液态发酵低桔霉素、高色价红曲红色素的制备方法及制品的制作方法_2

文档序号:8917542阅读:来源:国知局
、发酵中后期26~85h调整为550~700L · min ;整个发酵过程始终匀速搅拌, 转速为200~400r/min、罐压为0. 04~0. 07Mpa ;连续发酵培养时间共进行75~85h。
[0029] 所述的步骤(33)还包括用乳酸调节发酵培养基初始pH值为3. 0~4. 5,温度32~ 36°C ;发酵持续35~45小时到达发酵旺盛期后进行补料,补料量占总体积的5~10% ;所 述的补料为米粉10~20%、大豆0. 1~0. 5%,用乳酸调节pH值3. 0~4. 5。
[0030] 前述的液态发酵低桔霉素、高色价红曲红色素的制备方法,其还包括如下步骤:
[0031] (4)提取、纯化:将所述步骤(33)得到的低桔霉素、高色价红曲红色素发酵液经脱 水后,将留下的菌丝体用pH为7. 0~9. 0、60~80v/v酒精浸提,再二次压滤,将浸提滤液 经膜过滤(即纳滤)、真空浓缩(20~35Be锤度),得到低桔霉素、高色价红曲红色素的浓 缩液;
[0032] (5)喷雾干燥:将步骤⑷所得的浓缩液在100~210°C下进行喷雾干燥,制得低 桔霉素、高色价红曲红色素粉末成品。
[0033] 在发酵培养过程中,定期取样分析其理化指标并进行适当补充营养液即补料,可 使发酵水平和产出率均得到提高,补料时间在发酵中期及旺盛期较好。
[0034] 对于前述发酵培养过程中,采用紫外光分光度计检测所述的发酵液、红曲红色素 成品的吸光度,吸收峰波长为495~505nm。
[0035] 在发酵过程中,检测所述红曲红色素成品的桔霉素的含量,其成品中桔霉素的含 量不大于〇· 2mg/kg (以单位色价500u/g计)。
[0036] 采用前述的制备方法制备得到的低桔霉素、高色价红曲红色素,其成品中桔霉素 的含量不大于〇. 2mg/kg (以单位色价500u/g计)、红曲红色素色价为10300~10800u/g。
[0037] 本发明与现有技术相比,具有如下优点:
[0038] 1、本发明提供的红曲红曲菌YZ301 (Monascus anka),其微生物保藏编号为 CGMCC9707,是发明人经过培养、紫外诱变、多次分离筛选后得到优良菌种,其综合生物学性 能优异,最适于液态发酵工艺,繁育性能稳定、高产色素,该菌种在紫外诱变过程中能够耐 高温(35~36. 5 °C )、高压(0. 06~0. 08Mpa),发酵液培养过程中如增大接种量并保持较低 的PH值、可使发酵水平稳定,且能控制发酵过程中红曲次代谢物桔霉素的含量,提高发酵 液红曲色素的含量(即高色价)及收率,安全性高、稳定性好。
[0039] 2、本发明采用专门培育的菌种、工艺条件及各步骤的合理控制,对选用的红曲菌 诱变株进行液态发酵,得到高含量的红曲红色素发酵液,再经过提取工序处理后所得的红 曲红色素,桔霉素含量很低、安全性高、稳定性好、红曲色素色价高,且本发明将优选的菌种 在种子培养后、液态发酵之前,还采用了逐级扩大培养,从而增加了发酵初期的菌种含量, 提高了发酵期微生物的活性、缩短发酵周期,使大量微生物在发酵期内处于生长旺盛阶段, 保持旺盛的新陈代谢,利于提高色素产量。
[0040] 3、本发明通过提取、纯化工艺,有效地将大分子蛋白、小分子有机酸、糖与天然色 素分离,去除部分桔霉素,使红曲红色素产品的纯度和稳定性显著提高。
[0041] 4、本发明在发酵培养过程中,定期取样分析其理化指标并在发酵旺盛期适当补 料,使发酵水平和产出率均得到提高。
[0042] 5、本发明采用液态发酵技术,原料绿色环保、无污染、安全、配方合理,制备过程容 易控制、工艺合理稳定、效率高,使产品质量稳定、有效成分高、有害成分低,符合食品质量 安全标准,可实现大规模工业化生产。
[0043] 6、本发明的制备方法制得的成品中红曲红色素色价高达10300~10800u/g、桔霉 素含量不大于〇. 2mg/kg (以单位色价500u/g计)。
[0044] 上述是发明技术方案的概述,以下结合【具体实施方式】,对本发明做进一步说明。
