设计"也称为"合理药物设计"。RAMPE⑶s可以通过例如X-射线晶体照相术、核磁共振或 同源性建模来三维分析，所有这些都是公知的方法。在分子建模软件系统中结构信息的使 用也是本发明包括的。这种计算机辅助的建模和药物设计可以使用信息如化学构象分析、 分子的静电势、蛋白折叠等。本发明一个特别的方法可以包括分析RAMPECD的三维结构得 出革巴点可能的结合位点、合成引入推测反应位点的新分子以及如上所述测定新分子。
[0201] 在本发明优选的方法中，该试剂是拮抗剂。由本发明筛选方法鉴定的试剂可以包 括：抗体、siRNA、适配子、小有机分子（例如肽、环肽）和在此公开的多肽的显性失活变体。
[0202] 如上面提到地，在某些实施方案中，本发明还提供衍生自在此公开的多肽的"显性 失活"多肽。显性失活多肽是蛋白质的无活性变体，通过和细胞机器（cellular machinery) 的相互作用，由其与细胞机器的相互作用而取代活性蛋白或与活性蛋白竞争，从而降低活 性蛋白的作用。例如，显性失活受体结合配体但是不在配体结合的应答中不传输信号，会降 低所述配体表达的生物学效应。同样地，显性失活的催化无活性激酶正常地与靶蛋白相互 作用但是不磷酸化所述靶蛋白，会降低细胞信号应答中靶蛋白的磷酸化。类似地，显性失活 转录因子结合到基因控制区的另一个转录因子或启动子位点上，但却不增加基因转录，由 于占据启动子结合位点却不增加转录会降低正常转录因子的作用。
[0203] 对本领域技术人员来说，显然地，对于本发明公开肽试剂的氨基酸序列的修饰可 以增强所述肽与其靶序列有关的结合和/或稳定性。此外，所述肽的修饰还可以增加肽的 体内稳定性，从而降低对抑制在此公开多肽的活性所需肽的有效量。这将有利地减少在体 内可能产生的所不希望的副作用。修饰包括，作为举例而不是限制性的，乙酰化和酰胺化。 选择性地或优选地，所述修饰包括经修饰的氨基酸在重组或合成形式的肽的生产中的使 用。对本领域技术人员来说，显然地，经修饰的氨基酸包括例如：4_羟基脯氨酸、5-羟基赖 氨酸、N 6-乙酰基赖氨酸、N6-甲基赖氨酸、N6, N6-二甲基赖氨酸、N6, N6, N6-三甲基赖氨酸、 环己基丙氨酸、D-氨基酸、鸟氨酸。其他修饰包括具有任选取代的C2、C 3SC4烷基R基团的 氨基酸，所述取代是以1、2或3个选自如下的取代基来取代的：卤素（例如，F、Br、I)、羟基 或Ci-Q烷氧基。对于本领域技术人员而言，保持p53结合活性的肽可以通过环化来修饰， 这也是显然的。环化是本领域中已知的（参见Scott等人，Chem Biol (2001)，8 :801-815 ; Gellerman 等人，J. Peptide Res (2001)，57 :277_291 ;Dutta 等人，J. Peptide Res (2000)， 8 :398_412 ;Ngoka 和 Gross，J Amer Soc Mass Spec (1999)，10 :360_363) 〇
[0204] 在本发明进一步的方面，提供多肽在鉴定调节CRLR功能的试剂中的应用，其中所 述多肽选自：
[0205] i)多肽或者其变体，由图1、2或3所示的核酸序列组成的核酸分子编码；
[0206] ii)由核酸分子编码的多肽，所述核酸分子在严谨条件下杂交至以上（i)所定义 的核酸分子并调节CRLR的功能；和
[0207] iii)含有核酸的多肽，所述核酸由于遗传密码而与（i)和（ii)中所定义的核酸序 列是简并的。
[0208] 在本发明进一步的方面，提供CRLR在鉴定调节CRLR与多肽的相互作用的试剂中 的应用，其中所述多肽选自：
[0209] i)多肽或其变体，由图1、2或3所示的核酸序列组成的核酸分子编码；
