仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵饲料的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵饲料，属于饲料 微生物技术领域。
【背景技术】
[0002] 中国是世界上最大的养殖生产国之一，对饲料原料的需求量与日倶增。近年来，随 着人们对动物营养研究的深入，对饲料的要求也越来越高，人民更加注重质量而不仅仅是 对产量的追求。然而，资源逐渐匮乏，蛋白源短缺尤为严重，蛋白质的供需矛盾日益尖锐。其 中微生物发酵饲料日益受到重视。
[0003] 微生物发酵饲料是指在人为可控制的条件下，以农副产品为主要原料，通过微生 物的代谢作用，将植物性、动物性和矿物性物质中的抗营养因子分解、合成，产生更能被畜、 禽采食、消化、吸收养分和无毒害作用的生物饲料或饲料原料。微生态饲料添加剂又称微生 态制剂、益生素、活菌制剂等，添加到饲料中进行适当的发酵即为微生态发酵饲料。具有直 接通过增强动物对肠内有害微生物的抑制作用或通过增强非特异性免疫功能来预防疾病， 从而促进动物生长或提高饲料转化率的一类药物或饲料添加剂。
[0004] 微生态制剂安全、有效、不污染环境、无耐药性，作为抗生素的替代品将在饲料工 业中发挥重要作用。随着社会的发展，人们对食品安全越来越重视，抗生素饲料添加剂的广 泛应用所引起的临床畜禽耐药问题越来越严重，造成的药物残留问题不但影响了动物产品 质量，也危害人们的身体健康，其他如导致动物体内菌群失调、产生抗药性、畜产品适口性 差等问题，尤其是食物链的药物残留也引起普遍关注。因此，开发和研制新型无污染、无残 留绿色微生态饲料添加剂，是生产绿色畜禽产品的需要，已受到人们的重视和认可。
[0005] 活性发酵型微生态饲料因具有改善饲料适口性、提高饲料营养价值、生产成本较 低和充分利用多种饲料资源等显著特点，研究开发潜力极大，是现在和未来安全饲料发展 的重要方向。已成为国内外研究的热点领域。
[0006] 微生态饲料在发酵菌种上主要表现在由传统的单一菌种（株）向具有一定功能组 合效应的多菌种（株）发展。目前我国用于饲料强化混合发酵的微生物菌种（菌剂）主要 是与具体的发酵工艺相配套使用的微生物菌种，如CN1024468C中的"粗淀粉料混菌固体发 酵菌体蛋白饲料的方法"，CN1857099A中的"动物发酵浓缩饲料和配合饲料及其制作方法和 设备"。上述微生物发酵制剂菌种过于单一，发酵不全面，发酵效果差，影响仔猪的生长。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的是提供一种仔猪饲用微生态发酵剂及其制备方法和活性固态发酵 饲料，通过对具有显著协同作用的多个菌株的筛选和组合，解决现有技术微生物发酵制剂 存在的过于单一、发酵不全面和发酵效果差的问题，以达到提高产品质量和降低生产成本 的目的。针对仔猪生长阶段的营养需求，选取具有强力分解淀粉纤维素，糖化作用较强，高 产蛋白酶的几株菌株与酵母菌配合使用，提高营养饲料的营养效价和利用率。应用本发明 的饲料饲养仔猪，具有促进生长和增强抗病能力效果显著、饲料利用效率高以及减轻养殖 环境污染等特点；饲养而得的产品，无抗生素、激素等药物残留，营养丰富且口味纯正天然。
[0008] 本发明的技术方案：
[0009] -种仔猪饲用微生态发酵剂，其特征在于，按照重量份数计由如下原料配制而 成：
[0010] A:泡盛曲霉（Aspergillus awamori) 1 ~3 汾； B:黑曲霉（Aspergillus rdger) .1 ~3份； C:热带假遂酵母 CiCandicia'topiealis.) 2 ~4 汾； D: ΓI (Gcoirichuni candidum) 2 ~4份； E:扣囊复膜孢酵母(Saecharomyces cerevisiae) 1 ~3 份； P;宇佐美曲霉(Aspergillus _amii ) 2~4份； G: ^ [!!!-!!/(Aspcrgilius oryzac} 2~4份
[0011] 上述仔猪饲用微生态发酵剂的制备方法，具体步骤如下：
[0012] 1、一级培养
[0013] (1)配制PDA固体培养基
