说明，但本发明不限于运些实施例。
[0049] 试验例1抗癌剂感受性试验： W下的试验例中，在没有特别记载的情况下，抗癌剂感受性试验按照W下的顺序进行。 [(K)加]1.分析物洗涂： 从癌症患者的胃癌、大肠癌、膜腺癌等消化器官癌、乳癌、肺癌、头颈癌、癌性胸?腹膜 炎、宫颈癌、子宫体癌或卵巣癌等固形癌组织摘出分析物。通过W下方法，去除分析物表面 附着的杂菌。首先，准备3个IOcm的皿(dish),各加入20mL添加抗生素的培养基溶液(分析物 洗涂液）。将分析物在第1个皿的分析物洗涂液中，充分清洗分析物表面。将分析物移至第2 个、W及第3个皿中，进行洗涂操作。应用的分析物洗涂液为，在DF培养液(DF:达尔贝科改良 伊格尔（DME)培养液与化m' sFl2培养液1:1的混合培养液）中，将Pentci 11 in(富山化学公 司，Pentcillin注射用）W相对于基础培养基的最终浓度为Img/mL、卡那霉素（明治制果株 式会社，硫酸卡那霉素注射液）W相对于基础培养基的最终浓度为〇.5mg/mL、两性霉素 B(和 光纯药物公司）W最终浓度为2.化g/mL添加而成。
[0化1] 2.组织的细切处理： 将进行洗涂的分析物移至新的皿，在皿上使用剪刀W及綴子，将作为分析物的肿瘤组 织快速细切成3-5mm见方大小。
[0化2] 3.组织的切碎处理： 将进行细切处理的分析物在皿上使用夹在持针器上的剌刀刃进行切碎，直至细切的肿 瘤组织成为糊状。向切碎的肿瘤组织加入20mL的DF培养液，将DF培养液与组织一起回收至 50mL离屯、管。进一步地加入IOmL的DF培养液，充分回收粘附于培养皿的组织。用桌上型离屯、 机W400Xg离屯、3分钟。
[0化3] 4.组织分散： 离屯、后，通过抽吸除去上清。向离屯、后的沉淀物添加9mL的DF培养液，摇晃离屯、管使组 织片很好地分开。根据酶组合物也可添加10%FBS(FBS是胎牛血清）。添加 ImL调整至处方浓 度的10倍浓度的细胞分散用酶组合物，调整处方浓度的细胞分散溶液。在37°C恒溫器内揽 拌振荡1-2小时左右。
[0化4] 5.回收： 加入10血的DF培养液成为20血，W400Xg离屯、3分钟，除去上清。除去上清后，轻轻摇晃 离屯、管使细胞团块分开，在添加 IOmL培养基后，进行剧烈的移液，使细胞团块进一步地很好 地分开。应用孔径尺寸为300皿的尼龙网，过滤含有细胞的悬浮液。添加 IOmL的DF培养液，将 离屯、管与尼龙网充分地预洗。
[005引 6.预培养： 将回收处理得到的细胞离屯、回收，吸引除去上清。使离屯、后的细胞沉淀物在Primaster 试剂盒(仓敷纺绩株式会社）的5mL预培养培养基(PCM-I)中悬浮。将悬浮细胞的PCM-I培养 液接种至胶原蛋白?凝胶?烧瓶内。在C02培养箱内静置，培养一夜。培养一夜后，吸引除去包 含血细胞、不需要细胞成分等的培养液。观察到肿瘤细胞植入胶原蛋白?凝胶?烧瓶。
[0化6] 7.细胞回收： 吸引除去胶原蛋白?凝胶?烧瓶内的培养液，加入5mL的DF培养液洗涂后，加入2mL的DF 培养液。进一步地，加入0.2mL调整为处方浓度的10倍浓度的细胞分散用酶组合物，调整处 方浓度的酶溶液。W37°C振荡15-30分钟，溶解烧瓶内的胶原蛋白?凝胶。将从胶原蛋白?凝 胶?烧瓶剥离的细胞回收至50mL离屯、管。另外，在确认细胞粘附至烧瓶的情况下，加入3mL的 EDTA-膜蛋白酶振荡5分钟。确认细胞的剥离后，添加5mL的10%血清培养基仔细预洗烧瓶内 部，回收至SOmL罔心官。加入IOmL的DF抬养液后，罔心回收细胞。
