一种富含果聚糖的膳食补充剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种富含果聚糖的膳食补充剂及其制备方 法。
【背景技术】
[0002] 膳食补充剂是一种日常营养补充剂，其可通过维生素、矿物质、氨基酸等营养成分 的补充，来提高机体健康水平和降低疾病发生风险，现有的膳食补充剂基本都是通过多种 营养成分的组合制备而成的，复杂的配方大大增加了膳食补充剂在制备过程中被污染的风 险，进而对消费者形成了潜在的威胁。而果聚糖（果聚糖的英文名称为Levan)是一种天然 的果糖聚合物，存在于多种植物和微生物发酵产物中，虽然在甘蔗汁加工业中是不受欢迎 的微生物代谢产物，但在抗癌、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、降血糖、降血脂、降胆固醇、增强免疫、 减肥等医药临床领域具有极高的应用价值，近年来受到研究者的关注。
[0003] 将levan与膳食补充剂配合使用势必相得益彰，但目前富含果聚糖的膳食补充剂 相对较少，并levan的使用也因其产生菌多为致病菌（芽孢杆菌等）而通常是提取后人工 添加入产品中去的，因此，利用安全性更高的微生物来生产富含果聚糖的膳食补充剂将是 膳食补充剂的重要研究方向之一。
【发明内容】
[0004] 因此，本发明为了解决目前市场缺乏富含levan的膳食补充剂，现有levan产生菌 多为致病菌，以及类似的膳食补充剂中多糖多为人工添加的问题，提供了一种富含果聚糖 的膳食补充剂及其制备方法。本发明人发现利用保藏编号为CGMCC No. 6431的柠檬明串珠 菌发酵蕃茄汁蔗糖培养基后，获得的发酵液中含有大量果聚糖，利用该发酵液制备的膳食 补充剂中果聚糖含量也相当丰富，从而完成了本发明。
[0005] 因此，为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之一是：一种富含果聚糖的膳 食补充剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0006] (1)将梓檬明串珠菌（Leuconostoc citreum)发酵菌种在番前汁鹿糖培养基中发 酵培养，得发酵液；
[0007] (2)将步骤⑴所得发酵液离心取上清液，调节pH，冷冻干燥即得。
[0008] 其中步骤（1)为将梓檬明串珠菌（Leuconostoc citreum)发酵菌种在番前汁鹿糖 培养基中发酵培养，得发酵液。
[0009] 其中所述的柠檬明串珠菌为现有技术，其制备方法为本领域常规制备方法，或者 通过购买获得。所述梓檬明串珠菌（Leuconostoc citreum)发酵菌种较佳地为保藏号为 CGMCC No. 6431的柠檬明串珠菌，该菌株的命名为BD01707。该菌株已于2012年08月13 日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)，保藏地址：北京市朝 阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。
[0010] 其中所述的番茄汁蔗糖培养基的制备方法包括以下步骤：番茄榨汁，将所得榨汁 过滤后煮沸，离心取上清液，与蔗糖混合后加热冷却，调节pH值，灭菌后冷却即得。其中所 述过滤的方法为较佳地利用80~120目纱布过滤取汁，更佳地为100目纱布，所述煮沸的 时间较佳地为1~10分钟，更佳地为3~7分钟，优选地为5分钟，所述离心的较佳地速度 为4, 000~12, 000g，更佳地为6, 000~10, 000g，优选地为8, 000g，离心的时间较佳地为 8~12分钟，更佳地为9~11分钟，优选地为10分钟，蔗糖的加入量较佳地为5~30 %，更 佳地为10~20%，优选地为15%，所述灭菌的温度较佳地为95~125°C，更佳地为110~ 123 °C，优选地为121°C，灭菌时间较佳地为10~30分钟，更佳地为15~25分钟，优选地为 20分钟，pH值较佳地为4. 5~7. 5,更佳地为6. 0~7. 0,优选地为6. 5。
[0011] 所述发酵培养的温度较佳地为20 °C~35 °C，更佳地为25~32 °C，优选地为30 °C， 所述发酵培养较佳地为震荡发酵培养，振荡的速度较佳地为100~300rpm，更佳地为150~ 250rpm，优选地为200rpm，发酵培养的时间较佳地为24~120小时，更佳地为72~110小 时，优选地为96小时。