[0210] ii)由核酸分子编码的多肽，所述核酸分子在严谨条件下杂交至以上（i)所定义 的核酸分子并调节CRLR的功能；和
[0211] iii)含有核酸的多肽，所述核酸由于遗传密码而与（i)和（ii)中所定义的核酸序 列是简并的。
[0212] 药学方法、应用和产品
[0213] 在本发明的其他方面，提供如前所述的试剂作为药物的应用。在进一步的方面，提 供含有如前所述试剂的药物制剂。所述制剂可以含有至少一种另外的药学上可接受的成 分，例如赋形剂、稀释剂或载体。优选地，所述制剂是意在用于胃肠外给药。在特定的实施 方案中，所述制剂含有抗体产品试剂，例如结合至RAMP-3蛋白的抗体。
[0214] 本发明的保护范围包括含有或声称含有本发明试剂的伪造品或欺诈品，而不论其 实际上是否含有这样的试剂并且不论这样的试剂是否是以治疗有效量含有的。因此，包括 在本发明保护范围内的是含有描述或说明的包装，所述描述或说明指出所述包装包括本发 明的种类或药物制剂以及是或含有或声称是或声称含有这样的制剂或种类的产品。
[0215] 根据本发明进一步的方面，提供了含有本发明试剂的药物组合物。在优选的实施 方案中，所述试剂是抗体特别是结合至RAMP-3蛋白的抗体。
[0216] 包括在本发明公开内容中的是含有多肽或其片段或变体多肽的组合物，所述多肽 含有如图4、5或6中所示的氨基酸序列，其中该变体是通过添加、缺失或取代来修饰存在于 图4、5或6中的氨基酸序列的至少一个氨基酸残基，其中该变体多肽调节CRLR功能。
[0217] 在此使用的"含有如图4、5或6中所示的氨基酸序列的多肽的片段"包括含有1-50 个氨基酸例如1-30个氨基酸如10-30个氨基酸的片段。含有如图4、5或6中所示的氨基 酸序列的多肽片段可以含有如图7、8或9中所示的氨基酸序列或变体多肽，其中所述变体 是通过添加、缺失或取代存在于图7、8或9中氨基酸序列的至少一个氨基酸残基来修饰的， 其中该多肽调节CRLR的功能。
[0218] 还包括在本发明公开内容中的是含有选自如下的核酸分子的用作疫苗的药物组 合物：
[0219] i)核酸分子，含有图4、5或6所示核酸序列的全部或部分；
[0220] ii)核酸分子，在严谨杂交条件下杂交至以上（i)所定义的核酸分子上，并且编码 多肽，其中该多肽调节CRLR的功能。
[0221] 本发明公开内容还包括含有核酸分子的组合物，所述核酸分子含有如图4、7、8或 9所示的核酸序列。
[0222] 在本发明进一步的方面，该组合物包含佐剂和/或载体。
[0223] 佐剂是通过调节免疫细胞活性来增强对抗原的特异性免疫应答的物质或产品。佐 剂的例子包括仅作为举例的，弗氏佐剂（Freunds adjuvant)、胞壁酰二肽、脂质体。载体是 免疫原性的分子，当结合至第二种分子时，其增强对于后者的免疫应答。一些抗原本质上是 非免疫原性的，然而当与外源性蛋白分子如钥孔虫戚血蓝蛋白或破伤风毒素结合时，却可 能产生抗体应答。这样的抗原含有B-细胞表位但不含T-细胞表位。这种结合物的蛋白部 分（"载体"蛋白）提供了刺激辅助T-细胞的T-细胞表位，辅助T-细胞依次刺激抗原-特 异性B-细胞分化为浆细胞并产生抵抗抗原的抗体。辅助T-细胞也可以刺激其他免疫细胞 如细胞毒素T-细胞，并且载体可以在细胞介导的免疫性以及抗体的产生中发挥类似作用。
