5 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶， 得棕色透明晶体，即为含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合 物。产率：86.6%。熔点：140°C (dec)。
[0036] 元素分析（C28H21Br2N5O4Co):计算值：C 47. 35, H 2· 98, N 9· 86 ;实测值：C 47. 45， H 2· 96, N 9· 87〇
[0037] FT-IR (KBr, κ/cm 3 : 3070，3037，1602，1581，1477，1440，1303，1136， 1037。
[0038] 晶体学数据：三斜晶系，空间群 Ρ-1，a = 0· 88470 (7)nm，b = 0· 91799 (8) nm，c = 1.80141(15) nm，a = 104. 3350 (10)。，β= 91. 3680 (10)。，γ= 99. 0640 (10)。，Z=2，V= 1.3967(2) nm3。
[0039] 实施例4 : 含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合物的制备： 在500mL三口烧瓶中加入2.080 g (5.0 mmol) 3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚 Schiff碱及IOOmL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入105mL 50 mmol/L的乙酸钴的乙醇溶液， 在搅拌回流下反应14 h，然后滴加150mL吡啶，继续回流14 h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结 晶，得棕色透明晶体，即为含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴 配合物。产率：78.2%。熔点：140°C (dec)〇
[0040] 元素分析（C28H21Br2N5O4Co):计算值：C 47. 35, H 2· 98, N 9· 86 ;实测值：C 47. 45， H 2· 96, N 9· 87〇
[0041] FT-IR (KBr, κ/cm 3 : 3070，3037，1602，1581，1477，1440，1303，1136， 1037。
[0042] 晶体学数据：三斜晶系，空间群 Ρ-1，a = 0· 88470 (7)nm，b = 0· 91799 (8) nm，c = 1.80141(15) nm，a = 104. 3350 (10)。，β= 91. 3680 (10)。，γ= 99. 0640 (10)。，Z=2，V= 1.3967(2) nm3。
[0043] 实施例5 : 含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合物的制备： 在1000 mL三口烧瓶中中加入4.160 g (10. 0 mmol) 3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基 酚Schiff碱及180mL溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入210mL 50 mmol/L的乙酸钴的乙醇溶 液，在搅拌回流下反应15 h，然后滴加230mL吡啶，继续回流13 h，冷却，过滤，控制溶剂挥 发结晶，得棕色透明晶体，即为含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶 的钴配合物。产率：75. 4%。熔点：140°C (dec)。
[0044] 元素分析（C28H21Br2N5O4Co):计算值：C 47. 35, H 2· 98, N 9· 86 ;实测值：C 47. 45， H 2· 96, N 9· 87〇
[0045] FT-IR (KBr, κ/cm 3 : 3070，3037，1602，1581，1477，1440，1303，1136， 1037。
[0046] 晶体学数据：三斜晶系，空间群 Ρ-1，a = 0. 88470 (7)nm，b = 0. 91799 (8) nm，c = 1.80141(15) nm，a = 104. 3350 (10)。，β= 91. 3680 (10)。，γ= 99. 0640 (10)。，Z=2，V= 1.3967(2) nm3。
[0047] 试验例： 本发明的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合物，其体 外抗癌活性测定是通过MTT实验方法实现的。
[0048] MTT 分析法： 以代谢还原 3-(4, 5-Dimethylthiazol_2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide 为 基础。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒 (Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO)能溶解细胞中的甲 瓒，用酶标仪测定特征波长的光密度，可间接反映活细胞数量。
[0049] 采用MTT法来测定实施例1制备的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚 Schiff碱与吡啶的钴配合物对人结肠癌细胞（C〇1〇205)、人肝癌细胞（HepG2)、人乳腺癌细 胞(MCF7)、人子宫颈癌细胞（Hela)和人肺癌细胞（NCI-H460)的抑制活性。
[0050] 细胞株及培养体系：(：〇1〇205、!1印62、]\077、册1(93和从：1-!1460细胞株取自美国组 织培养库（ATCC)。用含10%胎牛血清的RPMI 1640 (GIBIC0公司）培养基，在5% (体积分 数）C02、37 °C饱和湿度培养箱内进行体外培养。
