量为4.5%、谷蛋白含量为10.3mg/kg。
[0015]实施例二:
将30kg 60目的燕麦麸于微波功率40 kW的条件下连续微波干燥15 min，然后将干燥后的燕麦麸采用超临界二氧化碳萃取法去掉燕麦油脂，使燕麦油脂残留了 < 0.5%，萃取条件为:萃取压力35 MPa，萃取温度40°C，萃取时间1.5h，流量为3000 L/h，向脱掉油脂后的燕麦麸中按料液比1:15的比例加入水，再添加2.4%的淀粉酶，在温度90 °C、pH=7的条件下酶解1.5h，然后将温度降至50°C，加入2%的糖化酶，于pH=4.5的条件下酶解lh，再将溶液调整pH=10，于温度90°C的条件下提取燕麦麸中的燕麦β-葡聚糖，提取时间为I h。将提取出来燕麦β -葡聚糖溶液调整ρΗ=4.5，静置8h，沉淀燕麦麸中的蛋白质，所得沉淀混悬液于离心机中离心，收集上清液；向上清液中加入1%的蛋白酶，于温度60°c，pH=8的条件下酶解4h ;向上述酶解液中先添加1%的壳聚糖4.5Kg，再添加1%的海藻酸钠4.5Kg，搅拌均匀，静置4h ;将所得的悬浮液用离心机离心，收集上清液；将上清液用截留分子量分别为1500000Da、600000Da、10000Da的超滤膜采用串联的方式过滤分离，分段收集截留液，在温度60°C，真空度60Kpa，采用双效浓缩的方法浓缩4小时；然后将浓缩液温度降至28°C后加入酒精至酒精浓度为80%，得到燕麦β -葡聚糖沉淀，所得沉淀在温度60°C、真空度SOKPa的条件下真空干燥3小时，得到具有特定分子量的无过敏源燕麦β -葡聚糖产品。
[0016]其中Mw彡1500000 Da的得率为1.3%、纯度为90.6%、水分含量为4.5%、谷蛋白含量为12.0mg/kg, 600000 Da ^ Mw ^ 1500000 Da的得率为1.2%、纯度为92.4%、水分含量为4.1%、谷蛋白含量为8.9mg/kg，100000 Da彡Mw彡600000 Da的得率为1.6%、纯度为93.6%、水分含量为3.5%、谷蛋白含量为10.0mg/kg, Mw ( 100000 Da的得率为2.1%、纯度为90.6%、水分含量为4.3%、谷蛋白含量为11.3mg/kg。
[0017]实施例三:
将10kg 80目的燕麦麸于微波功率60 kW的条件下连续微波干燥40 min，然后将干燥后的燕麦麸采用超临界二氧化碳萃取法去掉燕麦油脂，使燕麦油脂残留了< 0.5%，萃取条件为:萃取压力45MPa，萃取温度50°C，萃取时间2h，流量为4000 L/h,向脱掉油脂后的燕麦麸中按料液比1:20的比例加入水，再添加3%的淀粉酶，在温度90°C、pH=7的条件下酶解lh，然后将温度降至50°C，加入3%的糖化酶，于pH=5的条件下酶解2h，再将溶液调整pH=10，在温度90°C的条件下提取燕麦麸中的燕麦β-葡聚糖，提取时间为4 h?将提取出来燕麦β -葡聚糖溶液调整ρΗ=4.5，静置12h，沉淀燕麦麸中的蛋白质，所得沉淀混悬液于离心机中离心，收集上清液；向上清液中加入3%的蛋白酶，在温度60°C，pH=8的条件下酶解3h ;向上述酶解液中先添加1.5%的壳聚糖10Kg，再添加1.5%的海藻酸钠10Kg，搅拌均匀，静置4h ;将所得的悬浮液用离心机离心，收集上清液；将上清液用截留分子量分别为1500000Da、600000Da、10000Da的超滤膜采用串联的方式过滤分离，分段收集截留液，在温度70°C，真空度70Kpa，采用双效浓缩的方法浓缩3小时；然后将浓缩液温度降至30°C后加入酒精至酒精浓度为90%，得到燕麦β -葡聚糖沉淀，所得沉淀在温度700°C、真空度90KPa的条件下真空干燥2小时，得到具有特定分子量的无过敏源燕麦β -葡聚糖产品。
[0018]其中Mw彡1500000 Da的得率为1.3%、纯度为93.2%、水分含量为4.8%、谷蛋白含量为7.0mg/kg, 600000 Da ^ Mw ^ 1500000 Da的得率为1.4%、纯度为93.0%、水分含量为4.2%、谷蛋白含量为14.0mg/kg，100000 Da ^ Mw ^ 600000 Da的得率为1.7%、纯度为91.5%、水分含量为4.3%、谷蛋白含量为16.8mg/kg，Mw ( 100000 Da的得率为2.2%、纯度为94.1%、水分含量为3.5%、谷蛋白含量为9.3mg/kg。
[0019]本发明的有益效果:采用该制备方法能够得到特定分子量的无过敏原(Gluten谷蛋白含量低于20mg/kg)燕麦β -葡聚糖，且燕麦β -葡聚糖的纯度多90%，水分< 5%，使无过敏源燕麦β -葡聚糖达到了高纯度、具有特定分子量的效果。
[0020]以上已将本发明做一详细说明，以上所述，仅为本发明之较佳实施例而已，当不能限定本发明实施范围，即凡依本申请范围所作均等变化与修饰，皆应仍属本发明涵盖范围内。