[0224] 在给药时，本发明的药物组合物及制剂是以药学上可接受的试剂给药。这样的 试剂可以常规含有药学上可接受浓度的盐、缓冲剂、防腐剂、相容性的载体、补充免疫增效 剂如佐剂和细胞因子和任选的其他治疗试剂（例如，顺铂、卡铂、环磷酰胺、美法仑、卡莫司 汀、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、巯嘌呤、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、长春碱、长春 新碱、更生霉素、丝裂霉素C、紫杉酚、L-天冬酰胺酶、G-CSF、表鬼白毒素吡喃葡糖苷、秋水 仙素、去铁敏和喜树碱。
[0225] 本发明的组合物和制剂可以任何常规途径给药，所述常规途径包括注射或随时间 的逐渐输注。所述给药可以是例如口服、静脉内、腹膜内、肌肉内、腔内、皮下或经皮给药。 当抗体是在治疗上使用时，一种特定的给药途径是肺用气雾剂。制备包括抗体的气雾剂递 送系统的技术是本领域技术人员公知的。通常地，这样的系统应当使用不显著地削弱所 述抗体的生物学性质如互补结合能力的成分（参见，例如Sciarra和Cutie，"Aerosols"， Remington' s Pharmaceutical Sciences 中，第 18 版，1990 年，第 1694-1712 页；该文献 引入作为参考）。本领域技术人员可以容易地确定生产抗体气雾剂的不同参数和条件，无需 借助于过度的实验。
[0226] 本发明的组合物和制剂通常是以有效量来给药。"有效量"是组合物单独地或者与 进一步的药剂联用时产生所期望的应答的量。在治疗特定疾病如癌症的情况下，所期望的 应答是抑制疾病的发展。其可以仅仅涉及疾病发展的暂时减缓，虽然更优选地，其涉及永久 性地停止疾病的发展。其可以通过常规方法来监测或者可以根据本发明在此讨论的诊断方 法来监测。
[0227] 所述试剂给予受试者的剂量可以根据不同的参数尤其是根据所使用的给药方式 以及所述受试者的状态来选择。其他因素包括所期望的治疗时间。在使用初次剂量受试者 的应答不足时，可以使用该患者耐受允许的程度内的更高剂量（或由不同的、更为局部的 递送途径的更高的有效剂量）。
[0228] 通常地，抗体的剂量是根据本领域的任何标准工艺以约lng-lmg的剂量来配制 和给药的，所述剂量优选为lOng-lOOyg。在使用核酸或其变体时，根据标准工艺通常以 lng-O. lmg的剂量来配制和给药。用于所述组合物给药的其他规定对于本领域普通技术人 员将是已知的，其中剂量、注射时间表、注射位点、给药方式（例如，骨内）等根据上述变化。 向非人类的哺乳动物给药所述组合物（例如，试验目的或兽医治疗目的），基本上是在与上 述相同的条件下进行的。在此使用的受试者是哺乳动物，优选人类，包括非人灵长类、牛、 马、猪、绵羊、山羊、狗、猫或啮齿动物。
[0229] 在给药时，本发明的药物配制品及制剂是以药学上可接受的量并在药学上可接受 的组合物中应用。术语"药学上可接受的"是指不干扰所述活性成分的生物学活性作用的 非毒性物质。这样的配制品可以常规地含有盐、缓冲剂、防腐剂、相容性的载体以及任选的 其他治疗试剂。当在药物中使用时，所述的盐应当是药学上可接受的，但是非药学上可接受 的盐可以方便地用于制备其药学上可接受的盐并且不排除在本发明的范围之外。这样的药 理学上和药学上可接受的盐包括但不限于那些由以下的酸制得的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、 硝酸、磷酸、马来酸、乙酸、水杨酸、柠檬酸、甲酸、丙二酸、琥珀酸等等。药学上可接受的盐还 可以制备成碱金属或碱土金属盐，如钠盐、钾盐或钙盐。
[0230] 如果需要，药物组合物和制剂可以包含药学上可接受的载体。在此使用的术语"药 学上可接受的载体"是指一种或多种适于向人体内给药的相容性的固体或液体的填充剂、 稀释剂或包封物质。术语"载体"表示有机或无机的、天然或合成的成分，所述活性成分与 之结合以便于应用。所述药物组合物的成分还可以与本发明的分子共混，并且彼此共混，以 这样的方式从而不存在会实质上消弱所期望的药效的相互作用。
