酶的制作方法_4

，其包含根据本发明的表现出内 切-1，4-β-木聚糖酶活性的酶与任意一种或多种β-葡聚糖酶组合。在一些实施方案中， 这种一种或多种葡聚糖酶是根据本发明的。
[0134] 本发明的另一个重要的方面为组合物，其包含根据本发明的表现出内 切-1，3(4)-β -葡聚糖酶活性的酶与任意一种或多种木聚糖酶组合。在一些实施方案中， 这种一种或多种木聚糖酶为根据本发明的表现出内切-1，4-β -木聚糖酶活性的酶。在一 些实施方案中，这种一种或多种木聚糖酶为根据SEQ ID NO: 17和/或SEQ ID NO: 18的酶。 在一些实施方案中，所述一种或多种木聚糖酶为根据SEQ ID N0:19、SEQ ID N0:20、SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:22、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:24 和 / 或 SEQ ID NO:25 或它们的任何功 能片段的酶。
[0135] 在一些实施方案中，表现出内切-1，4-β-木聚糖酶活性的酶与表现出内 切-1，3 (4) - β -葡聚糖酶活性的酶的组合根据下表：
[0136]
【主权项】
1. 一种表现出内切-l，4-0-木聚糖酶活性的酶，该酶包含与选自SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 17、SEQ ID NO: 18,SEQ ID NO: 19,SEQ ID N0:20,SEQ ID N0:2USEQ ID N0:22,SEQ ID N0:23,SEQ ID N0:24、SEQ ID N0:25或它们的任何功能片段中的任意一者具有至少80%的一致性的氨基 酸序列。
2. 根据权利要求1所述的酶，该酶对可溶性的阿拉伯木聚糖底物（WE-AX)和不可溶的 阿拉伯木聚糖底物（WU-AX)阿拉伯木聚糖底物的活性比值为低于大约7.0,例如低于大约 6. 5,例如低于大约6. 0,例如低于大约5. 5,例如低于大约5. 0,例如低于大约4. 5。
3. -种表现出内切-1，3 (4)-0-葡聚糖酶活性的酶，该酶包含与选自SEQ ID NO: 7、SEQ ID N0:8、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10,和 SEQ ID NO: 11、SEQ ID NO: 12、SEQ ID NO: 13、 SEQ ID NO: 14、SEQ ID NO: 15、SEQ ID NO: 16或它们的任何功能片段中的任意一者具有至 少80%的一致性的氨基酸序列。
4. 根据权利要求1-3的任意一项所述的酶，该酶的最适温度为40-70°C的范围，例如 45-65°C的范围，例如50-65°C的范围，例如55-65°C的范围。
5. 根据权利要求1-4的任意一项所述的酶，其中所述的酶与选自SEQ ID N0:l-25或它 们的任何功能片段中的任意一条氨基酸序列具有至少81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、 91、92、93、94、95、96、97、98 或 99% -致性。
6. 根据权利要求1-5的任意一项所述的酶，其具有的氨基酸总数少于350,例如少于 340,例如少于330,例如少于320,例如少于310,例如少于300个氨基酸，例如200至350个 的范围，例如220至345个氨基酸的范围。
7. 根据权利要求1-6的任意一项所述的酶，其中与选自SEQ ID NO: 1-25或它们的任何 功能片段中的任意一条氨基酸序列相比，所述的酶的氨基酸序列具有至少1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10个氨基酸取代。
8. 根据权利要求1-7的任意一项所述的酶，其中与选自SEQ ID NO: 1-25或它们的任何 功能片段中的任意一条氨基酸序列相比，所述的酶的氨基酸序列具有最多1、2、3、4、5、6、7、 8、9或10个氨基酸取代。
9. 根据权利要求1-8的任意一项所述的酶，其中所述的酶包含SEQ ID NO: 1-25或它们 的任何功能片段中的任意一者所识别的氨基酸序列。
10. 根据权利要求1或3的任意一项所述的酶，所述的酶由SEQ ID NO: 1-25或它们的 任何功能片段中的任意一者所识别的氨基酸序列组成。
11. 一种包含DNA序列的DNA构建体，其中所述的DNA序列编码根据权利要求1-10的 任意一项所述的酶。
12. -种包含根据权利要求11所述的DNA构建体的重组表达载体。
13. -种使用权利要求11所述的DNA构建体或权利要求12所述的载体转化的细胞。
14. 一种制备物，其包含根据权利要求1-10的任意一项所述的酶、或根据权利要求11 所述的DNA构建体、或根据权利要求12所述的载体或根据权利要求13所述的细胞。
15. -种组合物，其包含根据权利要求1、2、4-10的任意一项所述的表现出内 切-1，4- 0 -木聚糖酶活性的酶，以及任意一种或多种0 -葡聚糖酶。
16. 根据权利要求15所述的组合物，其中所述的一种或多种0 -葡聚糖酶为表现出根 据权利要求3-10的任意一种所述的内切-1，3(4)-0 -葡聚糖酶活性的酶。
17. -种组合物，其包含根据权利要求3-10的任意一项所述的表现出内 切-1，3 (4) - 0 -葡聚糖酶活性的酶，以及任意一种或多种木聚糖酶。
18. 根据权利要求17所述的组合物，其中所述的一种或多种木聚糖酶为根据权利要求 1、2、4-10的任意一项所述的表现出内切-1，4-0 -木聚糖酶活性的酶。
19. 根据权利要求15-18的任意一项所述的组合物，其中所述的内切-1，3 (4) - 0 -葡聚 糖酶活性和所述的内切-1，4- 0 -木聚糖酶活性得自至少两种不同的酶，例如得自两种不 同物种的至少两种不同的酶。
20. 根据权利要求15-19的任意一项所述的组合物，其包含至少两种酶的组合，这两 种酶为所述的两种酶，或者其氨基酸序列与各个SEQ ID或它们的任何功能片段具有至少 80 %序列一致性的两种酶，所述的组合选自： SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:2 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:4 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:6 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:17 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:18 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:19 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:20 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:21 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:22 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:24 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:25 和 SEQ ID NO:7 ; SEQ ID NO:1 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:2 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:3 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:4 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:5 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:6 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:17 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:18 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:19 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:20 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:21 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:22 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:23 和 SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:8 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:22和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:9 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:18 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO:19 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO :20 和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:21 和SEQ ID NO:10 ; SEQ ID NO :22和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO :23和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:24和SEQ ID NO: 10; SEQ ID NO :25和SEQ ID NO :10 ; SEQ ID NO:I和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID N0:4和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID N0:6和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:18 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:19 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:20 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:21 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:22 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:23 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:24 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:25 和SEQ ID NO:11 ; SEQ ID NO:I 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:2 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:3 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:4 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:5 和SEQ ID NO:12 ; SEQ ID NO:6 和S