一种利用环糊精从槐米中提取槲皮素的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物提取工艺研究领域，具体涉及一种利用环糊精从槐米中提取槲皮 素的方法。
【背景技术】
[0002] 环糊精是直链淀粉在由芽孢杆菌产生的环糊精葡萄糖基转移酶作用下生成的一 系列环状低聚糖的总称，通常含有6~12个D-吡喃葡萄糖单元。其中研究得较多并且具 有重要实际意义的是含有6、7、8个葡萄糖单元的分子，分别称为alpha-、beta_和gama-环 糊精。根据X-线晶体衍射、红外光谱和核磁共振波谱分析的结果，确定构成环糊精分子的 每个D(+)_吡喃葡萄糖都是椅式构象，各葡萄糖单元均以1，4-糖苷键结合成环，由于连 接葡萄糖单元的糖苷键不能自由旋转，环糊精不是圆筒状分子而是略呈锥形的圆环，尤以 β -环糊精最为常用，β -环糊精结构成环状中空筒状，环筒外部是亲水性的表面，内部的 非极性基团形成一个具有一定尺寸的疏水空腔，当β -环糊精上每个葡萄糖残基的2_，3_， 6-位羟基中的氢原子被羟丙基取代时，形成了羟丙基β-环糊精，羟丙基β-环糊精在医药 领域的主要应用体现在（1)增加难溶性药物的水溶性；(2)增加药物稳定性、提高药物生物 利用度；⑶降低药物的毒副作用；同时，羟丙基-β -环糊精可用于口服药物、注射剂、粘膜 给药系统（包括鼻粘膜、直肠、角膜等）、透皮吸收给药系统、亲脂性靶向药物的载体，还可 用做蛋白质的保护剂和稳定剂。
[0003] 槲皮素，又名栎精，槲皮黄素，溶于冰醋酸，碱性水溶液呈黄色，几乎不溶于水，乙 醇溶液味很苦。可作为药品，具有较好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外还有 降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉，增加冠脉血流 量等作用。用于治疗慢性支气管炎。对冠心病及高血压患者也有辅助治疗作用。由于槲皮 素在冷水中几乎不溶，在沸水中极微溶解，在沸乙醇中溶解，在氢氧化钠溶液中易溶，传统 的对槲皮素的提取工艺多采取碱溶酸沉法，同时也有通过醇提法进行槲皮素的提取研究， 在申请号201210424952. 7的公开文件中，同样采用了碱溶酸沉法的制备过程，而且在实验 的过程中采取了利用了反应釜的方式，同样存在操作不方便，资源浪费等问题。
【发明内容】
[0004] 本发明设计开发了一种利用环糊精从槐米中提取槲皮素的方法，目的是解决槲皮 素在水溶液条件下提取过程中能源浪费，操作不便，提取效率低等问题，通过利用羟丙基 β -环糊精与槲皮素的包合作用，使水溶液下的槐米中的槲皮素能够高效提取，同时，也利 用了羟丙基β -环糊精具有溶血性低，安全性高，增加难溶性药物稳定性等特点，使羟丙基 β-环糊精能够高效可靠的用于本发明中。
[0005] 本发明提供的技术方案为：
[0006] -种利用环糊精从槐米中提取槲皮素的方法，包括如下步骤：
[0007] 步骤一：称取待实验槐米1. 5g，将待实验槐米研磨至25目~100目槐米粗品；
[0008] 步骤二：将所述槐米粗品加入到环糊精溶液中浸泡4h~6h，同时调节溶液pH至 2. 5~3. 0 ;其中，环糊精的质量占所述槐米粗品质量的5%~20%，所述槐米粗品的质量与 水溶液的体积的料液比为1 : 100~1 : 300 ;
[0009] 步骤三：将所述槐米粗品和所述环糊精溶液的混合液回流提取4~12h，回流提取 结束后，混合液自然冷却至室温；
[0010] 步骤四：计算出槲皮素的转移提取率。
[0011] 优选的是，所述环糊精为羟丙基β -环糊精。
[0012] 优选的是，所述步骤一中，将所述待实验槐米研磨至50~100目的颗粒。
[0013] 优选的是，所述步骤一中，所述槐米粗品质量为0. 5g。
[0014] 优选的是，所述步骤二中，所述环糊精的质量占所述槐米粗品质量的10 %~ 17. 5%。
[0015] 优选的是，所述步骤二中，所述槐米粗品的质量与所述水溶液的体积的料液比为 1 : 150 ~1 : 250。