[0231] 所述药物组合物和制剂可以含有适宜的缓冲剂，所述缓冲剂包括：乙酸盐、柠檬酸 盐、硼酸盐、磷酸盐。所述药物组合物和制剂也可以任选地含有适宜的防腐剂如：苯扎氯铵、 三氯叔丁醇、对羟基苯甲酸酯和乙基汞硫代水杨酸钠。
[0232] 适于口服给药的组合物可以呈现为离散的单元如胶囊、片剂、锭剂，所述离散单元 各自地含有预定量的所述活性化合物。其他组合物包括水性液体或非水性液体形式的混悬 剂如糖浆剂、酏剂或乳剂。
[0233] 适于胃肠外给药的组合物方便地含有抗体或核酸的无菌的水性或非水性制剂，所 述制剂优选与接受者的血液等渗。该制剂可以根据已知方法使用适宜的分散剂或润湿剂和 助悬剂来配制。所述无菌注射剂也可以是无菌注射溶液或混悬液，所述溶液或混悬液是在 非毒性的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂例如1，3_ 丁二醇溶液中。在所述可接受的载体和 溶剂中，可使用的是水、林格氏溶液和氯化钠等渗溶液。此外，无菌的不挥发性油通常是作 为溶剂或混悬介质使用。就此目的，可以使用任何混合的不挥发性油包括合成的甘油单酯 或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸可用于注射剂。适于口服、皮下、静脉内、腔内、肌肉内等 给药的载体制剂可以在Remington' s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Co.， Easton，PA 中找到。
[0234] 本发明进一步的方面提供了在此定义的用作药物的试剂或组合物。用作药物的优 选试剂是抗体产品例如抗体或抗体片段。特定的试剂是结合至RAMP-3的抗体产品。特别 地，所述抗体产品结合至人的RAMP-3蛋白。
[0235] 在本发明的一个方面，本发明公开的试剂可以用于治疗癌症。根据本发明进一步 的方面，提供在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括给予治疗有效量的本发明的试剂。 在本发明优选的方法中，所述受试者是人。
[0236] 根据本发明进一步的方面，提供了将动物免疫的抗癌方法，所述方法包括给予有 效量的根据本发明的组合物。在本发明优选的方法中，该动物是人。
[0237] 在此使用的术语"癌症（cancer) "是指具有自主生长能力的细胞，即，由快速增殖 细胞生长来表征的异常状态或情形。该术语意在包括不论组织病理学类型或侵袭的阶段， 所有类型的癌性生长或致癌过程、转移性的组织或恶变的细胞、组织或器官。术语"癌症" 包括不同器官系统的恶性肿瘤，如那些侵袭性的，所述的器官系统是例如肺、胸、甲状腺、淋 巴、胃肠和泌尿生殖道以及包括恶性肿瘤如大多数的结肠癌、肾细胞癌、前列腺癌和/或睾 丸肿瘤、非小细胞肺癌、小肠癌和食道癌的腺癌。术语"癌（carcinoma) "是本领域公认的并 且是指上皮或内分泌组织的恶性肿瘤，包括呼吸系统癌症、胃肠系统癌症、泌尿生殖系统癌 症、睾丸癌、乳腺癌、前列腺癌、内分泌系统癌和黑色素瘤。示例性的癌包括由宫颈、肺、前列 腺、胸、头和颈、结肠和卵巢组织所形成的那些。
[0238] 术语"癌"还包括癌性肉瘤，例如其包括由癌组织和肉瘤组织所组成的恶性肿瘤。 "腺癌"是指衍生自腺组织的癌或者其中所述肿瘤细胞来自可辨别的腺体结构的癌。术语 "肉瘤"是本领域公认的并且是指间质衍生物的恶性肿瘤。癌的进一步类型包括白血病、皮 肤癌、颜内癌症和脑癌。