[0057] 8.包埋： 除去上清，向离屯、后的沉淀物加入2血的邸TA-膜蛋白酶溶液处理3-7分钟后，加入IOmL 的10%血清培养基进行移液，W孔径尺寸IOOwii的尼龙网过滤细胞悬浮液。加入IOmL的DF培 养液，充分预洗离屯、管与尼龙网。将滤液离屯、后，吸引除去上清，回收细胞。在回收的细胞中 混入胶原蛋白溶液。将混入细胞的胶原蛋白溶液用冰冷却，使用微量移液管，W30化/滴，在 板上每1孔滴下3滴。在37°C的C〇2培养箱内静置1小时，使胶原蛋白?滴凝胶化。凝胶化后，将 含有10 % FBS的DF培养基W每3血/孔重叠。无血清培养基(PCM-2)也可。将培养基重叠后，在 C〇2培养箱内培养一夜。
[005引9.药剂接触： 一夜培养后，W成为预定浓度的方式将浓缩药剂液添加混合至培养基。在C02培养箱内 进行对应于药剂的规定时间的接触培养。
[0059] 10.药剂除去W及培养： 药剂接触结束后吸引除去培养液，在各孔中W每4mL重叠 PrimasteH式剂盒(仓敷纺绩 株式会社)的无血清培养基(PCM-2 )，在之后5天进行无血清培养。
[0060] 11.评价； 无血清培养后，在各孔中各添加40化中性红(NR)溶液。在C〇2培养箱溫育2小时，进行细 胞染色。中性红染色后，吸引除去含有染色液的培养液。除去培养液后，各添加4mL的10%中 性福尔马林溶液，在室溫进行约1小时的细胞固定。细胞固定后，除去中性福尔马林溶液。将 培养板浸溃在自来水中，水洗20分钟。水洗后，仔细渐干板的水分，进行送风干燥。进行中性 红固定的细胞的图像分析处理。图像分析处理应用日本特开平10-115612(癌细胞的定量测 定方法)公开的图像分析处理方法。
[0061 ] 试验例2 混合市售的胶原酶、分散酶、透明质酸酶、W及脱氧核糖核酸酶，制备膜蛋白酶活性W 及胶原酶活性为下表1所示的实施例1W及比较例1的组合物。制备的组合物用于试验例1的 4.组织分散。
[0062]【表1】
[006引实施例m及比较例1的组合物的胶原酶活性通过W下的FALGPA分解活性测定的 方法测定。
[0064] 1 .FALGPA分解活性测定的方法: W 下的方法刊载在Sigma-Aldrich公司网站化ttp : //www . sigmaaldrich . com/ technic曰l-documents/protocols/biology/enzym3tic-3ss3y-〇f-coll3gen3se-using-n-3-2furyI曰cryIoyl-leu-gly-pr〇-曰I曰.html)O [00化](I)缩写： LTO66」（2)原理：
测定在胶原酶的作用下FALGPA分解为FAL和Gl厂Pro-Ala时，来自FALGPA的345皿吸光 度(A345nm)的减少变量，算出活性。
[0067] (3)方法： a.试剂： (a)试剂B 50mM两性离子缓冲液（tricine)、10mMCaCl2、400mMNaCl、pH7.5(25°C)缓冲 液： 将两性离子缓冲液（Sigma-Aldrich、T0377)0.896g、rfeCl(Sigma-Aldrich、S9888) 2.34g、CaCl2.2出0(Sigma-Aldrich、C3881 )0.147g溶解于SOmL蒸馈水，用IM NaOH溶液 (Sigma-Al化ich、S2567)、或IM HCl溶液（Sigma-Al化ich、册 162)调整为抑7.5(25°C)后，加 入蒸馈水至lOOmL。
[006引（b)试剂C 1.OmM N-(3-[2巧喃基]丙締酷基)-Leu-Gly-Pro-Ala(FALGPA): 将9.6mg的FALGPA(Sigma-Aldrich、F5135)添加至20mL的A的溶液，揽拌30分钟W上完 全溶解。
