赭绿青霉及其在制备brefeldin A中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域，具体涉及赭绿青霉及其在制备brefeldinA中的应 用。
【背景技术】
[0002] BrefeldinA(布雷菲徳菌素A，简称BFA)是一种天然存在的大环内酯类抗生素， 化学名[(1R，2E，6S，10E，1las, 14aR) -1，6, 7, 8, 9, 1la, 12, 13, 14, 14a-Decahydr0-l，13-di hydroxy-6_methyl-4H-cyclopent[f]oxacyclotridecin-4-one]，分子式为C16H2404,分子量 为280,结构式如下：
【主权项】
1. 一 株赫绿青霉PenicilliumochrochloronSWUKD4. 211，保藏号为CCTCCM 2015022。
2. 如权利要求1所述的赭绿青霉，其特征在于：菌丝体较细，直径0. 5~2. 0ym，有横 隔；分生孢子梗单生，有横隔，顶端无膨大的顶囊，帚状枝不分散，小梗不作披针形；分生孢 子串生于小梗顶端，呈球形或亚球形，直径1. 6~2. 8ym。
3. 如权利要求1或2所述的赭绿青霉，其特征在于：该菌的5. 8srDNA的核苷酸序列 如SEQIDNo. 1 所示。
4. 采用权利要求1~3任一项所述的赭绿青霉发酵生产brefeldinA的方法，其特征 在于：将赭绿青霉SWUKD4. 211接种至适用于赭绿青霉的发酵培养基，130~210rpm、26~ 30°C发酵5~9天，发酵结束后，发酵液经分离纯化得到所述的次级代谢产物brefeldinA。
5. 如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的发酵培养基组成如下：马铃薯 200.Og/L，碳源20. 0~40.Og/L，碳酸钙2. 0~8.Og/L，硫酸铵0? 0~2.Og/L，硫酸铜0? 0~ 0. 02g/L，磷酸二氢钾1. 0g/L，七水硫酸镁2. 0g/L;pH5. 0~7. 0 ;其中，所述碳源为木糖、葡 萄糖、蔗糖、麦芽糖或可溶性淀粉中的至少一种。
6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述培养基成分为：马铃薯200g/L，麦芽糖 20. 0g/L，磷酸二氢钾1. 0g/L，七水硫酸镁2. 0g/L，碳酸钙8. 0g/L，硫酸铜0. 01g/L;培养基 的pH为7。
7. 如权利要求4~6任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵转速为170rpm。
8. 如权利要求4~7任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵温度为28°C。
9. 如权利要求4~8任一项所述的方法，其特征在于：所述的发酵时间为9天。
10. 如权利要求4~9任一项所述的方法，其特征在于所述的分离工艺如下：发酵液离 心，收集上清液，乙酸乙酯充分萃取上清液后，收集萃取相，减压蒸馏回收乙酸乙酯，得到的 粗提物用甲醇溶解，过滤，在低于60°C的加热板上结晶，重结晶，得到的无色棱状晶体，即为 brefeldinA〇
11. 权利要求1~3任一项所述赭绿青霉在生产brefeldinA中的用途。
【专利摘要】本发明属于微生物技术领域，具体涉及赭绿青霉及其在制备brefeldin A中的应用。本发明要解决的技术问题是为生物发酵生产BFA提供一种新选择。该发明的生产菌株是一株赭绿青霉Penicillium ochrochloron SWUKD4.211，保藏号为CCTCC M 2015022。本发明提供了采用所述的赭绿青霉发酵生产BFA的方法。使用该方法，该菌株产BFA的能力可达到356.0mg/L发酵液，为BFA的生产提供了新的选择，为生物制药提供了宝贵的菌种资源，具有极大的应用价值。CCTCC M 201502220150108
【IPC分类】C12R1-80, C12N1-14, C12P17-08
【公开号】CN104711198
【申请号】CN201510058289
【发明人】黄谦, 董锦艳, 毛洪强
【申请人】西南大学
【公开日】2015年6月17日
【申请日】2015年2月4日