[0239] 癌症病理学中的AM的具体活动落入到5个方面的作用，称为刺激癌细胞的增殖、 间接抑制免疫应答、促进血管生成、助长侵袭性的肿瘤表型和细胞凋亡存活因子。因此，本 发明的试剂或组合物可以是在治疗、阻止和/或预防癌性病症上有用的，例如抑制血管的 发生或癌细胞的增殖。
[0240] 可以将包含本发明试剂的药物制剂作为化学治疗试剂联合给药或顺序给药或是 在基本上相近的时间给药。
[0241] 在本发明的一个方面，本发明的试剂和/或含有所述试剂的组合物或制剂可用于 治疗骨质疏松症。因此，根据本发明的一个方面，提供了一种在受试者中治疗骨质疏松症的 方法，所述方法包括给予有效量的根据本发明的试剂。在本发明优选的方法中，该受试者是 人。
[0242] 在本发明进一步的方面，本发明的试剂和/或含有所述试剂的组合物或制剂可用 于治疗例如降低肥胖水平。所述试剂也可以用于治疗肥胖的药物的制备。因此，根据本发 明的一个方面，提供了在受试者中治疗肥胖症的方法，所述方法包括给予有效量的根据本 发明的试剂。在本发明优选的方法中，该受试者是人。
[0243] 作为本发明的一方面，还包括本文所述的试剂在制备用于治疗或减缓血管病的药 物中的用途，例如选自如下的血管病：糖尿病性血管病、微血管病和大血管病。治疗血管病 例如糖尿病性血管病的方法，所述方法包括将本发明的试剂给予受试者是作为本发明的一 个方面包括于本发明。
[0244] 在本发明进一步的方面，可以将本发明的试剂和/或含有该试剂的组合物或制剂 用于治疗炎性障碍和/或炎性应答。因此，根据本发明进一步的方面，提供了一种在受试者 中治疗炎性障碍的方法，所述方法包括给予治疗有效量的本发明的试剂。在本发明优选的 方法中，该受试者是人。
[0245] 所述炎性障碍可以选自：动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、骨性关节炎、痛风、 红斑狼疮、硬皮病、干燥综合征（Si or gen syndrome)、多发性肌炎和皮肌炎（poly-and dermatomyositis)、血管炎、腱炎、滑膜炎、细菌性心内膜炎、骨髓炎、银肩病、肺炎、纤维化 肺泡炎、慢性支气管炎、支气管扩张症、肺气肿、矽肺、尘肺、结核病、溃疡性结肠炎、节段性 回肠炎（Crohn's disease)、慢性炎症性脱髓鞘多神经根神经瘤、慢性炎症性脱髓鞘多神经 病、多发性硬化症、格林-巴利综合征（Guillan-Barre Syndrome)和重症肌无力、乳腺炎、 蹄叶炎、喉炎、慢性胆囊炎、桥本（氏）甲状腺炎及炎性乳房疾病。在一个实施方案中，所述 炎性障碍可以是移植之后组织或器官排斥反应的结果。在特定的实施方案中，所述炎性障 碍选自动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、骨性关节炎、脓毒和多关节炎。
[0246] 在实施方案中，所述患者患有的、或者处于危险的或怀疑患有的疾病选自：血栓形 成、心肌梗死、卒中、短暂性缺血发作、闭塞性外周血管疾病、外周动脉闭塞，由炎性疾病例 如动脉粥样硬化引起的其并发症。
[0247] 本说明书还公开了将本发明的试剂向动脉粥样硬化障碍的实际位点或可疑位点 局部给药的方法。这样的给药方法可以在患有或怀疑患有动脉粥样硬化障碍的患者的治疗 中是有用的，所述障碍是例如可能破裂的动脉粥样硬化斑块。所述给药可以通过导管进行。
[0248] 本发明的试剂可以用于治疗心力衰竭。还提供本文所述的试剂在制备用于治疗心 力衰竭的药物中的应用。