[0051 ] 测试过程：将测试药液（Ing/mL~100ug/mL)按照浓度的浓度梯度分别加入到各 个孔中，每个浓度设6个平行孔。实验分为药物实验组(分别加入不同浓度的测试药)、对照 组(只加培养液和细胞，不加测试药)和空白组(只加培养药，不加细胞和测试药)。将加药后 的孔板置于37°C，5%C02培养箱中培养72h。对照药物的活性按照测试样品的方法测定。在 培养了 72h后的孔板中，每孔加 MTT 40uL (用D-Hanks缓冲液配成4mg/mL)。在37°C放置 4h后，移去上层清液。每孔加150uL DMS0,振荡5min，使Formazan结晶溶解。最后，利用自 动酶标仪在570nm波长处检测各孔的光密度。
[0052] 数据处理：数据处理使用Graph Pad Prism version 5. 0程序，配合物IC5。通过程 序中具有S形剂量响应的非线性回归模型进行拟合得到。
[0053] 以MTT分析法对人结肠癌细胞（C〇1〇205)、人肝癌细胞（!fepG2)、人乳腺癌细胞 (MCF7)、人子宫颈癌细胞（Hela)和人肺癌细胞（NCI-H460)细胞株进行分析，测定其IC 5。值， 结果如表1所示，结论为：由表中数据可知，以本发明的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻 氨基酸Schiff碱与吡啶的钴配合物用作抗癌药物，对人结肠癌细胞（C〇1〇205)、人肝癌细 胞（HepG2)、人乳腺癌细胞（MCF7)、人子宫颈癌细胞（Hela)和人肺癌细胞（NCI-H460)具有 一定的药效，可作为抗癌药物的候选配合物。
[0054] 表1含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴配合物抗癌 药物体外活性测试数据
其余实施例制备的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴配 合物以MTT法对人结肠癌细胞（C〇1〇205 )、人肝癌细胞（HepG2 )、人乳腺癌细胞（MCF7 )、人子 宫颈癌细胞（He I a )和人肺癌细胞（NCI-H460 )的抗癌活性测试方法同试验例，测试结果与 表1基本相同。
【主权项】
1. 一种含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴配合物，为如下 结构式（I)的配合物：⑴。2. 如权利要求1所述的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的 钴配合物，其红外数据：FT-IR(KBr,K/cm 3 : 3070，3037，1602，1581，1477，1440， 1303， 1136， 1037。3. 如权利要求1所述的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶 的钴配合物，其中，所述的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的 钴配合物为晶体结构，其晶体学数据如下：三斜晶系，空间群P_l，a= 0.88470(7)nm，b =0.91799(8)nm，c= 1.80141(15)nm，a= 104.3350(10)。，0 = 91.3680(10)。，y= 99. 0640(10)。，Z= 2,V= 1.3967(2)nm3;分子中钴原子为六配位的畸变八面体构型。4. 权利要求1所述含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配 合物具有一定的热稳定范围，在140°C以下能稳定存在。5. 权利要求1所述的含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配 合物的制备方法，其特征是在反应容器中加入3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff 碱及溶剂无水乙醇，加热溶解后滴入50mmol/L的乙酸钴的乙醇溶液，在搅拌回流下反应 8~15h，然后滴加吡啶，继续回流6~15h，冷却，过滤，控制溶剂挥发结晶，得棕色透明晶 体，即为含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴配合物。6. 如权利要求4所述的制备的方法，其特征在于，所述3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨 基酚Schiff碱与乙酸钴的物质的量比为1:1~1:1. 2。7. 如权利要求4所述的制备的方法，其特征在于，所述溶剂无水乙醇的用量为每毫摩 尔3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱加14~25毫升。8. 如权利要求4所述的制备的方法，其特征在于，所述吡啶的用量为每毫摩尔3, 5-二 溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱15~30毫升。9. 权利要求1所述含有3, 5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚SchifT碱与吡啶的钴配 合物在制备抗癌药物中的应用。10. 权利要求9所述的应用，其中所述癌细胞为人结肠癌细胞、人肝癌细胞、人乳腺癌 细胞、人子宫颈癌细胞、人肺癌细胞。
【专利摘要】本发明公开了一种含有3,5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合物，为如下结构式(I)的配合物。本发明还公开了该含有3,5-二溴水杨醛缩4-硝基邻氨基酚Schiff碱与吡啶的钴配合物的制备方法以及在制备抗癌药物中的应用。
【IPC分类】C07F15/06, A61P35/00
【公开号】CN105218593
【申请号】CN201510650134
【发明人】张志坚, 邝代治, 蒋伍玖, 刘健晖, 滕涛, 周东升, 杨海
【申请人】衡阳师范学院
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月10日