中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤4操作。
[0065]步骤5、用LAMP法检测DNA:用本实施例步骤I的羊肉末代替实施例2的步骤5中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤5操作,其最的检测结果也同于实施例2步骤5的D.观察两个试样的反应结果。即结果如下:
D.观察两个试样的反应结果:用肉眼观察Loopamp? “朗报? ”反应试管I和Loopamp? “朗报?”反应试管2中是否有白色浑池;结果为:Loopamp? “朗报?”反应试管I中有白色浑浊,Loopamp? “朗报?”反应试管2中无白色浑浊;反应试管I中是含动物源成分植物油的DNA样品,LAMP法检测有白色浑浊;反应试管2中是植物油的DNA样品,LAMP法检测无白色浑浊。
[0066]E.结论:按步骤3在10mL植物油中加入了 Ig的羊肉末爆炒的残余物,作为含动物源成分植物油的DNA样品,在本发明的引物组进行LAMP法检测,与对照组的植物油的区别可用肉眼观察出不同,说明本发明的引物组用LAMP法检测植物油中的动物源成分羊肉DNA是可行的,灵敏度达到能检出10mL植物油中加入了 Ig的羊肉末爆炒2分钟后,残余在植物油中动物DNA。
[0067]所述植物油是纯玉米油、纯花生油或纯菜籽油的某一种,其中玉米油是建华牌四川省成都建华香油厂出品的标称纯玉米油;
花生油是惠宜牌山东玉皇粮油食品有限公司的标称纯花生油;
菜籽油是鲤鱼牌益海嘉里荣誉出品的称纯菜籽油。
[0068]
实施例6、植物油中混合有鸡肉DNA成分的LAMP法检测方法其步骤如下:
步骤1、制备鸡肉末样品:市场上购买新鲜的鸡肉,用天平称取鸡肉100g,装入烧杯I中;将烧杯I中的肉全部倒入绞肉机中绞碎混匀,直至所有的肉绞成肉末状并混合均匀,将绞肉机中的所有肉末装入烧杯2中,烧杯2中的肉末即鸡肉末。
[0069]步骤2、提取植物油中的DNA:同于实施例2的步骤2。
[0070]步骤3、制作含动物源成分的植物油样品:用本实施例步骤I的鸡肉末代替实施例2的步骤3的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤3操作。
[0071]步骤4、提取步骤3所得样品的DNA,即提取含动物源成分植物油中的DNA:用本实施例步骤I的鸡肉末代替实施例2的步骤4中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤4操作。
[0072]步骤5、用LAMP法检测DNA:用本实施例步骤I的鸡肉末代替实施例2的步骤5中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤5操作,其最的检测结果也同于实施例2步骤5的D.观察两个试样的反应结果。即结果如下:
D.观察两个试样的反应结果:用肉眼观察Loopamp? “朗报? ”反应试管I和Loopamp? “朗报?”反应试管2中是否有白色浑池;结果为:Loopamp? “朗报?”反应试管I中有白色浑浊,Loopamp? “朗报?”反应试管2中无白色浑浊;反应试管I中是含动物源成分植物油的DNA样品,LAMP法检测有白色浑浊;反应试管2中是植物油的DNA样品,LAMP法检测无白色浑浊。
[0073]E.结论:按步骤3在10mL植物油中加入了 Ig的鸡肉末爆炒的残余物,作为含动物源成分植物油的DNA样品,在本发明的引物组进行LAMP法检测,与对照组的植物油的区别可用肉眼观察出不同,说明本发明的引物组用LAMP法检测植物油中的动物源成分鸡肉DNA是可行的,灵敏度达到能检出10mL植物油中加入了 Ig的鸡肉末爆炒2分钟后,残余在植物油中动物DNA。
[0074]所述植物油是纯玉米油、纯花生油或纯菜籽油的某一种,其中玉米油是建华牌四川省成都建华香油厂出品的标称纯玉米油;
花生油是惠宜牌山东玉皇粮油食品有限公司的标称纯花生油;
菜籽油是鲤鱼牌益海嘉里荣誉出品的称纯菜籽油。
[0075]
实施例7、植物油中混合有兔肉DNA成分的LAMP法检测方法其步骤如下:
步骤1、制备兔肉末样品:市场上购买新鲜的兔肉,用天平称取兔肉100g,装入烧杯I中;将烧杯I中的肉全部倒入绞肉机中绞碎混匀,直至所有的肉绞成肉末状并混合均匀,将绞肉机中的所有肉末装入烧杯2中,烧杯2中的肉末即兔肉末。
[0076]步骤2、提取植物油中的DNA:同于实施例2的步骤2。
[0077]步骤3、制作含动物源成分的植物油样品:用本实施例步骤I的兔肉末代替实施例2的步骤3的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤3操作。
[0078]步骤4、提取步骤3所得样品的DNA,即提取含动物源成分植物油中的DNA:用本实施例步骤I的兔肉末代替实施例2的步骤4中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤4操作。
[0079]步骤5、用LAMP法检测DNA:用本实施例步骤I的兔肉末代替实施例2的步骤5中用的5种畜禽混合肉末,其它操作按实施例2的步骤5操作,其最的检测结果也同于实施例2步骤5的D.观察两个试样的反应结果。即结果如下:
D.观察两个试样的反应结果:用肉眼观察Loopamp? “朗报? ”反应试管I和Loopamp? “朗报?”反应试管2
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