[0014] AU取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml ;80°C浸泡lh，用纱布过滤，然后补 足失水至1000ml ;IOOPa灭菌20min，即得20%马铃薯浸汁，贮存备用；
[0015] A2、按每100mL马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后按每100mL马铃薯浸汁加 入2g琼脂，继续加热融化并补足失水；
[0016] A3、分装、加塞、包扎；
[0017] A4、高压蒸汽灭菌，IOOPa灭菌20min ;
[0018] A5、卧斜，待冷却后30°C恒温培养24h，排除冷凝水，观察试管培养基表面光滑无 菌则可以进行接菌；
[0019] ⑵斜面接种
[0020] 将各菌种分别斜面接种，30°C恒温培养24~72h ;
[0021] 2、二级培养
[0022] (1)三角瓶的制作工艺
[0023] B1、装料：按照重量比，麸皮：水=1:1的比例将两者进行拌料，每千克混合料加入 2ml浓硫酸；
[0024] B2、装入三角瓶内高度为20~25cm，装料为50g/瓶；
[0025] B3、棉塞堵塞封口，再用16层无菌纱布封口；
[0026] B4、高压蒸汽灭菌，IOOPa灭菌20min。自然冷却；
[0027] B5、接菌，接菌量每Ig斜面接种20~25g物料；
[0028] B6、28~32°C恒温培养，培养过程中每两个小时摇三角瓶一次，摊平；至24小时后 扣瓶，培养6小时后扣瓶，全程36小时，得到种曲，粉碎后过40~60目筛，并测定样品酶活 力；
[0029] 其中，按照国标方法酶活力定义如下：
[0030] 木聚糖酶活力：在37°C和PH5. 5条件下，每分钟从浓度为5mg/ml的木聚糖溶液中 降解释放1 μ mol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u ;
[0031] 果胶酶活力：在37°C和pH5. 5条件下，每分钟从浓度为4mg/ml的聚半乳糖醛酸溶 液中降解释放1 μ mol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u ;
[0032] 纤维素酶活力：在37°C和pH5. 5条件下，每分钟从浓度为4mg/ml的羧甲基纤维素 钠溶液中降解释放1 μ mol还原糖所需要的酶量为1个酶活单位u ;
[0033] 淀粉酶活力：在37°C、ρΗ6· 8的条件下，每分钟水解淀粉生成Img还原糖所需的酶 量；
[0034] 所得二级发酵产物要求细菌总数彡10scfu/g，总酶活彡500u/g，低于此标准不在 用于进行三级接种培养；
[0035] 3、三级培养
[0036] (1)筐式培养基的制作
[0037] B1、装料：按照重量比将麸皮：水=5:3的比例进行拌料，每公斤混合料加入2ml浓 硫酸、1 %硫酸铵；
[0038] B2、高压灭菌lOOPa，20min，自然冷却；
[0039] B3、装入筐中高度2~3cm的培养基；
[0040] B5、按筐式培养基物料重量的10%进行接菌；
[0041] ⑵培养
[0042] B1、室温培养，控制室内相对湿度50~85%，培养过程中，堆积培养，每6小时翻 拌一次，至18小时，待其连饼后将其划碎，36小时候扣筐继续培养至72小时，得固态发酵 产物，将其粉碎后过40~60目筛，并测定样品酶活力；所得三级发酵产物要求细菌总数 彡10 scfu/g，总酶活彡500u/g，低于此标准不再在用于进行四级接种培养；
[0043] 4、四级培养
[0044] 将三级培养的各菌株用石膏粉作为载体按照重量比三级培养产物：石膏粉= 1:10混合，进行四级培养，四级培养培养基按重量组成为麸皮：玉米面=1:1，加入和硫 酸，水占麸皮玉米面混合物料总重量的50 %~70%，硫酸占麸皮玉米面混合物料总重量的 1%〇
[0045] 利用上述仔猪饲用微生态发酵剂制备的活性固态发酵饲料，该发酵饲料由如下重 量百分比的原料制备而成：
[0046] 玉米 60~70% 麦麸 5~15% 豆粕 15~20%: 仔猪浓縮料 3:~5% 本发明微生态发酵剂 1:%。
[0047] 本发明的有益效果：