，分为四层，依次为上液层、类固层、中液层和下液层，上液层产物为脂类产品相，类固层为富磷脂相，中液层为富酶相。另取中下液层测量其酶活和上液层磷含量，可得油相中磷含量仅为13.96mg/kg磷脂去除率可达到86.0%，另磷脂酶主要分配于中液层，中下液层的分配系数可达4.75。
[0025]实施例2
[0026]取适量Ultra磷脂酶置于锥形瓶中，加入100倍体积的水，混匀后，取5.2g粗酶液(酶浓度50U/mL)，加入1.6g的柠檬酸钠，混匀后加入3.2g[BMIM]BF4^P 5g大豆毛油，装入具塞三角瓶中混合均匀，混合溶液的pH值为7.7，并置于转速为200rpm的恒温摇床上，控制在50°C下反应10分钟。另取不少于反应体积的粗酶液，加入2.5g大豆毛油，加水至和实验组相同体积，并在相同条件下反应作为对照。反应结束后，设定4600rpm转速离心5min，实验组分为四层，依次为上液层、类固层、中液层和下液层，上液层产物为脂类产品相，类固层为富磷脂相，下液层为富酶相。另取上、中、下液层分别测量磷含量和酶活，可得油相中磷含量仅为4.36mg/kg，油中磷脂去除率可达到97.0% ;回收磷脂主要分配于类固层，回收率可达81.7%，磷脂酶主要分配于下液层，中下液层的分配系数为零，磷脂酶的回收率为100%。而对照组分为两相，对照中磷含量为74.72mg/kg，磷脂去除率仅为47.6%。
[0027]实施例3
[0028]取适量Ultra磷脂酶置于锥形瓶中，加入100倍体积的水，混匀后，取2g粗酶液(酶浓度50U/mL)，加入1.5g的朽1檬酸钠，混勾后加入1.5g聚乙二醇400和2.5g大豆毛油，装入具塞三角瓶中混合均匀，混合溶液的pH值为7.7，并置于转速为200rpm的恒温摇床上，控制在50°C下反应lh。另取不少于反应体积的粗酶液，加入2.5g大豆毛油，加水至和实验组相同体积，并在相同条件下反应作为对照。反应结束后，设定4600rpm转速离心5min，分为四层，依次为上液层、类固层、中液层和下液层，上液层产物为脂类产品相，类固层为富磷脂相，中液层为富酶相。另取中下液层测量其酶活和上液层磷含量，可得油相中磷含量仅为
1.53mg/kg磷脂去除率可达到98.8%，比对照中磷脂去除率提升了 70%，另磷脂酶主要分配于中液层，中下液层的分配系数可达2.1。
[0029]实施例4
[0030]取适量Ultra磷脂酶置于锥形瓶中，加入100倍体积的水，混匀后，取3g粗酶液(酶浓度50U/mL)，加入lg的硫酸钱，混勾后加入lg聚乙二醇400和2.5g大豆毛油，装入具塞三角瓶中混合均匀，混合溶液的pH值为7.7，并置于转速为200rpm的恒温摇床上，控制在50°C下反应3h。另取3g粗酶液，加入2g水和2.5g大豆毛油，在相同条件下反应作为对照。反应结束后，设定4600rpm转速离心5min，实验组分为四层，依次为上液层、类固层、中液层和下液层，上液层产物为脂类产品相，类固层为富磷脂相，中液层为富酶相。对照组分为两相。另取中下液层测量其酶活和上液层磷含量，可得油相中磷含量仅为4.58mg/kg磷脂去除率可达到96.5%，而对照中磷含量为55.29mg/kg，磷脂去除率仅为58.2%，实验组磷脂酶主要分配于中液层，中下液层的分配系数可达6.67。
[0031]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种酶法脱胶方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)配置磷脂酶浓度为l_30000U/mL的酶液，向酶液中添加可溶性盐、亲水性溶剂和富含磷脂的脂类，配成三液相体系；所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液的质量比分别为0.1-0.9、0.1-5 和 0.1-10 ； (2)将三液相体系置于带搅拌反应器中反应，反应结束后，静置或离心至分为四层，从上自下依次为上液层、类固层、中液层和下液层，磷脂主要富集于类固层，收集上液层产物即为脱除磷脂的脂类产品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述亲水性溶剂为聚乙二醇、聚丙二醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、乙二醇和丙酮中的一种或两种以上。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述亲水性溶剂为[BMHOBr、[BM頂]BF4、[EMIM] ETSO4^P [0MIM]C1 中的一种或两种以上。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述可溶性盐是柠檬酸钠、氯化钠、硫酸铵、碳酸钠、磷酸氢二钾、磷酸钾、磷酸二氢钾和磷酸氢二钾中的一种或两种以上。5.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，步骤(2)的反应条件为:温度20-90°C，反应时间为0.01-50ho6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述三液相体系的pH值为3-13。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述三液相体系的pH值为4-8。8.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，步骤(I)所述磷脂酶浓度为5-2000U/mLo9.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液质量比分别为0.2-0.8,0.2-0.8和0.2-4ο10.根据权利要求1或2或3或4所述的方法，其特征在于，所述脂类为鱼油、大豆毛油、水化脱胶油或南极磷虾油。
【专利摘要】一种酶法脱胶方法，包括以下步骤：(1)配置磷脂酶浓度为1-30000U/mL的酶液，向酶液中添加可溶性盐、亲水性溶剂和富含磷脂的脂类，配成三液相体系；所述可溶性盐、亲水性溶剂和脂类与酶液的质量比分别为0.1-0.9、0.1-5和0.1-10；(2)将三液相体系置于反应器中恒温摇床反应，反应结束后，静置或离心至分为四层，从上自下依次为上液层、类固层、中液层和下液层，磷脂主要富集于类固层，收集上液层产物即为脱除磷脂的脂类产品。该方法具有能耗小、原料利用率高、反应条件温和等优点，解决了现有酶法脱除并同步回收油中磷脂难于工业化的技术难题。
【IPC分类】C11B3/00
【公开号】CN105349255
【申请号】CN201510757789
【发明人】王永华, 陈华, 李志刚, 杨博, 王卫飞, 陈华勇, 莫宗超, 杨良华
【申请人】华南理工大学
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年11月6日