[0069] (C)试剂D蒸馈水： (d)试剂E酶溶液： 将酶W使用时的5-10倍浓度溶解于蒸馈水。
[0070] b.条件： 反应液pH=7.5、反应溫度=25 °C、吸光度=A345nm、光程长度=Icm C .反应液的试剂组成W及操作： 【表3】
L 0071J 将2.9血的试剂B放入Icm光程长度的比芭池，加溫全25"C。如呆A345nm稳定则添加 0.1 mL的试剂C(空白试验)或试剂D(正式试验），立即混合于25°C记录A345nm的降低5分钟。
[0072] (4)活性单位的定义和计算方法 在前述条件下，在抑7.5、25°C、巧离子的存在下，于1分钟水解1.0皿Ole的FALGPA的酶 量作为IFALGPA单位。FALGPA单位由下式求出。
[0073] FALGPA单位/mL={(E1-E2) X3/(FX0.1)}/0.53 上式中的符号或数值如下显示。 r00741 r亲4】
[00对实施例m及比较例1的组合物的膜蛋白酶活性通过W下的BA邸水解活性测定的 方法测定。
[007引 2. BA邸水解活性测定的方法: W 下的方法刊载在Sigma-Aldrich公司的网站化ttp : //www. sigmaaldrich . com/ technic曰l-documents/protocols/biology/enzym3tic-3ss3y-0f-trypsin.html)0 [0077] (I)缩写： BAEE=Na-苯甲酯基-k精氨酸乙醋盐酸盐 (2)原理： 测定膜蛋白酶的作用下BA邸水解为化-苯甲酯基-1^-精氨酸和乙醇时的25化m吸光度 (A253nm)的增加变量，算出活性。
[007引 （3)方法： a.试剂： (a)试剂A 67mM憐酸钢缓冲液、pH7.5(25°C)缓冲液： 将0.804g憐酸二氨钢（Sigma-Aldrich、S0751)溶解于SOmL蒸馈水，用IM化OH溶液 (Sigma-Al化ich、S2567)调整至抑7.6(25°C)后，加入蒸馈水至lOOmL。
[0079] (b)试剂B 0.25mM Na-苯甲酯基-k精氨酸乙醋盐酸盐： 将4.3mg的Na-苯甲酯基-k精氨酸乙醋盐酸盐(Sigma-Al化ich、B4500)添加并溶解于 SOmL的A的溶液。
[0080] (C)试剂C蒸馈水： (d)试剂D酶溶液： 将酶W使用时的5-10倍浓度溶解于蒸馈水。
[00川 b.条件： 反应液pH=7.6、反应溫度=25 °C、吸光度=A253nm、光程长度=Icm C .反应液的试剂组成W及操作： r击Gi
L 0082 J 将3.01111^巧刑6放入1細化括长度的比色池，加溫全251：。如呆4253加1穏足则添加 0.1 mL的试剂C(空白试验)或试剂D(正式试验），立即混合于25°C记录A253nm的降低5分钟。
[0083] d.活性单位的定义和计算方法： 在前述条件下，在抑7.6、25 °C、反应液量3.2mL、光程长度1 cm下，将于1分钟使A253nm升 高0.001的酶量作为IBAEE单位。BAEE单位由下式求出。
[0084] BAEE 单位/mLKEl-E2)/{0.001X(FX0.1)} 上式中的符号或数值如下显示。
[0086]试验例3酶消化能力的比较：
使用用于评价消化能力的猪皮，对实施例1的组合物和比较例1的组合物，比较猪皮的 消化效率。具体地，在切碎的猪皮中混合0.1 mL的实施例1或比较例1的组合物与0.9mL的加 入10%FBS的DF培养基，在37°C振荡，观察猪皮的大小。0小时和2小时后的状态示于图1。
[0087]如图I所示，实施例1的组合