酶的制作方法_2

文档序号:8417194阅读:来源:国知局
。这种甜的液体称为"麦芽汁",而剩余的谷粒残余物称为"麦糟"。糖化醪通常 经过提取,这涉及将水加入到糖化醪中,以便由麦糟回收残余的可溶提取物。
[0055] 在第三个步骤中,麦芽汁被强烈煮沸。这对麦芽汁进行了消毒,并有助于显色、形 成风味和气味。在煮沸过程中的某一时间点加入啤酒花。
[0056] 在第四个步骤中,麦芽汁被冷却并转移至发酵罐中,该发酵罐装有酵母,或者向其 中加入酵母。酵母通过发酵将糖转化成酒精和二氧化碳气体;在发酵结束时,将发酵罐冷 冻,或者可以将发酵罐冷冻至停止发酵。酵母絮凝并移除。
[0057] 在最后一个步骤中,将啤酒冷却并储存一段时间,在该过程中,啤酒变澄清并形成 其风味,并且可能损害啤酒的外观、风味和保质期的任何材料都沉淀下来。在包装之前,将 啤酒充入二氧化碳,并可任选地过滤和巴氏消毒。
[0058] 发酵后,获得饮料,其通常包含大约2重量%至大约10重量%的酒精。不可发酵 的碳水化合物在发酵过程中没有被转化,并形成了啤酒成品中主要的溶解固体。
[0059] 这种残余物之所以保留是因为麦芽淀粉酶不能水解淀粉的α -1,6-键。每12盎 司的啤酒,不可发酵的碳水化合物贡献大约50卡路里。
[0060] 近来,特别在美国市场上,出现了被称为清淡啤酒、少热量啤酒或低热量啤酒的广 泛流行的酿造饮料。如在美国所定义的,这些啤酒比制造商的"正常啤酒"低大约30%卡路 里。
[0061] 关于传统酿造工艺的其他信息以及适用于本发明的酿造技术领域中使用的术 语的定义可以在 the Research and Teaching Institute of Brewing(Berlin(VLB)) 的 Wolfgang Kunze 的〃Technology Brewing and Malting"(1999 年第二次修 订版,ISBN 3-921690-39-0,第三版(2004): ISBN 3-921690-49-8,第四最新版, 2010(ISBN978-3-921690-64-2))中找到。
[0062] 木聚糖酶分类为 EC 3· 2. I. 8、EC 3· 2. I. 32、EC 3· 2. I. 136 和 EC3. 2. I. 156 ;它 们的活性可以测量,例如在实施例中所述。与根据本发明的表现出内切-1,3(4)-β-葡 聚糖酶活性的酶组合使用的合适的木聚糖酶包含分类于EC 3. 2. 1.8、EC 3. 2. 1.32、EC 3. 2. L 136 和 EC 3. 2. L 156 中的任何木聚糖酶,例如在 WO 2010072226、WO 2010072225、 W02010072224.W0 2005059084,W0200705632Uff02008023060A,ff09421785,ff02006114095, W02006066582、US 2008233175 和 W010059424 中所公开的任意一种。
[0063] 内切-1,4-β木聚糖酶分类为EC 3. 2. 1.8。该酶使木聚糖中的1,4-β-D-木糖苷 键从内部水解。
[0064] 如本文所用,术语"家族11木聚糖酶"、"糖苷水解酶(GH)家族11"或简称"GH11木 聚糖酶"是指分类为EC 3.2. 1.8的内切-1,4-β木聚糖酶,其使木聚糖中的1,4-β-D-木 糖苷键从内部水解,并且根据 Β. Henrissat, A classification of glycosyl hydrolases based on amino acid sequence similarities. Biochem. J. 280 (1991),pp. 309 - 316,其分 类为家族11木聚糖酶。