【具体实施方式】:
[0045] 实施例1本实施例提供的红曲红曲菌YZ301 (Monascus anka),其微生物保藏编号 为CGMCC9707 ;所述的红曲红曲菌YZ301(Monascus anka)l的培育方法,其是由东莞市天益 生物发酵技术有限公司开发的红曲红曲菌YZ201 (Monascus anka Nakazawa et Sato)经培 养、紫外诱变、多次分离筛选后得到的红曲红曲菌,编号YZ301 (Monascus anka)。
[0046] 所述的培养是在麦芽汁琼脂培养基10~15° Be、温度28~35°C培养6~8天, 菌落生长平坦,在曲汁琼脂上,于33~35°C培养7天成皮膜状菌落,无气生菌丝,其形状如 熔岩流出,石榴水红色,在麦芽汁琼脂上繁殖良好;
[0047] 优选地,所述的紫外诱变及筛选包括:A、紫外诱变:将培养7~9天的红曲菌种, 经高温55~65°C处理2~lOmin、高压0. 04~0. 07Mpa处理5~10小时,放入内装有带 玻璃珠、无菌水80~100mL的500ml三角瓶,置于摇床振荡1~2小时,过滤,取IOml孢子 悬浮液,加到带磁力棒的培养皿内,在磁力搅拌下进行紫外照射2~lOmin,涂平板,用黑布 包扎,于温度32~35 °C下培养6~8天;
[0048] B、分离培养基:可溶性淀粉5%,麦芽糖3%,蛋白胨0. 1%,添加适量乳酸,调节pH 值5~6,琼脂2% ;
[0049] C、分离培养基 PDA :NaN033. 0g,KH2PO4L 0g,MgSOJH2O 0· 5g,FeSOJH2O 0· Olg,蔗 糖30g,自来水1000ml,琼脂15g ;
[0050] D、斜面培养基MEA :麦芽汁20g,葡萄糖20g,蛋白胨l.Og,自来水1000ml,琼脂 20g〇
[0051] 一种采用前述红曲菌液态发酵制备低桔霉素、高色价红曲红色素的方法,其包括 如下步骤:
[0052] (1)菌种选育:采用通过紫外诱变分离得到的红曲红曲菌YZ301 (Monascus anka) 作为菌种,其保藏号为CGMCC9707 ;
[0053] (2)种子培养、扩大培养:将步骤⑴选育得到的红曲红曲菌YZ301依次接入装有 种子培养基的一、二级种子罐中分别培养6~9小时,之后接种到发酵罐中扩大培养75~ 85小时,得到液态种子培养液;
[0054] (3)液态发酵生产:
[0055] (31)采用容量为30m3的大容量发酵罐,装入液体发酵培养基;
[0056] (32)接种步骤⑵所得的液态种子培养液,接种量为5~10%,接入二级种子罐 于温度32~35°C下培养6~9小时,制得发酵用液体种子培养液;
[0057] (33)之后将步骤(32)所得的发酵用液体种子培养液接入发酵罐中,设定发酵条 件后进行液态发酵,即得低桔霉素、高色价红曲红色素发酵液。
[0058] 其中,所述的步骤(2)中还包括:将红曲红曲菌YZ301置入装有无菌水、玻璃珠的 三角瓶内打碎1~2小时,按5~10%接种量接入三角瓶,经摇瓶于温度32~35°C下培养 22~28小时;所述的步骤(2)中的种子培养基的原料组成及重量配比为:淀粉4~6%、 NaNO3O. 1 ~0· 3%、MgSO4 0· 1 ~0· 3%、KH2PO4O. 1 ~0· 3%、玉米浆 1 ~5%。
[0059] 所述的步骤(31)中还包括首先在大容量发酵罐中装入占酵罐3/4体积的液体发 酵培养基,在罐温121~125°C、罐压0. 1~0. 15Mpa下灭菌30min,冷却降温至30~35°C; 所述的步骤(31)中液体发酵培养基的原料组成及重量配比为:米粉8~15%、大豆0. 1~ 0. 5%、NaNO3O. 1 %~0. 3%、玉米浆1~5% ;还包括用乳酸调节发酵培养基初始pH值为 3. 0 ~4. 5〇
[0060] 所述的步骤(33)发酵条件设定如下:温度为发酵初始0~34h保温在30~ 35°C、发酵持续35~85h调整
当前第2页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1