[0016] 优选的是，所述步骤二中，调节溶液pH为2. 8。
[0017] 优选的是，所述步骤三中，所述混合液回流提取6~10h。
[0018] 优选的是，所述步骤四中，计算槲皮素的转移提取率的方法为：提取转 移率其中，c为提取液中懈皮素浓度；V为提取液体积；m为提取时称得的槐米 实际质量;w为槐米中槲皮素含量。
[0019] 本发明所述的有益效果：
[0020] 1、羟丙基β-环糊精能够有效增加槲皮素在水中的溶解度，有效提高其稳定性， 从而有效的提高水溶液下槲皮素从槐米中的转移提取率；
[0021] 2、实验简单，操作方便，只需水提取即可，节约能耗，没有污染物的产生。
【附图说明】
[0022] 图1为本发明所述的槲皮素对照品及所述的槐米中槲皮素的示意图。
【具体实施方式】
[0023] 下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文 字能够据以实施。
[0024] 本发明提供一种利用环糊精从槐米中提取槲皮素的方法，包括如下步骤：
[0025] 步骤一：首先粗略称取待实验槐米1. 5g，将待实验槐米研磨至25目~100目槐米 粗品，取等质量的槐米粗品样品数份；
[0026] 步骤二：将称好的槐米粗品加入到环糊精溶液中浸泡4h~6h，同时通过缓冲盐调 节溶液pH至2. 5~3. 0 ;其中，环糊精的质量占槐米粗品质量量的5%~20%，槐米粗品的 质量与水溶液的体积的料液比为1 : 100~1 : 300, g/mL ;
[0027] 步骤三：将槐米粗品和环糊精溶液的混合液置于到圆底烧瓶中进行回流提取实 验，提取时间为4~12h ;其中，当冷凝管中有回流溶剂向圆底烧瓶滴下时开始计时，实验完 成后提取液趁热过滤，自然冷却至室温，量取提取液的体积；
[0028] 步骤四：移取lmL提取液置于lOmL容量瓶中，以纯甲醇稀释定容，超声30min，稀 释液离心（12000rpm，10min)后取上清液过滤（0. 22μηι)，续滤液进样分析，计算出槲皮素 浓度；其中，通过公式提取转移率^计算提取转移率，c为提取液中槲皮素浓度， mg/mL ;V为提取液体积，mL ;m为提取时称得的槐米实际质量，g ;w为槐米中懈皮素含量， mg/g〇
[0029] 在另一种实施例中，环糊精为羟丙基β -环糊精，由于羟丙基β -环糊精在医药领 域的具有以下几种优势：（1)增加难溶性药物的水溶性；（2)增加药物稳定性、提高药物生 物利用度；⑶降低药物的毒副作用；同时，羟丙基-β -环糊精可用于口服药物、注射剂、粘 膜给药系统（包括鼻粘膜、直肠、角膜等）、透皮吸收给药系统、亲脂性靶向药物的载体，还 可用做蛋白质的保护剂和稳定剂，所以，在进行本发明实验时，选择羟丙基β-环糊精作为 一种优选，进行药材有效成分的提取。
[0030] 在另一种实施例中，实验步骤一中，将待实验槐米进一步研磨至50~100目的颗 粒，再进行回流提取实验，能够通过减小槐米的颗粒大小，从而增加与羟丙基β -环糊精的 接触表面积，进而增加提取转移率。
[0031] 在另一种实施例中，实验步骤一中，作为一种优选，将研磨后的槐米粗品质量选择 为0. 5g，在实验室的条件下，合理的选择0. 5g作为实验室的提取质量，能够合理的去选择 后续的实验条件。
[0032] 在另一种实施例中，实验步骤一中，羟丙基环糊精的质量占待实验槐米质量 的 10%~17. 5%〇
[0033] 在另一种实施例中，实验步骤二中，研磨后的槐米粗品质量与加入水溶液的体积 比（料液比）为1 : 150~1 : 250, g/mL。
[0034] 在另一种实施例中，实验步骤二中，作为一种优选，在提取瓶中加完水溶液后，通 过缓冲盐调节水溶液pH为2. 8。
[0035] 在另一种实施例中，实验步骤二中，作为一种优选，进行回流提取实验的实验时间 选择为6~10h。
[0036] 在本发明中，首先通过对料液比、提取方法、提取时间、槐米颗粒大小、羟丙基 β -环糊精用量等进行单因素考察