[0065] 术语"家族10木聚糖酶"、"糖苷水解酶(GH)家族10"或简称"CH10木聚糖酶" 包含具有多种已知的活性的酶,例如木聚糖酶(EC: 3. 2. 1. 8)、内切-1,3-β-木聚糖酶 (EC: 3. 2. 1. 32)和纤维二糖水解酶(EC: 3. 2. 1. 91)。这些酶以前称为纤维素酶家族F。 [0066] 在一些实施方案中,表现出内切-1,4- β -木聚糖酶活性的酶为家族11木聚糖酶。 在一些实施方案中,表现出内切-1,4-β -木聚糖酶活性的酶为家族10木聚糖酶。
[0067] 在一个方面中,根据本发明的酶组合物具有内切-1,4-β木聚糖酶活性,其可以 通过实施例中所述的测定法来测量。
[0068] 用于测量木聚糖酶活性的测定法可以在ρΗ3. 5或ρΗ5以及50°C下使用木聚糖作为 底物来实施,或者可以在不同的PH和温度值下实施该测定法用于酶的其他特征和规格。酶 活性可以由每单位时间内540nm处由木糖引起的吸光率的增加来计算。
[0069] 在一些实施方案中,根据本发明的酶组合物包含至少大约5000U/g,例如至少大约 6000U/g、例如至少大约7000U/g、例如至少大约8000U/g、例如至少大约8500U/g的木聚糖 酶活性,其可通过实施例中所述的测定法来测量。
[0070] 根据本发明的酶组合物可以具有纤维素水解活性。纤维素的系统名为4-(1,3 ; 1,4)-β-D-葡聚糖。4-葡聚糖水解酶以及纤维素水解酶或纤维素酶分类为EC 3.2. 1.4。 纤维素酶内切水解例如纤维素、地衣多糖和谷物β-D-葡聚糖中的(1 - 4)-β-D-葡糖苷 键,并且还水解β-D-葡聚糖(还包含1,3-键)中的1,4-键。此外,纤维素酶还具有其他 的名称,例如内切-1,4-β -D-葡聚糖酶、β -1,4-葡聚糖酶、β -1,4-内切葡聚糖水解酶、纤 维素酶Α、木粉ΑΡ、内切葡聚糖酶D、碱性纤维素、纤维素酶A 3、纤维素二糖酶、9. 5纤维素 酶、微晶纤维素酶、pancellase SS和1,4-(1,3 ;1,4)-0-〇-葡聚糖4-葡聚糖水解酶。
[0071] 在本发明的一个方面中,根据本发明的酶组合物的纤维素酶活性可以通过"纤维 素酶活性法"来测量,如下文中在标题为"测定法"中所述。
[0072] 在其他方面中,本发明涉及具有内切-1,3(4)_β-葡聚糖酶活性的酶,其活性可 以通过实施例中所述的测定法来测定。
[0073] 如本文所用," β -葡聚糖酶"或"beta-葡聚糖酶"是指EC 3. 2. 1. 6的内 切-1,3 (4)-β-葡聚糖酶。当葡萄糖残基(其还原基团与待水解的键有关)本身在C-3 处被取代时,所述的酶催化β-D-葡聚糖中(1->3)_或(I-M)-键的内切水解。与根据 本发明的表现出内切-1,4-β -木聚糖酶活性的酶组合使用的合适的β -葡聚糖酶包含 在 W02004087889、W02005059084、W09414953、W02007056321、W09531533、W008023060、 W02005100582、W09828410、W09742301、W02006066582、W005118769、W02005003319 和 W010059424中公开的任意一种β-葡聚糖酶。
[0074] 在pH5. 0下实施标准的测定法,并且可以在不同的pH值下实施该测定法用于酶的 其他特征和规格。
[0075] -个单位的内切-1,3(4)_β -葡聚糖酶活性被定义为在测定法的条件(pH5. 0(或 者指定的)和50°C )下,每分钟产生I μ mole葡萄糖等价物的酶量。
[0076] 在一些实施方案中,根据本发明的酶组合物包含至少大约10000U/g,例如至少大 约12000U/g、例如至少大约14000U/g、例如至少大约15000U/g、例如至少大约18000U/g的 β -葡聚糖酶活性,其可通过实施例中所述的测定法来测量。