【主权项】
1.一种无过敏原燕麦β -葡聚糖的制备方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)微波干燥:将10?150目燕麦麸进行微波干燥，微波功率为:20?60kW、微波时间为:I ?20min ； 2)二氧化碳超临界萃取:将步骤I)中的燕麦麸进行超临界二氧化碳萃取，去除燕麦麸中的油脂，萃取压力为:5?50MPa，萃取温度为:35?65°C，萃取时间为:0.5?5h，萃取流量为:2200 ?4300 L/h ； 3)淀粉酶酶解:将步骤2)中的燕麦麸按料液比1:5?1:35的比例加入去离子水，然后加入淀粉酶酶解，淀粉酶添加量为:0.1%?3.0%，酶解温度为:60?100°C，酶解时间为:0.1?3.0h,酶解pH为:4?8 ; 4)糖化酶酶解:向步骤3)中的溶液中加入糖化酶进行酶解，淀粉酶添加量为:0.5%?5%，酶解温度为:50?85°C，酶解时间为:0.5?2.0h，酶解pH为:3.5?6.5 ; 5)碱提取:将步骤4)中溶液的pH调整为:8?11，并在提取温度为:20?95°C，提取时间为:0.1?2.0h的条件下，提取燕麦β -葡聚糖，提取次数为:1?3次； 6)等电点沉淀蛋白:将步骤5)中溶液的pH调整为:3?6，并升温至80?100°C，加热0.5?4h，最后沉淀静置0.5?24h，分离上清液； 7)离心分离收集上清液:将步骤6)中沉淀静置后的溶液采用离心机进行离心分离，并收集合并上清液； 8)蛋白酶酶解:向步骤7)中的上清液中加入蛋白酶进行酶解，蛋白酶添加量为:1.0%?8.0%，酶解温度为:40?80°C，时间为:1?5h，pH为:3?10 ; 9)絮凝沉淀:向步骤8)中的溶液中先添加0.01%?2.0%壳聚糖后，再添加0.1%?5.0%的海藻酸钠，然后进行搅拌均匀，并静置I?15h，分离上清液，留下悬浮液； 10)离心分离收集上清液:将步骤9)中的沉淀悬浮液采用离心机分离，收集上清液； 11)膜分离:将步骤10)中的上清液用不同截留分子量的超滤膜采用串联膜分离的方式过滤分离，分段收集截留液，得到得到具有特定分子量的燕麦β -葡聚糖溶液； 12)真空浓缩:将步骤11)中的燕麦β-葡聚糖溶液采用双效浓缩方式浓缩，得到具有特定分子量的燕麦β -葡聚糖浓缩液，浓缩温度为:40?70°C，真空度为:40?80Kpa，时间为I?10h，所得燕麦β -葡聚糖浓缩液浓度为20?40° Β? ； 13)酒精沉淀:将步骤12)中的燕麦β-葡聚糖浓缩液冷却至20?40°C，加入酒精至酒精浓度为60?90%，进行醇沉，静置2?12h，收集上清酒精液，进行酒精回收，剩余为沉淀悬浮液； 14)离心收集沉淀:将步骤13)中的沉淀混悬液采用离心机离心收集沉淀； 15)真空干燥:将步骤14)中的沉淀置于真空干燥箱中于温度50?80°C、真空度60?10KPa的条件下干燥2?8h，得到无过敏源燕麦β -葡聚糖。
2.如权利要求1所述的一种无过敏原燕麦β-葡聚糖的制备方法，其特征在于:在步骤(11)中，所用超滤膜的截留分子量分别为150000Da、600000Da和lOOOOODa。
3.如权利要求1所述的一种无过敏原燕麦β-葡聚糖的制备方法，其特征在于:在步骤15)中，所得到燕麦β -葡聚糖产品中谷蛋白的含量少于20mg/kg，且燕麦β-葡聚糖的纯度彡90%，水分含量彡5%，其中Mw彡1500000 Da的得率彡1%，600000 Da ^ Mw ^ 1500000Da 的得率彡 1%，100000 Da ^ Mw ^ 600000 Da 的得率彡 l%，Mw 彡 100000 Da 的得率彡 2%。
【专利摘要】本发明提供的一种无过敏原燕麦β-葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：1）微波干燥；2）二氧化碳超临界萃取；3）淀粉酶酶解；4）糖化酶酶解；5）碱提取；6）等电点沉淀蛋白；7）离心分离收集上清液；8）蛋白酶酶解；9）絮凝沉淀；10）离心分离收集上清液；11）膜分离；12）真空浓缩；13）酒精沉淀；14）离心收集沉淀；15）真空干燥，该从燕麦麸提取燕麦β-葡聚糖的方法使无过敏源燕麦β-葡聚糖达到了高纯度、具有特定分子量的效果。
【IPC分类】C12P19-08, C12P19-14
【公开号】CN104774886
【申请号】CN201510115883
【发明人】吕振岳, 许祝辉, 高彦祥, 曾洲华, 伍尤文
【申请人】广州中康食品有限公司
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2015年3月17日