[0012]所述的发酵菌种的接种量较佳地为0. 5 %~4. 0 %，更佳地为1 %~3 %，优选地为 地为2%，所述百分比为体积百分比。
[0013] 其中步骤（2)为将步骤（1)所得发酵液离心取上清液，调节pH，冷冻干燥即得。
[0014] 其中所述离心的速度为较佳地为4, 000~12, 000g，更佳地为6, 000~10, 000g， 优选地为8, 000g，离心的时间较佳地为8~12分钟，更佳地为9~11分钟，优选地为10分 钟。其中所述调节pH值较佳地为5. 0~9. 0,更佳地6. 0~8. 0,优选地为7. 0。其中所述 调节pH值的方法为本领域常规方法，较佳地为利用食品级碱调节pH值，所述食品级碱为本 领域常规，较佳地是Na 2C03、NaHCOjP NaOH中的一种或多种。本发明所述的冷冻干燥为本 领域常规的冻干方法，所述冷冻干燥方法较佳地为真空冷冻干燥，其中所述真空冷冻干燥 条件较佳地为：板层极限温度< _60°C，冷阱极限温度-70°C，板层装料厚度0. 5~2. 0_， 真空度10~30Pa。
[0015] 为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之二是：一种如本发明所述的制备 方法制得的富含果聚糖的膳食补充剂。
[0016] 较佳地，所述膳食补充剂中果聚糖的含量彡6%，所述百分比为质量百分比。
[0017] 为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案之三是：如本发明所述的富含果聚 糖的膳食补充剂在制备药品或食品中的用途。
[0018] 本发明所述的用途为本领域常规用途，较佳地为将本发明所得富含果聚糖的膳食 补充剂作为食品添加剂或者药品辅助剂的用途。
[0019] 在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实 例。
[0020] 本发明所用试剂和原料均市售可得。
[0021 ] 本发明的积极进步效果在于：
[0022] 1、本发明采用的菌株为一株产果聚糖的梓檬明串珠菌（Leuconostoc citreum)， 该菌株为首次发现具有产levan能力的柠檬明串珠菌。
[0023] 2、本发明采用的柠檬明串珠菌是乳酸菌的一种，与其他产levan的菌株（如芽孢 杆菌等）相比，其代谢产物具有更高的食品安全性。
[0024] 3、本发明提供的膳食补充剂中所含有的levan是柠檬明串珠菌代谢蔗糖产生的， 与市面上以人工后添加方式生产的膳食补充剂相比，本发明的制备工艺极大简化了生产步 骤，节省了生产成本，同时降低了非连续性操作中带来的污染风险。
[0025] 4、本发明提供的膳食补充剂，其制备所过程采用的发酵培养基来源广泛、成本低 廉、天然安全，在降低物料成本的同时，提高了食品的安全性。
[0026] 5、本发明利用产果聚糖的柠檬明串珠菌发酵天然发酵培养基，结合调pH、冷冻干 燥的方法生产可直接食用的功能性膳食补充剂，打破现有市场上稀缺富含果聚糖的膳食补 充剂的现状。
[0027] 牛物材料保藏信息
[0028] 本发明涉及的柠檬明串珠菌的菌株，已于2012年08月13日保藏在中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC)，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3 号，邮编：100101。该菌株的建议的分类命名为：梓檬明串珠菌Leuconostoc citreum，该菌 株的保藏编号为：CGMCCNo.6431，所保藏的培养物名称为：BD01707。
【附图说明】
[0029] 图1显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的单糖组成色谱测定结果。
[0030] 图2显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的红外光谱测定结果。
[0031] 图3显示柠檬明串珠菌BD01707多糖的核磁共振测定结果。
【具体实施方式】
[0032] 下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实 施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商 品说明书选择。
[0033] 实施例1富含果聚糖的