[0249] 在本发明进一步的方面，本发明的试剂，和/或含有该试剂的组合物或制剂可以 用于治疗脓毒。所述试剂还可以用于治疗脓毒的药物的制备。因此，根据本发明的一个方 面，提供一种在受试者中治疗脓毒的方法，所述方法包括给予有效量的根据本发明的试剂。 在本发明优选的方法中，该受试者是人。
[0250] 在本发明的实施方案中，所述试剂可能在治疗创伤中是有用的，也就是说用于辅 助伤口的愈合。本发明进一步的方面，提供了一种在受试者中治疗创伤的方法，所述方法包 括给予有效量的根据本发明的试剂。在本发明优选的方法中，所述受试者是人。还提供本 发明的试剂在制备用于治疗创伤的药物中的应用。
[0251] 这里使用的"创伤"的治疗包括，尤其是溃疡和损伤的治疗，例如皮肤创伤如割伤 或烧伤，及其伴随症状。
[0252] 这里使用的"治疗"是指试图改变所治疗个体或细胞的天然进程的临床介入，并且 可以用于预防或是在临床病理学的过程中进行。所期望的效果包括：预防疾病的发生或复 发、症状的减轻、减小所述疾病的任何直接或间接病理结果、降低疾病发展的速率、改善或 缓解所述疾病的状态以及减轻或改进的预后。这里使用的的术语"治疗"意在包括所指明 的病症/障碍的治疗和预防。
[0253] 进一步提供各部分的包装或试剂盒，所述的包装或试剂盒包括：
[0254] (1)在此描述的试剂；连同
[0255] (2)在此所述的方法中使用所述试剂的说明。
[0256] 在此定义的包装可以包括超过一种的剂量单位，以提供用于重复的定量给药。如 果存在超过一种的剂量单位，在活性试剂组合物的剂量和/或外形方面，这样的单位可以 是相同的或可以是不同的。
[0257] 贯穿于本文的说明书和权利要求书，词语"包含（comprise) "和"含有（contain) " 及其变形例如"包含有（comprising) "和"包含着（comprises) "是指"包括但不限于"，并 且不意在排除（且不排除）其他部分、添加剂、成分、整体或步骤。
[0258] 贯穿于本文的说明书和权利要求书，所述单数包括复数，除非上下文另外要求。特 别地，当使用不定冠词时，将其描述内容理解为包含复数和单数，除非上下文另外要求。
[0259] 与本发明的特定方面、实施方案或实施例相结合的所描述的特征、整体、性质、化 合物、化学部分或基团被理解为应用于本文所述的任何其他的方面、实施方案或实施例，除 非与其不相容。
[0260] 现在将对本发明的实施方案仅仅通过实施例的方式并参考以下的附图以及材料 和方法来描述：
[0261] 图1显示了 RAMP 1的DNA序列（上方）（SEQ. ID. No. 1);和由所述DNA序列编码 的氨基酸序列（下方）（SEQ. ID. No 2);
[0262] 图2显示了 RAMP 2的DNA序列（上方）（SEQ. ID. No 3);和由所述DNA序列编码 的氨基酸序列（下方）（SEQ. ID. No 4.);
[0263] 图3显示了 RAMP3的DNA序列（上方）（SEQ. ID.No 5);和由所述DNA序列编码 的氨基酸序列（下方）（SEQ. ID.No 6);
[0264] 图4显示了对应于RAMP1胞外域（E⑶）的区域的DNA序列（上方）（SEQ. ID. No 7); 和由所述DNA序列编码的氨基酸序列（下方）（SEQ. ID. No 8);
[0265] 图5显示了对应于RAMP2胞外域（E⑶）的区域的DNA序列（上方）（SEQ. ID. No 9); 和由所述DNA序列编码的氨基酸序列（下方）（SEQ. ID. No 10);
[0266] 图6显示了对应于RAMP 3胞外域（E⑶）的区域的DNA序列（上方）（SEQ. ID. No 11);和由所述DNA序列编码的氨基酸序列（下方）（