[0077] 在其他方面中,根据本发明的酶组合物具有昆布多糖酶(Iaminarinase)活性,或 者包含具有昆布多糖酶活性的任意一种或多种其他的酶。昆布多糖酶活性可以根据测定法 部分中所述的昆布多糖酶测定法的描述来测定。
[0078] 昆布多糖酶可以为分类为Ε. C. 3. 2. 1. 6的内切-1,3 (4) - β -葡聚糖酶或分类为 E.C.3.2. 1.39的葡聚糖内切-l,3-f3-D-葡萄糖苷酶。内切-1,3(4)-β-葡聚糖酶分类为 Ε. C. 3. 2. 1. 6,其备选名称为昆布多糖酶、内切-1,3-β -葡聚糖酶、内切-1,4-β -葡聚糖 酶。底物包括昆布多糖、地衣多糖和谷物D-葡聚糖,并且当葡萄糖残基(其还原基团与待水 解的键有关)本身在C-3处被取代时,所述的酶催化β-D-葡聚糖中或(I-M)-键 的内切水解。葡聚糖内切-l,3-f3-D-葡萄糖苷酶(备选名称为(1->3)-β-葡聚糖内切水 解酶、内切-1,3-β-葡聚糖酶和昆布多糖酶)分类为E.C. 3. 2. 1.39,并水解底物(例如昆 布多糖、裸藻淀粉和茯苓多糖)中(l->3)-f3-D-葡聚糖的(l->3)-f3-D-葡糖苷键。
[0079] 在一些方面中,根据本发明的酶组合物具有阿拉伯糖内切酶(arabinanase)活 性,或者包含具有阿拉伯糖内切酶活性的其他酶。阿拉伯糖内切酶分类为EC 3. 2. 1. 99。系 统名称为5-a -L-阿拉伯聚糖5-a -L-阿拉伯聚糖水解酶,但是其具有多个其他的名称,例 如阿拉伯聚糖内切-1,5-a -L-阿拉伯糖苷酶,以及内切-1,5-a -L-阿拉伯糖内切酶、内 切-α -1,5-阿拉伯聚糖酶、内切-阿拉伯聚糖酶、1,5- a -L-阿拉伯聚糖和1,5- a -L-阿拉 伯聚糖水解酶。阿拉伯糖酶内切水解(1 - 5)-阿拉伯聚糖中的(1 - 5)-α -阿拉伯呋喃 糖苷键。阿拉伯糖内切酶也作用于阿拉伯聚糖。
[0080] 在本发明的一个方面中,根据本发明的酶组合物的阿拉伯糖酶活性是通过下文中 在标题为"测定法"中所述的阿拉伯糖酶测定法来测量的。在ΡΗ3. 5及50°C下,使用糖用甜 菜的阿拉伯聚糖作为底物来实施测定法,并且可以在不同的PH和温度值下实施该测定法 用于酶的其他的特征和规格。酶活性可以由每单位时间内540nm处吸光率的增加来计算。
[0081] 一个单位的阿拉伯糖酶活性定义为在测定法的条件(pH3. 5和50°C )下,使得 Λ OD54tol. HiirT1增加的酶量(对测定法的总体积进行归一化)。
[0082] 在一些方面中,根据本发明的酶组合物具有β -D-葡萄糖苷酶活性,或者包含具 有β -D-葡萄糖苷酶活性的其他酶。β -D-葡萄糖苷酶是指Ε. C 3. 2. 1. 21的酶。
[0083] 在一些方面中,根据本发明的酶组合物具有木糖苷酶活性,或者包含具有 β -木糖苷酶活性的其他酶。" β -木糖苷酶"或"木聚糖1,4-β -木糖苷酶"是指E. C 3. 2. 1. 37的酶。β -木糖苷酶催化(I-M) - β -D-木聚糖的水解,从而除去非还原末端的连 续D-木糖残基。
[0084] 在本发明的一些方面中,根据本发明的酶组合物具有纤维二糖水解酶活性,或者 包含具有纤维二糖水解酶活性的其他酶。"纤维二糖水解酶"或"纤维素1,4-β -纤维二糖 分支酶"是指EC 3.2. 1.91的酶。纤维素1,4-β-纤维二糖分支酶催化纤维素和纤维四糖 中1,4-β -D-葡糖苷键的水解,从而由链的非还原末端释放纤维二糖。
[0085] 根据本发明的酶组合物的纤维二糖水解酶活性是通过下文中在标题为"测定法" 中所述的纤
当前第2页1 2 3 4 5 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1